228 人肠道菌E．SP．A-44的无细胞提取物对紫草素的转化

雪莲培养细胞提取物的抗急性低压缺氧作用机制研究

目的 探讨雪莲培养细胞提取物的抗急性低压缺氧作用机制. 方法 Wistar大鼠36只,采用数字随机表法平均分为空白对照组、阴性对照组和雪莲培养细胞提取物组.各组动物于每日清晨灌胃,连续14d.其中雪莲培养细胞提取物组给予雪莲培养细胞提取物500 mg/kg灌胃,空白对照组和阴性对照组给予等量蒸馏水.14d后,除空白对照组外,其余两组大鼠行8h的模拟海拔8 000m的急性低压缺氧暴露.断头处死各组大鼠,取血、分离脑组织,检测血清和脑组织中的谷氨酸(glutamic acid,GLU)、NO、乳酸(lactic acid,LD)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,以及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、SOD、ATP酶和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-PX)的活力. 结果 与空白对照组比较,阴性对照组大鼠脑组织或血清中的GLU、NO、LD、LDH和MDA的含量均显著增加(P＜0.01);Na+-K +-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、T-AOC、SOD和GSH-PX的活力均显著降低(P＜0.01).与阴性对照组比较,雪莲培养细胞提取物组大鼠脑组织和血清中的GLU、NO、LD、LDH和MDA的含量均显著降低(P＜0.01);Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、T-AOC、SOD和GSH-PX的活力均显著升高(P＜0.01). 结论 在模拟海拔8 000 m急性低压缺氧环境下,雪莲培养细胞提取物能有效地清除或抑制氧自由基的生成,预防脑组织和血清中GLU和LD的堆积;通过保护细胞膜上Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的功能,预防能量代谢障碍所引起的继发毒性反应,减轻细胞水肿,保护脑组织和细胞的完整性及其功能,有效地阻止急性低压缺氧的损伤.

雪莲培养细胞提取物对辐射损伤小鼠造血功能的影响

目的 探讨雪莲培养细胞提取物对辐射所致小鼠造血功能损伤的影响. 方法 100只昆明种雄性小鼠,采用数字随机表法平均分为空白对照组、单纯辐射组、雪莲培养细胞提取物高剂量组(1.0 g/kg)、中剂量组(0.5 g/kg)、低剂量组(0.1 g/kg),每组20只.雪莲培养细胞提取物给予相应剂量的雪莲培养细胞提取物灌胃,其他各组给予蒸馏水灌胃,连续28 d.除空白对照组外,其余各组于灌胃14 d后给予2.5 Gy60Coγ射线全身辐射.辐射前第14天、1天及辐射后第3、6、10、14天检测外周血白细胞数,辐射后第6、14天检测脾脏指数、内源性脾结节数、骨髓有核细胞数和骨髓DNA含量. 结果 各组小鼠体重在饲喂过程中均明显增加(t=76.58～203.34,P＜0.01);与空白对照组比较,单纯辐射组小鼠外周血白细胞数、骨髓DNA含量、脾脏指数均明显下降(P＜0.01),脾结节数均明显增加(P＜0.01);与单纯辐射组相比,雪莲培养细胞提取物各组小鼠外周血白细胞数、骨髓DNA含量和骨髓有核细胞数均明显升高(P＜0.05),脾脏指数与内源性脾结节数增加(P＜0.05),检测结果不呈剂量依赖性. 结论 雪莲培养细胞提取物对辐射致造血系统损伤小鼠有修复和促再生作用.

端粒酶与消化系统肿瘤

在20世纪80年代,人们对端粒和端粒酶已有较多的认识.1985年由Greider[1]从四模虫的细胞提取物中首次发现端粒酶.

乙型肝炎病毒持续性感染防治策略的研究进展

HBV持续感染与肝细胞癌(HCC)的发生密切相关，其HCC发病率是无HBV感染者的100倍。 全世界每年死于慢性乙肝的人约100多万，死于与HBV感染相关的HCC的人约10万人，HBV持续性感染严重影响着人们的心身健康。因此，控制HBV持续性感染倍受重视。本文将近年来有关防治HBV持续感染的研究进展概述如下。 一、反义核酸与核酶用于治疗 反义核酸HBV作用的研究很多，多为体外研究，也有用鸭肝炎病毒模型的。所用的反义核酸，多数为反义mRNA，也有用反义DNA的。反义核酸所针对的HBV基因组特异性靶序列包括Pres、SPreC、C及P区，包装信号区或polyA加尾信号区等[1]。用这些区段特异性的反义mRNA或DNA，经载体转染或感染导入整合有HBVDNA并表达HBV抗原的肝癌细胞系后，对HBV基因表达与复制有不同程度的抑制作用，抑制率往往在40％以下，用反义DNA寡核苷酸预处理无HBV基因整合的肝癌细胞，再转染HBV质粒发现反义DNA对HBV基因的与复制有明显的抑制作用。对基因转录与HB-sAg合成的抑制率分别为60％和97％，作者认为这对肝移植后肝炎有治疗意义[2]。 用HBV核心区临近部位多靶位核酶在体外能有效地切割HBVRNA。因为HBV基因突变率高，HBV基因的突变形成了免疫逃避株[3]，用常规的乙肝疫苗免疫往往失败，从而为HBV持续性感染创造了条件。这种情况采用多靶位核酶可能有效。多靶位切割可能更有效。细胞内可能有抑制核酶切割活性的因子存在，用针对HBV前基因组RNA保守的包装信号靶序列的锤头状核酶所做的研究表明，该核酶对外合成的HBVRNA和细胞提取物HBVRNA有明显的切割作用，

端粒酶与胃癌相关性研究进展

近年来,端粒(telomere)与端粒酶(telomerase)的研究逐渐成为医学研究热点,早在20世纪80年代,人们对端粒和端粒酶已有较多的认识.1985年由Creider[1]从四膜虫的细胞提取物中首次发现端粒酶.

人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导人肺上皮细胞凋亡

目的探讨人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导体外培养的人肺上皮细胞A549凋亡,以及提取物浓度和作用时间与细胞凋亡的相互关系.方法根据四氮唑盐酶还原法(MTT)结果,选用5种不同浓度的提取物诱导人肺上皮细胞凋亡.分别在诱导后的5个时间段,采用苏木素-伊红(HE)染色盲法计数和二苯胺法检测DNA断裂率,观察肺上皮细胞凋亡情况.同时对某个时间和浓度组的样本,用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果不同浓度人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导A549细胞凋亡,在5 h之内细胞凋亡率随提取物浓度增加而增加,两者呈正相关关系,且细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.05),5 h细胞凋亡率达高峰(65.2%).结论人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物可诱导人肺上皮细胞凋亡,细胞凋亡与其提取物浓度呈明显的相关关系.在时间上表现为双向变化关系,其变化程度同时受提取物浓度的影响.

幽门螺杆菌诱导大鼠胃黏膜细胞分泌胃蛋白酶原

本研究应用新的大鼠胃黏膜细胞系(OUMS-37),研究幽门螺杆菌(Hp)提取物对胃蛋白酶原合成与分泌的影响[1].材料与方法一、Hp菌株及细胞提取物Hp菌株Sydney SS-1由日本冈山大学医学部细菌科横田副教授惠赠,Hela细胞空泡试验证实为VacA阳性.Hp在布氏培养液中增菌培养7 d收获,以6 000 r/min离心30min,弃上清,用20 ml冰PBS(pH7.4)洗涤细菌2次,将其置超声粉碎仪中破碎细菌20 min,4℃ 20 000 r/min离心20min,收集上清,0.4 μm滤纸过滤,-70℃冰冻.

抗SSA/Ro抗体研究的新进展

1979年Alspaugh等[1]使用培养人淋巴细胞提取物与原发性Sjogren's综合征(pSS)患者的血清进行研究,发现该提取物中含有两种新的自身核抗原即SSA和SSB抗原,1979年Alspaugh[2]与Clark又证明SSA抗原与Clark1968年发现的Ro抗原是同一种物质,故命名为SSA/Ro抗原,针对SSA/Ro抗原的自身抗体是已知的核糖核蛋白(ribonucleoprotein complex,RNP)抗体中分布广、常见的自身抗体之一.

JNK信号通路与临床疾病研究综述

c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK),又称为应激激活蛋白激酶(SAPK),属于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族的一类.上世纪九十年代,在紫外线照射的HeLa细胞提取物过程中被发现[1],可参与人类细胞的胚胎发育、细胞分化、细胞增殖、细胞死亡的过程.近些年研究证实,JNK信号通路活化参与多种临床疾病发生发展过程,调控JNK信号通路可作为临床疾病防治的作用靶点.

HI-SIV和HIVgp120干预CD3/CD4信号转导通路的研究

目的和方法:在HIV感染的早期及无症状的病毒携带者体内CD+4T淋巴细胞对抗原和有丝分裂原刺激缺乏IL-2表达和增殖反应,甚至在CD+4T淋巴细胞进行性减少之前就已经有明显的免疫缺陷.形成这一损伤的确切机制尚不十分清楚,但已有研究证实HIVgp120和CD4分子结合,从而抑制T淋巴细胞抗原受体(TCR)信号转导有关.本研究采用Western Blot及电泳迁移率改变检测法(EMSA)观察了HIVgp120多肽片段和灭活SIV病毒(HI-SIV)对CD3/CD4活化刺激诱导的TCR信号转导通路的影响,了解病毒蛋白作用下淋巴细胞活化信号转导的特征.结果:利用酪氨酸磷酸化的单克隆抗体对全细胞提取物蛋白磷酸化水平的检测结果表明,HIVgp120和HI-SIV对～70 kD、～40 kD组分的磷酸化水平有明显的抑制作用,HIVgp120和HI-SIV都具有阻断CD3/CD4活化刺激诱导的细胞蛋白磷酸化作用.选用抗ERK2(42 kD)抗体对～40 kD、～70 kD组分进行Western blot分析,结果HIVgp120和HI-SIV对ERK活性有明显的抑制作用.利用NF-κB和AP-1结合通用序列研究CD3/CD4活化信号诱导的NF-κB和AP-1活化,HIVgp120和HI-SIV则完全阻断了其活化作用,在转录水平上调控CD3/CD4活化信号.结论:HIVgp120和完整SIV病毒都具有抑制CD4辅佐的刺激活化信号,下调ERK、NF-κB和AP-1活性,抑制～70 kD蛋白的磷酸化水平等作用,从而阻断了TCR的信号转导,可能是导致HIV感染者淋巴细胞功能缺陷的机制之一.

重编程的机制研究进展

旧的观点认为发育是不可逆的过程，而从分化的供者细胞克隆出哺乳动物驳斥了这个观点。现已证明卵母细胞能重编程供者核到胚胎状态，并发育成一个新的生物。未来将研究替代核移植的重编程方法，不使用卵母细胞，在培养皿中重编程。本文综述了重编程的几种方法，包括核移植、细胞融合、细胞提取物、培养诱导和分子介导重编程的方法，对重编程的机制进行了探讨。

核转录因子NF-kB与危重症的关系

NF-kB初是由Sen和Baltimore等于1986年在B淋巴细胞提取物中检测到的一种核蛋白,它能与免疫球蛋白K轻链基因的增强kB序列(5'-GGGACTTTCC-3')特异结合,并能促进K链基因表达,故命名为核转录因子kB.

放置时间对烟蒂上DNA含量及STR分型的影响

目的 探讨不同放置时间对烟蒂上DNA含量及STR分型的影响.方法 以lO名志愿者的40枚"红双喜"烟蒂为检材(每人4枚),用chelex-100法分别在第1、4、7和1O周时提取烟蒂样本外层烟纸和海绵上的DNA,用Quantifiler人类DNA定量试剂盒进行DNA定量.并同时用AmpFL STR Profiler和IdentifilerrM试剂盒(AB公司)进行PCR扩增及STR分型. 结果放置第1、4、7和10周的烟蒂烟纸DNA质量浓度范围分别为0.104～2.52、0.110～2.41、0.096 0～2.32和0.085 0～2.28ng/μL,16个基因座检出率分别为100%、90%、75%和62.5%.海绵DNA质量浓度范围分别为0.0180～2.40、0.0171～2.25、0.0165～2.15和0.0160～2.15ng/μL,16个基因座检出率分别为97.5%、82.5%、50%和12.5%. 结论放置时间对烟纸和海绵上的DNA含量影响不大,对STR分型影响显著,STR分型受海绵的影响比烟纸明显.放置时间越久.检出率越低.