人宫颈癌FHIT基因的表达改变与HPV16感染的关系

目的 探讨FHIT基因表达改变和HPVl6感染与人宫颈癌发生的关系.方法 采用反转录-巢式聚合酶链反应方法测定5种人宫颈癌细胞株(SiHa、HeLa、RJC-1、CSl213、C4-1)和58例宫颈癌组织与18例正常宫颈对照中FHIT mRNA的表达;回收7例FHIT基因不同的转录扩增产物,纯化后进行DNA测序;PCR技术检测组织中HPV16型的感染状况.结果 SiHa、HeLa和C4-1宫颈癌细胞中有FHIT基因转录异常;宫颈癌组织中39例(67.2%)存在FHIT基因异常表达,显著高于正常对照组0例(0%)(P<0.05),37例(63.8%)有HPV16感染,显著高于正常对照组1例(5.0%)(P<0.05).宫颈癌组织中有HPV16感染患者的FHIT基因表达异常数(30/37)显著高于HPVl6未感染的患者(9121),二者之间存在相关性(P<0.01),FHIT基因的异常表达和HPV16的感染与患者的年龄、临床分期、肿瘤直径、病理分级及是否伴淋巴结转移无相关性(P>0.05).序列分析发现FHIT基因转录本主要存在不同程度的外显子的缺失,以第5位和第6位外显子的缺失为主,未见未知序列的插入和点突变.结论 FHIT基因在人宫颈癌组织中的异常表达率明显增高,且与HPV16的感染有关,这些改变可能在人宫颈鳞癌的发生中起着重要作用.

男性不育患者Y染色体基因缺失检测的临床意义

全世界约15%的夫妇被不育所困扰,其中约一半为男性不育.引起男性不育的原因可以按病变所在部位的不同分为睾丸前、睾丸和睾丸后三个部位[1].据文献报道,约40%以上的不育男子有精子生成异常,但却常找不到其特殊的病原.近几年分子生物学技术的发展和应用,尤其是对Y染色体上基因的研究证实:Y染色体上的微小缺失可以造成生育障碍,导致无精子症或严重少精症.

患无精、少精症的日本男子Y染色体D16-22区间基因缺失筛查

烧伤后不同瘢痕组织中p16基因的缺失与突变分析

目的:了解不同瘢痕组织基因组中抑癌基因p16第2外显子(exon2)有无缺失及突变.方法:取临床深Ⅱ度烧伤愈后瘢痕标本,取材时间:愈后4、8、18、32个月增生性瘢痕组织,愈后32个月稳定瘢痕、瘢痕疙瘩,每组5例,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)单链构象多态性(Single-strand conformation polymorphism, SSCR)分析方法,动态观察p16 exon2有无缺失及突变发生.结果:PCR结果显示,基因组中p16 exon2无缺失发生,SSCP分析显示各种瘢痕组织中p16 exon2无突变发生.结论:在烧伤愈后不同瘢痕组织中,抑癌基因p16 exon2未发现缺失及突变存在, 不同瘢痕组织间无差异,肿瘤中多见的p16 exon2在基因组水平上缺失及突变不是导致瘢痕过度形成的原因.

RNA干扰(RNAi)的研究进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在多种生物细胞中,外源或内源性双链RNA(dsRNA)可以高效促使胞内同源mRNA降解,进而阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型.作为一种全新的基因治疗的方法,本文将对RNAi的作用机制、研究策略以及应用研究进展等内容进行综述.

AZF基因缺失与男性精子缺陷的相关性

目的 了解AZF基因与男性精子缺陷发生的关系.方法 采用多重聚合酶链反应-琼脂糖电泳检测技术,利用挑选的AZFa、AZFb、AZFc共3个区域的6个序列标签位点(STS),对80例精子正常男性、142例特发性无精子症和113例重度少精子症病人进行AZF微缺失分析.结果 正常男性组未检出AZF基因缺失;特发性无精子症组检出AZF缺失21例(14.79%),其中AZFa缺失1例,AZFb缺失3例,AZFc缺失14例,AZFb+AZFc缺失3例;重度少精子症组检出AZF缺失14例(12.39%),其中AZFc缺失12例,AZFb+AZFc缺失2例.特发性无精子症组、重度少精子症组AZF缺失率与正常男性组比较,差异有显著性(χ2=11.39、8.92,P<0.01);而特发性无精子症组与重度少精子症组间差异无显著性(P>0.05).结论 AZF微缺失是引起特发性无精子症和重度少精子症的原因之一,与男性精子缺陷发生密切相关.

脑血管病病人ACE基因缺失多态性的初步研究

①目的探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因缺失多态性与中国人脑梗死、高血压脑出血的关系.②方法应用聚合酶链反应(PCR)方法,检测60例正常人,21例原发性高血压无心脑血管并发症病人,58例脑梗死病人和31例高血压脑出血病人的ACE基因型.③结果ACE基因缺失多态性与原发性高血压无相关关系(x2=0.467 1,P>0.05).高血压脑出血组DD基因型频率为26%,显著高于正常对照组的10%(x2=5.014 1,P<0.05).脑梗死组DD基因型频率为21%,与正常对照组相比无显著性差异(x2=3.398 4,P＞0.05);并发高血压的脑梗死病人及女性脑梗死病人DD基因型频率分别为27%和26%,显著高于正常对照组(x2=6.435 6,4.067 7,P>0.05).④结论在中国高血压病人中,ACE基因缺失多态性可能是脑梗死、脑出血的易患因素,并且可能是女性病人脑梗死的独立危险因素.

FHIT基因表达缺失在甲状腺乳头状癌中的研究

目的 研究脆性组氨酸三联体基因(fragile histidine triad gene,FHIT)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)及其配对癌旁组织(non-carcerous epithelium,NCE)中的表达及其临床意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测60例PTC及相对应NCE中FHIT基因的表达情况.结果 PTC中FHIT基因表达阳性率为45.0％ (27/60),明显低于NCE 100.0％ (60/60),其差异有显著性(P＜0.01);PTC中FHIT基因mRNA表达水平与患者的病理学分级、TNM分期、淋巴结转移有相关性,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 FHIT基因转录表达异常可能为一重要的分子改变参与了PTC的发展及演变,可望成为PTC病情监测及预后判断的一个生物学指标.

半巢式甲基化特异性PCR在急性淋巴细胞白血病患者p15基因甲基化检测中的应用

目的 探讨半巢式甲基化特异性PCR( hn-MSP)的特性并了解p15基因甲基化和缺失在急性淋巴细胞白血病(ALL)发病中可能起到的作用.方法 运用hn-MSP方法和基因组硫化修饰PCR( BSP)后直接测序方法,分析在25例初诊或复发不同阶段ALL患者以及部分恶性血液病细胞株中p15基因的甲基化和缺失状态,以10名健康者或非恶性血液病患者为对照组.以Molt-4细胞株为阳性对照,以对照组单个核细胞为阴性对照,分析hn-MSP方法的敏感性和特异性.结果 hn-MSP产物克隆测序结果与BSP结果一致,hn-MSP检测p15基因甲基化敏感性可达到1×10-5.25例ALL患者p15基因甲基化发生率为68.0％(17例)；25例ALL患者中3例p15基因外显子1缺失.对照组p15基因无甲基化或缺失.结论 p15基因甲基化状态在ALL患者中有较高的检出率,hn-MSP对分析p15基因甲基化状态具有较高的特异性和敏感性.

荧光原位杂交技术在检测慢性淋巴细胞白血病ATM基因缺失中的应用

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者中ATM基因缺失情况及其与临床分期的相关性.方法 以骨髓涂片档案片为标本,运用荧光原位杂交(FISH)技术和SpectrumOrange~(TM)标记的位于11q22.3的序列特异性DNA探针ATM对28例初诊的CLL患者进行了ATM缺失的检测,临床分期按照Binet分期方法 ,采用Fisher确切概率法分析ATM基因缺失与患者初诊时临床特征间的关系.结果 FISH分析中,28例CLL患者中有4例(14.3%)检出ATM基因缺失,9例Binet A期患者中1例(11.1%)存在del(ATM)异常;8例Binet B期患者中1例(12.5%)存在异常;11例Binet C期患者中2例(18.2%)存在异常.Fisher确切概率法分析显示ATM基因缺失与年龄、性别、临床分期无明显相关性(P>0.05).结论 以骨髓涂片档案片为样本进行FISH检测,方法 简便,结果 可靠,便于血液系统克隆性疾病的回顾性遗传学分析,ATM基因缺失是CLL患者常见的细胞遗传学改变,其对中国CLL患者的预后预测价值有待进一步深入研究.

Sinofiler试剂盒性别检测异常2例分析

本文报道在亲子鉴定中经Sinofiler试剂盒检验Amelogenin基因座出现X和Y基因各缺失1例,以供同行借鉴.1案例资料1.1样本案例1被鉴定人:王某,8岁,外观男性.案例2杜某,30岁,外观男性,胡须、喉结清晰可辨,育有1女;杜某胞弟.以上3人血样各1份.对照样本:已知正常男性、女性血样各1份.

人类精子发生中的遗传异常

精子发生是一个复杂的过程，受到染色体上众多基因的调控。染色体及其携带的基因缺失或异常可以不同程度地影响到精子的发生，并影响男性的生育能力［1］。几乎90%的男性不育患者具有不同程度的精子发生障碍，尽管其病因还不完全清楚，但遗传异常是主要的原因之一［2］。一些研究发现，男性不育患者的外周血淋巴细胞染色体检查异常，并与严重的少精子或无精子相关。但是，男性不育不仅与体细胞染色体异常有关，还可由于生殖细胞的染色体异常所致。据报道4%的男性不育与性染色体异常有关，1%与常染色体异常有关。由于检测方法和病例选择的差异，染色体异常的发生率波动于2.2%～10.3%。生精障碍中基因异常约占30%，多数伴有特发性少精子及无精子症。在男性不育（尤其是无精子症）患者中，多数病因不清楚，染色体异常或 Y 染色体微缺失发生接近20%（2.2%～19.6%）。

共享CRISPR/Cas9成果，谱写医学发展新篇章

2014年CRISPR/Cas9（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，成簇的规律间隔的短回文重复系列区域）基因工程编辑技术的公布，在整个医学生物研究领域，引起了席卷世界的一场“风暴”。CRISPR/Cas9系统基因编辑技术现已用于医学、生物学、农业、渔业等各行各业，而且揭示出了它的创新革命前景。目前该项技术在医学领域用于构建动物疾病模型、人肝癌小鼠模型、基因治疗与预防、生物物种的改良、解密人类基因功能、促进组织和器官再生、与诱导多能干细胞（IPS）技术等相结合，使修复后的IPS重新发展成正常的组织和器官，供患者移植。随着研究的深入，有可能通过CRISPR/Cas9系统对人类社会基因进行扫描，定位并治愈疾病。

黑斑息肉综合征息肉病理特性及肿瘤易感基因位点的分析

通过对黑斑息肉综合征(PJS)大肠息肉病理特性、基因缺失、点突变几种基因变异的分析,鉴定与PJS相关的肿瘤易感基因,并明确基因所在区域和变异方式.本研究对PJS大肠息肉及癌变组织与其它类型的大肠腺瘤样息肉进行组织结构学对照并采用PCR、PCR/SSCP分析、微卫星检测和DNA测序分析技术,对染色体出现频率高的3p14的遗传标记进行检测分析.病检息肉标本152枚,息肉性质为腺瘤样息肉.研究表明PJS患者大肠息肉有很高的癌变率,在3p14区域存在多种方式的基因变异,提示该区域可能存在与PJS和癌变相关的重要基因.

杜氏肌营养不良病儿心电图特点及其基因型分析

目的 分析杜氏肌营养不良(DMD)病儿的心电图特点,探索早期心电图异常改变及与其基因型关系,为临床诊治提供参考.方法 回顾性分析246例DMD病儿的270份心电图特点;选择抗肌萎缩蛋白(dystro-phin)基因含有大片段外显子缺失或重复病儿的158份心电图,分析心电图异常与其相应基因型关系.结果 心电图异常比例为22.96％(62/270),主要常见异常表现为左心室大/左心室高电压 、异常Q波 、V1导联深S波 、V1导联R/S>正常范围 、右心室大 、ST-T改变;其中,反映左心室心电生理改变表现的左心室大/左心室高电压 、V1导联S波加深及异常Q波所占总异常心电图的比例为66.13％(41/62).DMD病儿基因外显子缺失分布主要集中在外显子3-21与45-52区域,其中外显子1-2、44-54缺失组与其他位点缺失组病儿的心电图异常比例比较差异具有统计学意义(χ2=5.895,P<0.05).结论 DMD病儿心电图异常是较常见的现象,而且是以左心室大/左心室高电压 、V1导联S波加深 、异常Q波为常见的表现.Dystrophin基因外显子1-2、44-54是DMD病儿心电图异常的高发区域.

多重PCR法检测东北地区Dystrophin基因缺失及其应用

目的:了解东北地区Dystrophin基因缺失分布特点及进行产前基因诊断.方法:用12对引物以多重PCR法检测98例DMD/BMD患者:将高危男性胎儿行缺失检测.结果:缺失检出率为53%;22例高危胎儿中9例男性胎儿为缺失型,缺失位点与先证者相同.结论:首次对东北地区筛查缺失发现Dystrophin基因缺失主要分布于两个热区内,外显子8附近区域可能是该地区缺失断裂高发区;多重PCR法为检测患者及产前基因诊断提供了捷径,尤其对散发家系是可行的并且有其优越性.