首页 > 文献资料
-
超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱同时测定樟芝菌粉中6个核苷类化合物及其指纹图谱研究
目的:建立超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)同时测定樟芝菌粉中尿嘧啶、胞苷、腺嘌呤、鸟苷、胸苷和腺苷6个核苷类成分及其指纹图谱的分析方法.方法:采用Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵溶液(pH 8.5)为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃.在电喷雾正离子模式下,输入各化合物的分子离子质量数得到相应的提取离子色谱图,以色谱峰面积进行定量分析;以腺苷为参照物,测定其指纹图谱,并作相似度评价.结果:尿嘧啶、胞苷、腺嘌呤、鸟苷、胸苷和腺苷的浓度分别在0.3571～35.71μg· mL-1(r =0.9993)、0.2032 ～20.32μg· mL-1(r =0.9995)、0.0601 ～6.01 μg· mL-1(r =0.9998)、1.6160～161.60μg· mL-1(r =0.9996)、0.4809 ～48.09 μg· mL-1(r =0.9998)、0.5988 ～ 59.88 μg·mL-1(r=0.9993)范围内与各自峰面积值呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为106.7％、103.3％、98.8％、94.6％、97.1％、102.6％,RSD分别为3.9％、5.3％、5.7％、4.8％、6.4％、4.8％;初步建立了以9个共有峰为特征指纹信息的樟芝菌粉UPLC-MS提取离子流(EIC)指纹图谱.结论:该定量方法快速、准确,所建立的提取离子流指纹图谱专属性强,两者结合可实现对樟芝菌粉内在质量的综合评价和较全面控制.
-
RP-HPLC法同时测定熟地黄中5个核苷类成分的含量
目的:建立同时测定熟地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷5个核苷类成分的RP-HPLC法.方法:采用Diamonsil C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.04 mol·L-1磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm;柱温30℃.结果:次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷浓度分别在1.0～16.0 μg·mL-1(r=0.9999)、5.0 ～ 80.0 μg·mL-1(r=0.9999)、1.0 ～ 16.0 μg·mL-1(r =0.9997)、1.25 ～20.0 μg· mL-1(r=0.9999)、1.0～16.0μg· mL-1(r =0.9999)范围内线性良好.加样回收率为98.1％ ～ 101.0％.结论:该方法可以用于熟地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的含量测定.
-
RP-HPLC同时测定暗紫贝母中10个核苷及碱基类成分的含量
目的:建立RP-HPLC-DAD同时测定暗紫贝母药材中5个核苷类活性成分(尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷、肌苷)及5个游离的碱基(腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶)含量的方法.方法:采用Agilent Zorbax Bonus-RP C18色谱柱(4.6 mum×250mm,5 μm)；流动相为甲醇和水,梯度洗脱,流速1 mL·min-；检测波长260 nm；柱温30℃.结果:胞嘧啶、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷、腺嘌呤、肌苷、胸腺嘧啶、鸟嘌呤、尿嘧啶的质量浓度分别在1.78～56.80mg·L-1、1.84～59.00mg·L-1、1.58～50.60 mg·L-1、1.73 ～55.30 mg·L-1、1.78～57.10 mg·L-1、1.63～52.10 mg·L-1、1.79～57.20 mng·L-1、1.80～57.70 mg·L-1、1.63 ～52.30 mg·L-1、1.63～52.30 mg · L-范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率为97.7％～103.2％,RSD ≤2.2％.结论:建立了RP-HPLC-DAD同时测定暗紫贝母药材中10个核苷及碱基类成分含量的方法,该方法简单,重复性好,准确可靠；暗紫贝母药材中鸟苷、尿苷、胸苷、腺苷含量较高；青海久治、大通产暗紫贝母药材中核苷含量均高于四川松潘；青海2个产地比较,大通产暗紫贝母药材中核苷含量又明显高于久治.
-
高效液相色谱法测定北虫草中6个核苷含量
目的:建立同时测定北虫草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)腺苷含量的高效液相色谱法.方法:采用Grace Prevail Select C18(4.6 mm×150 mm,3μm)分析柱,以水(A)-甲醇(B)为流动相二元梯度洗脱(0 ～6.0min,0→5％B;6.0～15.0 min,5％B→25％B;15.0 ～22.0 min,25％ B→100％B),流速1 mL·min-,检测波长260 nm,柱温25℃,进样量5 μL.结果:尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)腺苷质量浓度分别在1.0 ～ 192.0μg· mL-1(r=0.999 9)、1.0～191.0 μg·mL-(r=0.999 9)、0.6～110.0 μg·mL-1 (r=1.000 0)、1.0～186.0 μg·mL-1(r=1.000 0)、1.0～194.0 μg·mL-1(r=0.9999)和0.8～160.0 μg·mL-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好,加样回收率(n=6)分别为100.6％(RSD=3.2％)、98.4％ (RSD=4.8％)、99.2％ (RSD=4.6％)、99.4％ (RSD=2.5％)、101.4％ (RSD =2.1％)和99.2％ (RSD=3.2％);不同来源北虫草产品核苷含量差别较大.虫草属特征性成分N6-(2-羟乙基)腺苷的含量仅次于含量丰富的虫草素,肌苷在所有样品中均未检出.5个核苷类成分在总含量高的样品中分别为0.68、0.84、1.22、11.12和5.32 mg.g-1.结论:本文将虫草属的6个主要核苷类特征性成分同时作为评价指标,对市场中的北虫草样品进行了检测分析.本文建立的方法能够快速、简便地测定北虫草中主要核苷的含量,可用于北虫草的质量检测.
-
以腺苷为对照的高效液相色谱法测定三磷酸腺苷二钠注射液含量
目的:建立以腺苷为对照的高效液相色谱法测定三磷酸腺苷二钠注射液含量.方法:采用依利特Hypersil C8(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温35℃,以0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(含0.161％四丁基溴化铵,pH 7.0)为流动相,流速为1.0 mL · min-,检测波长259 nm,以磷酸腺苷二钠和腺苷相对分子质量的理论比值2.062为系数、腺苷为对照外标法计算三磷酸腺苷二钠的含量.结果:腺苷质量浓度(C)在5.056～404.4 ng·mL-范围时与峰面积(A)呈良好的线性关系,线性方程为A =3.219×104C+31.70,r =0.999 9;三磷酸腺苷二钠质量浓度(C)在9.939 ～795.1 ng·mL-1范围时与峰面积(A)呈良好的线性,线性方程为A=1.567×104C+ 22.16,r=1.000.腺苷和三磷酸腺苷二钠的定量限分别为7.6×10-5 mg ·mL-1和2.6×10-4 mg·mL-1,重复性和中间精密度的RSD均为1.0％,三磷酸腺苷二钠回收率为101.1％(RSD =0.9％,n=9).含量测定结果范围为94.2％ ～ 109.2％.结论:本实验建立的分析方法解决了未能获得含量确定且稳定的三磷酸腺苷对照的问题,提高了方法的专属性和定量准确性,可用于测定三磷酸腺苷二钠注射液的含量.
关键词： 腺苷 三磷酸腺苷二钠注射液 高效液相色谱法 校正系数 外标法 -
板蓝根口服液定性定量方法的研究
目的:建立板蓝根口服液的定性定量方法.方法:采用TLC法,以板蓝根对照药材、精氨酸、L-脯氨酸和亮氨酸对照品为对照进行定性鉴别;采用HPLC法同时测定尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春和腺苷4个核苷类成分的含量.HPLC条件:采用C18色谱柱,流动相A为甲醇,流动相B为水,梯度洗脱[0～3 min,A-B(3∶ 97);3～20 min,A-B(10∶ 90);20～ 40 min,A-B(70∶ 30);40 ～50 min,A-B(70∶ 30)],流速0.8 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温为30℃.结果:薄层色谱斑点清晰,分离效果好,专属性强,阴性无干扰.4个核苷类成分含量测定经方法学验证,线性良好,制剂加样回收率(n=9)均符合含量测定要求.结论:该方法操作简便,重复性好,结果准确可靠,为含板蓝根制剂的质量评价提供了可靠的参考依据.
-
不同加工方法中何首乌核苷类成分的含量测定及主成分分析
目的:建立QTRAP UPLC-MS/MS同时测定何首乌中10种核苷类成分(核苷及碱基)含量的方法,分析不同加工方法对何首乌核苷类成分含量的影响.方法:样品用超纯水室温下超声提取,提取液经高速离心处理,取上清液,经Waters AtlantisT3色谱柱(2.1 mm×150mm,3μm),以甲醇-5 mmol·L-醋酸铵(含0.1％冰醋酸)为流动相,0.4 mL·min-梯度洗脱,质谱采用正离子多反应监测(MRM)模式测定不同加工何首乌药材中10种核苷类成分的含量,用主成分分析对核苷类成分进行综合评价.结果:10种核苷类成分具有良好的线性关系,相关系数均大于0.99,且线性范围满足实验要求;平均加样回收率为98.80％ ～ 102.54％,RSD在1.78％～ 3.02％之间.何首乌核苷类成分中以尿苷、腺嘌呤、鸟苷、胞苷含量较高;不同加工方法对何首乌核苷类成分含量具有一定影响,何首乌厚片80℃烘干样品中核苷类成分综合质量较好.结论:本文为揭示加工方法对何首乌化学成分的影响及优选何首乌适宜产地和加工方法提供基础资料.
-
高效液相色谱法测定不同产地棘托竹荪中4个核苷含量
目的:运用高效液相色谱法分析棘托竹荪中尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷的含量.方法:采用Grace Prevail Select C18(4.6mm×150mm,3μm)分析柱,以水(A)-甲醇(B)为流动相二元梯度洗脱(0～6.0 min,0→5％B;6.0 ～ 15.0 min,5％B→25％B;15.0～20.0 min,25％ B--100％B),流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温25 ℃,进样量10 μL.结果:尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷浓度分别在2.0～181.0μg·mL-1(r=1.000)、1.5 ～190.0μg·mL-1(r=0.9999)、0.8～126.4 μg·mL-1(r=0.9999)和1.0～171.2μg·mL-1(r=1.000)范围内线性关系良好,加样回收率(n=6)分别为100.7％ (RSD=3.4％)、98.5％(RSD＝4.2％)、99.5％ (RSD =3.6％)和99.1％(RSD=3.8％);采自不同产地的棘托竹荪核苷含量差别较大,四川青川木鱼产的竹荪中尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷4个核苷类成分含量是所有测试样品中高的,含量分别为0.77、0.06、1.19和1.60 mg·g-1.结论:本法能够快速、简便地测定棘托竹荪中主要核苷的含量,为其质量控制提供保证.
-
腺苷A2A受体:机体免疫调节的重要分子
腺苷A2A受体是目前已知的四种腺苷受体(A1、A2A、A2B和A3)之一,其在免疫细胞上呈高水平表达,活化后可通过对免疫细胞功能的调控而密切参与炎性反应、免疫耐受等免疫调节.但在不同的病理条件下,A2A受体活化的免疫调节作用方向不同、产生的效应不同.因此,对该受体产生不同免疫调节作用原因及机制进行深入的研究,以有效发挥其保护作用,而避免损伤效应,将为在临床疾病的免疫治疗中合理利用A2A受体调节剂奠定基础.
-
腺苷及其受体在生殖系统的研究进展
腺苷是一种内生性核苷,由腺嘌呤和核酸糖组成,广泛分布于哺乳动物各个组织中.细胞内的前体腺嘌呤核苷酸如三磷酸腺苷(adenosine 5’-triphosphate,ATP)、二磷酸腺苷(adenosine 5’-diphosphate,ADP)和单磷酸腺苷(adenosine 5’-monophosphate,AMP)等经核苷磷酸水解酶和5’-外核苷酸酶水解为腺苷,并经腺苷转运载体分泌于胞外,腺苷及其受体在体内发挥着至关重要的作用,如在神经系统和呼吸系统中等.在生殖系统中腺苷及其受体与阴茎勃起功能和精子活力有关;调节睾丸细胞分泌;在输精管中发挥神经样调节作用;调节附睾和前列腺平滑肌收缩;参与调节卵巢细胞内分泌和卵母细胞成熟;调节输卵管细毛运动和子宫平滑肌舒缩;调节胎盘血流量等.本文就腺苷及其受体在生殖系统的表达及作用作一综述.
-
心肌局部缺血的预适应
Preconditioning of the myocardium with short episodes of sublethal ischemia will delay the onset of necrosisduring a subsequent lethal ischemic insult. Ischemic preconditioning seems to involve a variety of stress signalswhich include activation of membrane receptors and signaling molecules such as protein kinase C, mitogen-acti-vated protein kinases, opening of ATP-sensitive potassium channel, and expression of many protective proteins.The purpose of this review is to assess the current position in this field and to facilitate future research.
-
致敏离体豚鼠气管横向或螺旋条对腺苷的收缩
AIM: To determine the role of the epithelium in the responses to adenosine of isolated trachea from ovalbuminsensitized guinea pigs. METHODS: Spirally cut tracheal preparations were superfused or immersed in organ baths and transversely cut strips were immersed. Epithelium was removed mechanically from some strips and confirmed by histological examination of a random sample. Tissues were from unsensitized or ovalbuminsensitized guinea pigs. Isometric tension was measured and responses to adenosine recorded. RESULTS: In sensitized tissues, contractile responses to adenosine were evident as contractions of superfused spirals or as rightwards shift of the concentration-response curve compared with non-sensitized immersed spirals. Epithelium removal potentiated relaxation responses in both nonsensitized and sensitized strips indicating release of contractile mediators in both tissues. Dipyridamole potentiated relaxation responses in sensitized tissues with and without epithelium. CONCLUSION: Sensitization reveals a contractile response to adenosine. The epithelium is not involved in this contractile response nor is it the major site of uptake of adenosine in both sensitized and non-sensitized tissues.
-
CD39在转化医学中的作用
CD39/膜外三磷酸腺苷二磷酸水解酶-1是一个细胞膜整合的跨膜结构，细胞外有核苷脱磷酸化作用的结合区域的糖蛋白酶，其表达于细胞膜外表面，能使细胞外三磷酸腺苷、二磷酸腺苷水解为磷酸腺苷。目前，研究发现 CD39在多器官缺血再灌注损失、血栓形成、器官移植排除反应、肿瘤发生等疾病中起着重要作用，并且在以上疾病中的表现存在交叉作用和共同作用。
-
负荷超声心动图的进展
负荷超声心动图(以下简称负荷超声)是指应用生理性或药物性的干预手段，通过生理或药物的刺激作用，激发心血管系统的反应，将负荷状态超声图像与静息状态所见相对比，……
-
AD相关睡眠障碍可能与BF区胆碱能对腺苷的负性调控有关
研究显示睡眠障碍在阿尔茨海默症(AD)患者中普遍存在,但其内在的分子机制仍不十分清楚;同时大量研究发现胆碱能与腺苷在睡眠中均起到重要作用.本文对相关文献进行研究、探讨,认为AD患者相关睡眠障碍可能与基底前脑(BF)区胆碱能对腺苷的负性调控有关.并进一步提出胆碱能-NTPDase3-腺苷-睡眠和胆碱能-NF-κ B-腺苷A1R-睡眠两条调控通路.希望通过本文介绍能为AD相关睡眠障碍的分子机制研究提供参考.
-
抱茎苦荬菜药材中总黄酮和腺苷的含量测定
目的:建立测定抱茎苦荚菜药材中总黄酮和腺苷的方法.方法:采用UV-VIS法测定总黄酮的含量.采用RP-HPLC法测定腺苷的含量,色谱条件为:XDB-C18(150 mm x4.6mm,5μn)色谱柱,以乙腈-水(体积比为6:94)为流动相,检测波长为260nm,流速为Iml/min-1.结果:腺苷进样量在0.072-3.6μg范围内线性关系良好(r=0.999),平均回收率为100.3%,相对标准差(RSD)为1.35%.结论:方法准确、可靠,适合测定抱茎苦荚菜药材中总黄酮和腺苷的含量.
-
高效液相色谱法测定人工虫草菌丝体中腺苷的含量
目的:采用HPLC法测定7种人工虫草菌丝体中腺苷的含量.方法:固定相:Kromasil 5u 100A C18柱;流动相:磷酸盐缓冲液(pH6.5)[取0.01 mol·L-1磷酸二氢钠68.5 ml与0.01 mol·L-1磷酸氢二钠31.5 ml,混合(pH6.5);流速:1ml·min-1;检测波长:260nm;柱温:室温.结果:7种人工虫草菌丝体的腺苷含量均符合标准.
-
腺苷对大鼠脊髓损伤后内源性阿片肽的影响
目的观察外源性腺苷对脊髓损伤后β-内啡肽(β-EP)、强啡肽A(DynA)的影响,探讨腺苷对脊髓继发性损伤的保护机制.方法腹侧压迫法造成大鼠T13脊髓中度损伤,伤后24 h观察神经功能,处死后取出伤段脊髓,放射免疫法测定β-EP、DynA的含量.治疗组于伤前30 min腹腔内分别预注射腺苷A1受体激动剂环己基腺苷(CHA)和腺苷重吸收阻断剂HWA285,对照组注射等量的生理盐水.结果对照组伤后24 h β-EP、DynA含量显著升高,而治疗组均明显低于对照组(P＜0.05),且神经功能显著改善.结论腺苷对内源性阿片肽的抑制作用可能是腺苷对脊髓损伤保护作用的机制之一.
-
腺苷药物负荷心肌灌注评价冠脉支架再狭窄的临床价值
目的 探讨腺苷负荷心肌灌注评价冠脉支架再狭窄的临床价值.方法 选择75例支架置入术后3个月-3年的冠心病患者,男52例,女23例;年龄为35-75岁;临床有胸闷、胸痛等症状33例.所有患者在2个周内完成腺苷药物负荷及静息心肌灌注,评价心肌灌注评价冠脉支架再狭窄.结果 75例冠脉支架植入术后患者中有24例出现新发狭窄,狭窄发生率32％.单支病变10例,双支病变者12例,3支病变2例.其中心肌梗死患者8例,非心肌梗死患者16例;有典型症状的33例患者中发生再狭窄有19例,无症状出现狭窄5例,1例证实为假阳性.14例有症状者3例后经造影证实有狭窄伴有侧支循环.结论 腺苷负荷诊断冠心病支架植入术后再狭窄的效能较高,在评价冠脉支架植入术后再狭窄中具有较高临床应用价值.
-
经胸多普勒超声心动图对糖尿病患者左心功能及冠脉血流储备的研究
目的 探讨应用腺苷经胸多普勒超声心动图对Ⅱ型糖尿病(DM)患者冠状动脉血流储备(CFR)和心功能的评价.方法 正常对照组21例,Ⅱ型糖尿病患者23例,两组年龄、性别及一般情况相匹配,应用经胸多普勒超声心动图(TTDE)测量左室射血分数LVEF,在彩色血流显像引导下,显示位于室间沟心外膜脂垫内冠状动脉左前降支远段(LAD)长轴切面,记录静脉注射腺苷(0.84mg/kg,6min内)前后LAD血流频谱,计算CER.结果 经胸超声心图检测LAD远段血流的成功率为88%.对照组腺苷激发后LVEF、LAD血流峰值流速显著增加,DM组注射腺苷后LVEF、LAD血流峰值流速无显著改变,DM组的CER显著低于对照组(3.0±0.04vs 1.75±0.12,p＜0.01).结论 DM患者左室收缩和舒张功能减低,冠脉血流储备下降,提示DM患冠脉微循环功能异常,经胸超声心动图为评价冠脉微循环提供了一种无创、简单易行的新技术,具有重要临床价值.
关键词： 经胸多普勒超声心动图 冠脉血流储备 Ⅱ型糖尿病 腺苷
