老年大鼠创伤性脑损伤后血管再生调节因子表达与肠黏膜、肠屏障功能的变化

目的 观察老年大鼠创伤性脑损伤后血管再生调节因子表达与肠黏膜、肠屏障功能的变化.方法 选择体重为500～600 g,17～20个月月龄的健康老年雄性SD大鼠,制备老年大鼠创伤性脑损伤模型,按损伤时间分为伤后3、12、24、72 h和5d,假手术组为对照组,每组10只.记录和比较各组大鼠行为学、脑组织含水量、肠黏膜显微特征、肠屏障功能和脑组织中VEGF和CD34蛋白表达.结果 与对照组比较,创伤性颅脑损伤3h～5d,随着损伤时间的延长,大鼠的行为学评分、脑组织含水量、脑组织中VEGF和CD34蛋白表达均明显增高(均P＜0.05),肠绒毛高度、绒毛中段直径、隐窝深度和绒毛表面积均明显降低(均P＜0.05);肠黏膜绒毛的破坏度明显,绒毛间质疏松,肠绒毛排列不规则甚至断裂,绒毛上皮坏死脱落,变矮,间距增宽,固有层出现不同程度水肿,上述异常在伤后24～72 h达到高峰(均P＜0.05).结论 密切关注老年大鼠创伤性脑损伤后24～72 h的病情转归对降低病残和致死率应有积极意义,增高VEGF和CD34表达,促进血管再生可能是治疗创伤性脑损伤后继发性脑损害的新思路.

还少丹对老年大鼠高脂血症模型血脂及体质量的影响

目的观察还少丹对老年大鼠血脂及体质量的影响.方法将老年大鼠随机分为空白组、模型组、药物组,拟用高脂饲料喂养(2%胆固醇、8%猪油、90%基础饲料)80 d后分别检测血脂及各组体质量的变化.结果①与模型组比较,药物组能降低血脂中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,分别具有非常显著性意义(P＜0.01).②与模型组比较,药物组体质量下降,具有非常显著性意义(P＜0.01).结论还少丹对老年大鼠具有调节血脂和减肥作用,抑制动脉硬化发生.

复方灵芝胶囊延缓衰老作用的实验研究

复方灵芝胶囊是由灵芝粉、冬虫夏草、地龙提取物等组成,其中冬虫夏草有补肾阳、益肺阴作用;灵芝有益寿延年作用[1].本研究观察了该产品对黑腹果蝇寿命、老年大鼠过氧化脂质降解产物(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,以便了解其抗衰老作用,现将结果报道如下.

补肾中药复方对老年大鼠尿道功能和膀胱逼尿肌β-AR的影响

目的:观察中药复方缩泉丸和金匮肾气丸对老年大鼠尿道功能和逼尿肌β-AR的影响.方法:实验分为4组:正常对照组(青龄大鼠)、模型组(老龄大鼠)、缩泉丸组和肾气丸组,每组12只动物.缩泉丸和肾气丸组给予相应浓度的药液,正常对照组和模型组灌胃给予等体积蒸馏水,连续给药6 w.检测缩泉丸和肾气丸对老年大鼠离体逼尿肌应力舒张功能和尿道压的影响,并考察其对β-AR激动剂及β3-AR拮抗剂作用下离体逼尿肌功能的影响.结果:与青年大鼠比较,老年大鼠离体逼尿肌顺应性变大;且对β3-AR激动剂BRL37344和β-AR激动剂异丙肾上腺素(ISO)引起的大松驰效应(Emax)下降,故药物内在活性(IA)显著降低(P＜0.01);其β3-AR拮抗剂的竞争性拮抗强度(PA2)也显著升高(P＜0.05).与模型组比较,缩泉丸和肾气丸均能显著降低膀胱顺应性(P＜0.05);显著升高β3-AR激动剂BRL37344及β-AR激动剂ISO作用下逼尿肌条的Emax、IA、PD2(P＜0.05或P＜0.01);显著降低其对β3-AR拮抗剂的PA2(P＜0.05).老年大鼠大尿道关闭压(MUCP)、大尿道压(MUP)和功能性尿道长度(FUL)显著低于青年大鼠(P＜0.05);缩泉丸及肾气丸均能增加老年大鼠的MUCP、MUP,肾气丸能增加老年大鼠FUL(P＜0.05或P＜0.01).结论:缩泉丸和肾气丸对老年大鼠逼尿肌β-AR功能有显著影响,能改善膀胱逼尿肌的功能.

天癸更年软胶囊对雌性老年大鼠脑NGF、BDNF、Trk A和Trk B表达的影响

目的:探讨天癸更年软胶囊(含沙棘脂肪酸)对老年大鼠的神经保护和抗衰老作用.方法:选用16月龄雌性大鼠,灌胃给予不同剂量的天癸更年软胶囊180 d,同时设立雌激素对照组、老年(22月龄)对照组和青年(3月龄)对照组.应用免疫组织化学和Western blot技术,观察神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)及其高亲和力酪氨酸激酶受体TrK A和TrK B在天癸更年软胶囊给药组和对照组大鼠脑内的表达.结果:免疫组织化学研究显示,天癸更年软胶囊可显著增加雌性老年大鼠脑白质内NGF阳性星形胶质细胞的相对面积,显著增加某些脑区NGF、Trk A、BDNF和Trk B阳性神经元数目.Western blot研究显示,天癸更年软胶囊可显著增加雌性老年大鼠脑内NGF和BDNF的相对表达量.结论:天癸更年软胶囊对老年期脑有一定的神经营养和保护作用.

当归芍药散改善老年大鼠学习记忆能力的松果体机制初探

二氧化硫调节老年大鼠急性肺损伤时肺泡巨噬细胞分泌及吞噬功能

目的：观察新型气体信号分子二氧化硫（ SO2）对老年ALI大鼠肺泡巨噬细胞分泌和吞噬功能的影响。方法：将48只20～24月龄，体重758±47 g的老年大鼠随机分为3组：对照组、ALI组和SO2治疗组。 SO2治疗组和ALI大鼠气管内滴注脂多糖（LPS，每只200μg）后，分别立即腹腔注射SO2供体Na2SO3（0．54 mmol／kg）／NaHSO3（0．18 mmol／kg）和等体积生理盐水。对照组大鼠气管内滴注等体积无热原生理盐水。各组大鼠气管内滴注LPS或生理盐水6 h后，留取支气管肺泡灌洗液用于分离和培养大鼠肺泡巨噬细胞（ AM）。 ELISA测定AM培养上清炎症因子IL－1β、IL－6和IL－10的含量，并观察AM对白色念珠菌吞噬功能的变化。结果：气管内滴注LPS可使AM分泌IL－1β、IL－6和IL－10增多，同时使其对白色念珠菌的吞噬率降低。与ALI组相比，给予SO2溶液后可抑制IL－1β、IL－6的分泌而促进IL－10的分泌，同时使AM对曲霉孢子的吞噬率增加。结论：外源性给予SO2可调节老年大鼠急性肺损伤时AM分泌及吞噬功能的变化。

骨髓间充质干细胞对髋部骨折诱导的老年大鼠急性肺损伤的保护机制

目的：探讨骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells，BMSCs）对老年单侧髋部骨折大鼠急性肺损伤（acute lung injury, ALI）的保护作用。方法将15月龄雌性WISTAR大鼠分为对照组（不做任何处理）、模型组（右髋部骨折+生理盐水）、治疗组（右髋部骨折+BMSCs）。治疗组于造模后经尾静脉注射1 ml BMSCs(2.5×106/ml)，模型组给予等体积生理盐水。创伤后24 h进行肺组织病理评分，ELISA法检测检测肺组织MPO含量、肺及血液炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-10）水平。结果与对照组相比，模型组肺部病理学评分、肺组织MPO水平、肺及血液炎症反应相关指标均明显升高（P<0.01）。BMSCs处理可明显降低肺组织病理学评分，肺组织MPO水平、肺及血液炎症反应相关指标下调，同时IL-10水平有更明显的增高（P<0.01）。结论髋部骨折可诱发老年大鼠急性肺损伤，BMSCs移植对老年髋部骨折大鼠肺损伤具有保护作用，其机制与缓解全身及肺部炎症反应有关。

米诺环素对异氟醚麻醉后老年大鼠海马老年痴呆相关蛋白的影响

目的:探讨米诺环素预给药对异氟醚麻醉后老年大鼠老年痴呆相关蛋白的影响.方法:健康雄性SPF级SD大鼠42只,约20月龄,体重约350-400 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=14);空白对照组(C组)、异氟醚组(Iso组)、米诺环0素预先给药组(M组).C组为对照组,不做任何处理;Iso组大鼠开始吸入2.5％的异氟醚3 min,后1.5％的异氟醚麻醉维持6h;M组于异氟醚暴露前30 min腹腔注射米诺环素50 mg/kg,余同Iso组.麻醉结束后立即处死大鼠,取海马组织,以western blotting法,测定海马tau蛋白、Aβ淀粉肽样蛋白的表达.结果:与C组比较,Iso组大鼠海马tau蛋白、Aβ淀粉肽样蛋白的表达含量升高(P＜0.05),M组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).与Iso组比较,M组大鼠海马tau蛋白、Aβ淀粉肽样蛋白的表达降低(P＜0.05).结论:米诺环素预先给药可降低异氟醚暴露所致老年大鼠海马tau蛋白、A3淀粉肽样蛋白的表达.

应用激光微分离系统分析老年大鼠肾小球、肾小管及小动脉转化生长因子β1的基因表达变化

为了对肾脏不同组成部分进行精细研究,早在80年代人们即开始研究各种微分离方法,90年代激光微分离技术逐渐成熟,特别是90年代后期自动激光微分离系统的问世[1,2],大大推动了对各种疾病发病机制的精细研究,肾脏病的研究也在不断应用此项技术[3,4].

老年大鼠供肝应用的实验研究

目的 研究老年大鼠供肝的应用,并探讨老年大鼠肝移植供体年龄限制.方法 采用肝动脉重建二袖套原位肝移植技术,建立大鼠原位肝移植模型,供受体均为雄性Wistar大鼠,受体鼠龄均为5月,根据供体鼠龄分组,A～E组供体鼠龄分别为5、17、20、23、26月,每组12例.检测术后第1、3、7天血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平,并观察组织病理学变化和术后3月存活率.结果 B、C和D组肝移植术后第1天和第3天ALT与A组比较差异均有显著性(P<0.05),第7天差异无显著性(P>0.05),肝功能恢复延迟,肝功能于术后第7天趋于稳定.老年大鼠移植肝植入前组织病理学表现存在轻度肝纤维化,老年大鼠肝细胞数目减少,脂褐素数量增加.E组术后ALT增高(P<0.05),肝功能损伤不可恢复,3月存活率为0.结论 供体年龄是影响老年供肝移植疗效的重要因素之一,鼠龄低于23月的老年大鼠移植肝可恢复功能.

哌嗪雌酚酮对老年大鼠腰椎骨代谢的影响

目的研究新合成化合物哌嗪雌酚酮对雌性老年大鼠腰椎骨代谢及子宫的影响. 方法 32只22月龄SD大鼠, 随机分为4组:对照组(生理盐水0.1 mL/kg·d-1), 哌嗪雌酚酮高、中、低剂量组(2、1和0.5 mg/kg·d-1),皮下注射30 d, 取第5腰椎行不脱钙骨制片骨形态计量学测量分析,同时取子宫称重.结果与对照组比较,哌嗪雌酚酮组骨量增加.其中中剂量(1 mg)组骨形成增加,骨吸收降低,骨量增加差异有显著性;子宫重量无明显变化.结论哌嗪雌酚酮可有效预防老年大鼠骨质减少,中剂量(1 mg)组效果明显,且无明显刺激子宫的副作用.

老年大鼠肾脏损伤中ASPP2蛋白调控与内质网应激的作用及相关性分析

目的 探讨P53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族成员ASPP2蛋白及内质网应激在老年大鼠肾脏损伤中的作用机制.方法 以6月龄SD大鼠为成年组,18月龄SD大鼠为老年组,苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠肾脏结构的改变;qRT-PCR检测内质网应激相关指标C/EPB同源蛋白(CHOP)、活化转录因子6(ATF6)、X盒结合蛋白-1(XBP-1)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的mRNA表达水平;Western blot法检测各组大鼠ASPP2蛋白的表达水平,并对ASPP2的表达水平与内质网应激相关指标CHOP、ATF6、XBP-1、GRP78的表达水平作相关性分析.结果 与成年组SD大鼠相比,老年组SD大鼠肾脏结构明显改变,CHOP、ATF6、XBP-1、GRP78的mRNA表达水平及ASPP2蛋白表达水平显著增高,且ASPP2水平与CHOP和XBP-1呈正相关,ASPP2水平与ATF6呈负相关.结论 在老年SD大鼠中,ASPP2调控内质网应激可能是引起肾脏损伤的重要机制之一.

LPS急性肺损伤老年大鼠肺巨噬细胞TLR4与IL-18 mRNA表达变化的对比研究

目的观察脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)老年大鼠肺巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)及IL-18 mRNA表达的变化,探讨TLR4与IL-18在ALI时老年鼠与青年鼠的作用差别.方法运用RT-PCR与ELISA检测TLR4和IL-18mRNA的表达及肺巨噬细胞培养液上清TNF-α浓度.结果老年鼠LPS急性肺损伤组TLR4与IL-18 mRNA表达显著高于青年鼠组(0.63±0.07 vs 0.25±0.03, 0.58±0.02 vs 0.26±0.03),TNF-α分泌显著多于青壮年鼠组(0.67±0.06 vs 0.45±0.02)ng/ml.结论 LPS急性肺损伤时老年鼠肺巨噬细胞TLR4功能及其介导的信号转导作用加强,IL-18分泌增加,表明两者在急性肺损伤中起重要作用,也可能是老年患者肺部感染时症状相对严重和难治的原因之一.

nNOS在缺血性老年大鼠海马及皮层神经元中的表达及超微结构变化

目的　研究神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase, nNOS）在缺血性老年大鼠海马及皮层神经元中的作用并观察其超微结构变化。方法　建立老年大鼠脑缺血动物模型，在不同的时间点进行nNOS免疫组化染色和透射电镜观察，检测海马及皮层神经元nNOS的表达并观察其受损情况。结果　缺血30 min后再灌流12 h组nNOS活性显著升高。而假手术组、缺血30 min即刻取材、再灌流1 h， 96 h组nNOS几乎无表达；6 h少量表达；24 h和48 h组中量表达；再灌流超过24 h组神经元损伤较重。结论　NO在脑缺血发生中对海马及大脑皮层神经元具有毒性作用。

ASPP2 DNA甲基化在老年大鼠肾脏基底膜增厚中的作用

目的:探讨p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2) DNA甲基化在老年大鼠肾基脏底膜增厚中的作用和机制.方法:以6月龄大鼠为成年组,18月龄大鼠为老年组,应用过碘酸希夫(PAS)染色,光镜下观察各组大鼠肾脏基底膜改变,qRT-PCR、Westem-blot分别检测各组大鼠ASPP2 mRNA及蛋白表达,nMS-PCR法检测ASPP2甲基化水平,qRT-PCR检测DNMT1 mRNA表达改变.结果:老年大鼠较成年大鼠肾脏基底膜明显增厚,ASPP2 mRNA及蛋白的表达在老年组大鼠中显著增高(P＜0.01);与成年组相比,老年组ASPP2 DNA甲基化水平显著下降(P＜ 0.01),且DNMT1 mRNA及蛋白表达也呈下降改变(P＜0.01).结论:ASPP2 DNA甲基化是促进老年大鼠肾脏基底膜增厚的重要机制,DNMT1参与了其调控.

Dex预处理对脾切除术后老年大鼠学习记忆能力的影响

目的 观察右美托咪定(Dex)预处理对脾切除老年大鼠术后学习记忆能力的影响及机制.方法 将健康雄性无特定病原体(SPF)级老年SD雄性大鼠60只按随机数字表法分为对照组、脾切除组和Dex处理组(Dex组)各20只.Dex组大鼠于脾切除手术前30 min经腹腔注射Dex 15μg/kg,对照组和脾切除组大鼠腹腔注射等量生理盐水.3组大鼠于术后7 d进行Morris水迷宫试验和旷场试验,行为学测试完毕后处死大鼠,检测其海马组织炎性因子IL?1、IL?6、CRP的浓度,海马淀粉样 β 蛋白、Tau?Thr181蛋白、磷酸化Tau?Ser356蛋白的表达,以及海马CA1区细胞凋亡数目,比较3组的差异.结果 与对照组比较,脾切除组大鼠平均游泳距离均延长,探索原平台时间和探索次数缩短/减少(P均<0.05),旷场直立次数和跨格次数减少、中央区停留时间均缩短(P均<0.05);海马组织炎性因子IL?1、IL?6、CRP的浓度均增加(P均<0.05),海马组织淀粉样β蛋白,Tau?Thr181蛋白,磷酸化Tau?Ser356蛋白均增加(P均<0.05);凋亡阳性细胞数目增加(P<0.05).与脾切除组比较,Dex组大鼠平均游泳距离均缩短,探索原平台时间和探索次数增加(P均<0.05);旷场直立次数和跨格次数、中央区停留时间均增加(P均<0.05);海马组织炎性因子IL?1、IL?6、CRP的浓度均减少(P均<0.05),海马组织淀粉样β蛋白,Tau?Thr181蛋白,磷酸化Tau?Ser356蛋白表达均降低(P均<0.05);Tunnel凋亡阳性细胞数目减少(P<0.05).结论 Dex可改善脾切除老年大鼠术后学习记忆能力,其机制可能与其抑制海马炎性反应及淀粉样β蛋白、磷酸化Tau蛋白的表达,抑制海马神经元细胞的凋亡有关.

丙泊酚对老年大鼠认知功能及海马区nNOS、血清β-淀粉样蛋白的影响

目的：探讨丙泊酚对老年大鼠学习记忆及认知能力的影响及其可能的机制。方法选择30只12个月龄SD大鼠，按分层随机区组法随机分为三组，每组10只，即训练组、丙泊酚低剂量组和高剂量组。麻醉结束后24 h，采用不固定训练次数随机法连续5 d进行水迷宫的行为学测试：记录各组的逃避潜伏期、穿越平台次数。测试结束抽取大鼠血后立即断头取脑，采用免疫组化染色法检测大鼠海马区脑组织nNOS的表达情况及大鼠血清中β-淀粉样蛋白含量。结果12个月龄SD大鼠丙泊酚麻醉后各组同时段水迷宫行为学测试的结果显示：高剂量组与训练组比较，逃避潜伏期显著延长、穿越平台次数显著减少，差异有统计学意义(P<0.01，t=12.142、5.63)；低剂量组与训练组比较，差异无统计学意义(P>0.05，t=0.386、0.773)。免疫组化染色的结果显示：高剂量组海马区nNOS阳性细胞数和积分光密度值(IOD)明显低于低剂量组和训练组，差异有统计学意义(P<0.01，t=12.072、11.646)；低剂量组与训练组比较，两项指标差异无统计学意义(P>0.05，t=0.642)。高剂量组与低剂量组、训练组比较，血清β-淀粉样蛋白含量增多，差异有统计学意义(P<0.01，t=11.692、10.354)；低剂量组与训练组比较，两组血清β-淀粉样蛋白含量比较，差异无统计学意义(P>0.05，t=0.082)。结论多次高剂量丙泊酚注射麻醉诱导及维持对老年大鼠的学习记忆与认知功能损害与海马区nNOS表达的抑制程度和血清β-淀粉样蛋白含量有关。

大黄对老龄大鼠脑缺血再灌注一氧化氮和肿瘤坏死因子的影响

目的从一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(NOS)及肿瘤坏死因子(TNF)的变化研究大黄对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤防护作用的机制,为揭示防治脑梗塞提供依据.方法老龄(20月龄以上)大鼠分为正常对照组、模型组、大黄组、尼莫地平组及血栓心脉宁组,观察大鼠全脑缺血30min再灌注60min后血和脑组织中NO和NOS及脑组织TNF的水平.结果老龄模型组血清中NO水平低于老龄对照组(P＜0.05),大黄组和血栓心脉宁组高于老龄模型组(P＜0.01);脑组织中NO水平老龄模型组较老龄对照组有降低趋势,大黄组脑组织中NOS水平较老龄模型组明显增高(P＜0.01);老龄模型组脑中TNF水平高于老龄对照组(P＜O.01),尼莫地平组、大黄组、血栓心脉宁组低于老龄模型组(P＜0.05或0.01).结论 NO含量降低和TNF增高与老龄大鼠脑缺血再灌注脑组织损伤有关;各组用药均能通过降低脑组织TNF含量以改善脑组织损害;大黄提高血清NO含量和脑组织NOS活性的作用可能是其拮抗脑组织损伤的机制之一.

西酞普兰联合石杉碱甲对老年抑郁模型大鼠的改善作用

目的:研究西酞普兰联合石杉碱甲对老年抑郁大鼠的改善作用.方法:将老年大鼠随机分为空白对照组、模型组、石杉碱甲组(0.3 mg/kg)、西酞普兰组(5 mg/kg)及联用组(石杉碱甲0.3 mg/kg+西酞普兰5 mg/kg),每组10只.除空白对照组外,其余各组大鼠采用慢性不可预知温和应激方式建立抑郁模型,成模后每天ig给予相应药物1次,连续给药2周.通过旷场实验、糖水消耗实验、悬尾实验、强迫游泳实验、Morris水迷宫实验观察各组大鼠的抑郁和学习记忆行为变化.结果:与空白对照组比较,模型组大鼠水平穿格次数和直立次数、糖水偏好率、站台穿越次数、目标象限路程百分比、目标象限时间百分比均明显减少或降低(P<0.05或P<0.01),悬尾不动时间、游泳不动时间和逃避潜伏期均明显延长(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,西酞普兰组和联用组大鼠抑郁相关指标均明显改善(P<0.05或P<0.01),其中联用组效果更好;联用组大鼠学习记忆相关指标均明显改善(P<0.05或P<0.01),石杉碱甲组和西酞普兰组大鼠仅站台穿越次数明显增加(P<0.05或P<0.01),其他学习记忆相关指标无明显变化(P>0.05).结论:西酞普兰联合石杉碱甲能明显改善老年抑郁模型大鼠的抑郁行为和学习记忆能力,效果优于单用西酞普兰.