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酪氨酸激酶受体和神经细胞黏附分子对老年大鼠黑质致密部多巴胺能神经细胞的影响
胶质细胞系源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)能有效地保护中脑黑质多巴胺能神经细胞[1],是迄今所发现的对多巴胺能神经细胞作用强的神经营养因子.
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依达拉奉和甘露醇联合应用对老年大鼠脑缺血再灌注损伤的保护
依达拉奉(3-methyl-1-phenyl-pyrazolin-5-one)作为一种自由基清除剂与脱水降颅压药物甘露醇联合应用治疗缺血性脑卒中已经有了较深入的基础和临床研究[1-5],但两种药物联合应用是否优于单药目前国内未见报道.我们于2005年3月至2005年4月通过分析依达拉奉、甘露醇及两药联合应用对局灶性脑缺血再灌注损伤后老年大鼠脑组织神经细胞凋亡数及一氧化氮(NO)含量的影响,探讨其脑保护作用.
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高脂饮食对老年大鼠棕色脂肪组织线粒体内膜解偶联蛋白活性与含量的影响
老年肥胖者易患高血压、冠心病、糖尿病等疾病,而肥胖与饮食习惯有明显的关系.正常大鼠过度饮食时,可以通过增加能量消耗避免发展成为肥胖,这种现象被称为食物诱导的产热,也就是食物的热效应;而给予肥胖大鼠过度饮食则可导致大鼠体重过度增加.棕色脂肪与能量平衡有关,肥胖大鼠棕色脂肪明显减少,食物诱导的产热减少可能与棕色脂肪有关.我们于1999年9～10月应用高脂饲料喂养老年大鼠,旨在了解高脂饮食对解偶联蛋白(uncoupling protein,UCP)的影响,探索肥胖发生的机制,为临床治疗肥胖探寻新的途径.一、材料和方法1.试剂:[8-3H]鸟嘌呤核苷三磷酸(GTP)和[U-14C]蔗糖,为英国Amersham公司产品;羧基苍术苷(carbxyatractyloside)钾盐,为美国Sigma公司产品;三乙醇胺盐酸盐,为德国Boehringer公司产品;GTP由上海丽珠生物技术有限公司生产.2.动物及分组:18月龄雄性SD大鼠24只,体重370～390 g,随机分为正常对照组、高脂饮食组,每组各12只.正常对照组给予标准饲料(第二军医大学动物实验中心提供):碳水化合物热卡占61%,脂肪占12%,蛋白质占26%,喂养30 d;高脂饮食组予配制的高脂饲料:碳水化合物热卡占20%,脂肪占61%,蛋白质占19%,喂养30 d.饲养期间大鼠置于室温(22±1)℃中,自由饮水.3.UCP的测定:取肩胛间区棕色脂肪组织,以差速离心法分离出线粒体.用3H标记的GTP与UCP结合,用液体闪烁仪测定放射活性.后用Scatchard作图法对测定的数据进行分析,得出UCP与GTP结合的解离常数(Kd)及大结合容量(Bmax)值,其中Kd的大小反映UCP活性的高低;Bmax的大小反映UCP含量的多少.
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老年充血性心力衰竭大鼠心脏胰岛素样生长因子1自分泌系统的研究
近年来,人们注意到胰岛素样生长因子1(IGF-1)作为一种重要的细胞因子对心脏的作用,发现IGF-1及其受体系统(IGF-1R)可促使蛋白质合成,调节心肌生长,抑制受损心肌细胞的凋亡,加强心肌收缩力.IGF-1对高血压及心肌梗死患者心脏的作用研究较多,但对充血性心力衰竭(心衰)尤其对老年充血性心衰,心脏局部IGF-1自分泌系统的变化及其意义尚不清楚.我们于2000年9月至2001年7月建立老年大鼠充血性心衰模型,观察心肌细胞的IGF-1及IGF-1R的基因表达,并探索其临床意义.
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老年大鼠松质骨骨重建的组织形态计量学研究
目的研究老年大鼠及在促骨合成药前列腺素E2(PGE2)作用下松质骨骨重建和骨建造的形态计量学改变,探讨动物骨重建形态学新参数测量方法及其意义.方法 50只20月龄雄性Wistar大鼠随机分成5组,年龄对照组(基础组、10d和30 d年龄对照组),PGE2给药组(分别10 d和30 d给予3mg/kg/d处理组).用体内双荧光标记,不脱钙组织切片,粘合线(cement line)染色,骨组织形态计量学方法,测定骨重建和骨建造参数.结果 20月龄雄性大鼠胫骨近端松质骨的骨形成表面大多数为骨重建单位(占63.3%),少部分为骨建造单位(占26.7%);PGE2用药后骨重建单位增加1.5倍,骨建造单位增加4倍,比值倒置,成骨细胞10d时明显增多.说明PGE2通过刺激成骨细胞骨合成而介导骨建造性骨量增加和骨重建性骨量增加,并以前者为主.结论老年雄性大鼠松质骨以骨重建活动为主,仍有骨建造活动.PGE2主要通过刺激成骨细胞骨建造而增加骨量.
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老年大鼠含淫羊藿血清对成骨细胞的增殖与分化的影响
目的观察老年雄性大鼠含淫羊藿血清对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖和分化的影响.方法雄性,19月龄SD大鼠24只,随机分为3组,分别为生理盐水组、淫羊藿低剂量组(1g/ml)\,淫羊藿高剂量组(2 g/ml),按0.5 ml/100 g的量,每日两次,连续灌胃1个月,处死前1h,再灌胃一次,取血清(灭活,过滤),终稀释成1∶20、1∶40、1∶80加入新生大鼠颅骨成骨细胞体系,用MTT法检测细胞增殖,另外,分别在第2天、第3天、第4天动态观察细胞生长过程,做生长曲线和检测分化指标ALP.结果老年大鼠含药血清在1∶80稀释比,MTT测得的OD值给药组高于对照组(P＜0.05)且以高剂量组高于低剂量组(P＜0.05),生长曲线表现为,在第2天各组无明显差别,从第3天开始,含药血清增殖速度加快,仍以高剂量组快.ALP检测结果,含药血清OD值高于对照组(P＜0.05),但不同剂量之间没有差异(P＞0.05).结论老年雄性SD大鼠连续服用淫羊藿水提液1个月,其血清对新生大鼠颅骨成骨细胞有促进增殖和分化的作用.
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银杏内酯B后处理改善缺血/再灌注损伤的老年大鼠心功能
目的:探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)后处理对缺血/再灌注(isehemia/reperfusion,I/R)损伤的老年大鼠心功能的影响.方法:将老年SD大鼠随机分为正常对照组、单纯缺血/再灌注组和GB后处理组.制备离体心脏I/R损伤模型,记录心脏血流动力学各指标,测定心肌梗死面积、冠脉流出液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量.分离心脏得单个心肌细胞,行细胞I/R损伤模型,分别用不同浓度GB在再灌注时进行后处理,并检测单个心肌细胞的收缩幅度,收集细胞,检查其Bcl-2和Bax蛋白表达.在GB佳浓度组中分别加和不加PI3 K/Akt信号通路抑制剂LY294002,检测细胞的收缩幅度和p-Akt蛋白表达含量.结果:GB后处理能明显降低左心室舒张末压(LVEDP),增强+dp/dtmax,并抑制-dp/dtmax的抬升,降低LDH含量.GB 1μmol·L-能明显增强心肌细胞的收缩幅度(P＜0.01),并能降低Bax与Bcl-2的比值,降低凋亡.而GB增强细胞收缩幅度的作用能够被LY294002抑制,并且GB能增加p-Akt蛋白的表达.结论:GB后处理可通过PI3K/Akt信号通路改善缺血/再灌注损伤的老年大鼠的心功能.
关键词： 银杏内酯B 缺血/再灌注 老年大鼠 心肌细胞 PI3K/Akt信号通路 -
低剂量邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对老年大鼠前列腺的促增生作用
目的 评价环境暴露剂量的邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对老年大鼠前列腺的促增生作用及机制.方法 32只1.5岁龄老年雄性SD大鼠随机分成4组,每组8只,分别ig给予DEHP(30,90和270 μg·kg-1)或溶媒,每天1次,连续4周.于末次给药24 h后将大鼠麻醉,而后①腹主动脉采血,采用ELISA检测血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)和泌乳素(PRL)水平;②处死后取前列腺,分叶,称重、测量体积,计算脏器系数;③制作前列腺组织病理切片,HE染色后用显微镜观察组织形态改变,并利用显微图像分析软件分析前列腺上皮高度变化.结果 与溶媒对照组比较,DEHP 270 μg·kg-1组前列腺系数、背侧前列腺质量和背侧前列腺系数均显著增加(P＜0.05);DEPH各剂量组腹侧前列腺上皮高度明显升高(P＜0.01);DEHP 270 μg·kg-1组背侧前列腺上皮高度明显升高(P＜0.01);DEHP各剂量组E2,PRL和T水平均无显著改变,但DEHP30和270 μg·kg-1组E2/T比值显著增加(P＜0.05).结论 低剂量DEHP对老年大鼠前列腺具有促增生作用,该作用可能与其影响内源性激素的相对水平有关.
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生长抑素在老年鼠胃窦黏膜和血浆中的表达
目的 研究老年鼠胃窦黏膜生长抑素含量和分布状况,探讨老化过程中生长抑素作为一种胃酸抑制因子存在的实际意义.方法 选择不同年龄Wistar大鼠,雌雄不拘.青年鼠(3月龄)20只,体质量200~250 g;老年鼠(24～30月龄)15只,体质量400~450 g.动物按规定月龄取血,提取血浆样本,留取胃黏膜组织,采用放射免疫分析法,进行生长抑素测定.取胃窦新鲜组织,经冰冻切片进行生长抑素免疫组织化学染色.结果 不同年龄组Wistar大鼠胃黏膜组织生长抑素具有不同的生理浓度,在老年鼠生长抑素含量呈高浓度分布,与青年鼠比较差异有统计学意义(P<0.01).生长抑素免疫组织化学染色显示,胃窦D细胞形状不规则,胞质内布满生长抑素免疫复合物颗粒,老年鼠D细胞显色较深,其D细胞数量和免疫复合物颗粒多于青年鼠组,2者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 老年大鼠D细胞数量增加,生长抑素分泌量增多,与其老年抑酸调节作用增强存在重要关系.
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不同月龄实验大鼠造血细胞的定量观察
目的 观察老年大鼠与青年大鼠造血功能的差别.方法 采用含有15%刺激因子(GM-CSF)的大鼠肺条件培养基进行单层软琼脂法培养大鼠骨髓造血祖细胞,进行定量观察.结果 肺条件培养基内刺激因子(GM-CSF)度为15%时活性好.2.5月龄大鼠骨髓,每4×105个有核细胞中形成细胞集落(GM-CFU)为92.5±23.8,而24月龄老年大鼠则为23.1±9.6.以2.5月龄青年大鼠GM-CFU为100%,12月龄大鼠为37%,18月龄大鼠为35.7%,24龄大鼠则为27.2%.结论 骨髓造血功能随月龄的增加逐渐减弱,老龄大鼠骨髓造血功能明显下降.
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人参皂苷Rb1激活Nrf2/ARE通路对术后疲劳综合征老年大鼠骨骼肌氧化应激损伤的影响
目的 研究人参皂苷Rb1激活Nrf2/ARE通路来减轻术后疲劳综合征老年大鼠骨骼肌氧化应激损伤,探讨人参皂苷Rb1的抗疲劳机制.方法 以70％中段小肠切除用以制备术后大鼠疲劳综合征模型.老年SD大鼠随机分为对照组、模型组和人参皂苷Rb1干预组,每组再分别按时间点分为术后6h,第1、3、7天组.在术后对应时间点进行旷场实验检测行为学变化后取骨骼肌,分光光度法测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,RT-PCR检测Nrf2及下游Ⅱ相解毒酶基因Nqo1表达.Western blot检测Nrf2核转位情况.结果 旷场实验显示,相比于对照组,模型组术后穿越格子数降低(第1、3天,P＜0.05),休息时间增加(第1、3、7天,P＜0.05);相比于模型组,干预组穿越格子数术后增加(第1、3天,P＜0.05).相比于对照组,模型组SOD活性在术后增加(第3、7天,P＜0.05),MDA含量增加(第1、3、7天,P＜0.05);相比于模型组,干预组SOD活性术后增加(第3、7天,P ＜0.05),MDA含量术后降低(第3、7天,P＜0.05).RT-PCR结果表明,相比于对照组,模型组Nrf2术后表达增加(第1、3天,P＜0.05),Nqo1术后表达有上升倾向(第1、3天,P＞0.05);相比于模型组,干预组Nrf2术后表达增加(6h、第1天、第3天,P＜0.05),Nqo1表达增加(6h、第1天,P＜0.05).Western blot结果表明,相比于对照组,模型组核内Nrf2术后表达增加(6h、第1、3、7天,P＜0.05);相比于模型组,干预组核内Nrf2术后表达增加(6h、第1天、第3天,P＜0.05).结论 通过激活Nrf2/ARE通路,人参皂苷Rb1能减轻老年大鼠术后疲劳综合征骨骼肌氧化应激所致损伤,这可能是其抗术后疲劳的一种机制.
关键词： 人参皂苷Rb1 术后疲劳综合征 Nrf2/ARE信号通路 老年大鼠 氧化应激 -
不同全麻药对老年大鼠学习记忆及脑内乙酰胆碱含量的影响
目的：研究不同全麻药对老年大鼠学习记忆以及脑内乙酰胆碱含量的影响。方法60只老年SD大鼠，随机分6组，未麻醉第1天组（ N1组）和第7天组（ N2组），七氟醚第1天组（ S1组）和第7天组（S2组），丙泊酚第1天组（P1组）和第7天组（P2组）。第1天和第7天开始连续5 d进行水迷宫测试。并检测脑内乙酰胆碱含量。结果 S1组和P1组大鼠的定位航行试验和空间探索实验的成绩均明显低于N1组（P＜0.05），P1组的学习成绩较S1组差（P＜0.05）。 S1组和P1组Ach含量较对照N1组降低，差异有统计学意义（P＜0.001）。结论麻醉药可以使老年大鼠的学习记忆能力可逆性下降，影响脑内学习记忆的神经递质乙酰胆碱，使之含量下降，从而影响学习记忆能力。
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pH值为6.9时比索洛尔对老年大鼠胸主动脉张力的作用机制研究
目的 观察比索洛尔在pH 值为7.4 和6.9 的情况下,对去甲肾上腺素预收缩的离体老年大鼠胸主动脉环的作用及机制.方法采用离体血管张力实验方法,观察比索洛尔对老年大鼠离体胸主动脉环张力的影响以及在pH 改变后的变化.结果(1)pH 值为6.9 和7.4 时,累积浓度的比索洛尔对去甲肾上腺素预收缩的血管环有浓度依赖性的舒张作用.(2)比索洛尔在pH 值为6.9 时对去甲肾上腺素预收缩血管的大舒张百分比大于其在pH 值为7.4 时的舒血管作用.(3)KATP 通道阻断剂格列苯脲(1×10-5mol/L)在pH 值为6.9 的情况下抑制了比索洛尔的舒张作用.结论 (1)比索洛尔在pH 值为6.9 时对去甲肾上腺素预收缩的老年大鼠离体胸主动脉环有浓度依赖性的舒张作用,且其舒张作用强于在pH 值为7.4 时.(2)比索洛尔对老年大鼠胸主动脉的舒张作用在pH 值为6.9 时可能与KATP 通道有关.
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圆白菜可防衰老
圆白菜又叫包包菜,不但对癌症、心脑血管等慢性疾病有预防功能,还可防衰老.日本的一项实验表明:每周吃4次以上圆白菜可以延长老年大鼠的寿命,并改善很多衰老症状.这些功能得益于圆白菜的香味物质,这种香味来自一种叫做"异硫氰酸脂"的化学物质,属于含硫化合物.大蒜、芥末等物有刺鼻气味都出自和它类似的一些化合物,它的防癌、防治心脑疾病的功能也都与这种香味成分有关.
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人参皂苷Rb1对术后疲劳综合征老年大鼠海马神经营养因子的影响
目的 研究术后疲劳综合征(POFS)老年大鼠海马神经营养因子(NTF)水平动态变化及人参皂苷Rb1的抗疲劳机制.方法 将96只老年雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和人参皂苷Rb1干预组,每组再按时间点分为术后6h及术后1、3、7d组.术后对应时间点进行旷场试验,并通过Real-time PCR检测大鼠海马神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)的mRNA表达;放射免疫法检测NGF和BDNF蛋白表达;电镜观察海马CA1区超微结构变化.结果 模型组与假手术组比较,旷场试验中大鼠穿越格子数减少(P＜0.01),休息时间延长(P＜0.01);NGF和BDNF mRNA表达降低(P＜0.05、0.01),其相应的蛋白表达也降低(P＜0.05).人参皂苷Rb1组与模型组比较,旷场试验中大鼠穿越格子数增多(P＜0.05),NGF和BDNF mRNA表达升高(P＜0.05、0.01),其相应的蛋白表达也升高(P＜0.01).电镜结果显示,模型组与假手术组比较,大鼠海马神经元超微结构受损,人参皂苷Rb1组得到相应改善.结论 POFS老年大鼠海马NTF表达降低,神经元存在一定程度损伤,人参皂苷Rb1对POFS老年大鼠有一定改善作用.
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有氧运动对老年大鼠胃肠动力及血清中胃促生长素、瘦素水平的影响
目的:探讨有氧运动对老年大鼠胃肠动力以及血清中胃促生长素(ghrelin)和瘦素(leptin)的影响.方法:雄性SD大鼠45只,分为青年对照组、老年对照组以及老年有氧运动组(n=15).老年有氧运动组采用递增负荷的方式进行8周跑台运动.实验过程中连续观察并记录各组大鼠的摄食量、体重以及行为学特征;实验结束测定各组大鼠胃排空速率以及小肠推进比,血清Ghre-lin和Leptin.结果:与青年对照组相比,老年对照组大鼠摄食量、胃排空速率、小肠推进比、血清Ghrelin水平明显降低,体重、体脂和Leptin水平显著升高;与老年对照组相比,老年有氧运动组大鼠摄食量、胃排空速率、小肠推进比、血清Ghrelin水平明显升高,体重、体脂和Leptin水平明显降低.结论:有氧运动能促进老年大鼠食欲、提高胃肠动力、改善身体成分,其保护机制可能与血清中Ghrelin含量升高和Leptin含量降低有关.
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毒素清对大肠杆菌肺炎老龄大鼠小肠组织自由基
目的：研究老年肺炎时小肠损伤的病理生理特点与中药毒素清的作用机制。方法：复制大肠杆菌肺炎模型，分为老龄对照组、模型组、毒素清高低剂量组和氟哌酸组5组。主要观察肺脏和小肠组织病理改变及其含水量，小肠组织6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)和血栓素B2(TXB2)含量，一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果：肺炎时肺、小肠组织损伤明显，含水量增高。老龄模型组SOD活性、6-keto-PGF1α含量的降低和NO、MDA、TXB2含量的增高均较老龄对照组显著。与老龄模型组比较，毒素清用药各组MDA和NO含量降低，SOD活性和6-keto-PGF1α含量提高。结论：前列腺素及自由基介导的损伤参与肺炎时小肠组织损伤的发生、发展。毒素清对老龄大鼠肺炎的小肠损伤改善作用明显，其机制与其拮抗自由基损伤和调节前列腺素代谢平衡有关。
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037 甲状腺激素对年轻及老年大鼠肾脏磷酸盐转运的调节作用
[英]/Alcalde Al …//Endocrinology.-1999, 140.-1544～1551 本实验研究了生理浓度的甲状腺激素在体内对肾脏磷酸盐转运的影响以及其对老年大鼠肾脏磷酸盐重吸收的潜在损害作用。 材料和方法 应用雄性 Wistar 3月幼年大鼠及24月老年大鼠，施行甲状腺及甲状旁腺切除术(TPTX)1个月后，待血浆及肾脏中T3 浓度为0时，将鼠各分为4组：①非手术对照组。②术后甲状腺功能减退(甲减)组，口服安慰剂20 d。③术后甲状腺功能正常组，每天给 T3 0.5μg／100μg体重，20 d。④术后甲状腺功能亢进(甲亢)组，每天给5倍于生理剂量的T3 2.5μg／100体重，20 d。老年大鼠无第③组，而采用⑤组给T3 5μg/100μg 体重每天。实验当天测定血浆T3水平，手术取出肾皮质表层及近髓质层，制备刷缘膜，用同位素标记方法测定磷酸盐转运，以免疫组化法和Western印迹法测定2型Na／Pi(NaPi-2)转运蛋白，提取细胞核用North-em印迹法及核转录活性测定法(Nuclear run-on)测定NaPi-2 mRNA。利用单因素方差分析等进行统计分析。 结果 T3 能促进肾脏重吸收无机磷(Pi)。甲亢大鼠磷酸盐转运较甲状腺功能正常者高40％，较甲减大鼠高175％。甲减大鼠Na／Pi转运降低，并伴有NaPi-2转运蛋白及mRNA的缺乏；而甲亢大鼠其NaPi转运、NaPi-2转运蛋白及mRNA增加。甲减的年轻大鼠长期给生理剂量或超生理剂量的T3 则可使血浆磷酸盐浓度、Na／Pi转运、NaPi-2转运蛋白及mRNA表达增加。研究显示，T3是通过一种转录机制对NaPi-2 mRNA进行调节，使NaPi-2转运蛋白增加。衰老过程影响甲状腺激素对肾脏磷酸盐转运刺激作用的各个阶段。老年大鼠血浆 T3 水平虽然与年轻大鼠无明显差别，但其血浆磷酸盐浓度、肾脏Na／Pi转运活力、NaPi-2转运蛋白及mRNA表达明显减低，这至少部分是由于其对T3 的反应性降低及其他因素共同引起的NaPi-2基因(NPT-2)转录速度减慢。 结论 T3 可能为调节肾脏磷酸盐重吸收的主要调节因子，此调节作用随年龄增加而减弱。研究显示，T3及老龄是通过调节NPT-2基因的转录过程而对肾脏磷酸盐重吸收进行调节的。(童 玉摘 高 妍校）
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银杏叶提取物对老年大鼠术后认知障碍的防治作用
目的:观察银杏叶提取物对老年大鼠术后认知功能障碍的防治作用.方法:健康老年雄性Wistar大鼠随机分为A、B、C三组,每组15只,A组术前1周开始给予银杏叶注射液0.5 mL腹腔注射,1次/d;B组给于生理盐水腹腔注射;C组空白对照.Y型迷宫实验和旷场分析试验检测比较认知功能变化,通过MRI显像比较脑组织供氧情况.结果:A组与B组相比,术后认知评分明显改善(P＜ 0.05),旷场实验分析各项指标较B组均有明显改善(P＜ 0.05).结论:银杏提取物是一种有应用前景的预防术后认知障碍的药物,其机制可能与改善脑组织血氧水平有关.
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大鼠衰老过程中神经细胞变化和空间记忆改变的关系
本文研究了不同年龄的雌雄大鼠的神经元密度、神经可塑性和神经血管重塑性与空间记忆的关系,包括年轻大鼠(4—6个月)、中年大鼠(9—11个月)和老年大鼠(18—20个月).研究发现,在中年和老年大鼠,特别是雄性大鼠中,海马区的神经元密度减低.
