首页 > 文献资料
-
EX527对胰腺癌细胞 PANC1侵袭迁移能力的影响
目的：应用 EX527特异性下调胰腺癌细胞 PANC1中 SIRT1的去乙酰化活性，观察其对细胞侵袭转移能力的影响。方法使用 EX527处理 PANC1细胞，下调 SIRT1乙酰化转移酶活性，通过 transwell 侵袭及划痕实验，观察 EX527对 PANC1细胞侵袭转移能力的影响，应用 Western blot 方法观察其对侵袭转移相关因子 MMP －2和 MMP －9蛋白表达的影响。结果EX527可以明显降低细胞去乙酰化转移酶活性，但对 SIRT1蛋白表达无影响。与对照组相比，经 EX527处理后的 PANC1细胞的侵袭及转移能力呈现明显抑制作用，且细胞 MMP －2和 MMP －9的 mRNA 及蛋白表达水平明显降低，差异具有统计学意义（P ＜0．01）。结论EX527可以下调胰腺癌细胞 SIRT1去乙酰化活性，明显抑制胰腺癌 PANC1细胞的侵袭转移能力，作用机制可能与下调 MMP －2和 MMP －9表达相关。
-
卵丘颗粒细胞SIRT1表达对卵胞浆内单精子显微注射助孕结局的影响
目的 探讨卵丘颗粒细胞SIRT1表达对ICSI助孕结局的影响.方法 收集120例因男方因素在我院辅助生殖技术研究室行ICSI助孕的女性患者卵丘颗粒细胞,采用免疫组化法检测SIRT1蛋白.比较分析ICSI妊娠与非妊娠组SIRT1表达率,并分析其与ICSI实验室各项指标如穿卵泡数、获卵数、获卵率,受精数、受精率,卵裂数、卵裂率,优质胚胎数、囊胚形成数及囊胚冷冻数之间关系.结果 妊娠与未妊娠组SIRT1表达率差异有统计学意义(P＜0.05).SIRT1表达率与穿卵泡数、Ⅲ级OCCs数、ICSI卵子数、受精数、卵裂数、平均优质胚胎数、平均囊胚数、优质囊胚数、平均冷冻胚胎数间均有显著相关性(P＜0.01).结论 SIRT1在卵丘颗粒细胞表达可能影响卵母细胞成熟及卵子发育能力,进而与ICSI助孕结局有关.
-
Sirt1与阿尔茨海默病的关系研究
Sirt1是源于哺乳动物体内的Sirtuins家族成员之一,它参与抗氧化应激、抗感染、抗凋亡等生理病理过程,神经系统发生退行性病变时,Sirt1表达量上调,起到一定的神经保护作用.目前Sirt1与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的关系日益受到关注,本文对两者之间的关系研究情况进行总结,以期为AD的治疗提供依据.
-
抗衰老基因SIRT1对骨关节炎的防治影响
去乙酰化酶Sir2(silence information regulator2,Sir2)基因家族对细胞的生存、凋亡、衰老等生理活动起着十分重要的调节作用,可能是所有生物共同的寿命控制基因之一.SIRT1是存在于哺乳动物的酵母染色质沉默子Sir2同源体,是一种依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的组蛋白去乙酰化酶.它与多种细胞生物学功能如基因转录沉默、细胞生长周期调节、能量代谢包括糖异生和脂质累积、胰岛素分泌、血管生成、神经保护、病毒感染以及细胞衰老有着密切关联.
-
白藜芦醇对硝普钠诱导的软骨细胞凋亡bax及bcl-2表达的影响
[目的] 探讨白藜芦醇对硝普钠诱导的软骨细胞凋亡及凋亡调控基因bax及bcl-2表达的影响.[方法] 常规培养关节软骨细胞后,按不同浓度白藜芦醇(分别为25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L)处理后分组并用硝普钠(SNP)(2.5mmol/L)诱导细胞凋亡.采用MTT法检测各组软骨细胞活性、DAPI染色和流式细胞术检测各组细胞凋亡,采用western-blot技术检测各组细胞sirt1、bax、bcl-2的表达,RT-PCR法检测各组细胞sirt1 mRNA的表达.[结果] 随着白藜芦醇浓度的升高,MTT法结果显示处理后细胞活性依次增高;DAPI染色、流式细胞术检测显示处理后细胞凋亡相对较少;western-blot检测显示随着白藜芦醇浓度的升高,处理后细胞sirt1、bcl-2依次增高,而bax逐渐降低;RT-PCR法检测显示白藜芦醇处理后细胞sirt1 mRNA表达随浓度逐渐增高.[结论] 白藜芦醇激活sirt1,使bcl-2/bax表达增高,是白藜芦醇抑制软骨细胞凋亡、预防骨关节炎的机制之一.
-
藻酸钠微球三维立体培养恢复去分化软骨细胞表型的实验研究
[目的] 研究在连续体外单层培养条件下不同接种密度对大鼠关节软骨细胞分化状态的影响,并探讨藻酸钠微球三维立体培养恢复去分化关节软骨细胞表型的调节机制.[方法]以正常密度(3×10<,4>/cm<'2>)或低密度(3×10<'2>/cm<'2>)分别连续体外单层传代培养大鼠膝关节软骨细胞使其去分化,RT-PCR检测Ⅰ、Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA的表达以确定其分化状态.取正常密度培养时的去分化软骨细胞,藻酸钠微球包被4周以恢复其表型,在该立体培养过程中将特异的SIRT1抑制剂-EX-527加入到培养基中抑制其表达,甲苯胺兰染色微球中软骨细胞分泌的细胞外基质,Western blot检测各种条件下SIRT1和Sox-9的表达.[结果] 当以正常密度连续体外单层培养时,软骨细胞在第4代发生去分化,低密度时于第1代即明显去分化,此时SIRT1和Sox9表达明显降低.藻酸钠微球三维立体培养能显著地增强去分化软骨细胞中Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚镛mRNA以及SIRT1、Sox9蛋白的表达,同时降低Ⅰ型胶原mRNA的表达.EX-527不仅限制藻酸钠微球中的软骨细胞周围细胞外基质的大量生成而且还抑制了SIRT1和Sox9的表达.[结论]关节软骨细胞连续体外单层培养的去分化与细胞接种密度有关,低密度培养加速去分化过程.藻酸钠微球三维立体培养恢复去分化关节软骨细胞表型的作用可能是通过细胞-细胞、细胞-细胞外基质间的相互作用,从而激活SIRT1的表达,继而增强Sox9的转录活性来实现.
-
SIRT1蛋白在胃癌中的表达及其与P-gp、Top-Ⅱα关系的研究
目的:探讨SIRT1蛋白在胃癌组织和细胞中的表达,分析SIRT1蛋白表达与耐药相关蛋白P-gp和Top-Ⅱα的相关性.方法:免疫组化SP法检测SIRT1、P-gp及Top-Ⅱα蛋白在15例胃癌组织和15例正常胃黏膜组织中的表达.Western blot检测正常人胃黏膜上皮细胞株GES-1和人胃癌细胞株SGC7901、MKN45、MKN28、HGC27、AGS、MGC803中SIRT1蛋白的表达;检测GES-1、SGC7901及MKN45中的SIRT1、P-gp和Top-Ⅱα的蛋白表达;siRNA-SIRT1/脂质体转染胃癌细胞SGC7901后,Western blot检测SIRT1、P-gp和Top-Ⅱα的蛋白表达变化;MTT-检测SGC7901细胞的体外增殖能力变化及对化疗药物5-Fu的敏感性变化.结果:15例胃癌组织中SIRT1蛋白表达阳性15例,P-gp蛋白表达阳性13例,Top-Ⅱα蛋白表达阳性3例;15例正常胃黏膜中SIRT1蛋白表达阳性6例,P-gp蛋白表达阳性5例,Top-Ⅱα蛋白表达阳性0例.GES-1、SGC7901、MKN45、MKN28、HGC27、AGS、MGC803中SIRT1相对蛋白表达量平均值分别为0.385、0.827、0.009、0.232、0.275、0.159、0.117;GES-1、SGC7901、MKN45中的P-gp相对蛋白表达量平均值分别为0.339、0.526、1.03;Top-Ⅱα的蛋白相对表达量分别为0.093、0.889、0.158. siRNA-SIRT1转染SGC7901 8 h,培养72 h后检测control、BC-V、negative、siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3的SIRT1相对蛋白表达量平均值分别为0.965、0.937、0.958、0.567、0.253、0.083;P-gp相对蛋白表达量平均值分别为1.893、1.905、1.932、0.465、0.006、0.005;Top-Ⅱα的蛋白相对表达量分别为0.09、0.07、0.073、0.085、0.168、0.195.M-TT结果显示抑制SIRT1蛋白表达后,SGC7901体外增殖能力无明显变化,对化疗药物5-Fu的敏感性显著增加.结论:SIRT1在胃癌组织中过表达,且过表达的胃癌组织、细胞中SIRT1扮演促癌因子角色;SIRT1蛋白过表达能促进P-gp蛋白表达,降低Top-Ⅱα蛋白表达,导致胃癌细胞化疗多重耐药性的增加.
-
不同浓度白藜芦醇激动SIRT1对卵巢颗粒细胞凋亡的调控
目的:研究SIRT1激动剂白藜芦醇(RES)调控卵巢颗粒细胞凋亡的佳作用浓度.方法:选取人卵巢颗粒细胞瘤细胞系COV434细胞,分别采用不同浓度20、50、75μmol/L和100μmol/L RES激动SIRT1,qRT-PCR法检测RES对SIRT1基因的激活作用,Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3及Bcl-2表达,CCK-8毒性实验检测细胞增殖状况,Annxin V-FITC/PI双染流式细胞术测定细胞凋亡.结果:随着RES作用浓度的增加,COV434细胞数增多,SIRT1表达增高,细胞凋亡抑制因子Bcl-2表达增加,促凋亡因子Caspase-3表达降低,细胞凋亡率降低,细胞增殖率升高;RES作用浓度达50μmol/L时,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:50μmol/L RES作为研究SIRT1对卵巢颗粒细胞凋亡作用的有效激活浓度,可作为研究早发性卵巢功能不全的药物干预浓度依据.
-
SIRT1基因在肿瘤中的作用机制
Ⅲ类去乙酰化酶Sirtuin 1(SIRT1)是一种依赖NAD+的组蛋白去乙酰化酶.研究发现SIRT1在肿瘤中的作用具有双面性,它可通过抑制炎症、肿瘤血管形成及与肿瘤相关基因相互作用等机制抑制肿瘤的发生发展;也可通过调控肿瘤相关基因、上皮间质转化、促进肿瘤细胞增殖和肿瘤放化疗耐受以及维持肿瘤干细胞的存活等机制促进肿瘤的增殖、侵袭和转移.
-
SIRT1与肿瘤
SIRT1 (Sirtuin type 1)是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的组蛋白脱乙酰酶，参与组蛋白的共价修饰，并可通过转录、翻译及翻译后修饰等多种途径参与肿瘤的发生发展过程。肿瘤细胞内SIRT1的表达或功能异常是肿瘤发生发展的重要机制之一，并可能成为治疗肿瘤的潜在靶点。
-
SIRT1和p53在合并糖尿病子宫内膜癌的表达及意义
目的 研究SIRT1和p53在合并糖尿病子宫内膜癌的表达.方法 应用免疫组化法检测实验组39例合并2型糖尿病子宫内膜癌患者、对照组40例不合并糖尿病子宫内膜癌患者及25例正常子宫内膜标本的SIRT1、p53表达情况,分析指标间相关性.结果 实验组SIRT1和p53的阳性率分别为64.1％、59.0％,对照组分别为85.0％和52.5％.实验组SIRT1表达低于对照组(x2=4.561,P=0.033).对照组SIRT1和p53的阳性率均高于正常子宫内膜组(x2 =21.462,P ＜0.001;x2=6.771,P=0.009).SIRT1与p53的表达呈正相关(r=0.360,P=0.024).结论 在子宫内膜癌患者中,高血糖可能下调SIRT1,SIRT1可能通过抑癌基因p53的沉默作用促进子宫内膜癌的形成.
-
SIRT1在合并2型糖尿病乳腺癌中的表达及意义
目的 研究沉默信息调节因子1( SIRT1)在合并2型糖尿病乳腺癌中的表达,探讨SIRT1与p53之间的相关性,分析在乳腺癌合并糖尿病组织与乳腺癌非糖尿病组织血脂之间的差异,并对其与2型糖尿病的关系及临床价值做出评价.方法 应用免疫组化染色法对30例合并2型糖尿病的乳腺癌组织与30例乳腺癌非糖尿病组织中SIRT1和p53的表达进行检测,分析二者的相关性.结果 ①在合并糖尿病的乳腺癌组织中SIRT1阳性表达率明显低于非糖尿病乳腺癌组织(P＜0.05)；②SIRT1阳性组P53蛋白表达水平明显高于SIRT1阴性组(P＜0.05),乳腺癌合并糖尿病组织中SIRT1表达与p53表达呈显著正相关(P＜0.05)；③乳腺癌合并糖尿病组织中BMI以及甘油三脂明显高于非糖尿病乳腺癌组织(P＜0.05),高密度脂蛋白低于非糖尿病组织(P=0.05),而胆固醇以及低密度脂蛋白差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SIRT1在乳腺癌合并糖尿病组织中存在过表达,但阳性表达率低于非糖尿病乳腺癌组织,提示其可能与糖尿病病程进展有关；SIRT1表达与p53表达呈显著正相关；此外SIRT1还可参与血脂的调节过程,因此它可能成为糖尿病以及乳腺癌的新的生物学指标.
-
SIRT1、β-catenin在胃癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨胃癌组织中SIRT1、β-catenin的表达水平及其与临床病理特征的相关性.方法 采用免疫组织化学方法对101例胃癌组织SIRT1、β-catenin的表达进行检测,分析其与肿瘤临床病理特征的相关性.结果 胃癌组织中SIRT1、β-catenin阳性表达率分别为64.4% (65/101)和47.5% (48/101).SIRT1在肠型胃癌中的表达显著高于弥漫型胃癌中的表达,P＜0.05;SIRT1的高表达与胃癌发生部位、肿瘤大小、淋巴结转移情况及β-catenin的表达之间的差异无统计学意义 (P＞0.05),SIRT1表达与β-catenin的表达无相关性(r=0.01;P=0.751).结论 SIRT1可能参与了胃癌的发生.
-
丹参酚酸B通过调控Sirt1对大鼠肝氧化应激损伤的影响
目的 探讨丹参酚酸B抗大鼠肝氧化应激损伤的机制.方法 48只SD大鼠随机分为四组:A对照组,B模型组,C丹参酸酚B空白给药组,D丹参酸酚B预处理组.SalB溶液灌胃7天之后使用四氯化碳造模,24 h后取肝脏标本,分别测定肝匀浆SOD、MDA水平,Western Blot检测MnSOD和Sirt1表达水平,RT-PCR检测MnSOD基因转录水平.结果 经过四氯化碳诱导,模型组小鼠SOD、Sirt1表达水平明显下降;与模型组相比,丹参酸酚B预处理组SOD、Sirt1表达水平明显上升.与对照组相比,丹参酸酚B空白给药组Sirt1表达水平明显上升.结论 在四氯化碳诱导的大鼠急性肝损伤模型中,丹参酸酚B具有明显的抗氧化应激肝损伤的药理作用,其机制与激活Sirt1的表达密切相关.
-
瑞舒伐他汀对ApoE-/-小鼠心肌SIRT1信号通路的影响
目的 探讨SIRT1、p-FOXO3a信号通路在高脂饮食下ApoE--小鼠心脏氧化应激损伤中的保护作用,及瑞舒伐他汀对该通路的影响.方法 随机选取C57BL/6J小鼠(对照组)10只,给予普通饮食.选取同品系ApoE--小鼠20只,随机分为模型组和干预组,每组10只,均给予高脂喂养.干预组瑞舒伐他汀悬液灌胃,模型组等量生理盐水灌胃.连续喂养16周后处死所有小鼠,全自动生化仪检测血清血脂,HE染色观察各组小鼠心肌细胞形态变化,Western blotting法检测心肌细胞SIRT1、p-FOXO3a的表达,免疫组化法检测心肌SIRT1蛋白的表达,同时检测心脏组织匀浆中SOD、MDA含量.结果 模型组较对照组血清TC、TG、LDL-C明显升高(P＜0.05),HDL-C显著降低(P＜0.05),心肌细胞粗大、排列紊乱,胶原增多,SIRT1、p-FOXO3a表达减少(P＜0.05),组织匀浆中SOD降低,MDA增多(P＜0.05).与模型组相比,干预组小鼠血清TC、TG、LDL-C明显降低(P＜0.05),HDL-C明显升高(P＜0.05),心肌细胞排列整齐,胶原减少,SIRT1、p-FOXO3a表达增加(P＜0.05),组织匀浆中SOD增多,MDA降低.结论 高脂饮食下ApoE-/-小鼠心脏易发生氧化应激损伤,瑞舒伐他汀可通过上调SIRT1、p-FOXO3a保护心脏免受氧化应激损伤.
-
NAD对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的影响
目的 探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的作用.方法 提取新生Wistar大乳鼠原代心肌成纤维细胞,传代培养,采用2～4代细胞.实验分为空白对照组,AngⅡ(0.01、0.1、1μmol/L)组,NAD(250 μmol/L)组,AngⅡ(1 μmol/L)+NAD (250 μmol/L)组,FAM组,Sirt1-siRNA+AngⅡ(1μmol/L)组,Sirt1-siRNA组,Sirt1-siRNA+NAD(250 μmol/L)组,Sirt1-siRNA十Ang Ⅱ(1 mol/L)+ NAD(250 μmol/L)组.刺激24h后,提取总RNA,Real time RT-PCR法分别检测SIRT1和Ⅰ型胶原mRNA的表达.结果 心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA的表达随着AngⅡ浓度升高明显增加(P＜0.05),呈浓度依赖性.与空白对照组比较,NAD(250 μmol/L)组SIRT1 mRNA表达增高(P＜0.05).与AngⅡ(1μmol/L)组比较,AngⅡ(1μmol/L)+NAD(250μmol/L)组Ⅰ型胶原mRNA的表达明显减少(P＜0.01).相对于FAM组,Sirt1-siRNA转染后各组SIRT1 mRNA的表达减少(P＜0.05),而心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达增多(P＜0.05).结论 NAD可以抑制心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA的表达,SIRT1影响Ⅰ型胶原mRNA的表达,它们对Ang Ⅱ诱导的心肌纤维化有保护作用.
-
姜黄素通过激活 SIRT1抑制 AngⅡ诱导的心肌纤维化
目的：研究姜黄素（Curcumin）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌纤维化的影响，并观察其对 SIRT1的调控。方法心肌成纤维细胞给予 Curcumin 预处理后再给予 AngⅡ刺激，采用 Cell Counting Kit-8（CCK-8）法检测成纤维细胞增殖水平，羟脯氨酸检测试剂盒检测成纤维细胞中羟脯氨酸的水平，Real-time PCR 法检测 collagen-Ⅰ、collagen-Ⅲ、CTGF、FN 等基因 mRNA 表达变化，Western Blotting 和 SIRT1酶活性检测试剂盒分别检测沉默信息调节因子1（silent information regulator 1，SIRT1）的蛋白表达及去乙酰化酶活性的变化。结果给予 AngⅡ处理24 h 后，细胞增殖水平增加、胶原合成相关基因表达增多、纤维化相关基因 CTGF、FN 的 mRNA 表达显著增加，并且 SIRT1的蛋白水平和去乙酰化酶活性显著下降；Curcumin 预处理可明显抑制 Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖，抑制胶原合成以及纤维化相关基因 CTGF、FN 的表达，并增加 SIRT1的蛋白水平和酶活性。结论 Curcumin 可抑制 AngⅡ诱导的心肌细胞纤维化，其机制可能与 SIRT1的激活有关。
-
SIRT1在胃癌组织、细胞中的表达及意义
目的 观察SIRT1在胃癌组织及胃癌细胞中的表达情况,探讨SIRT1同胃癌临床病理特征之间的关系.方法 应用Real-time PCR方法检测SIRT1 mRNA在21例新鲜胃癌及癌旁组织中的表达情况;应用Western blot和Real-time PCR方法在蛋白和mRNA水平检测SIRT1在胃癌、胃黏膜上皮细胞中的表达;应用免疫组织化学染色法检测130例胃癌组织及癌旁正常组织中SIRT1蛋白的表达,分析SIRT1蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系.结果 SIRT1 mRNA在新鲜胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高(P＜0.05),SIRT1 mRNA及蛋白在胃癌细胞中均比正常胃黏膜上皮细胞中表达增高(P均＜0.05).免疫组化染色结果表明,SIRT1蛋白在胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高(P＜0.05).SIRT1蛋白表达水平同胃癌患者的年龄及肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、大小有关(P均＜0.05),同生存时间呈负相关(r=-0.502 3,P＜0.05).结论 SIRT1在胃癌组织和胃癌细胞中呈高表达,其在胃癌发生中充当癌基因的角色.
关键词： 胃肿瘤 SIRT1 免疫组织化学 免疫印迹 实时定量聚合酶链反应 -
SIRT1在神经退行性疾病中的作用研究新进展
SIRT1是高度保守的去乙酰化酶家族成员,是酵母沉默信息调节因子Sir2的同源物.SIRT1具有组蛋白/非组蛋白去乙酰化酶活性,通过其可逆的乙酰队化--去乙酰化循环反应参与调节多种细胞功能,可参与抗凋亡、抗炎、抗氧化应激、调节能量代谢、调控细胞周期等过程.近年来,其在神经退行性疾病中的作用受到越来越广泛关注,本文就SIRT1在神经退行性疾病中的作用研究新进展作一综述.
-
沉默信息调节因子T1及其在心血管疾病中保护作用的研究进展
沉默信息调节因子(SIRT1)是一种依赖烟碱胺腺嘌呤二核苷酸的Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶,与酵母菌中发现的沉默信息调节因子2高度同源,其通过对组蛋白以及多种非组蛋白底物的去乙酰化作用调控细胞代谢、衰老、凋亡及氧化应激等众多生理及病理过程.近研究发现,SIRT1及其下游的调节通路参与心血管疾病的发生发展过程,并起到保护作用.SIRT1在基础医学研究和临床医学应用中具有重要意义,可能成为心血管疾病防治的新策略和潜在靶点.该文对近年来SIRT1在心血管疾病中的研究做一综述.
关键词： 沉默信息调节因子(SIR) SIRT1 心血管疾病
