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半套式逆转录聚合酶链反应技术诊断中枢神经系统肠道病毒感染
肠道病毒(EV)感染常见,所致疾病轻重不一,可表现为无症状感染或严重的脑膜炎、脑炎和心肌炎等。长期以来缺乏有效的病原学诊断方法。组织培养分离病毒费时,阳性率低,且病合1至2周得到结果时已无益于临床诊断和治疗。聚合酶链反应(PCR)方法能快速、特异地检测出脑膜炎病人脑脊液(CSF)中EV RNA,但感染初期及回顾性研究的临床标本中病毒滴度较低,扩增结果多为阴性,病毒培养也常常失败。我们采用二步扩增半套式PCR方法检测无菌性脑膜炎病人脑脊液(CSF)和血清标本中肠道病毒RNA,发现该方法较常规一步PCR敏感性至少增加100倍。10例病毒培养阳性的CSF标本,二次PCR后10例均阳性;同时期的血清标本病毒培养4例阳性,而二次扩增后7例阳性。10例CSF培养阴性者二次扩增后4例CSF阳性,2例血清阳性,对照组全部阴性。表明本方法特异敏感,对临床EV感染的病原学诊断有较高的使用价值。
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通用引物检测脑炎患者脑脊液疱疹病毒DNA及其酶切鉴定
疱疹病毒(HSV)引起的脑炎不经治疗死亡率高达70%, 若获早期诊断治疗, 死亡率可降至(19~28)%[1].临床迫切需要快速、特异、敏感的诊断方法.90年代后, 陆续有用PCR对病毒性脑炎作病原诊断的报道,但用通用引物检测病人脑脊液(CSF)中疱疹病毒DNA的报道并不多见.我们选择疱疹病毒科病毒DNA多聚酶基因高保守区一对引物,对中枢神经系统(CNS)感染病人CSF作PCR扩增和病毒分离,以研究病毒性脑炎的快速诊断方法.
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颅内感染治疗19例临床分析
一、资料与方法2003年5月至2006年5月承德市中心医院收治术后颅内感染病人19例,男11例,女8例,年龄11~65岁,平均46岁.颅内感染病因:颅脑损伤8例,幕上肿瘤开颅术5例,小脑肿瘤、Chiari畸形等后颅窝开颅术3例,高血压脑出血开窗血肿清除术2例,脑积水脑室-腹腔分流术1例.患者通常急性起病,表现为寒战高热,体温38.5℃~41℃,清醒患者有头痛,查体可有脑膜刺激征.少数病人表现为低热.血常规白细胞总数增高,中性粒细胞80%~90%;CSF外观浑浊,甚至为脓性,白细胞1000~1000×106,CSF中蛋白含量增高,糖含量低,高颅压.病人脑脊液细菌培养阳性,致病菌依次为肺炎双球菌5例,嗜血流感杆菌3例,金黄色葡萄球菌3例,肺炎球菌3例,大肠杆菌2例,链球菌2例,绿脓杆菌1例.
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HPLC法测定人脑脊液中万古霉素浓度的不确定度评定
目的:评定高效液相色谱法(HPLC)测定人脑脊液中万古霉素(vancomycin,VCM)浓度的不确定度.方法:分析并评定HPLC法测定人脑脊液中VCM浓度过程中的不确定度来源并进行合成.结果:人脑脊液中VCM低浓度(13.2 μg· mL-1)和高浓度(438μg· mL-1)的扩展不确定度分别为1.03和22.0μg· mL-1(P=95%,k=2).结论:HPLC法测定人脑脊液中VCM浓度的不确定度在低浓度时主要由回收率、基质效应和生物样品配制引入,在高浓度时主要由基质效应、生物样品配制和重复性引入.
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开颅手术患者脑脊液和血浆异丙酚浓度与脑电双频谱指数的关系
异丙酚麻醉时,脑电双频谱指数(BIS)能准确地反映患者的意识状态,镇静深度与异丙酚血药浓度的相关性良好[1,2].但药物效应取决于效应室浓度.动物实验结果表明脑脊液异丙酚浓度与BIS相关性良好[3].人脑脊液异丙酚和血浆异丙酚浓度与BIS的关系尚需进一步探讨,本研究拟观察开颅手术患者脑脊液和血浆异丙酚浓度与BIS的关系.
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尿酸含量在中枢神经系统感染性脑脊液中的临床观察
1.对象正常脑脊液样本60例,中枢神经系统感染病人脑脊液35例,其中外伤手术后感染脑脊液20例,非外伤单纯细菌感染脑脊液15例.
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系统性红斑狼疮患者血清及脑脊液D-二聚体的水平及临床意义
D-二聚体(D-dimer)是因子Ⅻ作用后交联纤维蛋白裂解产生的片断,既反映体内纤溶活性,又反映凝血活动,是血栓形成或溶解的标志物[1],而正常人脑脊液(CSF)中D-dimer为阴性.系统性红班狼疮(SLE)患者CSF中D-dimer含量情况及血清D-dimer和CSF中D-dimer相互间变化规律报道较少.
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国外老年医学文献题录选译
1.更年期神经内分泌细胞 cAMP 及兴奋性的研究[英]/Janse C…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-503~5142.老龄鼠新皮质乙酰胆碱释放增效剂 Linopirdine 引起 Fos 的变化[英]/Dent GW…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-489~4943.老龄 SAMP8 鼠在恐惧状态下记忆的丧失及对此的反应[英]/Ohta A …∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-479~4844.老龄鼠(SAM)海马、小脑及桥脑微血管的超微结构及通透性研究[英]/Ueno M …∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-479~4845.中年人白天睡眠意识的丧失[英]/G audreau H…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-461~4686.MRI检测记忆丧失老年人认知功能障碍的遗传性研究[英]/Bartres-Faz D…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-474~4597.帕金森病和阿尔茨默病病人心理抑郁的敏感性研究[英]/Szili-Torok K…∥Neurobiol Aging. -2001,22(3).-435~4388.APP23 转遗传基因鼠神经胶质细胞和淀粉样蛋白的3D-重现研究[英]/Stalder M…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-427~4349.阿尔茨默病病人迈内特基底细胞核α、β雌激素受体的表达研究[英]/Ishunina TA…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-417~41610.阿尔茨默病病人血清中α1凝乳蛋白酶的检测[英]/Scancchi R…∥Neruobiol Aging.-2001,22(3).-413~416.11.抗高血压药治疗痴呆及痴呆的发生率[英]/In't Veld BA…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-407~41212.阿尔茨默病病人脑脊液中N(varepsilon)(γ-谷氨酰基)赖氨酸水平的测定[英]/Nemes Z…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-403~40613.阿尔茨默病病人脑脊液中蛋白糖基化作用研究[英]/Shuvaev VV…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).397~40214.β淀粉样蛋白蛋白质前体分子监控蛋白 Calreticulin 功能的变化[英]/Johnson RJ…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-387~39515.转遗传基因APP+PS1鼠认知缺陷和沉淀物的相关性研究[英]/Gordon MN…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-377~38516.淀粉样蛋白斑点沉积物中Presenilin-1和APP717突变的作用研究[英]/Ishii K…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-367~37617.人前大脑皮质突触及与年龄变化有关的定量评价分析[英]/ Scheff SW…∥Neurobiol Aging. -2001,22(3).-355~36518.何种突触影响衰老及原发性老年痴呆与寿命的关系[英]/Morrison JH∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-349~35019.原发性老年痴呆与寿命的突触的关系[英]/Terry RD…∥Neurobiol Aging.-2001,22(3).-347~34820.老龄F344/Brown-Norway F1杂鼠丘脑下部脑垂体肾上腺皮质调节障碍[英]/Herman JP…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2).-323~33221.钙拮抗剂影响老龄高血压鼠脑毛细血管壁损伤[英]/Farkas E…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2),-329~30922.NGF治疗对交感神经和感觉虹膜神经的反应[英]/Gavazi I…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2).-287~29623.F344鼠前皮质正肾上腺素神经支配对年龄的影响[英]/Ishida Y…//Neurobiol Aging.-2001,22(2).-283~28624.细胞色素C氧化酶缺乏细胞对海马和脉络膜丛的影响[英]/Cottrell DA…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2).-265~27225.半盲状态下前大脑皮质的作用[英]/Schreursa BG…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2).-237~24626.老年人脑神经病理流行病学的两种遗传多态现象研究[英]/Heldt N…//Neurobiol Aging.-2001,22(2).-227~23527.微血管淀粉样沉积在肝、转基因新生丝虫属中的作用[英]/Link CD…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2).-217~22628.脑脊液中Abeta40和Abeta42(43)水平的检测[英]/shoji M…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2),-209~21529.前颞性痴呆星形胶质细胞的退化[英]/Martinac JA…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2).-195~20730.阿尔茨默病病人脑中丙烯醛的增加[英]/Martinac JA…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2).-187~19431.阿尔茨默病病人种族和性别神经病理性损伤的流行病学调查[英]/Sandberg G…∥Neurobiol Aging.-2001,22(2).-169~17532.老龄Fisher344鼠海马缺陷在NR2B亚群的表达[英]/Clayton DA…∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-165~16833.阿尔茨默病和老年病的异同点[英]/Morgan D∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-159~16034.阿尔茨默病β样淀粉样蛋白的变化[英]/Terry D∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-15535.阿尔茨默病β样淀粉样蛋白的变化[英]/Joseph J∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-131~14636.FTDP-17显型遗传异质性研究[英]/Arai T…∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-127~12937.PHF和PHF样小纤维[英]/Ihara Y∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-123~12638.痴呆的基因型、显型及需要解决的某些问题[英]/Bird TD∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-113~11439.FTDP-17亚型的相关性研究[英]/Reed LA…∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-89~10740.早期阿尔茨默病Lithostathine 和胰腺炎相关蛋白的研究[英]/Duplan L…∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-79~8841.已确定的迟发性阿尔茨默病HLAⅠ期,Ⅱ期和Ⅲ期水平的测定[英]/Lehmann DJ…∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-71~7742.年龄的相关因素与脑血流变化的研究[英]/Niehaus L…∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-35~3843.老龄鼠海马、新大脑皮质L-型和N-型钙通道自动射线照相术[英]/Kelly KM…∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-17~2344.阿扑脂蛋白E缺乏鼠海马中AMPA受体和LTP的调节研究[英]/Valastro B…∥Neurobiol Aging.-2001,22(1).-9~1545.衰老的内分泌学研究[英]/Martin F∥Age Ageing.-2001,30(2).-18046.老年人的帕金森氏综合征和帕金森氏症候群[英]/McMahon DG∥Age Ageing.-2001,30(2).-180~18147.椎骨性骨髓炎[英]/Khan SA…∥Age Ageing.-2001,30(2).-17848.急性卒中后血压的变化[英]/Bhalla A…∥Age Ageing.-2001,30(2).-178~17949.急性精神紊乱引起抽搐性癫痫[英]/Roffe C∥Age Ageing.-2001,30(2).-176~17750.维生素D缺乏[英]/Ganeshram KN…∥Age Ageing.-2001,30(2).-175~176
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脑出血病人脑脊液锌、镁、钙含量的测定
脑出血病人脑脊液微量元素的测定目前还未见报告,我们从1994年~1996年对31例脑出血病人的脑脊液中锌、镁、钙三种微量元素的含量进行了测定,现分析如下.
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胶质细胞及胶质瘤细胞分泌β-微量蛋白
目的:探索神经胶质细胞及人脑胶质瘤细胞是否能分泌β-tp.方法:用ELlSA方法分析了胶质瘤病人脑脊液中和细胞培养液中β-tp水平.结果:3种胶质细胞瘤和患者脑脊液中均能测得β-tp,其浓度是正常人的10~12倍.培养的大鼠胶质细胞随细胞数增加而β-tp水平增高.在胶质瘤细胞株(SHG-44,U-251,BT-325)培液中β-tp浓度与细胞增殖的增加成正比.但在非胶质瘤细胞株,如卵巢癌细胞,神经母细胞瘤细胞及前列腺癌细胞株等,β-tp的浓度与细胞增殖的趋势相反.结论:胶质细胞和人脑胶质瘤细胞能分泌β-tp,细胞分泌β-tp水平的高低由细胞类型及细胞的多寡决定.
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高效液相色谱法测定隐球菌性脑膜炎患者脑脊液中两性霉素B和伊曲康唑含量
目的 建立人脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中两性霉素B(amphotericin B,AmB)和伊曲康唑(itraconazole,ITZ)含量测定的高效液相色谱方法,并用于隐球菌性脑膜炎患者脑脊液样品的测定.方法 脑脊液样品经固相萃取后直接进样.AmB测定采用Gemini 5w C18柱,流动相为5 mmol/L乙二胺四乙酸二钠(醋酸调pH至4.5)/乙腈(62/38,V/V),流速0.3 mL/min,DAD检测器:检测波长410 nm.ITZ测定采用YMC C18柱,流动相为0.2%三氟乙酸/乙腈(45/55,V/V),流速1.1 mL/min,荧光检测器:激发波长260 nm,发射波长365 nm.结果 AmB和ITZ的线性范围均为5 ng/mL~100 ng/mL,线性相关系数大于0.999,低定量限为5 ng/mL,低、中、高浓度质控样品在日内、日间精密度均小于7.6%.结论 该方法灵敏、快速、简便,适用于隐球菌性脑膜炎患者治疗药物监测.
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脑损伤的标志物
为及时诊断脑损伤而开展的生物标志物的研究已取得进展.所谓脑损伤标志物是指在脑损伤时可释放人脑脊液和血液中、且可检出的物质.目前研究较多的标志物如下.
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心理干预对行腰椎穿刺术患者焦虑、恐惧情绪的影响
腰椎穿刺术是神经科常用检查手段之一,它对神经科疾病的诊断和鉴别诊断有非常重要的意义.因要抽取病人脑脊液进行化验,常使病人产生焦虑、恐惧情绪,引起心理和生理反应,甚至有的病人因此而拒绝这项检查,鉴此我们对40例病人进行心理干预,现将结果报告如下.
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脑脊液免疫球蛋白和寡克隆带检测以及IgG指数和IgG合成率的临床意义
脑脊液免疫球蛋白的测定对于中枢神经系统疾病的发病机制、诊断、治疗有重要的意义,现将我科近2年来检测97例病人脑脊液免疫球蛋白的结果分析如下.
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癫痫患者血清和脑脊液一氧化氮含量的测定
一氧化氮(NO)是一种生物调节因子,其半衰期短(3~5 s),多以稳定的代谢性产物亚硝酸盐(NO-2)和硝酸盐(NO-3)形式存在.我们采用荧光分光光度法对24例癫痫(EP)患者和16例正常人脑脊液和血清中的NO-2含量进行了检测.现将结果报告如下.
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HPLC测定人脑脊液中的万古霉素和去甲万古霉素
目的 采用HPLC法测定人脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的含量.方法 采用Diamonsil C18柱(150 mm ×46 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH3) (20∶80),流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长236 nm,万古霉素和去甲万古霉素互为内标.结果 脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的线性范围分别为0.0977~97.68(r2=0.9995)、0.104~104μg·mL-1 (r2 =0.9996),检测限分别为0.0484、0.0524μg·mL-1;方法回收率分别为99.8% ~ 109.0%、99.6~107.0%,绝对回收率为95.6% ~ 100.0%、95.9% ~ 99.6%,批内、批间RSD均≤4.0%;室温下放置8h、冻融循环3次和冰冻21d的稳定性均良好.结论 所用方法简便准确,适宜于临床脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的分析.