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针刺对局灶性脑缺血大鼠海马神经元细胞[Ca2+]i的影响
[目的]研究脑缺血不同时点大鼠海马神经元内游离Ca2+浓度[Ca2+]i及醒脑开窍针刺对其影响,探讨醒脑开窍针刺法早期干预对脑缺血的治疗作用.[方法]建立大脑中动脉所致局灶性脑缺血(MCAO)模型,采用醒脑开窍针刺法治疗,采用激光扫描共聚焦显微技术动态观察脑组织海马CAI区锥体细胞[Ca2+]i在不同时间点的变化.[结果]与正常组大鼠相比,模型组大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞内游离[Ca2+]i(以细胞内Ca2+相对荧光强度表示)在局灶性脑缺血 1h时升高,持续升高至缺血24h时(P＜0.05).假手术组与正常组相比,[Ca2+]i变化差异无统计学意义(p＞0.05).相应时间点非穴位针刺组与模型组[Ca+]i比较,无统计学意义(P＞0.05).在相应时间点,醒脑开窍针刺组[Ca2+]i低于模型组(P＜0.01).[结论]急性局灶性脑缺血后大鼠海马神经细胞[Ca2+]i随缺血时间的延长而持续升高,提示细胞内钙超载；醒脑开窍针刺组能有效调节缺血区的[Ca2+],提示在缺血后针刺治疗效果越早越好,为临床及早应用针刺治疗缺血性脑血管病提供了理论依据.
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野西瓜总生物碱诱导HepG2细胞凋亡与[Ca~(2+)]_i变化的相关性
目的 探讨野西瓜总生物碱(Capparis spinosa alkaloid,CSA)对人肝癌HepG2细胞的杀伤和诱导凋亡的作用机制.方法 MTT法研究CSA对人肝癌HepG2的杀伤作用;荧光显微镜观察HepG2细胞形态;流式细胞仪研究CSA对HepG2细胞的凋亡诱导作用;激光共聚焦显微镜检测CSA对HepG2细胞内[Ca~(2+)]i的影响.结果 CSA对人肝癌HepG2有明显细胞毒性作用,并且有剂量依赖性,IC_(50)为142.82 μg/mL;HepG2细胞在CSA作用后出现特征性凋亡形态特征,凋亡细胞比率明显高于自然凋亡率;且阻断细胞由S期向G_2期的移行,CSA明显升高HepG2细胞[Ca~(2+)]i,并与药物质量浓度呈量效正相关.结论 CSA对人肝癌HepG2有明显的杀伤和促凋亡作用,其机制可能与CSA造成肿瘤细胞内钙离子超载有关.
关键词： 野西瓜总生物碱 人肝癌HepG2细胞 细胞凋亡 钙超载 -
Guattegaumerine的神经细胞保护及细胞内钙调节作用
目的 探讨guattegaumerine (Gua)对H2O2合并血清剥夺诱导的培养大鼠神经细胞的保护作用,以及对H2O2、KCl诱导的大鼠皮质神经元内钙超载和缓激肽诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)内钙超载的影响.方法 H2O2合并血清剥夺诱导培养大鼠皮质神经元损伤,Hoechst33258染色法检测Gua对细胞凋亡的影响；钙荧光探针Furo-2/AM标记细胞,荧光显微图像分析系统和双荧光波长分光光度计检测Gua对细胞内钙浓度的影响.结果 Gua能显著抑制H2O2导致的神经元凋亡、H2O2和KCl引起的培养皮质神经细胞[Ca2+]i升高(P＜0.05)和缓激肽所诱导的培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y[Ca2+];升高(P＜0.01).结论 Gua具有一定的神经细胞保护作用,该作用可能与其抑制细胞外钙内流及内质网内钙释放有关.
关键词： guattegaumerine 神经细胞 钙拮抗 钙超载 H2O2 -
HOE642对减轻缺氧／复氧致未成熟兔心肌细胞内钙超载的作用
目的：观察Na+/H+交换抑制剂HOE642（Cariporide）对缺氧／再复氧前后未成熟兔心肌细胞内游离钙离子浓度(［Ca2+］i）的影响，探讨HOE642对未成熟心肌保护机制。方法：6枚新西兰幼兔心脏，用酶解法分离成单个未成熟兔心肌细胞悬液，每份细胞悬液均随机分为基础组、对照组和实验组，基础组未经缺氧直接测量细胞内Ca2+及心肌酶含量（CK、LDH），而后两组均经受缺氧60 min，再复氧30 min后测量，其中实验组于缺氧时加入HOE642（1 μmol／L）。用Flou-3／AM标记，激光扫描共聚焦显微镜测定单个未成熟免心肌细胞内游离钙浓度。另测定三组心肌细胞悬液中心肌酶含量（CK、LDH）。结果：缺氧／再复氧后对照组未成熟兔心肌细胞内［Ca2+］i（2814±236/1375±102）及心肌酶漏出量明显高于缺氧前基础值(P＜0.01);再复氧后HOE642处理组心肌细胞内［Ca2+］i较缺氧前基础值增加不显著（1446±128/1375±102,P>0.05);而较未用药对照组明显减少（1446±128／2814±236，P<0.01）。而HOE642处理组细胞悬液心肌酶漏出量较基础值有所增加，但其相差不显著，而较对照组有心肌酶漏出量明显减少，两者相差非常显著（P＜0．01）。说明HOE642对缺氧／再复氧后未成熟兔心肌细胞内游离钙超载具有明显的抑制作用。结论：HOE642对未成熟心肌的保护机制可能是抑制心肌细胞内游离钙超载引起的心肌缺血／再灌注损伤。
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黄芩苷对无糖复合低氧致人脑微血管内皮细胞损伤的保护作用
目的:通过观察黄芩苷对体外无糖复合低氧致人脑微血管内皮细胞损伤的保护作用,探讨黄芩苷抗脑缺血的作用机制.方法:体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMVEC),随机分为6组:空白对照组,模型组,黄芩苷高剂量组,黄芩苷中剂量组,黄芩苷低剂量组,尼莫地平组.利用试剂盒检测各组细胞的生存活性,乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、钠钾-三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATPase)及钙-三磷酸腺苷酶(Ca2+-ATPase)活性及细胞内Ca2+.用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡百分率.结果:与空白对照组比较,模型组细胞的存活率、Na+-K+-ATPase及Ca+-ATPase 活性均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),而LDH的漏出率、细胞内Ca2+浓度及细胞的凋亡率则明显升高(P＜0.01).与模型组比较,黄芩苷高剂量组细胞的存活率、Na+-K+-ATPase及Ca2+-ATPase活性明显升高(P＜0.05,P＜0.01),而黄芩苷高剂量组的LDH的漏出率及细胞内Ca2+浓度则明显减低(P＜0.05,P＜0.01),且降低细胞内Ca2+的作用明显优于尼莫地平组.其中黄芩苷中剂量组与高剂量组细胞凋亡百分率明显降低(P＜0.01).结论:黄芩苷能明显提高体外无糖合并缺氧导致的人脑微血管内皮细胞的生存活性,其机制可能与其能够改善细胞的能量代谢,抑制细胞内钙超载,并进一步降低细胞凋亡有关.
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缺氧/复氧早期对豚鼠心室肌持续性钠电流的影响
目的:研究心室肌细胞持续性钠电流(INa.P)在缺氧/复氧早期的变化,探讨其在此病理条件下的作用及意义.方法:运用全细胞膜片钳技术记录持续性钠电流,并观察其在缺氧-复氧模型下的变化.结果:①在0.5 Hz,1Hz和2 Hz的刺激频率下第1个和第8个刺激脉冲引起的INa.P电流密度差值分别为(0.021±0.014)pA/pF,(0.097±0.014)pA/pF和(0.133±0.024)pA/pF(P＜0.01);②分别在-150～-80 mV,阶跃10 mV的钳制膜电位下去极化至-30 mV,INa.P逐渐减小;③在缺氧条件下,INa.P电流密度增大,并随缺氧时间延长增大更显著;④在正常、缺氧15 min和复氧5 min时INa.P密度分别为(0.500±0.125)pA/pF,(1.294±0.321)pA/pF和(0.988±0.189)pA/pF(与对照比较P＜0.01).结论:以上特性提示INa.P在缺氧/复氧过程心律失常的产生及钙超载引起心肌损伤的机制中起重要作用.
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血管紧张素转换酶抑制剂和醛固酮受体阻断剂对钙超载大鼠心功能的影响
目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)和醛固酮(ALDO)受体阻断剂(spironolactone,安体舒通)对钙超载大鼠心功能的影响,以探讨钙超载引起心功能降低和心肌损伤的机制.方法:维生素D3加尼古丁诱导心肌钙超载,放射免疫法测定心肌组织Ang Ⅱ和ALDO含量,Powerlab仪测定心功能,原子吸收测定心肌和血管钙含量,生化法测定心肌MDA和conjugated diene变化,自动生化分析仪测定血浆LDH和CPK含量.结果:心肌钙超载后,心肌和血管钙含量较对照组分别增加3.2和5.8倍,LVdp/dtmax和LVdp/dtmin分别降低27%和34%,LVESP和LVEDP增加42%和32%;心肌MDA和conjugated diene增加22%和68%;血浆LDH和CPK增加4.5和3.1倍(均P＜0.01).运用ACEI和ALDO受体阻断剂可缓解上述指标变化,与钙超载组相比,心肌钙含量分别低44%和39%,主动脉钙含量也低57%和34%,MDA低20%和30%,conjugated diene低44%和35%,LDH、CPK分别减少28%和34%、20%和27%(均P＜0.01).结论:心肌钙超载可以导致心功能下降和心肌损伤,运用ACEI和ALDO受体阻断剂可以减轻心肌钙超载和改善心功能,心肌损伤程度减轻.
关键词： 血管紧张素Ⅱ转换酶抑制剂 醛固酮受体阻断剂 大鼠 钙超载 -
缺氧再给氧对心肌细胞内游离钙浓度的影响
再灌注损伤是一个很复杂的病理生理现象.大量证据表明再灌注损伤或细胞死亡与细胞内的钙超载有关.再灌注损伤发生与否和轻重程度,多认为与缺血时间的长短有关.根据我们的研究,所谓再灌注损伤取决于缺血时间的问题.只是在一定缺血时限内有效,超过这个时限就不存在再灌注损伤的问题.每种动物在心肌缺血再灌注损伤中都有一个由可逆向不可逆转变的时间点,当缺血损伤达到不可逆的程度时,就无所谓再灌注损伤了.本文以成年大鼠体外分离的心肌细胞氧反常模型,动态、定量地观察了细胞内游离钙浓度的变化,探讨了大鼠心肌细胞氧反常变化的规律.
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急性胰腺炎的发病机制研究进展
急性胰腺炎(AP)是临床常见的急腹症,除有局部的病理损伤表现外,常伴有明显的全身炎症反应,甚至并发多器官损伤,病死率很高.虽然,人们在AP的发病机制方面进行了大量的研究,并提出了很多有价值的学说,但其确切机制至今仍未完全阐明.近年来,国内外学者在研究AP发病机制方面已将主要观点由"胰酶消化学说"、"自由基损伤学说"转至"胰腺微循环障碍学说"、"胰腺腺泡内钙超载学说"、"白细胞内皮细胞间相互作用学说"和"细胞因子学说"等方面.本文对近年来有关AP的发病机制方面研究的主要进展进行综述.
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脓毒症细菌内毒素诱导血管内皮细胞损伤与Toll样受体和钙信号的相关性研究
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)、髓质分化蛋白2(MD2)、基质相互作用蛋白1(STIM1)对细菌内毒素(LPS)诱导血管内皮细胞钙超载损伤及炎症反应的影响.方法 DMEM培养基培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).① 高保真反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测LPS刺激前及刺激后0.5、1、6、12、24 h的TLR4、MD2、核转录因子-κB(NF-κB)表达.② 用psiSTIM、psiTLR转染细胞,激光共聚焦检测其对LPS刺激HUVEC钙内流的影响.③psiTLR转染12 h后用LPS刺激6 h,免疫共沉淀法检测抗TLR4抗体沉淀细胞裂解液中MD-2、STIM1、NF-κB蛋白表达.④ 在LPS刺激HUVEC基础上,给予NF-κB抑制剂PDTC 0.1 mg/L或1 mg/L以及转染psiTLR表达载体1 h或12 h,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,RT-PCR检测STIM1、NF-κB的mRNA表达.结果 ①LPS刺激HUVEC后,上清液中TLR4、MD2、NF-κB的mRNA表达水平(2-ΔΔCt)逐渐升高,均于6 h达峰值,分别为23.52±2.88、17.43±3.43、18.13±2.99;与LPS刺激前(分别为7.02±2.81、5.19±3.22、8.11±1.42)比较差异均有统计学意义(均P<0.05).②psiSTIM可显著抑制LPS诱导细胞外钙离子内流峰值(Peak[Ca2+])显著升高(nmol/L:62.61±14.12比108.13±22.33,P<0.05);psiTLR也可显著抑制LPS诱导Peak[Ca2+]显著升高(nmol/L:50.78±8.05比109.43±20.21,P<0.01);而共同抑制TLR、STIM1表达则可使Peak[Ca2+]进一步降低(nmol/L:39.31±6.42比109.43±20.21,P<0.01).③ 非LPS处理组免疫共沉淀法能检测到抗TLR4抗体沉淀细胞中MD2蛋白表达,LPS处理组MD2蛋白表达增强,psiTLR+LPS组MD2蛋白表达显著减弱;而3组均未检测到STIM1、NF-κB蛋白表达.④ 与LPS组比较,PDTC 1 mg/L组TNF-α水平显著降低(ng/L:0.60±0.24比1.77±0.66,P<0.01),PDTC 0.1 mg/L和1 mg/L组及psiTLR 12 h组IL-6水平显著降低(ng/L:232.10±63.54、134.32±37.23、284.23±56.14比510.22±89.23,均P<0.05),PDTC 1 mg/L组和psiTLR 12 h组NF-κB、STIM1的mRNA表达水平均明显下降〔NF-κB mRNA(2-ΔΔCt):17.22±2.35、13.24±3.54比30.16±2.06,STIM1 mRNA(2-ΔΔCt):12.57±2.43、12.21±2.46比25.12±2.02,均P<0.05〕.结论 TLR4、MD2、NF-κB信号及STIM1可调节LPS刺激HUVEC细胞Ca2+内流及炎性介质水平;下调TLR4、NF-κB、STIM1能有效抑制LPS诱导血管内皮细胞钙超载损伤及炎症反应.
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针刺对大鼠脑缺血超早期脑细胞内外游离钙离子浓度的影响
目的:观察手十二井穴点刺放血法对大鼠脑缺血超早期脑细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)和细胞外游离Ca2+浓度([Ca2+]o)的干预作用,探讨其在中风急救中的作用机制.方法:30只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组.应用针型Ca2+选择电极观测大鼠脑缺血即刻至20 min期间每分钟脑缺血区皮质细胞[Ca2+]o的变化.应用Fura-2/AM荧光探针技术观测脑缺血后20 min脑缺血区皮质神经元突触体内胞浆[Ca2+]i.结果:与假手术组比较,模型组大鼠造成脑缺血后,缺血区皮质细胞[Ca2+]o从第5 min开始出现明显降低(P<0.05),到20 min为止其下降幅度与时间呈正相关(P<0.01),而缺血区皮质神经元突触体内胞浆[Ca2+]i显著增高(P<0.01).与模型组比较,治疗组大鼠脑缺血后缺血区皮质细胞[Ca2+]o从第8 min开始其下降幅度明显减小(P均<0.05),到第18 min此趋势更加显著(P均<0.01),第20 min缺血区皮质神经元突触体内胞浆[Ca2+]i显著降低(P<0.01).结论:脑缺血超早期应用手十二井穴点刺放血法进行干预可快速起效,起到调节缺血区脑细胞内外游离Ca2+浓度,有效抑制神经元内钙超载,保护脑细胞功能的作用.
关键词： 脑缺血 超早期 钙超载 手十二井穴点刺放血法 -
胰腺腺泡钙超载与急性胰腺炎
对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的研究已有100多年的历史.然而临床上,AP仍是一危重病症,尤其重型急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)更是病势凶猛、死亡率高.究其原因,主要是其发病机制尚未阐明,致使相应的治疗观点摇摆不定.近年来,国内外对AP发病机制研究的重点已从"胰酶消化学说”、"胰腺微循环障碍学说”、"自由基损伤学说”转至"细胞因子学说”、"胰腺腺泡钙超载学说”[1].本文就胰腺腺泡钙超载与AP的关系研究进展综述如下.
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光动力疗法对人膀胱癌细胞胞内游离钙的影响
目的:探讨光动力学作用后的膀胱癌细胞(T-24和SCaBER)胞内钙离子浓度的变化.方法:采用MTT比色分析法判断光动力学对体外人膀胱癌T-24和SCaBER细胞的杀伤效应.同时应用激光共聚焦显微镜和Fluo-3/AM探针技术测定光动力学作用后细胞内钙离子的浓度.结果:T-24和SCaBER细胞内钙离子有明显升高,与对照组比较差异有显著意义(P＜0.001).结论:光动力学作用后细胞内钙离子超载可能在细胞死亡中发挥重要作用.
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急性胰腺炎大鼠血清、腹水对离体胰腺腺泡细胞的损伤
目的:观察急性胰腺炎(AP)大鼠血清、腹水对大鼠离体胰腺腺泡细胞的损伤作用,探讨AP细胞钙超载的可能机制.方法:采用大鼠胰胆管逆行注射3%去氧胆酸钠复制AP模型,分别在1、5、10h取动物的血清、腹水备用.胶原酶法分离、培养正常大鼠胰腺腺泡细胞,给予1、5、10h AP大鼠血清、腹水刺激;采用MTT法检测胰腺腺泡细胞的存活率;用荧光染料Fura-2/AM负载后,给予1、5、10h AP大鼠血清、腹水刺激,采用钙离子成像系统,观察单个胰腺腺泡细胞游离钙水平的变化.结果:AP模型复制后1h,血清淀粉酶活性即明显升高,同时胰腺组织破坏严重;经AP腹水、血清刺激的胰腺腺泡细胞,其存活率降低;胰腺腺泡细胞内游离钙浓度明显升高(P<0.05),且随AP病程时间延长,AP腹水、血清的刺激作用越明显.结论:在AP大鼠血清、腹水刺激下,胰腺腺泡细胞存活率下降,同时有细胞钙超载发生.
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蕨麻正丁醇部位下调缺氧心肌细胞Cav1.2及Ryanodine受体表达
[目的]研究蕨麻正丁醇部位对大鼠心肌细胞缺氧所致钙超载的抑制作用,并通过研究其对心肌细胞L-型钙通道(L-type calcium channel,Cav1.2)及肌浆网兰尼定受体(Ryanodine receptor,RyR)表达的影响,探讨其可能的机制.[方法]建立原代心肌细胞缺氧模型,设正常对照组、缺氧损伤组、维拉帕米组(5 μmol/L)及蕨麻正丁醇部位高、中、低浓度组(250.0、62.5、15.6μg/ml).采用荧光分光光度法检测各组心肌细胞内钙离子变化,RT-PCR法检测心肌细胞Cav1.2和RyR mRNA表达水平.[结果]缺氧损伤组心肌细胞内游离钙离子的浓度较正常对照组明显增加(P＜0.01),Cav1.2 mRNA、RyR mRNA表达明显增强(P＜0.01),维拉帕米组和蕨麻正丁醇部位高、中、低浓度组心肌细胞内游离钙离子的浓度较缺氧损伤组明显降低,Cav1.2 mRNA(P＜0.01或P＜0.05)和RyR mRNA (P＜0.01)表达明显降低.[结论]蕨麻正丁醇部位可明显抑制缺氧所致心肌细胞钙超载,抑制L-型钙通道和RyR的表达.提示蕨麻正丁醇部位抑制心肌细胞内钙超载的作用可能与其抑制L型钙通道有关.
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钙与创伤性脑损伤
创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是临床上致死致残的重要原因之一,已成为威胁人们生命的重要疾患,得到了越来越多的国际性专业机构的重视.脑创伤后神经组织损伤除原发机械损伤外,其所继发的病理损害更为引人关注,国内外新研究发现,创伤后继发的病理损害与钙的变化密切相关.
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内质网应激与心房颤动研究进展
心房颤动(AF)是临床常见的持续性心律失常,是卒中和心力衰竭的独立危险因素,然而其具体发病机制尚不完全清楚.内质网是调控蛋白质合成、细胞内Ca2+浓度、氧化应激水平、诱导细胞凋亡信号通路的主要细胞器,在心律失常发生和发展中的作用日益受到重视.多种致病因素可导致内质网应激(ERS),其主要通过未折叠蛋白反应(UPR)来恢复内质网稳态.ERS的过度激活可导致心房肌细胞Ca2+超载、氧化应激失衡和细胞凋亡,在AF的发病机制中发挥重要作用.本文对ERS和AF研究进展进行了综述.
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生脉注射液下调心肌肌钙蛋白I增强急性心肌梗死后心源性休克心脏泵功能的研究
目的：观察生脉注射液对急性心肌梗死后心源性休克患者心肌肌钙蛋白I （cTNI）和心肌钙调蛋白（ CaM）及其基因表达的影响，探讨其增强患者心脏泵功能的机制。方法将164例急性心肌梗死后心源性休克急诊患者随机均分为常规治疗组和生脉组，常规治疗组给予急性心肌梗死后心源性休克急诊常规用药处理，生脉组在此治疗基础上给予生脉注射液60 mL静滴。观察2组治疗前后心肌相关蛋白及其基因表达情况及心脏泵功能、尿量、心率和血压变化情况，统计2组临床疗效、并发症发生情况及病死率。结果治疗7d后，与常规治疗组比较，生脉组血清cTNI 和cTNI mRNA、CaM 和钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）mRNA水平及肺毛细血管楔压（PCWP）均明显降低（P均＜0．05），左心室收缩末期内径（LVESD）和舒张末期室间隔厚度（IVST）缩小，左心室大上升／下降速率（±LV dp／dtmax）、左心室射血分数（LVEF ）、左心室舒张末内径（LVEDD）、舒张压（DBP）和脉压差（PP）增大（P均＜0．05），尿量和心脏指数（CI）明显增加（P均＜0．05）。生脉组总有效率明显高于常规治疗组（P均＜0．05），室间隔穿孔、心律失常和急性肾衰竭发生率及病死率均明显低于常规治疗组（P均＜0．05）。结论生脉注射液可增强急性心肌梗死后心源性休克患者心脏泵功能，机制可能与其下调cTNI和CaM、纠正异常开放的钙通道、避免心肌细胞“钙超载”有关。
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自由基与脑缺血再灌流损伤
脑缺血再灌流损伤的机制十分复杂,有多种因素参与,钙超载,兴奋性氨基酸毒性作用,氧自由基的毒性作用等.近年来随着对自由基研究的深入,人们逐渐证实自由基连锁反应是脑缺血的核心病理环节,而缺血后再灌流可以使自由基连锁反应激化,加重缺血损伤,引发迟发性神经功能损害,称为再灌流损伤.本文对脑缺血及再灌流时自由基产生的途径、脑损害机理及自由基清除剂的脑保护作用的研究进展作一综述.
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超声联合微泡对A549肺癌细胞卡铂化疗微环境中Ca2+稳态的影响
目的 探讨超声联合微泡对A549细胞卡铂化疗微环境中Ca2+稳态的影响及其协同卡铂抑制细胞活性的可能机制.方法 按照是否使用造影剂,以及卡铂的不同剂量分为超声辐照(U S)组(A组)、超声联合微泡(USMB)组(B组)、低剂量卡铂(100μg/ml)+US组(C组)、低剂量卡铂+USMB组(D组)、高剂量卡铂(200μg/ml)+US组(E组)、高剂量卡铂+USMB组(F组),经无Ca2+缓冲液漂洗、负载钙离子荧光探针fluo-4 AM、再漂洗,激光共聚焦显微镜实时测定基态、加药中、加药后、超声辐照(0.4 W/cm2,10 s)后每组活细胞内Ca2+荧光强度,总结组内、组间钙超载现象,并进行比较分析.结果 超声辐照后,细胞内C a2+标准化荧光强度升高,达到极值,后回落至新稳态(A、B、E、F组勾选细胞)或产生二次钙振荡(C、D组部分细胞).B组勾选细胞钙振荡均有叠加,C、D两组部分细胞有叠加,A组有4个细胞延迟发生钙振荡.D组钙超载时间长.与A组比较,其余五组钙振荡幅度增加且差异有统计学意义(均P<0.05).与A组比较,B、D组钙超载总时长增加且差异有统计学意义(均P<0.05).结论 在无Ca2+细胞外液中,US、USMB、卡铂+US、卡铂+USMB均为A549细胞钙超载的直接刺激.SonoVue、卡铂、卡铂+SonoVue为超声辐照诱导A549细胞钙超载的增效刺激.US、USMB与卡铂可协同诱导A549细胞内源性钙释放,钙超载为超声联合微泡对卡铂化疗可能的增效机制.
