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传染性单核细胞增多症淋巴结病临床病理观察
目的 探讨传染性单核细胞增多症淋巴结病(LIM)的临床特点.方法 采用免疫组化及原位杂交方法并结合临床资料分析LIM的临床特点、实验室检查结果、EBV感染情况及免疫表型.结果 临床特点:患者均为青少年(平均年龄19岁),起病急,病程短(平均病程18天),发热,淋巴结肿大,短期自愈.实验室检查:血常规中单核细胞比例及绝对值增高,肝功能异常,外周血异型淋巴细胞增多,EBV抗体阳性.镜检:淋巴结基本结构不同程度破坏,斑驳状,无包膜增厚及间质纤维增生.免疫组化:CD30并且CD20(+)的免疫母细胞散在分布,强弱不等.4例标本原位杂交EBER均(+).结论 LIM是EBV感染引起的青少年自限性淋巴组织增生性疾病.诊断时需综合临床特点、实验室检查、EBV感染及免疫表型多方面因素,以免过诊断.
关键词： 传染性单核细胞增多症淋巴结病 免疫表型分析 原位杂交 -
血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤骨髓/外周血瘤细胞免疫表型分析
血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AITL)是一类以异形T淋巴细胞增生伴显著血管增生,以及滤泡树突状细胞增生为主要表现,为一类来源于成熟T细胞的淋巴瘤[1].过去AITL瘤细胞形态学诊断缺乏特异性的鉴别特征,而近来AITL瘤细胞CD10[2]和CXCL13表达意义的发现为AITL的诊断提供了有力的支持,为了更深入了解AITL瘤细胞的免疫表型特征及发病机制,我们利用流式细胞术分析AITL患者骨髓及外周血有核细胞表面CD分子标志,期望获得更多信息.
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多发性骨髓瘤免疫表型及胞浆轻链检测的临床意义
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是以克隆性恶性浆细胞(骨髓瘤细胞)在骨髓中异常增殖,并伴有单克隆免疫球蛋白增多为特征的疾病[1],其发病机制尚不清楚.特点是单克隆的浆细胞在骨髓中异常增殖(可达骨髓内细胞总数的90％),破坏骨髓造血功能并分泌单克隆免疫球蛋白或其多肽链亚单位(如轻链),并通过多种机制产生临床症状及体征.MM多发于中老年人,临床表现多种多样,主要表现为骨髓瘤细胞增生、浸润和破坏骨组织及髓外其他组织,出现骨痛、病理性骨折、贫血、出血,以及骨髓瘤细胞产生大量单克隆免疫球蛋白而出现感染、高钙血症、肾脏病变、高黏滞血症、淀粉样变等,尤其在疾病早期,表现无特异性,极易漏诊和误诊.本文通过四色流式细胞术对其进行免疫表型分析,以期望为MM的诊断提供更可靠的实验室依据和方法.
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加强临床流式细胞免疫表型分析的质量控制
流式细胞术(FCM)的应用越来越广泛,流式细胞免疫表型分析已经成为常用的检查项目.FCM可以通过多参数分析异质性细胞群的免疫表型,从双参数分析外周血细胞到参数以上分析骨髓细胞膜、细胞浆和细胞核等多种抗原成分,涉及临床多种疾病的诊断、治疗与预后等诸方面.
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CD7和(或)CD56阳性急性髓系白血病患者干细胞表型分析及在微量残留病检测中的意义
目的 探讨CD7和(或)CD56阳性急性髓系白血病(AML)干细胞免疫表型特点及微量残留病(MRD)与白血病干细胞LSC的关系.方法 采用四色流式细胞术,以4～6组四色抗体组合检测51例CD7+和(或)CD56+及CD34+CD38+初治AML患者(除外M3)白血病细胞免疫表型,并检测CD34+CD38-Lin-LSC中CD123、CD90、CD117、CD7和CD56的表达.以28名正常人骨髓作为对照,以CD34+CD38+细胞同时表达CD7和CD56作为白血病细胞标志,对26例CD7+和(或)CD56+AML患者的53份标本进行MRD监测.结果 CD7+和(或)CD56+初治AML患者CD34+CD38+细胞和CD34+CD38-Lin-干细胞中,CD7+细胞相对比例分别为(77.39±20.71)%,(44.57±22.70)%,CD56+细胞分别为(56.71±32.56)%,(33.51±29.64)%,均明显高于正常对照(P＜0.01和P＜0.05).CD34+CD38-Lin-干细胞中低表达CD90(P＜0.01),高表达CD123(P＜0.01);CD117的表达和正常对照相比差异无统计学意义(P＞0.05).在随访的CD7+和(或)CD56+患者中,MRD阳性组CD34+CD38-Lin-亚群中CD7和(或)CD56表达的相对比例和实际比例增高的患者比例明显高于MRD阴性组,CD7+细胞实际比例增高的患者分别为71%(21例中15例)与16%(25例中4例)(P=0.001),相对比例增高的患者分别为81%(21例中17例)与24%(25例中6例)(P=0.000).CD56+细胞实际比例增高的患者分别为100%(4例)与12%(25例中3例)(P=0.001),相对比例增高的患者分别为75%(4例中3例)与20%(25例中5例)(P=0.031).CD7+AML患者中初治时CD7+CD34+CD38-Lin-细胞亚群实际比例高的患者治疗后较易出现MRD(P＜0.05).结论 CD7和CD56在AML患者的异常表达发生在AML细胞分化的早期阶段,治疗后CD34+CD38-Lin-干细胞中CD7+和CD56+细胞比例高的患者易出现MRD.
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610例急性髓系白血病免疫表型和白血病相关免疫表型分析
目的 探讨急性髓系白血病(AML)患者免疫表型和白血病相关的免疫表型(LAIP)特征及在微量残留病(MRD)检测中的意义.方法 采用CD45/SSC设门四色流式细胞术,检测610例AML患者和20名健康志愿者下列抗原的表达:CD7、CD117、CD33、CD34、CD10、CD19、CD56、CD38、CD13、CD14、CD64、CD9、CD16、CD2、CD5、CD11b、CD123、HLA-DR.结果 正常骨髓中CD34+和CD117+SSC值低(SSClow)的细胞比例分别为(0.35±0.15)%和(0.76±0.31)%.CD34+SSClow细胞中绝大多数细胞共表达CD13、CD33、CD38、CD117、HLA-DR(84%～94%).CD9和CD15的相对比例为20%和33%,而CD11b、CD56、CD19和CD64的相对比例均低于10%,CD7为12%.CD117+SSClow细胞中,CD19+、CD11b+、CD56+和CD7+细胞相对比例低于10%,CD9+细胞为14%,CD38+和HLA-DR+细胞的相对比例为87%和91%,其余抗原(CD15、CD13、CD33、CD34)均在30%～50%.AML患者中CD117、CD38表达率约为95%,CD33、CD9表达率约为84%.HLA-DR和CD13表达率分别为77.23%和75.25%.CD64和CD34的表达率分别为64.41%和59.51%.CD15表达率为43.06%,CD11b表达率为22.07%.86.39%的AML患者LAIP阳性,以AML-M1和M3高,AML-M4Eo低.LAIP主要表现为交叉系列抗原表达和非同期共抗原表达,前者以CD34与CD7、CD19、CD56同时阳性为主.在非同期抗原表达中,CD34+CD64+、CD117+CD11b+、CD117+CD38-/dim、CD117+HLA-DR-/dim正常值在0.01%左右,与AML之间的对数差大于3,为灵敏度较高的LAIP.结论 多参数流式细胞术适于80%以上AML患者MRD检测.
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成人急性双表型白血病的临床研究
目的 分析成人急性双表型白血病的临床、生物学特征和预后.方法 对65例成人急性双表型白血病患者,应用多色流式细胞术进行免疫分型,采用短期培养R显带技术进行染色体核型分析.治疗方案分为针对急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓系白血病(AML)或二者兼顾的方案,bcr-abl阳性和(或)Ph阳性者部分加用伊马替尼.结果 ①成人急性双表型白血病占急性白血病的6.7%,男性多见,WBC≥130×109/L者占52.3%,WBC≥100×109/L者占16.9%.②以同时表达髓系和B系抗原者常见,占81.5%,髓系和T系抗原共表达者占10.8%,髓系、B系、T系抗原共表达者占4.6%,B系和T系抗原共表达者占3.1%.③53例患者进行了染色体核型分析,正常核型者22例,占41.5%,其中3例为bcr.abl(+);异常核型者高达58.5%,涉及9、22、4、11、8、14、12号等染色体,Ph阳性或bcr-abl阳性者占32.1%.④65例患者完全缓解31例(56.4%).17例Ph阳性或bcr-abl阳性者完全缓解6例(35.3%).结论 成人急性双表型白血病高白细胞者多见,以髓系和B系抗原共表达常见,异常核型发生率高,Ph染色体阳性者多见,治疗效果较差.
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误诊为慢性淋巴细胞白血病的套细胞淋巴瘤一例
患者,女,61岁,于2008年10月因手外伤作血常规检查时发现白细胞升高.血常规:WBC 36×109/L,中性粒细胞(N)占0.05,淋巴细胞(L)占0.95,HGB 126 g/L,PLT 205×109/L.乳酸脱氢酶510 U/L.骨髓象:成熟淋巴细胞增多,细胞质稀少,核染色质致密,无明显核仁.骨髓成熟淋巴细胞免疫表型分析:Igλ+细胞98.7％、CD19+细胞95.5％、CD5/CD19+细胞6.1％、CD22+细胞92.6％、CD20+细胞92.4％、CD23+细胞55.7％、CD10+细胞0、FMC7 47.1％、CD38+细胞1.4％、ZAP70 22.8％.查体未见异常,颈、胸、腹部CT显示无淋巴结及其他器官浸润.骨髓染色体核型:46,XX,2q+,6q+,t(11;14) (q13;q32),12q -,13q -,i(17q),19p+.曾在外院诊断为慢性淋巴细胞白血病(CLL),并给予苯丁酸氮芥、氟达拉滨及环磷酰胺等治疗.
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胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤42例临床分析
目的:探讨胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤的临床表现、病理特征和治疗方法.方法:回顾性分析1990年7月至2008年5月间42例胃MALT淋巴瘤的病理特征和临床分期等资料,并按治疗方式不同划分为单纯根除Hp组(7例)、单纯手术组(9例)、手术+根除Hp组(20例)、手术+放、化疗组(6例),对各治疗组随访结果使用Kaplan-Meier方法进行生存率分析,Log Rank检验评估各组间的统计学差异.结果:全组患者均接受胃镜检查,确诊率26.2%(11/42),HP染色阳性率70.6%(24/34).免疫表型分析证实全部为B细胞性淋巴瘤.全组Cotswolds改良Ann Arbor分期:ⅠE2期17例,ⅡE1期16例,ⅡE2期6例,ⅢE期2例,Ⅳ期1例.各组5年生存率分别为100%、83.7%、82.4%及43.0%(P=0.027).结论:胃MALT淋巴瘤的临床表现和辅助检查均无明显特异性,故初治时接受手术治疗的患者较多.病理确诊者可首选根除Hp治疗,疗效与手术无异;晚期患者可在术后选择放、化疗等综合治疗,但远期生存率相对较差.
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儿童急性髓性白血病治疗现状
1 急性髓性白血病(AML)的诊断和鉴别诊断小儿AML的确诊主要依靠骨髓涂片检查.其分型基本与成人相同,即M1至M7型.大约有20%的患儿仅通过其原始细胞形态和组化染色难以鉴别白血病类型,应行细胞遗传学和免疫表型分析,以利于AML与急性淋巴细胞白血病(ALL)或AML亚型之间的鉴别[1].Downs 综合征的婴儿型急性白血病应与一过性骨髓增殖性疾病相鉴别.对急性早幼粒细胞白血病(APL)的诊断应注意到成人或大龄儿童假性白血病的表现有时类似于早幼粒细胞白血病,如在药物或绿脓杆菌感染诱发的粒细胞缺乏症恢复期,即可在骨髓中出现早幼粒细胞的一过性增殖.出现假性白血病时,血小板计数多正常,其白细胞减少的程度较AML更为显著(<1.0×109/L),早幼粒细胞含有明显的副核区(Golgi体)并缺乏颗粒,也不见奥氏小体.故疑有假性白血病时,如能观察数日,可看到骨髓中幼稚细胞的成熟,外周血嗜中性粒细胞亦增多,则可与APL区分开来.
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急性髓系白血病微小残留病检测的临床意义
目的 探讨微小残留病(MRD)检测在急性髓系白血病预测复发及指导治疗的临床意义.方法 选择32例初治急性髓系白血病(除外M3)患者128份标本,利用多参数流式细胞术(FCM)进行微小残留病检测,CD45/SSC设门,选择2-4组四色抗体组合,从诱导化疗后第21天开始,每1-3个月监测一次.结果 按照首次诱导治疗后第21天MRD水平将32例AML分为高(MRD＞1×10-2)、中(1×10-2＞MRD＞1×10-4)、低(MRD＜1×10-4)三组.高、中、低三组的2年复发率依次为83.3%、11.1%、0.其中MRD＞1×10-2组2年复发率高,MRD＜1×10-4组预后好,两组的复发概率差异有统计学意义(P＜0.05).形态学与MRD动态监测两年结果显示,其中26例缓解,6例复发.6例形态学复发者均在MRD持续阳性4-6个月出现.形态学完全缓解时MRD阳性组与阴性组的复发率有显著性差异(P＜0.05).结论 MRD＞1×10-2高度提示复发,MRD阳性比形态学复发出现早,连续监测MRD对个体化治疗和预测复发有重要意义.
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胞浆轻链测定在多发性骨髓瘤的微小残留病变检测中的价值
多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是以克隆性恶性浆细胞（骨髓瘤细胞）在骨髓中异常增殖，并伴有单克隆免疫球蛋白（monoclonal immuno-globulin）增多为特征的疾病，多发于中老年人，临床表现多种多样，主要表现为骨髓瘤细胞增生、浸润和破坏骨组织及髓外其他组织，出现骨痛、病理性骨折、贫血、出血，以及骨髓瘤细胞产生大量单克隆免疫球蛋白而出现感染、高钙血症、肾脏病变、高粘滞血症、淀粉样变等。经典的化疗方案缓解率低，随着新药问世、联合化疗和骨髓造血干细胞移植等新技术的应用，MM 患者的缓解率不断提高。近年来研究表明，多参数流式细胞术免疫表型分析有助于MM 诊断，缓解后患者体内 MRD 分析是判断疗效和预后的重要指标，目前国内有关 MRD 的报道多是应用于骨髓瘤细胞的膜表面免疫表型。本研究应用多参数流式细胞术进行胞浆轻链的测定来建立MRD 分析方案，并探讨其临床意义。
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MDS转化为AML-M0一例
目的：为诊断微小分化型急性髓细胞白血病（AML-M0）提供现实依据。方法报告一例骨髓增生异常综合征（MDS）转化为AML-M0的临床过程。结果 MDS虽经有效治疗，但多数仍转化为白血病，其中以AML为主。结论 AML-M0的诊断在细胞形态学及化学染色的基础上必须应用细胞表型免疫分析等现代手段确诊。
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上海市医疗机构白血病／淋巴瘤免疫分型检验技术人员培训班开办
近二十多年来，免疫表型分析为血液／淋巴系统恶性肿瘤的诊断、分类和疗效监测提供了重要信息，并在新版的世界卫生组织（WHO）造血系统肿瘤分型指南中占据了主要地位。但目前国际和国内尚无其它被广为接受的、统一的、标准化的检测方案。国内外各实验室对于白血病／淋巴瘤免疫表型分析所应用的指标、指标个数以及抗体荧光颜色搭配不尽相同，尤其是国内不同实验室的检测人员对于白血病／淋巴瘤的临床背景以及分析策略的掌握程度也有较大差异，这些现状都可能成为白血病／淋巴瘤免疫表型分析质量的影响因素，从而进一步影响临床的诊断和治疗效果。
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急性髓系白血病177例免疫分型特点及预后分析
目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者免疫分型的特点及临床意义.方法:采用CD45/SSC双参数散点图设门方法对177例急性髓系白血病患者进行三或四色流式细胞术免疫分型分析.结果:177例AML显示,CD33,CD38,CD117,CD13及HLA-DR高度表达,阳性率分别为92.66%,81.36%,75.14%,68.93%和67.80%.40.7%的AML患者伴有淋系抗原表达,常见的是CD7(22.6%),其次是CD19(7.91%).结论:多色流式细胞仪术免疫分型对AML的诊断及预后具有重要意义.
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T淋巴细胞亚群分析全血质控物的评价及应用调查
目的 对自制T淋巴细胞亚群分析全血质控物的均匀性和稳定性进行评价;发放质控物进行室间质量评价.方法 依据ISO Guide 35<标准物质/标准样品的定值-通用原则和统计原理>的要求,对自制质控物CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+淋巴细胞百分比3个指标的均匀性、稳定性进行评价,同时以进口质控物作为对照.在组织淋巴细胞免疫表型分析项目室间质量评价活动中,向178家实验室同时发放进口质控物和自制质控物,并对调查结果进行分析和比较.结果 自制20081027、20081111批号质控物及进口质控物的3个指标均匀性的不确定度范围分别为0.189%～0.318%、0.184%～0.280%、 0.209% ～ 0.284%.稳定性评价结果显示,自制质控物的3个指标随着保存时间变化的线性趋势无统计学意义(P>0.05),自制20081027、20081111批号质控物及进口质控物的3个指标长期稳定性的不确定度范围分别为0.554%～1.515%、0.189%～1.006%、0.328%～1.786%.室间质量评价调查结果显示,BD公司仪器组自制质控物与进口质控物的各指标变异系数(CV)范围分别为:2.94%～8.17%、2.84%～6.89%;Beckman Coulter公司仪器组自制质控物与进口质控物的各指标CV范围分别为:3.07%～14.25%、1.84%～5.14%.结论 自制质控物的均匀性、稳定性符合要求,可用于流式细胞仪T淋巴细胞亚群分析的质量控制.
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流式细胞术在淋巴瘤免疫表型分析中的作用
目的：探讨流式细胞术免疫表型分析在淋巴瘤诊断中的应用。方法采用流式细胞术对92例淋巴瘤患者进行免疫表型分析。结果在92例受检者中，B细胞 NHL67例，T细胞 NHL25例。B细胞 NHL标记抗原出现频率较高的为CD19、CD22；T细胞NHL标记抗原出现频率高的为CD7。结论流式细胞术在淋巴瘤的诊断分型方面有重要意义。
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46例上呼吸道非何杰金淋巴瘤临床病理及免疫组化观察
上呼吸道淋巴瘤为上呼吸道较常见的恶性肿瘤,发生于该部位的淋巴瘤,往往有其特殊的临床表现.我们收集了从1992年到2000年46例上呼吸道淋巴瘤病例,进行临床病理特点及免疫表型分析,为临床诊断和治疗提供可靠依据.
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急性早幼粒细胞白血病微小残留病灶的检测
目的 探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)患者免疫分型与微小残留病灶的特点及临床意义.方法 对30例急性早幼粒细胞白血病患者采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫分型分析,多色单克隆技术检测微小残留病灶.结果 30例急性早幼粒细胞白血病(APL)主要阳性表达为CD33、CD117、CD13、CD38、MPO和CD11B(阳性表达率分别为100％、70.00％、76.67％、53.33％、76.67％、10.0％);HLA-DR和CD34阳性表达率分别为6.67％和30.0％.结论 免疫分型在细胞形态学和细胞化学染色基础上对急性早幼粒白血病诊断与分型极为重要,同时对急性早幼粒细胞白血病的免疫分型的诊断结果更为客观准确.微小残留病灶的检测对白血病患者的复发能够提前预测,对于疾病的判断和预后至关重要.
关键词： 急性早幼粒细胞白血病 免疫表型分析 流式细胞术 微小残留病灶 -
健康儿童淋巴细胞免疫表型参考范围与年龄关系的研究进展
在人体发生、发育、成熟及衰老的过程中,免疫系统的特性和功能不断地发生着变化.淋巴细胞免疫表型与机体的免疫功能相关,当免疫功能紊乱时,淋巴细胞免疫表型各亚群之间比例会失去平衡,致使部分细胞免疫或体液免疫功能低下或亢进,导致一系列相关疾病的发生.随着流式细胞仪的广泛应用,淋巴细胞免疫表型分析已成为临床上细胞免疫监测的常规指标.
