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降钙素基因相关肽受体及其活性修饰蛋白mRNAs在大鼠中脑导水管周围灰质的表达
目的观察降钙素基因相关肽(CGRP)、降钙素受体样受体(CRLR)、孤儿受体RDC-1(RDC-1)和受体活性修饰蛋白(RAMPs)等,在正常大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)的表达.方法用实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,以大鼠β-actin为内参,分别记录CGRP、CRLR、RAMP1、RAMP2、RAMP3和RDC-1 mRNAs PCR产物的CT值,计算每一样品对应其内参的相对含量. 结果大鼠PAG区域,脑组织CGRP、CRLR、RAMP1和RAMP2mRNAs均出现特异性DNA扩增产物.其中CGRP和RAMP1 mRNAs表达水平较高,CRLR mRNA次之,RAMP2 mRNA较弱;而RAMP3和RDC-1未出现特异性DNA扩增产物. 结论大鼠PAG区域脑组织存在CGRP,CRLR,RAMP1和RAMP2mRNAs的特异性表达;它们共同参与生理过程的调节.
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降钙素基因相关肽和神经生长因子对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达的影响
目的探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达的影响.方法原位杂交和免疫组织化学结合显微图像分析方法.结果假手术组大鼠纹皮质c-jun mRNA表达弱;缺血组较假手术组c-jun mRNA表达显著强(P＜0.01);CGRP组和NGF组c-jun mRNA表达弱于缺血组(P＜0.05);CGRP和NGF合用组c-jun mRNA表达明显弱于缺血组(P＜0.01),分别弱于CGRP组和NGF组(P＜0.05).假手术组大鼠纹皮质未见c-Jun蛋白表达;缺血组较假手术组c-Jun蛋白表达明显强(P＜0.01),缺血后再灌注3 h强,1 d、3 d时弱;CGRP组和NGF组c-Jun蛋白表达较缺血组弱(P＜0.05);CGRP和NGF合用组较缺血组c-Jun蛋白表达明显弱(P＜0.01),分别弱于CGRP组和NGF组(P＜0.05);CGRP和NGF合用组缺血后再灌注3 h时强,1 d、3 d时弱. 结论CGRP和NGF分别抑制全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-junmRNA及蛋白表达,联合应用显著抑制全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达,两者对保护缺血神经元可能有协同作用.
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大鼠咽黏膜内ATP受体P2X_3阳性感觉纤维的分布
目的 研究大鼠咽黏膜内三磷酸腺苷(ATP)受体P2X_3阳性感觉纤维的分布,为探究ATP在咽黏膜感觉信号传导中的作用提供形态学依据. 方法 成年Wistar大鼠12只,应用免疫荧光组织化学双标技术结合激光扫描共焦显微镜. 结果 1.在咽黏膜各部位均可观察到P2X_3阳性感觉纤维,纤维分为两类:一类为串珠样游离神经纤维;另一类纤维在黏膜内发出分支并形成复杂的树枝状末梢,纤维分支在黏膜内形成神经丛.2.可见许多降钙素基因相关肽(CGRP)阳性纤维缠绕在P2X_3阳性树枝状末梢周围,并有少量的串珠样P2X_3阳性纤维与CGRP共存.3.在岩神经节内可观察到许多P2X_3或CGRP免疫阳性神经元,其中有少量神经元同时呈P2X_3/CGRP免疫阳性. 结论 大鼠咽黏膜内不同类型的感觉纤维均表达ATP受体P2X_3阳性,提示ATP可能与咽黏膜伤害性刺激和其他生理性刺激向中枢的传递有关.
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降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑cAMP反应元件结合蛋白mRNA表达的影响
目的 探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质cAMP反应元件结合蛋白(CREB)mRNA表达的影响.方法 用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用原位杂交和图像分析技术检测大鼠缺血侧海马CA1区和顶叶皮质CREB mRNA表达.结果 假手术组右侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA有明显表达,缺血再灌注组右侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA阳性产物吸光度值减少,CGRP组缺血侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA表达的吸光度值比缺血再灌注组增高(P＜0.05).结论 CGRP上调局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质CREB mRNA的表达,CGRP对缺血神经元的保护作用可能通过激活CREB的转录与翻译,从而启动一系列信号通路来实现.
关键词： 脑缺血 降钙素基因相关肽 cAMP反应元件结合蛋白 原位杂交 大鼠 -
降钙素基因相关肽对血管平滑肌表型转化和增殖的影响
目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化和增殖的影响以及它们之间的关系.方法 取大鼠主动脉先体外培养8d后再贴块培养(VSMCs);对照组直接用贴块法培养细胞.实验分为CGRP作用组和无CGRP作用组.用5-BrdU标记平滑肌细胞增殖变化;RT-PCR检测HRG-1和SM22α表达变化.结果 血管经体外培养8d后再贴壁培养的平滑肌细胞可见大量棕黄色标记增殖的细胞核,HRG-1和SM22α mRNA表达明显减少;而CGRP作用组标记的血管平滑肌增殖细胞明显减少,HRG-1和SM22α mRNA表达明显上调.结论 CGRP对VSMCs增殖有抑制作用并同时可使VSMCs从合成型向收缩型转化.
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成人和大鼠阴茎包皮及包皮系带内降钙素基因相关肽免疫阳性神经末梢的分布及来源
目的探讨人和大鼠阴茎包皮和包皮系带内降钙素基因相关肽(CGRP)免疫阳性神经末梢的分布和起源.方法采用免疫组织化学法观察成人阴茎包皮和包皮系带内CGRP免疫阳性神经末梢的分布,通过荧光金(FG)逆行标记和CGRP免疫荧光标记相结合法研究大鼠包皮系带内CGRP免疫阳性神经末梢的起源.结果成人阴茎包皮及包皮系带内均有CGRP免疫阳性神经末梢存在,主要位于表皮基底层和棘细胞层内,呈树枝状或念珠状分布,大多成束走行.阴茎系带处CGRP免疫阳性神经末梢的分布密度明显大于阴茎包皮处.大鼠的阴茎包皮和包皮系带内也有类似的CGRP免疫阳性神经末梢分布,结合FG逆行标记法研究发现,神经末梢起源于第6腰髓对应的背根神经节(L6-DRG)和第1骶髓对应的背根神经节(S1-DRG)的神经元.CGRP免疫荧光标记细胞大多为中小型,呈深绿色,沿神经束成行排列或散在分布.FG/CGRP双标阳性细胞均为中小型,其数量占FG逆标阳性细胞总数的二分之一.结论人和大鼠阴茎包皮及包皮系带内存在着大量的CGRP免疫阳性神经末梢;大鼠实验表明,这些末梢来源于L6-DRG和S1-DRG,提示CGRP可能参与阴茎包皮及包皮系带感觉信息的传递.
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生长抑素和降钙素基因相关肽在小鼠舌下腺的分布
目的观察小鼠舌下腺内神经肽的分布.方法免疫组织化学ABC方法.结果小鼠舌下腺纹状管上皮细胞呈生长抑素和降钙素基因相关肽免疫反应阳性,免疫反应物分布于胞质,胞核为阴性.结论表明小鼠舌下腺导管上皮细胞内含有神经肽,对腺体分泌活动可能起重要作用.
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VR1受体在大鼠食管传入纤维的表达
目的研究辣椒素(capsaicin)受体VR1在大鼠食管传入神经纤维的表达,纤维的形态特征及分布.方法应用激光共聚焦显微镜结合免疫组织化学双标技术.结果VRl阳性(VR1-IR)纤维和终末主要分布于食管的黏膜层、黏膜下层、平滑肌以及血管周围,其形态多为一些含有小棘及串珠样结构的细纤维.有(92.3±3.7)%VR1-IR纤维与代表脊神经节源性传入纤维的神经肽CGRP共存.VR1在脊神经节和结状神经节中的表达类似,为中小型神经元.脊神经节中有(41.5±4.5)%VRl-IR神经元含有CGRP和(67.9±3.2)%CGRP-IR神经元表达VR1.CGRP-IR细胞在结状神经节较少,仅有(4.7±1.4)%VR1-IR神经元含有CGRP. 结论大鼠食管壁内的脊神经源性感觉纤维表达VR1受体.
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大鼠脑缺血再灌注后降钙素基因相关肽对受损胃黏膜的保护作用
The purpose of the present study is to investigate the protective effect of calcitonin gene-related pepfide (CGRP) on gastric mucosa injury after focal cerebral ischemia reperfusion and gastric ischemia-reperfusion in rats. Wistar male rats (280-320g) were selected for this experiment. Focal cerebral ischemia and reperfusion rat model was established with left middle cerebral artery occlusion by using thread inserting.
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降钙素基因相关肽的新近研究进展
降钙素基因相关肽(CGRP)是存在于感觉神经末梢的一种神经肽，是具有代表性的一种活性多肽。实验证明CGRP在身体许多组织器官起着重要的调节作用，特别是对脑血管具有很强的血管扩张、逆转血管痉挛、改善脑血液循环的作用。对肠道免疫功能也有调节作用，同时介导神经- 免疫系统的相互调节。
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不同给药方式下降钙素基因相关肽在蛛网膜下腔出血大鼠的组织分布
目的 探讨经鼻给药、经静脉给药降钙素基因相关肽(CGRP)在蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠的组织分布.方法 采用枕大池两次注入新鲜自体动脉血的方法建立SAH大鼠模型,64只大鼠按随机数字表法分为4组:(1)A组(n=16):经鼻给予125I标记的CGRP(125I-CGRP)处理正常大鼠;(2)B组(n=16):经鼻给予125I-CGRP处理SAH模型大鼠;(3)C组(n=16):经股静脉给予125I-CGRP处理正常大鼠;(4)D组(n=16):经股静脉给予125I-CGRP处理SAH模型大鼠.采用放射性同位素示踪法比较处理30 min后各组大鼠CGRP的组织分布.结果 经鼻给予125I-CGRP后,正常大鼠和SAH模型大鼠各脑区、颈髓和脑脊液的CGRP浓度均显著高于经静脉给药,而血液、甲状腺、颈深淋巴结、肝和肺组织CGRP浓度均显著低于经静脉给药(均P＜0.05).经鼻给药后以嗅球的CGRP浓度高,其次为脑脊液和颈髓.结论 经鼻给药和经静脉给药CGRP具有组织分布差异性,在中枢神经系统的药物治疗上经鼻给药具有显著优势.
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肺部降钙素基因相关肽的生理病理学意义
降钙素基因相关肽(CGRP)及其受体广泛的存在于肺神经内分泌细胞(PNEC)和肺的神经纤维中,是迄今为止发现体内已知的强的扩血管肽.CGRP参与了胎儿期肺部的发育调控;在缺氧性肺动脉高压的病理过程中起保护作用;能诱导多类细胞的增殖及分化功能(包括成纤维细胞和内皮细胞等)参与了呼吸道的自我修复过程及抑制炎症扩散的作用.因此CGRP在肺组织中起了不可忽视的作用,但也有着非常复杂的机理.
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外源性降钙素基因相关肽预防内皮素-1致新生鼠肺出血的实验研究
目的通过动物实验初步了解外源性降钙素相关肽(CGRP)对预防性拮抗内皮素-1(ET-1)致肺出血的作用.方法①使用新生Wistar乳鼠经气道分别给予高、中、低三种不同浓度的外源性CGRP,了解其与肺出血的相关性;②将40只乳鼠随即分成4组,对照组先用生理盐水气道给药,实验组分别给予高、中、低三种不同浓度的外源性CGRP,观察1小时后每组再经气道给予外源性ET-1,观察不同组间肺病理改变.结果①使用从浓度6.7×10-10mol/L～6.7×10-6mol/L的外源性CGRP的实验组病理改变与对照组组间比较差异无显著性(p>0.05).②经高浓度CGRP预处理的肺内滴入 ET-1后肺组织损伤程度轻.结论外源性CGRP没有肺出血的影响并且可以预防性拮抗ET-1致肺出血的反应.
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婴儿重症肺炎合并心力衰竭时血浆TNF-α与CGRP水平变化的研究
目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与降钙素基因相关肽(CGRP)在婴儿重症肺炎并急性充血性心力衰竭时的动态变化及其临床意义.方法对22例肺炎并心衰、16例轻型肺炎患儿及16例正常同龄儿童的血浆TNF- α与CGRP水平进行同期动态观察.结果心衰急性期血浆TNF-α较缓解期显著增高(p<0.01),并明显高于轻型肺炎组与对照组(p<0.01).急性期血浆CGRP水平较缓解期及对照组均显著降低(p<0.01);心衰缓解期与轻型肺炎组和对照组间血浆TNF-α、CGRP水平变化无差异(p>0.0 5).急性期血浆TNF-α含量变化与CGRP水平呈显著负相关(t=0.47,p<0.05 ).结论 TNF- α与CGRP在肺炎合并心衰的发生中起重要作用,TNF-α参与了肺水肿及心肌功能减退的病理过程,CGRP可能对肺血管及心肌有保护作用;动态监测血浆TNF-α及CGRP水平变化对判断病情及预后有重要临床意义.
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蛋白CXCR7的发现及其作用
CXCR7,以前称为RDC1,1989年从狗甲状腺cDNA库筛选出来的,初报道是一个具有血管活性肠肽(VIP)的受体,接着被确定为与降钙素基因相关肽结合的受体,后来又认为与肾上腺髓质素结合,然而这些定论终都被否决了.事实上,RDCI与已知的一些趋化因子受体有高度相似序列,故属于G蛋白耦联受体(G-protein coupled receptor,GPCR)的亚族[1].然而因为不知道或者认为没有配体故一直将RDC1归类为孤儿GPCR[2].
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急性重型颅脑损伤时内皮表和降钙素基因相关肽含量变化及其对动脉压的影响
内皮素(endothelin, ET)是一种具有极强生物活性的血管收缩因子,而降钙素基因相关肽 (calcitonin gene-related peptide, CGRP)则是一种具有极强活性的血管舒张因子,二者是极具代表性的血管活性多肽.我们用放射免疫法测定急性重型颅脑损伤(ASBI)患者血浆中ET及CGRP的含量变化,同时监测其平均动脉压(mean arterial blood pressure, MABP ),并对三者间的相互关系进行探讨.
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急性肾功能衰竭的非透析疗法
近年来,我科经过不断研究探索,摸索出一组对急性肾衰(ARF)行之有效的综合治疗药物,并成功地治愈了部分ARF病人.一、对象与方法1.研究对象肌酐＞450μmol/L,尿量≤400ml/d,B超检查示双侧肾脏弥漫性增大的59例ARF病人,根据病因按随机号分为两组,心血通组(河北医科大学生物医学工程生产,内含心房肽(ANP)＞1600pg/ml,降钙素基因相关肽(CGRP)486pg/ml,以及三磷酸腺苷、腺苷和多种氨基酸及其代谢中间产物)和常规治疗组.
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通心络胶囊对肺心病患者血浆内皮素、降钙素基因相关肽的影响
目的观察中成药通心络胶囊对肺心病急性加重期患者血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响及治疗意义.方法将服用过通心络胶囊前、后患者血浆ET、CGRP含量分别与常规治疗前、后患者及健康人作比较.结果肺心患者血浆ET增多,CGRP略减.加服通心络胶囊后,ET含量回降幅度增大,CGRP含量增多,升幅显著大于常规治疗组.结论通心络胶囊促进肺心病急性加重期血浆ET回降,促进CGRP产生,有助减轻肺动脉高压.
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脑卒中患者血浆内皮素与降钙素基因相关肽含量的变化及意义
目的测定脑卒中患者血浆内皮素(endothelzhe,ET)和降钙素基因相关肽(calcitonih gene-related pepticle,CGRP)含量,探讨其疾病治疗前后的变化及意义.方法采用放射免疫分析技术(RIA),对41例脑梗死患者和40例脑出血患者的急性期与恢复期血浆,分别作ET和CGRP分析,并用33例健康对照者作比较.结果脑卒中患者血浆ET含量,在20天内均明显高于对照组(P＜0.01),但治疗后有所下降;血浆CGRP含量在疾病的急性期明显高于对照组(P＜0.01),第20 天恢复正常.结论在脑卒中的急性期,血浆ET及CGRP均升高,并与脑损伤程度呈正相关,提示两者在疾病的演变过程中有重要意义.
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先天性心脏病肺动脉高压患儿血浆降钙素基因相关肽水平和基因测序的临床意义
目的探讨先天性心脏病患儿血浆降钙素基因相关肽(CGBP)水平与肺动脉高压的关系和基因序列检测的临床意义.方法使用放射免疫法测定36例左向右分流先天性心脏病患儿血浆CGRP浓度,心脏超声脉冲Doppler术前测肺体动脉收缩压比值(PP/PS),其中29例合并不同程度肺动脉高压,并用直接测序法对上述患儿CGBP基因第5外显子进行测序.结果轻度肺动脉高压患儿血浆CGRP水平低于对照组(P＜0.01),中、重度肺动脉高压患儿明显低于对照组(P＜0.001)和肺动脉压力正常组(P＜0.05).先天性心脏病患儿血浆CGRP水平与PP/PS呈负相关.36例先天性心脏病患儿和对照组CGRP基因第5外显子直接测序结果未发现有碱基突变现象.结论血浆CGRP水平失衡在先天性心脏病肺动脉高压的发生机制中起重要作用.肺动脉高压患儿CGRP基因在编码序列上未发现存在多态现象.
