季铵盐单体改性牙本质粘接剂对变形链球菌的抑制作用

目的 探讨季铵盐单体改性后牙本质粘接剂对变形链球菌生长、黏附的影响.方法 将季铵盐单体[甲基丙烯酰氧乙基-正十六烷基-二甲基氯化铵(methacryloxylethyl cetyl dimethyl ammonium chloride,DMAE-CB)]加入二甲基丙烯酸酯基牙本质粘接剂作为改性组,以二甲基丙烯酸酯基牙本质粘接剂作为阴性对照组,两组分别制作39个试件.采用接触抑菌实验和黏附实验,比较无处理、老化处理和唾液处理后两组粘接剂表面变形链球菌的生长和黏附情况;检测两组粘接剂浸提液中变形链球菌的细菌倍增时间,评价浸提液的抑菌作用.结果 无处理时改性组变形链球菌菌落数的中位数(四分位数间距)为2.80(1.50)×10~6 CFU,显著低于阴性对照组[2.60(0.90)×10~8 CFU,P＜0.01],变形链球菌的生长抑制率为99%;改性组黏附细菌所制悬液的吸光度A600值(0.332±0.063)显著低于阴性对照组(0.434±0.093,P=0.021).老化处理后改性组黏附细菌所制悬液的A600值(0.372±0.062)显著低于阴性对照组(0.455±0.066,P=0.022),变形链球菌的生长抑制率为99%;唾液处理后改性组黏附细菌所制悬液的A600值(0.299±0.061)显著低于阴性对照组(0.370±0.068,P=0.045),变形链球菌的生长抑制率为90%.改性组浸提液的细菌倍增时间为(130.5±8.4)min,与阴性对照组[(126.4±7.0)min]相比,差异无统计学意义(P=0.298).结论 DMAE-CB改性的牙本质粘接剂固化后其表面变形链球菌的生长和黏附受到抑制.

三种改性方法对钛合金表面变形链球菌黏附的影响

目的 比较表面脉冲等离子渗氮、超声滚压表面纳米化、纳米化后渗氮对钛合金表面变形链球菌黏附的影响,为提高临床口腔钛合金修复体表面改性方法提供依据.方法 制作相同规格的钛合金试件24片,通过查随机数字表将试件随机分为4组,分别为抛光组(对照组,A组)、表面纳米化组(B组)、表面等离子渗氮组(C组)、纳米化后渗氮组(D组),每组6片.试件表面黏附变形链球菌1h后对细菌进行吖啶橙染色.用荧光显微镜对每片试件选5个点作为观测区并拍照.利用Image-ProPlus6.0软件进行细菌计数.采用SPSS13.0对计数结果进行方差分析.结果 对照组表面变形链球菌为(214 ±29)个/视野,B组为(220±30)个/视野,C组为(162±27)个/视野,D组为(45 ±24)个/视野.A、B组差异无统计学意义(P＞0.05)；A组和C、D组差异均有统计学意义(P＜0.01)；B组和C、D组差异均有统计学意义(P＜0.01)；C、D组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 表面等离子渗氮及纳米化后渗氮两种表面处理方法均能在一定程度上改善钛合金表面性能,并能减少变形链球菌黏附.纳米化后渗氮在减少变形链球菌黏附方面效果明显.

新疆维吾尔族儿童乳牙龋与变形链球菌基因型相关性的初步研究

目的 探讨新疆维吾尔族不同龋敏感儿童口腔中变形链球菌幕冈多态性与乳才龋发生的关系,以期为新疆维吾尔族儿童乳牙龋危险性预测和防治提供依据.方法 选取新疆乌鲁小齐市3～5岁维吾尔族高龋(龋失补牙数≥5)和无龋(龋失补牙数=0)儿童各17名为研究对象,收集唾液样本,轻唾一杆菌肽琼脂培养基分离培养变形链球菌.典型菌落行革兰染色、生化鉴定并细菌保种,提取基因组DNA,采用OPA02、OPA05和OPA13三个随机引物对变形链球菌临床分离株行随机引物聚合酶链反应基因分型及聚类分析.结果 分别从高龋和无龋儿童口腔中分离鉴定变形链球菌81和62株,共得到40种不同的基因型.17例高龋儿童中9例携带1种基因型,5例携带2种基因型,3例携带3种基因型;17名无龋儿童中14名携带1种基因型,3名携带2种以上基因型.Spearman相关结果 显示基因多态性与龋敏感相关(r=0.342,P<0.05).结论 维吾尔族儿童口腔中变形链球菌菌株间存在明显的基因多态性,高龋儿童口腔中定植的变形链球菌有多种基因型,个体携带基因型的种类数与其致龋能力相关.

葡糖基转移酶合成肽疫苗的免疫原性研究

目的检测合成的葡糖基转移酶(glucosyltransferase,GTF)多肽疫苗的免疫原性,有助于研制以合成多肽为基础的防龋疫苗.方法合成融有GTF催化和葡聚糖结合区的27个氨基酸残基肽段,利用ELISA法检测免疫小鼠抗体的产生,通过GTF酶活性与变形链球菌粘附实验测定其抗血清的作用.结果融合多肽疫苗的序列为ANDVDNSNPVVQAEQLYFRANGVQVKG,免疫小鼠脾脏重量显著增加,可有效诱导机体抗体的产生.其免疫血清不仅拮抗GTF的酶活性,而且明显抑制变形链球菌的粘附.结论 GTF多肽疫苗可产生抗体介导的抑制GTF酶活性和抑制葡聚糖结合作用,对龋病的防治十分有价值.

编码基因pac的DNA疫苗经鼻粘膜免疫定菌鼠的研究

目的检测pCIA-P DNA防龋疫苗经鼻粘膜免疫定菌鼠的效果,并对两种不同的载体系统进行对比.方法将30只出生后20 d断乳的SD雌鼠随机分为6组,制备定菌模型.分别用裸DNA(A组)、DNA-Dosper复合体(B组)、DNA-Bupivacaine复合体(C组)、pCI质粒(D组)及无菌水(E组)经鼻粘膜免疫大鼠,裸DNA股四头肌注射(F组)为阳性对照.2周后加强免疫1次.70 d鼠龄时收集唾液、血清及粪便,酶联免疫吸附实验检测特异性抗体,处死大鼠进行Keyes记分,单因素方差分析法分析结果.结果 B、C、F组血清特异性抗PAc IgG水平和B、C组唾液中特异性抗PAc IgA抗体水平明显高于其他组(P<0.01).疫苗免疫组龋齿记分明显低于阴性对照组(P<0.01),其中B、C组效果好.结论编码基因pac的pCIA-P DNA防龋疫苗经鼻粘膜途径进行免疫可以有效预防龋病的发生,阳离子脂质体Dosper和局部麻醉药Bupivacaine能够增强核酸疫苗的免疫效能.

中草药抗致龋菌的实验研究

目的筛选出具有抗致龋菌的中草药,并检测其小抑菌、杀菌浓度.方法对各种实验用中草药分别采用水、醇两种方法提取有效成分,从黄连中提纯盐酸小檗碱,通过纸片扩散法筛选出具有抗致龋菌的中草药,用液体稀释方法检测小抑菌及小杀菌浓度.结果对变形链球菌Ingbritt株的小杀菌浓度,厚朴、黄连、五倍子、大黄醇提取物、黄连水提取物和小檗碱分别是0.488、1.950、7.800、31.250、7.800及0.626 g/L;对茸毛链球菌6715株的小杀菌浓度,厚朴、黄连、大黄醇提取物、黄连水提取物和小檗碱分别是0.488、3.900、31.250、1.950及0.625g/L;对粘性放线菌ATCC19246株的小杀菌浓度,黄连、大黄醇提取物、黄连水提取物和小檗碱分别是3.900、31.250、3.900及1.250 g/L.结论厚朴、黄连、大黄醇提取物、盐酸小檗碱、黄连及大黄水提取物对致龋菌有较强的抑菌或杀菌作用,厚朴醇提取物的杀菌效果强.

变异链球菌表面增强拉曼光谱的初步研究

目的 探讨以纳米银溶胶为增强基底的变异链球菌(Streptococcus mutans)表面增强拉曼光谱(SERS).方法 葡萄糖还原硝酸银制备纳米银溶胶,以该溶胶为增强基底,用DXR 激光显微拉曼光谱仪获取变异链球菌的SERS.结果 纳米银溶胶粒子为分散性好、均粒径约为11.08 nm的球形颗粒,其增强效果较高;变异链球菌SERS 的拉曼信号强且峰较多,被增强的谱峰主要集中在细胞壁成分相关的700 ～ 1800 cm-1 区域,在721.94、1270.35、1371.83、1441.51、1569.22、1628.91、2922.65 cm-1处均有明显的拉曼振动峰.结论 以葡萄糖还原硝酸银制备的纳米银溶胶为基底,可获得变异链球菌SERS,可用于变异链球菌的检测及其细胞壁成分的分析等,有助于进一步探索变异链球菌的致龋机制及研制新型防龋药物.

Hsp100/Clp ATPase对变异链球菌毒力表达的调控及机制的研究进展

变异链球菌是龋病的始动因子,依赖其产酸、耐酸及形成生物膜等能力成为了口腔致龋环境中的优势菌.三磷酸腺苷(ATP)依赖的内肽酶Clp(Clp ATPase)属于热休克蛋白100家族(Hsp100)成员,通过调控基因表达和控制关键蛋白的活性影响细菌的多种生物学性能.Hsp100/Clp ATPase中某些成员可结合ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶ClpP形成功能复合体,活化、重组和降解变性蛋白质,维持细菌的蛋白质稳态,辅助细菌抵抗严苛的口腔环境.特异性靶向变异链球菌Hsp100/Clp ATPase有望为龋病防治提供新的思路和方法.本文就Hsp100/Clp ATPase的结构和分类,对变异链球菌基因、蛋白及生物学行为调控,及Hsp100/Clp ATPase靶向药物作用等研究进展进行系统阐述,为进一步分析Hsp100/Clp ATPase与变异链球菌致龋毒力的关系,研发抗龋药物候选靶标奠定基础.

超氧化物阴离子自由基与龋病关系的初步研究

超氧化物阴离子自由基(O2-.)是致龋菌代谢过程中产生的重要的中间产物,关于(O2-.)与龋病关系的研究,目前主要有两个方面,一是氧代谢对龋病发病的作用,把O2-.作为致龋菌氧代谢的产物,认为变链球菌代谢过程中产生了O2-.,而O2-.通过影响菌斑的形成而对龋病的发病起作用[1、2];二是氧化还原电位(Eh)对龋病发病的作用,菌斑和龋变组织Eh 负电位的存在,导致牙面局部发生电化学反应,对牙齿产生脱矿破坏,形成龋洞[3].本研究从O2-.对致龋菌生长和粘附的影响的角度,探讨O2-.与龋病发病的关系.

Ⅱ型猪链球菌快速鉴定的分子生物学方法

目的 鉴定疑似Ⅱ型猪链球菌血液感染的病原.方法 将采集的疑似Ⅱ型猪链球菌血液感染者血液标本注入血培养瓶培养,阳性报警后,转种血平板,5%CO_2孵箱培养.同时涂片行革兰染色,API 20 strep生化鉴定.16S RNA通用引物PCR扩增,产物经克隆、测序后行Blast比对.针对Ⅱ型猪链球菌型抗原(CPS)、溶菌酶释放蛋白(MRP)和细胞外蛋白因子(EF)设计引物,PCR扩增鉴定.结果 镜下细菌为革兰阳性球菌,呈短链状或成对排列.API 20 strep鉴定编码为4640453:Ⅱ型猪链球菌(ID值92.3%),16S RNA测序结果为猪链球菌,同源性99%以上,3个特异基因均在相应化置出现条带.结论 以Ⅱ型猪链球菌三个特异基因为靶基因的PCR方法能够准确快速地鉴定Ⅱ型猪链球菌.

模拟失重大鼠肺组织肺炎链球菌感染的病理改变

目的 建立模拟失重条件下大鼠细菌性肺炎的动物模型,观察模拟失重对大鼠肺组织肺炎链球菌感染的影响. 方法 36只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为失重感染(weightless and infection,WI)组、失重对照(weightlessness and control,WC)组和1G重力感染(1 G gravity and infection,GI)组,每组12只.实验第8天(注入细菌后的第6天)处死各组大鼠,检测血常规、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及CD4 T淋巴细胞和CD8 T淋巴细胞的比值(CD4+/CD8+).观察大鼠肺组织病理变化. 结果 各组大鼠白细胞计数差异无统计学意义,中性粒细胞(neutrophils,NEU)计数及NEU比值差异有统计学意义(F=6.12、4.23,P＜0.01、＜0.05),其中WI组高;3组大鼠的CRP差异有统计学意义(F=19.49,P＜0.01),其中WI组高,WC组低;各组大鼠外周血中CD4+/CD8+差异无统计学意义.WI组肺组织病理改变严重,炎症反应较重;GI组可见部分肺组织病理改变,炎症反应程度较轻;WC组肺组织病理改变和炎症反应均轻. 结论 模拟失重(微重力)状态下大鼠机体免疫功能降低,肺炎链球菌肺部感染的病理改变严重,炎症反应较重.

024 针对链球菌的潜在药物靶标

利奈唑胺致导管感染患者高死亡率

利奈唑胺(linezolid,商品名:Zyvox)为合成的(口惡)唑酮类(oxaxolidinones)抗菌药,对肠球菌和葡萄球菌起抑菌作用,对链球菌的多数菌株起杀菌作用,临床主要用于控制耐万古霉素屎肠球菌所致的系统感染,包括败血症、肺炎等.

细菌性阴道病的治疗及护理

细菌性阴道病(Bacterial vaginosis)简称BV,曾被命名为嗜血杆菌性阴道炎、阴道炎、加德涝阴道炎,现称为细菌性阴道病[1] 以下简称BV,因为在患者的阴道分泌物中可找到类杆菌和消化链球菌,分别占87%和36%,兼性厌氧菌16%,尚有支原体,故称之为细菌性阴道病,实际是一种需氧菌、厌氧菌及支原体引起的混合感染[2].

透析与感染

Kaslow等报道309例患者血液透析(HD)12～24个月,平均感染发生率6.5/1000治疗月.另一组445例患者HD 42个月,因感染死亡占8%,以细菌感染多见(48.5%),包括大肠杆菌、克雷伯杆菌、链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌和结核杆菌等,还有病毒及真菌.血管通道是常见的感染途径,发生率72.3/1000治疗月,而留置导管感染在血管通道感染中占80%,是动静脉瘘感染的5～7倍.

黄连素外用八法

黄连素片是从中药黄连、黄柏等中药中提取的具有生物碱类成分的药物.药理研究表明,黄连素对痢疾杆菌、肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、伤寒杆菌及阿米巴原虫有抑制作用,临床主要用于肠道感染、细菌性痢疾等.经临床观察发现,其外治又添许多新用途.

全面认识"红眼病"

"红眼病"又叫"暴发火眼",即急性流行性结膜炎.它是由肺炎双球菌、葡萄球菌、链球菌和科一韦氏杆菌或病毒(肠道病毒、腺病毒)等病原引起的急性传染性眼病.该病通常包括急性卡他性结膜炎(细菌感染)、流行性出血性结膜炎(病毒感染)、流行性角结膜炎(病毒感染)等.目前在各地流行的"红眼病"以流行性出血性结膜炎为多见,它常在春夏季节暴发流行.在洪灾之年,由于卫生条件差,干净水缺乏,也易造成暴发流行.

从目标菌耐药性变迁评价克林霉素在围手术期预防用药中的作用

目的：通过分析克林霉素主要目标菌的耐药性变迁，评价克林霉素在围手术期预防用药中的作用。方法：参照CLSI标准测定我院葡萄球菌和链球菌临床分离株对克林霉素的耐药性，并通过文献检索评价国家监测网发布数据中葡萄球菌与链球菌对克林霉素和万古霉素的耐药性。结果：我院临床分离葡萄球菌和链球菌对克林霉素总体耐药率分别为64%和77%；Mohnarin监测网数据葡萄球菌和链球菌对克林霉素总体耐药率分别为57%和70%；CHINET监测网葡萄球菌和链球菌对克林霉素总体耐药率分别为49%和75%；所有葡萄球菌和链球菌菌株均对万古霉素敏感。结论：克林霉素目标菌耐药率较高，其作为围手术期预防用药的价值需进一步观察和讨论。

市售乙酰螺旋霉素片的质量考察

乙酰螺旋霉素(Acetylspiramycin)是螺旋霉素乙酰化衍生物,属半合成大环内酯抗生素.其毒性低,不良反应小,细菌对本品和其他抗生素之间没有交叉耐药性,较广泛有效地应用于金黄葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌和大肠杆菌等所致感染而引起的肺炎、支气管炎、尿路炎、中耳炎等炎症[1].乙酰螺旋霉素的制剂形式有片剂和胶囊剂.本文对本市市售7个厂家生产的24批样品进行了考察,具体分析了各样品的性状、乙酰螺旋霉素组分、溶出度和含量四个项目.

过氧化物美白剂对釉质表面变形链球菌生物膜的影响

目的:观察高浓度过氧化物美白剂对于釉质表面变形链球菌生物膜的影响.方法:选择拔除的离体牙,制备直径5 mm的带有天然釉质表面的圆盘20个;分为两组,其中10个圆盘用含有35%(质量分数)过氧化氢凝胶(Beyond公司,美国)进行美白,另外10个为对照组.20个釉质圆盘于灭菌人唾液中浸泡3.5 h形成获得性膜,加入脑心浸液肉汤(brain heart infusion broth,BHI)和变形链球菌(UA 159菌株)混悬液,放入5% (体积分数)CO2孵箱进行孵育.在孵育3、7、14、21、28 d后,每组各取出2个圆盘,其中一个圆盘刮去釉质表面的生物膜,系列稀释,接种于脑心浸液琼脂(BHI agar supplemented with blood,BHIS))血平皿菌落计数;另一个圆盘以荧光染色后,用激光共聚焦显微镜 (confocal laser scanning microscope,CLSM)分层扫描观察生物膜.结果:培养3、7、14 d后美白牙面的生物膜内活菌数均显著少于对照组.在培养3 d后,美白釉质表面生物膜内活菌面积[(3 595 ± 2 903) μm2 vs.(89 155±65 963) μm2,t= 8.71,P=0.00]和活菌比例[(26.0% ±16.4%) vs.(92.2% ±10.9%),t= 19.93,P=0.00)]显著低于对照组;但培养21 d后出现逆转:美白釉质表面生物膜内活菌面积[(66 262±23 772)μm2 vs.(51 184±20 502)μm2,t=2.59,P=0.012]显著超过对照组.传统培养法得出的活菌数与CLSM结果一致.结论:美白后釉质表面短期内可抑制变形链球菌生物膜的生长,但在21 d后,美白组生物膜生长高于对照组.美白治疗在短期内有一定抗龋作用,但长期作用有待进一步研究.