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用巢式PCR扩增ZFY基因产前诊断胎儿性别
近年来的研究表明,Y染色体上锌指结构基因(zinc-finger-Y gene,ZFY)是继SRY之后又一与性分化有关的单拷贝基因,并与精子的发生有关[1,2].为此,我们利用巢式PCR技术,以ZFY作为检测指标,参考有关文献自行设计内外两侧两对巢式PCR引物[3],对绒毛、羊水和孕妇外周血标本进行ZFY基因的特异扩增,初步建立了一种用PCR技术产前检测胎儿性别的方法.
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宫内宫外复合妊娠1例
患者,女,已婚,41岁,因停经54 d,伴恶心厌食等早孕反应,B超提示宫内孕囊2.4 cm×2.6 cm,探及胎心搏动及胎芽反射,诊断为宫内孕,在我院行人工流产术,刮出物见绒毛.术后1 d内无不适.术后d 2突感左下腹撕裂样剧痛,伴肛门坠胀2 h,于2005年10月11日急诊入院.既往月经正常,G12P1+10.
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胃腺瘤癌变合并胃多发癌1例并文献复习
胃息肉病变为边界清楚的良性上皮性新生物,伴有上皮异型性改变被称为腺瘤.根据其起源分为肠型、小凹型和幽门型,其中肠型腺瘤居多,超过胃腺瘤的一半以上甚至所有的腺瘤均为该型,由管状和绒毛构成,是一种不常见的肿瘤,在西方国家约占息肉的10%,近40%病例伴有高级别异型性增生,发展为癌占2.5%~50%[1].由于胃息肉常常伴有萎缩性胃炎改变,故增加胃癌发生危险,但发生率非常罕见,约10%的腺瘤患者同时伴有胃其它部位的癌[2].本文报道1例胃腺瘤癌变同时伴胃其它部位腺癌,结合文献进行讨论.
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经腹直肠癌切除中直肠内超声检查在治疗策略选择上的作用
Doornebosch PG, Bronkhorst PJ, Hop WC等人对经活体组织检查证实为绒毛管状腺癌的268例肿瘤进行由直肠内超声检查辅助的局部切除,结果发现231例(86%)肿瘤利用直肠内超声检查在技术上是可行的.由于技术上的原因,如肠道准备差或设备问题,使镜检时不能达到肿瘤处或无法完全通过肿瘤,则定义为无法估测,其肿瘤距齿状线的中位数距离为11 cm,而其余可估测者为7 cm.有21例肿瘤的直肠内超声检查结果不能令人信服,主要是由于肿瘤复发或近期才接受过内镜检查.
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辅助生殖技术患者孕早期流产绒毛染色体异常分析
目的:研究辅助生殖技术(ART)与自然妊娠(NC)孕早期流产绒毛组织染色体异常情况.方法:按照辅助生殖助孕和自然受孕将205例患者分为ART组(60例)和NC组(145例);将每组患者按年龄分为<35岁及≥35岁,按既往连续发生自然流产的次数分为<2次及≥2次.取两组流产绒毛组织进行NGS染色体分析,比较各组染色体异常情况.结果:ART组与NC组染色体异常率分别为56.67% (34/60)、52.41%(76/145),差异无统计学意义(P>0.05).ART组与NC组染色体数目异常和结构异常进行比较,差异均无统计学意义(P>0.05).< 35岁及≥35岁染色体异常率,ART组为45.71%、72.00%;NC组为45.63%、69.05%,差异均有统计学意义(P<0.05).两组流产次数<2次与≥2次的患者染色体异常率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:与NC相比,ART不增加自然流产胚胎染色体异常的发生率,无论ART或NC绒毛染色体异常率与流产孕妇的年龄存在着一定的关系.年龄越大染色体异常率越高.但与患者流产次数无关.利用NGS技术检测流产绒毛染色体异常,可为遗传咨询和再生育风险评估提供指导.
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不同类型早期稽留流产中的甲基化异常探讨
目的:探讨不同类型早期稽留流产(停经6~9+6周)中的甲基化异常情况.方法:选择早期稽留流产绒毛61例,根据B超检查的胚胎发育情况分为空囊型(18例)、有胚芽无胎心型(30例)、有胎心后停育型(13例)3组.采用RT-PCR法及Western-blot检测10-11易位蛋白(TET)(包括TET1、TET2、TET3)、5-mC、5-hmC在3组中的表达.对所有流产绒毛行G显带染色体分析,并比较染色体正常组和异常组间TET、5-mC、5-hmC的表达.结果:①流产绒毛组织中的TET1、TET2、TET3 mRNA的表达和蛋白的表达在3组间及组间两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05).②5-mC含量在空囊型中明显降低,且与其他两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而5-hmC在绒毛组织中的表达量整体偏低,但3组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).③染色体正常组与异常组间TET1、TET2、TET3、5-mC、5-hmC表达的比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:甲基化水平低下可能阻碍了形成胚囊后的胚胎进一步发育,甲基化的改变影响了绒毛组织的发育,但可能与染色体的异常无直接关系.
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125例胚胎停育患者绒毛染色体数目异常分析
目的:探讨绒毛染色体数目异常与胚胎停育的关系.方法:应用荧光原位杂交法(FISH)对125例胚胎停育患者(均为单胎)绒毛染色体数目进行检测,并了解胚胎停育患者绒毛染色体数目异常情况及其与患者年龄、胎儿性别及流产次数之间的关系.结果:①125例胚胎停育患者染色体数目异常55例(44.0%),其中,常染色体三体35例(63.6%),多倍体10例(18.2%),嵌合体6例(10.9%),其他异常4例(7.3%).②绒毛染色体数目异常组年龄(29.19±4.04岁)与正常组(29.46±4.27岁)比较,差异无统计学意义(P>0.05);胚胎停育中常染色体数目异常组胎儿性别比例与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05);③流产次数3次及3次以上的染色体数目异常发生率(51.7%和68.8%)高于流产次数为1次的发生率(25.0%),差异有统计学意义(P<0.05).结论:染色体数目异常是胚胎停育的重要发病因素,其中常染色体三体多见;胚胎停育绒毛染色体数目异常与孕妇年龄、胎儿性别无关,而对3次及以上的流产患者,更应关注是否有染色体异常的发生.
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胸腺基质淋巴细胞生成素及相关因子在原因不明复发性流产中的表达
目的:探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)与原因不明复发性流产(URSA)的关系.方法:建立研究组自然流产小鼠模型( CBA/J×DBA/2)和对照组正常妊娠小鼠模型(CBA/J×Balb/c),采用免疫印迹(Western Blot)方法和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测绒毛、蜕膜组织中TSLP的表达;采用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)方法检测外周血TSLP、细胞因子白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的表达;采用流式细胞仪检测调节性T细胞(Treg)表面FoxP3的表达.结果:RT-PCR法检测自然流产模型组绒毛组织中TSLP的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05);Western Blot法分析显示自然流产模型组绒毛、蜕膜组织中TSLP的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05);ELISA法检测自然流产模型组血清中TSLP、IL-4的表达低于正常妊娠模型组(P<0.05),而IFN-γ的表达较正常妊娠模型组未见明显增高(P>0.05);流式细胞仪检测自然流产模型组CD4+ CD25+ Treg和FoxP3的表达明显低于正常妊娠模型组(P<0.05).结论:TSLP明显降低,可能是导致URSA患者母胎界面免疫耐受异常的重要原因.
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TNF-α在IVF-ET后自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达
目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在胚胎早期发育过程中的作用及其与流产的关系.方法:应用免疫组织化学标记法(SP法),比较IVF-ET后自然流产(10例,A组)、复发性流产(20例,B组)、人工流产(20例,C组)3组患者早孕绒毛、蜕膜组织中TNF-α的表达情况.结果:TNF-α在3组绒毛及蜕膜组织中均有表达,A、B组蜕膜及绒毛组织中表达的平均光密度与C组相比差异有非常显著性(P<0.01).结论:TNF-α调节生殖免疫过程,参与了母-胎间相互作用,TNF-α表达异常,在自然流产发病中起重要作用,是导致自然流产的原因之一.
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产前预测胎儿血型方法的研究
目的:孕早期预测胎儿血型,对防治新生儿溶血病有着重要的意义.方法:采用多种取材方法预测胎儿血型对比研究:①绒毛活检共55例,其中经腹取孕早期绒毛10例.②经腹脐静脉穿刺取脐血30例.③经腹取羊水共72例,其中取孕早期羊水20例.分别测羊水、绒毛血型物质和脐血血型.结果:羊水、缄毛、脐血取材成功率分别为100%、98.2%、88.2%.各种取材均可检测胎儿血型(羊水非分泌型除外),与父母血型及产后脐血血型对照符合率100%.结论:三种取材方法各有其优点与适应症:①经腹绒毛活检避免了经宫颈取标本的污染及母儿并发症.②孕早期羊水穿刺比中孕提前4周,且成功率高.③取脐血直接测血型更准确、简便.因此这三种预测胎儿血型的取材方法是先进、科学、安全、可靠的,具有临床实用价值.
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特殊组织类型妊娠滋养细胞肿瘤的诊断与治疗
胎盘部位滋养细胞肿瘤(placental site trophbblastic tumor,PSTT)及上皮样滋养细胞肿瘤(epithelial trophoblastic tumor,ETT)是来自于中间型滋养细胞的特殊类型妊娠滋养细胞肿瘤,PSTT起源于胎盘种植部位中间型滋养细胞,而ETT则起源于绒毛膜型中间滋养细胞.
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胎盘中胎儿血管的血栓形成和胎儿的血栓性血管病变
胎盘分别有母体的和胎儿的两个循环.母体的循不障碍多为胎盘灌注不良,常引起胎盘梗死、胎盘早剥、绒毛发育不良和缺氧、血栓形成包括绒毛间血栓、绒毛间纤维蛋白样物质沉积等.
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如何掌握脐带因素的剖宫产指征
脐带是一支平均长度为50cm的长圆形带状结构,内含两根脐动脉,一支脐静脉,在血管周围是乳白色富有弹性的华通氏胶,保护这三根血管.脐带一端连接胎儿,另一端连接胎盘.胎儿心脏每一次搏动将含氧较低、二氧化碳较高的血液经脐动脉输向胎盘,经过绒毛的毛细血管,与绒毛间隙的母血根据血氧及二氧化碳的浓度梯度差进行氧及二氧化碳的交换,交换后,将含氧较高、二氧化碳较低的血经脐静脉回输给胎儿;当然,此中还兼有输送各种胎儿所赖以生存的各种营养成分和经代谢之后需要排出的产物.因此脐带是维系胎儿生命的重要通道,一旦血运受阻或出血,将对胎儿造成伤亡,以致死亡.
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子宫内膜切除术后肌壁间妊娠1例
1 病例报告患者,45岁.因子宫内膜切除术后1年,药物流产后不规则阴道流血1月余入院.患者因功能失调性子宫出血于1年前在某院行子宫内膜电切术,术后月经稀发,1月余前因停经50+天自行药物流产,药物流产后阴道流血,于本院清宫两次,术后阴道仍然淋漓不断流血.入院查体:一般情况可,贫血貌,子宫增大如孕2+月大小.B超提示子宫肌层内不均质回声,血HCG 9 U/L.入院后止血治疗无效,行子宫全切术.术中可见子宫如孕2+月大小,表面光滑.术后切开子宫见子宫前肌壁间内有一2 cm×3 cm×4 cm大小坏死组织,切除标本经本院及外院病检均报告肌层内可见退变绒毛及滋养细胞.术后7天出院,随访1个月HCG转为正常.
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16卷2期疑难病案
患者,28岁,G2P1+1,因"异位妊娠后28天,腹痛20天"入院.28天前因停经40天在当地医院行人工流产术,术中未见绒毛,行B超检查怀疑"异位妊娠"遂行剖腹探查术,术中发现及手术方式均不详.术后11天患者再次出现左下腹痛,持续性,无发热,但有恶心、乏力,因腹痛渐加重遂到我院就诊.既往史及家族史无特殊.
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自然流产绒毛染色体核型分析的研究现状
自然流产的发病率日趋升高,其主要原因为染色体异常,分析胚胎染色体的核型对寻找自然流产的原因具有重要意义.绒毛细胞染色体制片的培养法成功率高于直接法,但培养法的操作难度及成本亦高于直接法;自然流产的绒毛染色体异常核型中以非整倍体的发生多见,其中16三体约占三体的1/3;自然流产、辅助妊娠后流产的绒毛染色体异常率分别都高于人工流产的绒毛染色体异常率;对于自然流产绒毛染色体异常与支原体、衣原体感染相关性及自然流产次数、年龄、孕周及胚胎性别与绒毛染色体核型的关系均尚无明确结论.目前类似以上通过绒毛染色体分析寻找自然流产原因的研究很多,但可以治疗的原因并不多见,故还需结合临床的实验指标,寻找与绒毛染色体的相关性,进一步提高染色体分析的意义.
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宫、腹腔镜联合治愈剖宫产子宫切口部位妊娠1例
1病例报告患者,30岁,孕5产1.因人工流产术后阴道不规则出血3月余,于2001年9月21日急诊入院.2001年6月13日因停经60天在外院做人工流产术,术中刮出少量组织,未见绒毛,术后一直有阴道不规则流血,并大出血3次,B超示宫内有孕囊及胎儿,分别于6月20日和6月27日再行清宫术,术中出血较多,似见部分胚胎组织,因再次阴道大量流血转来我院.患者1995年行子宫下段剖宫产术,1998年因孕5月胎死宫内引产1次,1999年及2001年3月各人工流产1次.入院查体:一般情况尚可,中度贫血貌.
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输卵管妊娠破裂后继发大网膜妊娠漏诊1例
1 病例报告患者36岁,因反复阴道淋漓流血,下腹疼痛伴肛门坠胀21天,加重1天于2003年12月6日急诊入院.患者既往月经规律,G3P2,10年前行绝育术,末次月经2003年8月30日.于2003年10月11日因停经42天,阴道少许流血1周,突然下腹痛3小时第1次急诊入住我科,入院诊断为异位妊娠,失血性休克.即在硬膜外麻醉下行腹腔镜探查术,术中见腹腔陈旧血约1000 ml,左侧输卵管壶腹部妊娠破裂,破裂口处可见绒毛团,破口有新鲜血液溢出.即行左侧输卵管部分切除术并取出绒毛团.手术顺利,术后病理报告:输卵管局部炎症及绒毛.术后5天(2003年10月16日)出院.
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胎盘、胎膜及脐带病理检查在避免和防止医疗纠纷中的重要性
"胎盘作为一个器官来说,它是人的一生中重要的器官,却也是生命短暂的器官".这是著名的胎盘病理学家Benirschke 1979年在一篇关于胎盘研究的文章中的一段话,这段话对胎盘的形容十分贴切.从胚胎发育的第13~21天,绒毛已经处于发育分化旺盛的时期,胎盘的主要结构逐渐形成,至胚胎发育的第3周,绒毛内血管形成,胎儿循环开始.
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妊娠早期绒毛组织HAI-1的表达
目的研究肝细胞生长因子激活物抑制因子-1(hepatocyte growth factor activator inhibitor-1,HAI-1)在胚胎着床后绒毛组织中的动态表达,探讨其对胚胎早期发育的调控作用.方法取妊娠第6~10周正常人工流产绒毛组织50例,各孕周各10例.采用RT-PCR和免疫组织化学法检测绒毛组织HAI-1的表达.结果 RT-PCR测得HAI-1 mRNA在各组绒毛组织中均有表达,且其表达量随妊娠周数增加而逐渐上调,在妊娠第6周HAI-1基因表达量极低(0.3142),随后表达量逐渐升高(第7周0.3476、第8周0.3910),至第9周达高峰(0.4876),且高峰持续至第10周(0.4909).第9、10孕周组间HAI-1 mRNA表达值差异无统计学意义(P≥0.05),其余各孕周组HAI-1 mRNA表达值两两相比差异有统计学意义(P<0.01),第10周与第9周分别同其余各孕周组间差异有统计学意义(P<0.01).免疫组织化学法显示HAI-1蛋白表达随妊娠周数增加呈递增趋势,与RT-PCR结果吻合.结论 HAI-1基因可能参与了人胚胎早期发育.