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应用头孢吡肟纸片法对革兰氏阴性杆菌进行SSBL阳性菌株筛选及其临床意义
产超超广谱β-内酰胺酶(SsBL)细菌即细菌同时产生超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrum betalactamases,ESBLs)和质粒型头孢菌素酶(AmtpC),因此产SSBL的菌株耐药性更强,治疗更为棘手.
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AmpG在AmpC酶表达中的调控作用及研究进展
AmpC 酶,是由革兰氏阴性菌产生的一种β-内酰胺酶[1].近年来,由于β-内酰胺类抗菌药物的过度使用,使得β-内酰胺酶介导的耐药情况越来越严重,终给临床抗菌药物的选择和治疗带来了困难[2].AmpC酶能够水解三代头孢菌素酶,单环类和头霉素类抗生素,而且不受酶抑制剂所抑制[3,5].AmpC酶的作用机制目前还没有完全确定,它的出现与细胞壁肽聚糖循环相关,至少有四个基因参与了AmpC酶的表达,分别为ampR,ampD,ampG和ampE,其中ampR和ampD的相关性研究较多,而ampG和ampE的研究甚少.
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张家口地区木糖氧化无色杆菌耐药性的相关基因分析
目的:了解张家口地区木糖氧化无色杆菌耐药性的相关基因的基因型别,为临床合理使用抗生素提供实验依据.方法:应用改良三维试验法筛选耐β-内酰胺类药物的菌株,再结合PCR技术和序列测定检测耐药菌ESBLs和AmpC酶的基因型别,后进行统计学分析.结果:2010年12月～2011年12月本地区临床分离的48株木糖无色杆菌菌株中有32株对β-内酰胺类药物耐药,检出率高达66.7％,其中14株单产ESBLs,5株单产AmpC酶,9株同时产ESBLs和AmpC酶,4株为未知型菌株;筛选出的耐药菌中有24株PCR结果阳性,分属于不同耐药基因型并发现存在多重耐药基因.ESBLs以TEM型检出率高,均为TEM-1亚型;AmpC酶检出率也较高,均为DHA-1型;多重耐药基因TEM+CTX-M-1 +AmpC检出率高.结论:张家口地区木糖氧化无色杆菌的耐药现象严重,临床上应严格掌握头抱菌素类药物的使用以取得更好的治疗效果.
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大肠埃希氏菌在临床中耐药性的动态监测
目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素(AmpC)酶的大肠埃希菌(EC)对抗菌药物的耐药性,为指导临床合理使用抗菌药物提供科学依据.方法:用纸片扩散法(K-B法)对大肠埃希菌进行14种抗菌药物的敏感性试验,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的筛选按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片确证法进行,去阻遏持续高产AmpC酶的检测采用双抑制剂扩散协同纸片法检测.结果:2008～2010年从临床标本中共分离到大肠埃希菌176株,其中产ESBLs阳性58株,有1株同时产AmpC酶.除亚胺培南外对其他13种抗生素均有不同程度耐药,头孢类药物耐药率较高.结论:临床EC的耐药情况十分严重,应对EC进行耐药性动态监测,以指导临床科学使用抗菌药物.
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大肠埃希菌耐药性监测
目的 调查产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamase,ESBL)、头孢菌素 (AmpC) 酶的大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)对抗菌药物的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据.方法 用纸片扩散法(K-B法)对E.coli进行14种抗菌药物的敏感性试验,ESBL的筛选按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片确证法进行,去阻遏持续高产AmpC酶的检测采用双抑制剂扩散协同纸片法检测.结果 从临床标本中共分离到E.coli 219株,其中产ESBLs 68株(产ESBLs率为31.05%),有3株同时产AmpC酶(产AmpC酶率为1.37%).除亚胺培南外对其他13种抗生素均有不同程度耐药,头孢类药物耐药率较高,且有上升趋势.结论 黑龙江省E.coli的耐药率很高,且为多重耐药,情况十分严重,应对E.coli进行耐药性动态监测,以指导临床科学使用抗菌药物.
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潮州地区革兰阴性杆菌产AmpC酶检测及其耐药性分析
目的:观察并分析潮州地区革兰阴性杆菌产头孢菌素酶(AmpC)酶检测情况以及对常用抗菌药物的耐药性情况,为临床合理用药提供一定参考依据.方法:选取我院2014年3月-2016年3月期间临床分离出112株革兰阴性杆菌.应用头孢西丁三维试验对其菌产AmpC酶进行检测,应用K-B方法对常用抗菌药进行药敏检测.结果:提取的112株革兰阴性杆菌中一共检出产AmpC酶细菌46株,其检出率为41.1%.非产霉菌、大肠埃希菌、以及肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素以及β-内酰胺类抗生素敏感;铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗生素敏感;非产酶菌株和铜绿假单胞菌对头孢曲松耐药;肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌全部出现对美罗培南耐药;革兰阴性杆菌产AmpC酶铜绿假单胞菌对妥布霉素、庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率均较低;其他菌株则对上述抗生素敏感.同时,各菌株的非产酶菌株与单产AmpC酶菌株与常用抗生素之间的耐药性比较差异明显,具有统计学意义(P<0.05).结论:革兰阴性杆菌各菌种菌产酶对常用抗生素的耐药性均较高,而其菌产AmpC酶则逐渐增多且耐药性极强,是导致其耐药性较高的主要机制.
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三维试验检测革兰阴性杆菌ESBLs及AmpC酶
目的 了解革兰阴性杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、染色体头孢菌素酶(AmpC)的分布及分离率.方法 准确鉴定菌株,采用底物为头孢噻肟的三维试验,测定菌株中ESBLs及AmpC酶.结果 临床分离175株革兰阴性杆菌中产ESBLs 49株,阳性率28.0%,包括阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、克雷伯菌属、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和弗劳地枸橼酸菌.产AmpC酶22株,阳性率12.6%,包括阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、产酸克雷伯菌.其中阴沟肠杆菌产ESBLs及AmpC酶分离率均居首位(分别为55.6%、33.3%).3株铜绿假单胞菌同时产AmpC酶和ESBLs.结论 我院产ESBLs菌以阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主.产AmpC酶以阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主.超超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)菌株在医院有流行.
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泌尿系感染大肠埃希菌耐药性监测和酶型分析
目的监测衢州地区近4年泌尿系统感染大肠埃希菌的检出率,超广谱β-内酰胺酶(ESBL)、头孢菌素(AmpC)酶的检测及耐药性分析,为指导临床合理使用抗菌药物提供依据.方法低抑菌浓度(MIC)值的检测采用全自动微生物鉴定仪及其配套药敏板.用微量稀释法、改良三维试验分别进行ESBL及AmpC酶测定.结果共分离到大肠埃希菌342株,在同期尿液检出菌中所占比率稳定在52%左右.其中ESBL阳性134株,有4株同时产AmpC酶.除亚胺培南外对其他18种抗生素耐药率均有不同程度的增高,头孢类药物上升幅度大.ESBL发生率从2002年30.4%上升至2005年44.6%.结论衢州地区泌尿系感染大肠埃希菌对多种抗菌药物耐药率较高,且呈逐年增高的趋势,以产ESBL菌株为主,少量同时产AmpC酶,检出率稳定在较高的水平.临床应加强对尿液细菌培养检测,合理使用抗菌药物避免耐药菌株的流行.
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安徽省临床分离的大肠埃希菌耐药性分析
大肠埃希菌是导致医院感染常见和重要的病原菌之一,其高耐药水平及逐年增多的产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)和产头孢菌素酶(.AmpC β-lactamase,AmpC酶)菌株给临床治疗带来了极大的困难.本研究对2005年安徽省各级医院分离的大肠埃希菌株耐药性进行分析,以阐明不同级别医院分离菌株对临床常用抗菌药物的耐药现状,指导临床合理选用抗菌药物.
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加强细菌耐药性监测提高抗感染治疗水平
近年来,细菌耐药性已成为全球医疗领域中颇受关注的问题之一,特别是甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)中对万古霉素敏感性减低株(VISA)及耐药株(VRSA)、青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSSP)包括青霉素低度耐药株(PISP)及青霉素高度耐药株(PRSP)、万古霉素耐药肠球菌(VRE)、肠杆菌科细菌和其他革兰阴性杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)及头孢菌素酶(AmpC)的菌株、葡萄糖不发酵细菌中泛耐药菌株(PDRS)等,这些细菌所致的感染已经成为当前抗感染治疗所面临的严峻挑战!
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头孢地尼的临床应用
头孢地尼是头孢菌素类第3代口服抗生素,除对β-内酰胺酶具有高度的稳定性, 对肠杆菌科细菌作用突出外,还增强了对革兰阳性细菌的作用,特别是对葡萄球菌属的抗菌效力,其3位侧链上的乙烯基可提高其口服吸收性,是治疗社区获得性感染安全有效的药物.
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大肠埃希菌质粒介导头孢菌素酶基因型研究
目的 调查大肠埃希菌中质粒头孢菌素酶(AmpC酶)的基因型分布以及耐药性.方法 收集对头孢西丁耐药的24株大肠埃希菌,根据头孢菌素酶和超广谱内酰胺酶(ESBLs)各种已知基因序列设计引物,进行聚合酶链反应(PCR)及序列分析确定AmpC酶基因以及ESBLs的基因型分布;接合试验证实质粒ampC基因有无可转移性.结果 24株耐头孢西丁的大肠埃希菌中13株产CMY型类似AmpC酶,1株产DHA-1型AmpC酶;PCR检测发现ESBLs TEM型15株,CTX-M型2株,SHV型1株.结论 耐头孢西丁的大肠埃希菌中发现CMY型类似AmpC酶和DHA-1型AmpC酶.药敏结果对大多数新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感.
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76株阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶的检测
目的了解临床分离的阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)及与耐药性的关系.方法采用纸片表型确证法、表型筛选法与三维试验法分别检测76株临床分离阴沟肠杆菌的ESBLs和去阻遏持续高产AmpC酶,同时用K-B法检测体外药敏结果.结果在76株阴沟肠杆菌中,纸片表型确证法检出产ESBLs菌株22株,占28.9%;表型筛选法检出产AmpC酶菌株30株,占39.5%;三维试验检出产AmpC酶菌株26株,占34.2%;同时产两种酶菌株4株,两种酶均不产菌株24株.对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、氨曲南的体外药物敏感率产AmpC酶菌株敏感率分别为100.0%、84.6%、84.6%、76.9%,产ESBLs菌株分别为100.0%、90.9%、54.5%、27.3%.结论产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要机制,亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟对产酶株的效果较好.
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阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶和质粒介导耐药基因的检测及耐药性分析
目的 明确阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和qnr耐药基因的分布情况,初步探讨阴沟肠杆菌的耐药机制.方法 收集2016年1月至2017年6月临床分离的非重复阴沟肠杆菌共89株,采用多底物协同-拮抗法(MSSAT)检测ESBLs和AmpC酶的表型,采用PCR扩增质粒介导的ESBLs基因(TEM-1、SHV-12、CTX-M、SFO-1、VEB-3)、AmpC酶基因(ACT-1、DHA-1)和喹诺酮类耐药(qnr)基因(qnrA、qnrB、qnrS).结果 MSSAT结果显示,89株阴沟肠杆菌中,单产ESBLs?13株(14.61％),单产AmpC酶41株(46.07％),同时产ESBLs和AmpC酶?24株(26.97％).PCR结果显示:ESBLs基因检出率为38.20％,AmpC酶基因检出率为19.10％,qnr基因检出率为12.36％.结论 本院阴沟肠杆菌以产AmpC酶为主,碳青霉烯类抗菌药物依然是治疗多重耐药阴沟肠杆菌感染的首选.质粒介导的ESBLs、AmpC、qnr基因,临床分布较广泛,临床应合理使用抗菌药物,加强对阴沟肠杆菌的耐药性监测.
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大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌连续分离株质粒AmpC基因研究
目的 研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌连续分离株质粒AmpC基因情况和耐药性.方法 应用聚合酶链反应(PCR)法对耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌连续分离株进行AmpC酶DHA和ACT-1基因检测和分析.结果 68株大肠埃希菌中ACT-1基因阳性4株(5.9%),DHA基因全为阴性;44株肺炎克雷伯菌中DHA基因阳性4株(9.1%),ACT-1基因全为阴性.结论 质粒型AmpC酶基因可通过转化、接合等方式转移给其他同种或不同种菌,易于传播,应加强监测.
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120例肺炎克雷伯菌ESBLs和AmpC酶检测及耐药分析
目的 探讨本院儿科病区下呼吸道标本中分离的肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC酶)的情况及耐药分析.方法 采用改良的酶提取物三维试验法检测ESBLs和AmpC酶,采用纸片扩散(K-B)法检测肺炎克雷伯菌对13种抗生素的耐药率.结果 从120株下呼吸道标本中分离的肺炎克雷伯菌中单产ESBLs,单产AmpC酶和同时产AmpC酶+ESBLs的阳性率分别为20.8%(25/120),10.0%(12/120)和4.2%(5/120).单产AmpC酶、单产ESBLs及同时产AmpC酶+ESBLs对13种抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株.结论 本院儿科病区下呼吸道标本中分离的肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素,其次是β-内酰酶类抗生素和酶抑制剂、头霉类抗生素及其他敏感抗生素.
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铜绿假单胞菌DHA-1型AmpC酶检测
目的:调查淮北矿工总医院临床分离铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)DHA群质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)的产生情况.方法:收集2007～2008年36株临床多重耐药Pa,用K-B法检测其对12种临床常用抗生素的耐药性;用改良三维试验法检测耐药表型;用聚合酶链反应(PCR)扩增DHA 结构基因.采用肠杆菌科基因间重复一致序列PCR(ERIC-PCR)方法对产DHA群Pa进行同源性分析.结果:36株临床多重耐药Pa中有25株扩增出DHA-1型酶基因,检出率为69.4%.25株Pa对10种抗生素的耐药率＞50%,ERIC-PCR分析结果显示在同一科室或不同科室间存在DHA-1流行.结论:淮北矿工总医院DHA-1型质粒AmpC酶检出率远高于国内其他地区;产DHA-1型质粒AmpC酶菌株对头孢菌素及单环酰胺类抗生素耐药严重,在同一科室或不同科室间的传播应引起高度重视.
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AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶研究进展及临床治疗对策
产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制.AmpC酶是对第三代头孢菌素耐药而不能被β-内酰胺酶抑制剂所抑制,有染色体介导的AmpC酶和质粒介导AmpC酶,前者分诱导表达和非诱导表达,后者可随耐药质粒复制、接合、转化及转座子移位,在革兰阴性杆菌内或种间传播.ESBLs是由质粒介导的能水解大多数青霉素、头孢菌素和氨曲南等β-内酰胺类抗生素且活性能被酶抑制剂抑制的一类β-内酰胺酶,主要由肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产生,也可由其它肠杆菌科细菌、不动杆菌属、铜绿假单胞菌产生.碳青霉烯类抗生素是治疗产AmpC酶和ES-BLs革兰阴性杆菌感染的首选药物.
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重症监护病房患者医院感染肺炎克雷伯菌产头孢菌素酶检测及耐药性分析
目的 了解重症监护病房(ICU)患者医院感染肺炎克雷伯菌产头孢菌素(AmpC)酶及其耐药特性,为临床合理用药提供依据.方法 对67份标本的细菌鉴定采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定;产AmpC酶菌株筛选按CLSI推荐的头孢西丁纸片扩散法；产AmpC酶菌株确证通过酶粗提物头孢西丁三维试验；AmpC酶基因型检测通过PCR测序；药敏试验按CLSI推荐的K-B纸片法.结果 67株肺炎克雷伯菌中检出产AmpC酶菌株11株,检出率为16.4％,11株产AmpC酶阳性菌株的耐药基因型均为DHA-1型；产AmpC酶菌株呈多重耐药状态,尤其对广谱β-内酰胺类抗生素及含酶抑制剂复合物呈高度耐药状态,产酶株的耐药性显著高于非产酶株.结论 ICU患者肺炎克雷伯菌检出产AmpC酶菌株较高,AmpC酶基因型均为DHA-1型,产AmpC酶菌株对多种抗菌药物呈耐药状态.
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呼吸系统感染大肠埃希菌耐药性及三种β内酰胺酶变迁研究
目的 了解2008 -2010年呼吸系统感染的大肠埃希菌耐药性及高产头孢菌素(AmpC)酶、超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和碳青霉烯酶的流行变化趋势.方法 纸片扩散法检测耐药性；双纸片确认试验、头孢西丁琼脂法及改良Hodge试验分别检测ESBLs、AmpC酶及碳青霉烯酶.结果 247株大肠埃希菌对三代头孢菌素的耐药率呈逐年上升趋势,对其它抗生素耐药率变动无统计学意义；2008 -2010年ESBLS产率分别为23.5％、28.2％、37.5％,呈逐年上升趋势；AmpC酶产率分别为17.3％、18.0％、18.2％,不同年份间AmpC酶的差异无统计学意义；碳青霉烯酶产率为1.25％、2.56％、2.27％.结论 三代头孢菌素耐药率持续上升；ESBLs流行较严重并继续呈上升趋势,AmpC酶流行无明显变化,碳青霉烯酶仍较少出现.
