首页 > 文献资料
-
咖啡酸苯乙酯对神经毒素诱导帕金森病模型神经元损伤的保护作用
目的:探讨咖啡酸苯乙酯(Caffeic Acid Phenethyl Ester,CAPE)对神经毒素诱导的帕金森病模型神经元损伤的保护作用.方法:体外用MPP+处理PC12细胞制作PD细胞模型,利用MTT法和流式细胞仪分别测定细胞存活率和细胞凋亡.将C57 BL雄性小鼠用MPTP处理(20 mg/kg,3次,ip)制作PD小鼠模型,用尼氏染色检测黑质致密区神经细胞数,免疫组化方法检测黑质致密区酪氨酸羟化酶(TH)和Caspase-3阳性细胞数.结果:PC12细胞中,1.25 μM的CAPE可以显著抑制MPP+诱导的细胞活性的丧失和细胞凋亡.PD小鼠模型中,MPTP模型组黑质致密区神经细胞数和TH阳性细胞数较正常对照组明显降低,黑质致密区Caspase-3阳性细胞数较正常对照组明显增加.CAPE (50 mg/kg,ip,7d)可以显著增加黑质致密区TH阳性细胞数,减少黑质致密区Caspase-3阳性细胞数.结论:CAPE对神经毒素诱导的PD模型神经元损伤有明显的保护作用.
-
TLR4信号缺失对MPTP帕金森小鼠模型黑质Beta-catenin信号的表达影响
目的 观察帕金森小鼠模型中TLR4通路对Beta-catenin信号的表达影响.方法 C57BL小鼠和TLR4敲除(TLR4knock out,TLR4 KO)小鼠各36只,分别注射生理盐水和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP).采用RT-PCR、Westernblot检测4组之间的Beta-catenin的mRNA和蛋白表达变化,进一步采用免疫荧光的方法检测黑质区星形胶质细胞中Beta-catenin的共表达变化.结果 RT-PCR及Western blot结果显示,与生理盐水注射组小鼠相比,C57BL、TLR4KO小鼠在MPTP注射后,mRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.01);并且,与C57BL小鼠MPTP注射组相比,TLR4KO小鼠MPTP注射组Beta-catenin的mRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.01).进一步的免疫荧光结果显示,与C57BL小鼠MPTP注射组相比,TLR4KO小鼠MPTP注射组星形胶质细胞(GFAP)中表达的beta-catenin明显升高.结论 TLR4通路在亚急性帕金森MPTP模型中,对黑质beta-catenin蛋白的表达起重要调控作用,Toll样信号与Beta-catenin信号这种互动关系可能在帕金森发病机制中起着重要的作用.
-
白藜芦醇经NRF2/ARE通路减轻MPTP毒性研究
目的 观察白藜芦醇(resveratrol,trans-3,4′,5trihydroxystilbene,RE)对帕金森病(PD)斑马鱼多巴胺神经元的保护作用及其机制.方法 本研究分为5组:1)空白对照组(con组);2)200μM/L MPTP处理组(MPTP组);3)60μM/L RE处理组(RE组);4)先加60μM/L RE,12 h后加200μM/L MPTP组(MR1组);5)先加200μM/L MPTP,12 h后加60μM/L RE组(M1R组),每组含斑马鱼25条.每组斑马鱼发育至第4天时观察药物对多巴胺神经元、PD相关基因和NRF2/ARE信号通路的影响.解剖显微镜观察斑马鱼的运动功能、外部形态;激光共聚焦显微镜观察多巴胺神经元;荧光定量PCR检测PD相关基因parkin、pink1、dj-1以及抗氧化相关基因sod、cat的表达;Western blot检测Nrf2蛋白表达.结果 与con组相比,MPTP组斑马鱼出现尾巴后弯,多巴胺神经元减少,RE回救多巴胺神经元数量;MPTP组PD相关基因和氧化应激相关基因表达下调,Nrf2蛋白表达水平下降;MIR与MR1组PD相关基因、氧化应激相关基因及Nrf2蛋白的表达得到援救.结论 MPTP对斑马鱼多巴胺神经元具有毒性作用,RE可减弱MPTP的毒性,可通过抗氧化应激来实现.
-
依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制
目的 探讨依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 SD大鼠60只,随机分为对照组(S)、缺血再灌注组(IR)和依托咪酯组(Etom),各20只.采用4-VO法建立大鼠全脑缺血再灌注模型.缺血再灌注后1d、3d、7d用免疫组化法测定海马CA1区神经元mPTP的表达.结果 与S组相比,IR组和Etomidate组海马CA1区神经元mPTP的表达明显上升(P<0.01),但Etom组海马CA1区神经元mPTP的表达低于IR组(P<0.05).组内各时间点表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,可能是通过抑制mPTP的表达而发挥作用的.
-
腺嘌呤核苷酸转位酶1在亚硒酸钠抑制脑胶质瘤中的作用机制
目的:研究腺嘌呤核苷酸转位酶1(ANT1)在亚硒酸钠抑制脑胶质瘤生长中的作用机制.方法:将不同浓度的亚硒酸钠(0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L)侵染人脑胶质瘤细胞SHG44,MTT比色法检测亚硒酸钠对SHG44的增殖的影响；PCR法检测ANT1的表达；提取细胞线粒体后通过观察线粒体的荧光强度,检测SHG44的线粒体膜电位和膜通道开放程度.结果:亚硒酸钠对人脑胶质瘤细胞具有明显的抑制作用,2.0及4.0 μmol/L染硒组差异均有统计学意义(P＜0.05),ANT1的表达在各染硒组均出现显著性增加(P＜0.05)；线粒体膜电位在2.0及4.0μmol/L染硒组显著降低(P＜0.05),线粒体膜通道转运孔开放程度在1.0、2.0及4.0μmol/L组显著增高(P＜0.05).结论:亚硒酸钠能抑制人脑胶质瘤细胞SHG44地生长,并伴随线粒体膜电位降低和线粒体膜通道转运孔开放程度增加,ANT1可能参与了其作用机制.
-
EGb防治PD的实验研究
目的观察银杏叶提取物(Ginkgo biloba leaves,EGb)在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahyropyridine,MPTP)诱导的帕金森氏病(PD)模型中对旋转症状及纹状体中多巴胺(dopamine,DA)含量的影响.方法腹腔注射EGb连续20d,采用大脑立体定位仪向大鼠黑质内注射MPTP诱导旋转,观察大鼠旋转情况,测定大鼠相关脑区中DA含量的变化.结果EGb相对增加了纹状体中DA的含量,改善了PD的旋转症状.结论EGb对MPTP诱导的大鼠PD模型有防治作用.
-
Sirtuin 3减少心肌细胞钙超载时细胞色素C的释放并抑制细胞凋亡
目的 研究Sirtuin 3在心肌细胞钙超载时对细胞色素C(CytC)释放和caspase-3激活的影响.方法 将培养的H9c2心肌细胞随机分为4组,即对照组、Sirtuin 3组、离子霉素组(ionomycin组)和离子霉素联合Sirtuin 3组(ionomycin联合Sirtuin 3组).采用ionomycin诱导法构建心肌细胞钙超载模型,Western blot法检测心肌细胞线粒体及胞质细胞色素C(CytC)和caspase-3的水平,分光光度法检测caspase-3的活性,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测H9c2心肌细胞的凋亡比率.结果 成功构建钙超载模型.Western blot结果显示CytC在线粒体中的水平ionomycin组明显低于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组明显高于ionomycin组,CytC在胞质中的水平相反;Ionomycin组caspase-3的水平明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组caspase-3的水平明显低于ionomycin组.分光光度法结果显示caspase-3的活性ionomycin组明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组明显低于ionomycin组.双染色结合流式细胞术结果显示ionomycin组的凋亡比率明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组的凋亡比率明显低于ionomycin组.结论 心肌细胞钙超载时,Sirtuin 3通过减少CytC释放和caspase-3的激活,抑制细胞凋亡.
-
MPTP处理的SAMP8小鼠黑质纹状体损伤中血红素加氧酶-1的表达变化
目的:研究1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)诱导6月龄快速老化小鼠(SAMP8)黑质纹状体急性损伤,以及血红素加氧酶-1(HO-1)的表达变化,探讨其与MPTP导致的SAMP8小鼠黑质纹状体系统损害的关系.方法:给6月龄健康雄性SAMP8小鼠背部皮下注射MPTP 20mg/(kg·次),连续注射4次,每次间隔2h；对照组注射等量生理盐水.在注射后6h、24h、3d和8d处死小鼠留取脑组织标本,用免疫组织化学技术检测小鼠黑质、纹状体的酪氨酸羟化酶(TH)和HO-1,以计数黑质多巴胺能神经元数量及其投射纤维的改变,及HO-1阳性细胞的变化；用Western blot方法检测TH和HO-1蛋白表达的变化.结果:MPTP致6月龄SAMP8小鼠各时间点TH阳性神经元分别减少14.23％(P＜0.05),23.85％ (P＜0.01),36.77％ (P ＜0.01),45.9％(P＜O.01),24 h与3d比较有显著性差异(P＜0.05),神经元的丢失以24 h至3d为显著；MPTP组随时间延长纹状体区酪氨酸羟化酶免疫反应阳性染色逐渐变浅淡,不均匀,于注射后24h明显,第8天为浅淡；同时TH蛋白表达具有相同变化.但仅在注射后3d小鼠纹状体区见到大量HO-1阳性细胞,同时HO-1蛋白表达增高,具有统计学意义,其余各时间点及对照组未见HO-1阳性细胞.中脑区HO-1阳性细胞及蛋白表达在各时间点均未见显著变化.结论:MPTP导致6月龄SAMP8小鼠黑质纹状体系统急性损伤,产生多巴胺能神经元数量减少及蛋白表达降低；其黑质纹状体HO-1的高表达是一过性短暂的,它在PD中的作用是有限的.
-
小鼠肠道菌群失调与帕金森病发生发展的相关性研究
目的:探索肠道菌群失调与帕金森病的发生、发展的相关性,揭示帕金森病的发病起因.方法:雄性C57BL/6小鼠80只,随机分为A组(正常对照组:灌胃生理盐水和腹膜腔注射生理盐水)、B组(肠道菌群失调组:只灌胃头孢曲松CRO)、C组(仅腹膜腔注射MPTP)、D组(灌胃CRO+腹膜腔注射MPTP),每组20只.在肠道菌群失调基础上,长期小剂量给予MPTP制备帕金森病小鼠模型;进行爬杆、悬挂和滚轴实验通过组间对比评估运动行为学改变;通过分析盲肠指数、肠道菌落数和观察盲肠的组织学改变来确定肠道菌群失调;通过Western Blot及免疫荧光组织化学双染方法检测中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)、α-突触核蛋白的表达及寡聚化和纤维化程度.结果:悬挂实验、滚轴实验显示:C、D组在给药2周后,与A组相比均出现明显的运动行为学改变,随着给药时间的延长,这种趋势的改变更加明显,且具有统计学意义(P＜0.01);其中D组比C组的改变更加明显,两者之间有显著性差异(P＜0.01).B组与正常对照A组相比,无显著性差异(P＞0.05).爬杆实验各组与A组相比均无明显差异(P＞0.05).Western Blot结果显示:C组、D组与同窝对照A组相比,TH的表达均出现了随给药时间推移而改变的明显降低趋势(P＜0.01);且D组比C组的改变要早而显著(P ＜0.05);α-突触核蛋白未检测出.免疫荧光组织化学双标染色结果亦显示:肠道菌群失调的PD模型与同窝对照组相比,黑质TH阳性神经元的数目明显下降(P＜0.01),但α-突触核蛋白未检测出.结论:肠道菌群失调可加剧MPTP诱导的帕金森病小鼠模型提前出现运动行为学改变,证明肠道菌群失调在帕金森病发生发展过程中扮演着重要角色.
-
MPTP诱导人神经干细胞衰老模型的建立
目的:建立MPTP诱导的人神经干细胞(hNSCs)衰老模型,探讨其衰老的相关生物学特点,从而为人神经干细胞衰老的研究提供细胞模型工具.方法:人胚胎干细胞系(H9)经体外诱导分化得到hNSCs,将第3代细胞接种到培养皿.在完全培养基基础上加入终浓度400 μmol/L的MPTP处理24h,处理结束后通过CCK8和Ki67染色、β-半乳糖苷酶染色、活性氧水平检测验证神经于细胞衰老模型的建立,应用Western Blot法检测相关基因SOD2,p21和p53的表达变化.结果:400 μmol/L MPTP作用24h后,hNSCs提前衰老,表现为CCK8光密度值显著下降,ki67阳性细胞比例显著下降,β-半乳糖苷酶阳性细胞百分比显著升高,细胞活性氧水平显著升高.进一步在分子水平上表现为SOD2蛋白表达水平明显下降,p21,p53蛋白表达水平显著升高.结论:本研究证实400 μmol/L MPTP作用24h可建立人神经干细胞体外衰老模型,该模型的生物学变化可能是由SOD2,p21,p53的表达水平引起的.
-
色钉菇乙酸乙酯提取物对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺神经元的保护作用
目的:探讨色钉菇乙酸乙酯提取物能否改善帕金森病(PD)小鼠的行为症状以及对黑质多巴胺(DA)能神经元保护作用.方法:以成年C57 BL/6小鼠为对象,设置空白对照组、MPTP模型组和100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg三个剂量的色钉菇乙酸乙酯提取物的干预组.通过站立次数和爬杆得分等指标评价行为症状,以TH的免疫荧光方法检测存活的黑质DA能神经元,FJC染色法显示黑质致密部变性的DA能神经元.结果:在行为上,实验处理之前各组之间无显著性差异(P＞0.05);而实验处理后,于站立次数指标上,400 mg/kg剂量干预组显著地高于实验对照组(P＜0.05),与空白对照组无显著性差异(P＞0.05);在爬杆得分指标上,200 mg/kg组和400 mg/kg组均显著地高于实验对照组(P＜0.05),但与空白对照组无显著性差异(P＞0.05).在TH标记的黑质多巴胺能神经元数量上,只有400 mg/kg组显著地高于实验对照组(P＜0.05),与空白对照组无显著性差异(P＞0.05).而FJC标记的变性细胞只在MPTP组、100 mg/kg和200 mg/kg组表达,空白对照组和400 mg/kg组未见FJC阳性细胞.结论:色钉菇乙酸乙酯提取物能显著地改善PD的行为症状和保护黑质DA能神经元,且呈剂量依赖性.
关键词： 帕金森病 色钉菇乙酸乙酯提取物 MPTP 多巴胺能神经元 小鼠 -
京尼平苷对MPTP所致帕金森病小鼠模型的神经保护作用研究
目的:观察京尼平苷对MPTP帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用和对帕金森病的治疗作用.方法:制作MPTP帕金森病小鼠模型,将C57BL/6小鼠随机分为四组:对照组、京尼平苷组、MPTP组、和治疗组(MPTP+ Geniposide).通过行为学实验(转棒实验、游泳试验)、TH免疫组化实验和TUNEL染色,观察京尼平苷对MPTP小鼠行为学、黑质多巴胺能神经元数目和凋亡细胞数目的影响.结果:MPTP组出现了典型的PD行为学改变,小鼠掉落潜伏期和游泳行为评分均低于对照组(P＜0.01),黑质致密部TH阳性细胞数目较对照组明显减少(P ＜0.001),凋亡细胞数目明显增多(P ＜0.001).治疗组与MPTP组相比,能明显改善MPTP诱导的C57BL/6小鼠的行为学异常,小鼠掉落潜伏期明显延长(P＜0.01),游泳行为评分亦显著提高(P＜0.01),同时,TH阳性细胞数目明显增多(P＜0.001),凋亡细胞数目明显减少(P ＜0.001).结论:京尼平苷能够明显改善MPTP引起的小鼠行为学改变,并能够抑制小鼠黑质TH阳性神经元的减少和凋亡细胞的增加.提示京尼平苷对MPTP帕金森病小鼠DA能神经元具有神经保护效应,这种保护作用可能与京尼平苷的抗凋亡作用有关.
-
粒细胞集落刺激因子拮抗MPTP诱导的小鼠多巴胺神经元死亡
目的:检测粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是否能通过拮抗MPTP诱导的小鼠帕金森病(PD)模型中的细胞死亡,从而保护多巴胺能神经元.方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,分别为对照组、MPTP组、G-CSF+MPTP组.采用免疫组织化学、高效液相色谱法(HPLC)和免疫印迹(Western Blot)等方法评估黑质多巴胺能神经元的损伤及Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果:G-CSF显著拮抗MPTP诱导的TH阳性神经元损失(P＜0.05),增加Bcl-2蛋白表达和减少Bax蛋白表达(P＜0.05).结论:G-CSF对MPTP诱导的C57BL/6小鼠多巴胺能神经细胞死亡发挥保护作用,其机制可能是通过上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达介导的.
-
MPTP对小鼠中脑α-突触核蛋白线粒体表达和线粒体形态改变的影响
目的:观察MPTP对中脑黑质神经元线粒体表达α-突触核蛋白及线粒体形态改变的影响.方法:运用腹腔注射MPTP诱导C57/BL小鼠中脑黑质神经元损伤,以生理盐水腹腔注射小鼠作为对照组.运用线粒体纯化结合Western Blot分析线粒体α-突触核蛋白的水平,运用免疫组织化学标记结合激光共聚焦方法观察线粒体结构的改变.运用MPP+干预原代培养的多巴胺能神经元,观察线粒体形态的改变.结果:MPTP可以诱导小鼠中脑线粒体α-突触核蛋白的水平升高,并导致线粒体出现碎片化,碎片化的线粒体结构与α-突触核蛋白共定位.运用MPP+处理原代培养的中脑腹侧神经元,发现MPP+可以选择性地诱导多巴胺能神经元的线粒体碎片化.定量研究显示:多巴胺能神经元经MPP+处理后,线粒体的长度显著降低(P＜0.01).结论:MPTP可以在体诱导多巴胺能神经元的线粒体碎片化,线粒体α-突触核蛋白水平的升高可能与其碎片化密切相关.
-
二苯乙烯苷通过抑制ROS减轻MPTP对帕金森病小鼠的神经毒性作用
目的:探讨2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4'-tetrahydroxystibene-2-o-β-D-gluco-side,TSG)对1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-pheyl-1,2,3,6-tetrahydrophridine,MPTP)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠黑质多巴胺能神经元保护作用的机制.方法:实验分成三组,即健康C57BL小鼠随机分为对照组(腹腔注射生理盐水)；模型组,连续7d给C57BL小鼠腹腔注射MPTP(30 mg/kg)制备亚急性PD模型；治疗组,在给予MPTP后1h腹腔注射TSG(60 mg/kg).爬杆实验检测小鼠的行为学变化；活性氧(reactiveoxygen species,ROS)检测试剂盒检测ROS水平；免疫荧光组织化学染色法测定黑质酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)的表达变化.结果:行为学:与对照组比较,模型组爬杆时间与转头时间明显延长(P＜0.01),而治疗组较模型组时间缩短(P ＜0.05).模型组ROS水平较对照组大幅度升高(P＜0.01),治疗组较模型组明显下降(P＜0.05).免疫荧光染色:与对照组相比,模型组TH及DAT阳性神经元的数目明显减少(P＜0.01),而治疗组TH及DAT阳性神经元数目减少的幅度明显有所下降(P＜0.05).结论:TSG对MPTP诱导的神经毒性具有保护作用,其机制可能与TSG抑制ROS有关.
-
红景天苷对MPTP诱导的帕金森病小鼠黑质多巴胺转运蛋白的影响
目的:探讨红景天苷(salidroside,Sal)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠黑质多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)表达的影响.方法:将神经毒素l-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phen-yl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)注入C57BL/6小鼠腹腔内,制备PD模型,Rotarod实验和游泳实验观察小鼠行为学变化,免疫荧光组织化学法检测黑质DAT阳性神经元数目的变化.结果:行为学实验结果显示,Rotarod实验中模型组小鼠在滚轴上运动的时间明显短于正常组(P＜0.01),给予不同剂量的Sal后,小鼠在滚轴上运动的时间有所延长,并呈剂量依赖性(P＜0.05,P＜0.01).游泳实验结果与Rotarod结果一致,模型组小鼠游泳时间明显短于正常组(P＜0.01),给予不同剂量Sal后,小鼠游泳时间不同程度增加(P ＜0.05,P＜0.01).免疫荧光结果显示,模型组小鼠黑质中DAT阳性神经元的数目明显少于正常组(P＜0.01),而给予不同剂量Sal干预后,小鼠DAT阳性神经元数目的减少有所恢复(P ＜0.05,P＜0.01).结论:Sal可以改善PD小鼠行为协调能力,提高DAT阳性神经元存活的数目,并呈剂量依赖性,表明Sal对多巴胺(dopamine,DA)能神经元具有一定的保护作用.
-
二苯乙烯苷对MPTP诱导的帕金森病小鼠模型黑质多巴胺转运体的影响
目的:研究2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4’- tetrahydroxystibene-2-o-β- D-glucoside,TSG)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠黑质多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)表达的影响.方法:将1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)注入小鼠腹腔制作PD模型,然后采用爬杆实验和悬挂实验检测小鼠的行为学变化,免疫荧光组织化学法观察黑质DAT阳性神经元数目.结果:行为学检测结果表明:模型组小鼠较正常对照组爬杆时间延长,悬挂能力下降(P＜0.01),而TSG干预后可有效缩短小鼠的爬杆时间,并提高其悬挂能力(P ＜0.05,P＜0.01).免疫荧光结果显示:模型组小鼠黑质DAT阳性神经元的数目明显少于正常对照组(P＜0.01),而TSG干预后,小鼠DAT阳性神经元数目的减少降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:TSG可改善PD小鼠的行为学、提高黑质DAT阳性神经元的存活数目,表明TSG对黑质多巴胺能神经元有一定的保护作用.
-
MPTP诱导的小鼠PD模型中相关脑区小胶质细胞反应性差异研究
为了探讨Parkinson病(PD)小鼠相关脑区的小胶质细胞反应性是否存在差异,本研究采用MPTP诱导的小鼠PD模型,用GSA I-B4-HRP组织化学染色方法对黑质致密部(SNc)、尾壳核(CPu)、腹侧被盖区(VTA)和额叶联合皮层(FrA)四个部位中小胶质细胞的形态和数量进行了观察;同时用免疫荧光染色检测了SNc和VTA中TH阳性神经元的数量,用Western blot方法检测CPu和FrA内TH蛋白含量的变化情况.结果显示:SNe中TH阳性神经元的数量和cPu中TH蛋白的含量在MPTP腹腔注射后1 d即大幅度降低(降幅约为68%);在MPTP腹腔注射后3 d起SNc中TH阳性神经元的数和CPu中TH蛋白的含量逐步增加;小胶质细胞在MPTP腹腔注射后1～3 d的反应明显,然后逐渐减弱.VTA中TH阳性神经元的数量和FrA中TH蛋白的含量在MPTP腹腔注射后降幅不明显(降幅约在15%),小胶质细胞在MPTP腹腔注射后1 d的反应较为明显,其它时段的变化不显著.本研究结果提示:PD模型小鼠SNc和CPu中的小胶质细胞反应明显强于VTA和FrA区,反应性小胶质细胞在SNc中的多巴胺(DA)能神经元损伤过程中扮演了重要角色.
关键词： Parkinson病 MPTP 多巴胺能神经元 小胶质细胞 小鼠 -
Fluoro-Jade C染色方法显示神经毒物MPTP和红藻氨酸致小鼠中脑黑质神经元的变性死亡
为探讨Fluoro-Jade C荧光染色检测神经毒物MPTP和红藻氨酸(KA)损伤致中脑黑质神经元变性死亡的方法,本研究采用小鼠腹腔注射MPTP或黑质定位注射KA制备黑质损伤模型,然后进行Fluoro-Jade C染色标记和计数分析黑质内变性死亡神经元.结果显示:Fluoro-Jade C(FJC)染色可清晰地显示MPTP或KA致小鼠黑质损伤后出现的变性神经元,包括变性神经元的细胞胞体和突起.在中脑组织切片上,MPTP模型与KA模型黑质致密部内有许多FJC染色阳性的变性神经元,而对照组动物黑质内未见FJC染色阳性的变性神经元分布.本研究结果表明:FJC方法能够很好地显示MPTP和KA动物模型黑质内神经元的变性死亡,具备很高的对比度和分辨率,是一种特异性标记黑质变性神经元树突、轴突和胞体的优良染色方法.
关键词： Fluoro-Jade C MPTP Kainic Acid 神经元变性 黑质 -
MPTP对小鼠不同脑区神经递质代谢酶基因表达的影响
1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)能够诱发黑质纹状体系统多巴胺能神经元损伤并产生与帕金森病类似的症状.本实验通过MPTP注射诱导C57BL小鼠神经元损伤,利用逆转录PCR方法检测酪氨酸羟化酶(TH)、单胺氧化酶B(MAO-B)以及胆碱乙酰基转移酶(ChAT)三种神经递质代谢相关基因的表达变化.结果发现,在小鼠黑质与纹状体中,MPTP导致TH基因表达显著降低,而MAO-B与ChAT基因的表达变化在黑质与纹状体则有所不同,在黑质MPTP导致MAO-B与ChAT基因表达的上升,在纹状体则略有下降.
