首页 > 文献资料
-
不同来源鼠伤寒沙门菌的侵袭力及毒力基因表达
目的 探讨不同来源的鼠伤寒沙门菌侵袭力和毒力基因表达的差异.方法 从腹泻患者粪便、河水及土壤中共分离出鼠伤寒沙门菌(分别简称为临床株、水体株、土壤株)34株,分析菌株在上皮细胞黏附、侵袭以及巨噬细胞内复制能力的差异;选择与黏附、侵袭以及复制阶段相关的毒力基因(鞭毛合成位点filC,致病岛1位点hilA、invI,致病岛2位点ssrA、sseF),通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测不同来源细菌的毒力基因表达差异.结果 土壤株和水体株的黏附力和侵袭力与标准菌株(ATCC 14028)类似,但80%左右的临床株表现出比标准菌株(ATCC 14028)更高的黏附力和侵袭力.在巨噬细胞内的复制结果 显示,临床株、土壤株以及水体株的胞内复制能力均与标准菌株(ATCC 14028)类似.不同菌株的毒力基因表达情况与细胞黏附、侵袭及胞内复制结果 相吻合.高侵袭力临床株在黏附期filC基因以及侵袭期hilA、invI基因的表达量显著高于标准菌株(ATCC 14028)(P<0.05),而胞内复制期ssrA和sseF基因的表达量与标准菌株(ATCC 14028)类似.土壤株和水体株在不同时期的基因表达量均与标准菌株(ATCC 14028)类似.结论 鼠伤寒沙门菌临床株显示出较环境菌株更强的黏附力、侵袭力及更多的相应毒力基因表达量,应着重加强对医院内沙门菌感染的防控措施,降低医源性沙门菌的感染率.
-
印记基因SLC22A18的表达与乳腺癌侵袭能力的关系
目的:研究印记基因SLC22A1 8(solute carrier family 22,member 18)在乳腺癌中的表达情况及其与乳腺癌侵袭能力的关系.方法:采用Transwell方法评估2种不同恶性程度的乳腺癌细胞株MDA-MB-231(恶性程度高)和MCF-7(恶性程度低)的侵袭转移能力.分别采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测SLC22A18的mRNA和蛋白在这2种乳腺癌细胞株中的表达情况.结果:MDA-MB-231细胞株恶性程度高,穿过膜的细胞多,侵袭能力强;MCF-7细胞株恶性程度低,穿过膜的细胞少,侵袭能力弱;SLC22A 18在MCF-7中的mRNA和蛋白表达水平高于MDA-MB-231;差异有统计学意义(P＜0.01).结论:印记基因SLC22A18的表达与乳腺癌细胞的侵袭能力相关,该基因有望作为一个抑癌基因抑制乳腺癌的转移.
-
上颌窦腺样囊性癌2例
上颌窦恶性肿瘤种类较多,多数为鳞癌,也有腺癌、肉瘤、淋巴瘤.腺样囊性癌也是其中之一,约占上颌窦恶性肿瘤的10%[1].腺样囊性癌又称圆柱瘤,原发于上颌窦的较少见.早年认为其恶性程度介于良恶性肿瘤之间,近年来多认为是恶性肿瘤,因侵袭力强,沿神经侵犯,转移多见等原因,5年生存率很低.
-
FAK阻断对MHCC97肝癌细胞侵袭性的影响
尽管目前对肝癌的治疗,无论是手术还是局部或全身辅助治疗(包括放疗、化疗)措施都取得了很大的进步,但仍难以控制其在局部和远处转移.我们通过反义FAK ODN转染和Genistein抑制FAK磷酸化分别对MHCC97肝癌细胞FAK的表达进行不同干预,探讨受干预后的MHCC97肝癌细胞的侵袭力变化.
-
机会性致病原虫感染的免疫学研究进展
机会性感染是指一些侵袭力较弱,致病力也较低,在免疫功能正常人体不会造成感染的病原微生物,但当人体免疫功能受损时,如发生获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、器官移植后长期使用免疫抑制剂、或者肿瘤化疗患者等,这类病原体可以乘虚而入,其繁殖能力和致病力增强,患者出现明显的临床症状和体征,甚至危及生命.
-
猪蛔虫卵低温保存5年后的存活率及侵袭力
猪蛔虫(Ascaris suum)常用于寄生虫学教学实验,让学生了解线虫经肺移行生活史中的特点,认识寄生虫发育不同阶段对机体造成的危害.但目前教学实验用的猪蛔虫有时不易获得,作者等对冰箱中保存5年的猪蛔虫卵的存活率及侵袭力进行实验观察,现将结果报告如下.
-
纤维连接蛋白对人结肠癌细胞侵袭力的影响
目的研究纤维连接蛋白(fibronectin,FN)对人结肠癌细胞侵袭力的影响,并探讨其中的信号传导机制.方法以递增浓度的FN刺激结肠癌细胞株Colo320,以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测结肠癌细胞内黏着斑激酶(focaladhesion kinase,FAK)第397位酪氨酸(tyr-397)磷酸化的状况,以改良Boyden小室法检测相应的细胞侵袭力变化.设计反义寡核苷酸阻断FAK蛋白质表达,再次观察接受FN刺激后,结肠癌细胞内FAK tyr-397磷酸化状况及细胞侵袭力的改变.结果FN能够促进Colo320FAK tyr-397磷酸化,在一定范围内具有剂量依赖性.FN浓度达10 nmol/L时,此作用显著,继续增加FN浓度,FAK tyr-397磷酸化不再呈现继续增强趋势,当浓度达到100 nmol/L时,磷酸化程度反而有所下降;FN可以增强细胞侵袭力,同样在一定范围内具有剂量依赖性;反义寡核苷酸干预后,结肠癌细胞内FAK tyr-397磷酸化及细胞侵袭力均有显著降低(P＜0.01).结论FN可以有效增强结肠癌细胞的侵袭力,其作用是通过FN-FAK信号通路实现的,FAK的活性形式是其酪氨酸位点的磷酸化,阻断FAK的表达可以减弱FN促进细胞侵袭的作用.
-
有症状的胃食管反流病中埃索美拉唑抑酸能力比奥美拉唑更强
目前已知胃反流物的侵袭力(以黏膜损害程度表示)及胃食管反流病(GERD)的相关症状对pH值有高度依赖性.认为胃内pH=4是鉴别反流有无侵袭力的分界点.pH＜4的反流物中含有活性的胃蛋白酶,可引起明显临床症状.
-
A族链球菌与感染性皮肤病
在皮肤科门诊中,细菌性皮肤感染常见,占儿童皮肤病发病率的17%[1].正常皮肤菌群分为常住菌和暂住菌,重要的暂住菌是金黄色葡萄球菌(SA)和链球菌.链球菌中A族链球菌(group A streptococcus,GAS)与人类的关系密切,它广泛分布于粘膜和皮肤,侵袭力强、菌型多且感染途径多,所致疾病临床表现多种多样.现主要叙述A族链球菌与感染性皮肤病的关系.
-
流感嗜血杆菌检测的研究进展
流感嗜血杆菌(H.influenzae,HI)是引起儿童呼吸道感染的常见细菌,在我国是儿童社区获得性肺炎的重要病原菌,尤其是有荚膜的b型流感嗜血杆菌(HIb)具侵袭力[1～4].HI还是引起儿童化脓性脑膜炎的首位病原菌[5],还可引起中耳炎和败血症等.
-
人脑胶质瘤组织培养的干细胞样细胞具有体外高侵袭能力
目的:分离培养人脑胶质瘤干细胞样细胞(glioma stem-like cell,GSLC),研究其体外侵袭力.方法:选取中国医科大学第一医院神经外科2008年10月至2009年1月间住院患者手术切除的脑胶质瘤组织8例,以无血清成球培养法培养胶质瘤细胞球；免疫细胞化学实验检测其CD133的表达；荧光免疫显微镜观察其分化后胶质细胞标志物GFAP和神经元标志物TU-20的表达；matrigel侵袭实验检测其侵袭力,并与原代脑胶质瘤细胞进行比较.结果:成功分离培养出人脑胶质瘤细胞球细胞,该细胞表达干细胞标志物CD133；能自我更新与增殖；诱导分化后,GFAP和TU-20均为阳性表达,提示其为GSLC.胶质瘤细胞球细胞侵袭细胞数显著多于原代胶质瘤细胞[(261.23±87.20)vs( 116.08 ±63.88)个,P＜0.01]；此外,胶质瘤细胞球细胞穿过matrjgel胶后可再次聚集成球状生长.结论:成功分离培养人脑胶质瘤组织中的GSLC,其体外具有较高的侵袭力,可能参与脑胶质瘤的侵袭和转移.
-
沙门菌介导骨桥蛋白siRNA对Tca 8113细胞体外生长的影响
目的:研究应用减毒沙门菌感染性转基因骨桥蛋白siRNA(OPNsiRNA)抑制Tca 8113细胞生长和转移的可行性和作用.方法:人工合成OPNsiRNA,同时,合成无义ControlsiRNA作为对照,进行以下平行试验;合成siRNA,分别构建表达载体pIRES2-EGFP,转染减毒沙门菌SL7207,获得的重组菌SL-OPNsiRNA和SL-ControlsiRNA分别体外感染Tca 8113细胞,观察细胞感染率及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响,同时以Western印迹检测转基因OPNsiRNA对细胞内源性OPN、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)蛋白表达的影响.采用SPSS15.0软件包进行组间t检验.结果:重组减毒沙门菌感染Tca 8113的效率可达80.0%以上,两者之间无显著差异(P>0.05);OPNsiRNA可显著抑制Tca 8113细胞的生长和诱导凋亡;感染后24h,细胞OPNsiRNA和ControlsiRNA的迁移指数分别为0.56±0.10和0.82±0.05,侵袭力指数分别为0.53±0.13和0.83±0.06,2组之间均存在显著差异(n=12,P<0.01);同时.OPNsiRNA感染可显著降低细胞内OPN、MMP-2和uPA蛋白的表达量.结论:携带OPNsiRNA的减毒沙门菌可有效通过细菌感染方式,转入舌癌细胞,发挥抗肿瘤生长和转移的作用.
-
PTEN基因转染的胶质瘤细胞对γ刀照射敏感性的变化
目的:观察转入正常PTEN基因的胶质瘤细胞经γ刀照射后生长能力及黏附力的改变,探索PTEN基因对胶质瘤细胞放射敏感性的影响.方法:以RT-PCR方法体外扩增PTEN全长基因,与质粒pcDNA3.1连接,构建重组真核载体pcD-NA3.1-PTEN,并用之转染PTEN失活的U251细胞(人胶质母细胞瘤细胞系),用48 h的半数致死剂量(中心剂量和周边剂量分别为9.00和4.50 Gy)进行γ刀等中心照射,并采用MTT法和纤维粘连蛋白黏附实验观察照射前后细胞的生长及黏附力改变.结果:空载体转染组与未转染组照射前后细胞存活率和黏附率均无显著性差异,而PTEN基因转染的细胞存活率及黏附率在照射前后均显著低于空载体转染组及未转染组(P＜0.01),且照射后下降程度更加明显.结论:PTEN基因转染的胶质瘤细胞对于γ刀照射的敏感性提高.
-
树突状细胞表面C型凝集素受体表达对绒毛外细胞滋养细胞生物学行为的影响
目的 采用基因克隆技术构建C型凝集素受体(CLR)过表达/siRNA慢病毒载体,观察胎盘来源的树突状细胞表面CLR过表达或低表达对人绒毛外细胞滋养细胞(EVCT)侵袭力、黏附能力和凋亡的影响.方法 通过质粒转染和RNA干扰技术获取过表达和低表达CLR基因的树突状细胞.将分离、培养及鉴定后的EVCT分别与过表达和低表达CLR基因的树突状细胞共培养(过表达组和低表达组).采用体外侵袭试验、黏附能力实验和Annexin Ⅴ/PI双染法检测共培养对EVCT侵袭、黏附能力及凋亡的影响.以共培养前的EVCT作为对照组.结果 过表达组EVCT的侵袭能力与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),低表达组EVCT的侵袭能力明显弱于对照组(P＜0.01).过表达组和低表达组与对照组的黏附率比值分别为(94.2±2.3)％和(52.8±1.5)％,低表达组EVCT的黏附能力明显下降(P＜0.01).过表达组、低表达组和对照组的细胞凋亡率分别为(3.9±0.8)％、(8.2±1.4)％和(1.1±0.3)％,低表达组细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.01).结论 抑制树突状细胞表面CLR表达可使EVCT的侵袭力和黏附能力显著减弱,凋亡率显著增高;提示树突状细胞表面CLR表达异常可能是EVCT免疫损伤和子痫前期发病的重要机制之一.
-
微RNA-375在三阴性乳腺癌中的表达及生物学效应
目的 探讨微RNA-375(miRNA-375)在三阴性乳腺癌中的表达及生物学效应.方法 采用Real-timePCR技术检测62例三阴性乳腺癌患者的癌组织及其癌旁正常组织中miRNA-375的表达,分析miRNA-375表达与临床病理学特征的关系.对乳腺癌细胞株M DA-MB-231和乳腺纤维腺瘤细胞株MCF-10A中miRNA-375的表达进行检测;将miRNA-375前体转染MDA-MB-231,CCK-8法和Transwell实验检测细胞增殖和侵袭力的变化.结果 三阴性乳腺癌组织中miRNA-375表达显著低于癌旁正常组织(P ＜0.001),miRNA-375的表达与肿瘤的大小和是否存在腋窝淋巴结转移有关(P＜0.001).与MCF-10A比较,MDA-MB-231中miRNA-375的表达显著降低(P =0.021).miRNA-375前体转染后,MDA-MB-231内miRNA-375表达显著上调,细胞增殖能力和侵袭力减弱.结论 三阴性乳腺癌组织和MDA-MB-231中miRNA-375的表达下调.miRNA-375对三阴性乳腺癌发生和发展具有一定的抑制作用.
-
Dickkopf-4激活Wnt/PCP通路促进肾透明细胞癌的增殖及侵袭
目的 研究Dickkopf-4(DKK4)在肾透明细胞癌(clear cell Renal cell carcinoma,ccRCC)组织中的表达及其与ccRCC生物学行为、临床分期分级和预后之间的的相关性.方法 采用RT-PCR、免疫组织化学及Western印迹法比较42例肾癌和癌旁正常组织中DKK4的表达水平,观察其表达与肿瘤大小、临床分期、分级之间的关系;使用pCMV6-DKK4表达载体转染786-O和A498人肾透明细胞癌细胞,检测、观察转染后的肿瘤细胞的增殖活性、侵袭力及细胞凋亡水平,检测Wnt/β-Catenin(β-Catenin、Cyclin D1)及Wnt/Planar Cell Polarity信号通路(.JNK、Rac1)蛋白表达.结果 28例(66.7％)肾癌组织中,DKK4的表达明显高于正常组织,其表达水平与肿瘤病理分级分期和临床特征之间无明显相关(P＞0.05);过表达DKK4的肾癌细胞株的增殖活性及侵袭力明显增强;细胞内Wnt经典通路蛋白β-Catenin表达下调而Cyclin D1表达上调;Wnt/PCP通路下游蛋白JNK、Rac1表达上调.结论 Wnt/β-Catenin通路抑制剂DKK4通过激活Wnt/PCP非经典通路促进肾癌细胞增殖,增强肾癌细胞侵袭力.
-
早孕期母-胎界面蜕膜基质细胞过表达肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82导致妊娠失败
目的 观察肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82在自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达情况,并建立蜕膜基质细胞(decidual stromal cell,DSC)与滋养细胞共培养模型,探讨KAI1/CD82在人母—胎界面的生物学作用.方法 分别采用RT-PCR和Real-time PCR、免疫组化和Western blot技术分析KAI1/CD82在人早孕期正常妊娠和自然流产的绒毛和蜕膜组织中的转录及翻译水平.模拟体内微环境,建立了DSC和滋养细胞BeWo细胞株共培养体系,利用RNA干扰沉默DSC细胞KAI1/CD82表达,探讨DSC是否通过表达KAI1/CD82对滋养细胞侵袭性发挥调节作用.结果 自然流产母—胎界面KAI1/CD82转录水平明显高于正常妊娠(P＜0.05)；自然流产的蜕膜组织KAI1/CD82蛋白表达也明显高于正常妊娠(P＜0.05)；而绒毛组织及滋养细胞不表达KAI1/CD82蛋白.采用RNA干扰技术成功沉默DSC细胞KAI1/CD82表达；KAI1/CD82基因沉默后,与DSC细胞共培养的BeWo细胞侵袭力显著增强.结论 DSC通过表达KAI1/CD82控制滋养细胞的侵袭,而一旦DSC异常过表达KAI1/CD82将导致滋养细胞侵袭力异常降低,终可能导致自然流产的发生.
关键词： KAI1/CD82基因 蜕膜基质细胞 滋养细胞 侵袭力 自然流产 -
半胱氨酸蛋白酶在医学寄生虫学领域的研究进展
半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease)是一类在酶的活性中心含有半胱氨酸残基的蛋白水解酶,该酶在生物体内初合成时常为前体物质,包括无活性的前体区和催化区.前体区提供了大量独特的功能,涉及在细胞内有助于蛋白质折叠的监护分子、内源性的蛋白抑制因子以及信号肽序列.半胱氨酸蛋白酶广泛地存在于人类、寄生虫等多种动物体内,因此生物体内的绝大多数化学反应都需要蛋白酶的催化.对人类半胱氨酸蛋白酶的研究工作主要集中在凋亡和肿瘤两个方面 [1,2],而对寄生虫半胱氨酸蛋白酶的研究,由于该酶涉及虫体的毒力、对组织和细胞的侵袭力和免疫逃避等多个方面,因此对其研究更为广泛.本文重点对寄生虫半胱氨酸蛋白酶近期研究的进展作一综述.
-
小RNA SbfR增强伤寒沙门菌动力和侵袭力
目的:探究小RNA SbfR对伤寒沙门菌动力和侵袭力的影响及其潜在机制.方法:用前期构建的SbfR缺陷株(△SbfR+pBAD/Myc-HisA)、SbfR回补株(△SbfR+pBAD/Myc-HisA-SbfR)和空载体株(WT+pBAD/Myc-Hi-sA)进行细菌动力实验和HeLa细胞侵袭实验,观察SbfR对伤寒沙门菌的动力和对HeLa细胞侵袭力的影响.通过基因芯片分析SbfR缺陷株与回补株全基因组表达的差异,并进一步用qRT-PCR分析SbfR对2个鞭毛和2个侵袭相关基因的调控作用.结果:与空载体株、SbfR回补株比较,SbfR缺陷株动力和侵袭力均明显下降(P<0.01或0.05);缺陷株鞭毛和侵袭相关基因的转录表达水平均比回补株明显下降(均P<0.05).结论:SbfR通过促进鞭毛和侵袭相关基因的表达,增强伤寒沙门菌的动力和侵袭力.
-
鼻内镜下鼻咽腔多部位活检在早期鼻咽癌诊断中的价值
鼻咽癌是我国南方地区较常见的恶性肿瘤,具有局部侵袭力强、浸润性扩展、极易侵犯邻近组织器官,区域淋巴结转移率高等特点,世界人口标化病死率达12.46/10万(男)和5.00/10万(女),因此早期诊断、早期治疗对提高鼻咽癌的生存率极为重要.
