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常用器械消毒液被L型细菌污染的调查
L型细菌是细菌因变异而产生的细胞壁缺陷型细菌,呈革兰氏阳性和阴性,在普通培养基和血培养基上不生长,在高渗培养基上能生长[1].为了解常用小型器械消毒液在应用过程中被细菌污染的情况,笔者1997年4月以来对我院及8个医疗点使用的消毒液被L型细菌污染情况进行调查,报告如下.
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新净界在危重患者口腔护理中的应用
患者由于卧床不能自理、禁食等原因,不能经口进食,唾液分泌减少,口腔内水分自然丢失,口腔黏膜干燥,细菌繁殖力增强.在传统口腔护理的基础上,本研究应用新净界进行口腔护理取得了显著效果,对金黄色葡萄球菌等多种G+ 细菌有明显的灭菌作用,对部分G-细菌有抑制作用.它是一种生物工程蛋白酶,能专一降解金黄色葡萄球菌等细胞壁,具有甘氨酸肽键结构的细菌,通过裂解其细胞壁达到杀菌的作用[1],从而降低了患者口腔溃疡及口臭的发生率,现报告如下.
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临床标本中应重视马红球菌的分离
马红球菌Rhodococcus equi属红球菌属,曾归于棒杆菌属,马红球菌原称为马棒状杆菌.但近年来学者对其细胞壁进行分析后建议列入红球菌属,命名为马红球菌.该菌为食草动物的致病菌,过去极少引起人类致病.近年来引起艾滋病、骨髓炎和肾移植术后等患者的肺部感染逐年增多.从临床感染性标本中检出本菌的报道呈上升趋势,被认为是机会致病菌[1].但对其生物学特性及药敏监测的报道甚少,工作中极易被漏检,正确掌握其鉴定要点及药敏的监测,对识别和治疗该菌引起的感染性疾病,具有重要的临床价值.本院于2006~2011年从临床感染性标本中共分离出13株马红球菌.现将其鉴定特点与药敏实验的报道如下.
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邯郸地区小儿肺炎支原体感染情况
肺炎支原体是介于细菌和病毒之间的能独立存活的无细胞壁的病原微生物,是小儿获得性肺炎的常见病原体之一.有文献报道近年来肺炎支原体的感染率逐年上升[1],其阳性率与季节有关[2-4].肺炎支原体严重危害儿童的健康,为此笔者收集2011年5月至2012年4月来本院儿科及病房就诊的呼吸道感染儿童进行分析,现报道如下.
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药敏试验在泌尿生殖道支原体感染治疗中的应用
支原体是一类无细胞壁,可在人工培养基上生长繁殖的小原核细胞型微生物,可造成人体多部位的感染[1].解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)作为支原体的主要类型,可导致泌尿生殖道感染,是引起非淋菌性尿道炎的主要病原体.随着抗菌药物的广泛使用,耐药支原体的检出率日益增高,给临床治疗带来不少困难,因此药敏试验在临床治疗中的重要性逐渐受到重视.为了解本地区泌尿生殖道支原体感染状况及其对不同药物的体外敏感性,笔者对397例泌尿生殖道感染患者的分泌物进行了支原体培养、鉴定及体外药敏检测,结果报道如下.
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干酪乳杆菌细胞壁成分构建川崎病动物模型
目的:建立干酪乳杆菌细胞壁成分(LCWE)诱导的川崎病动物模型,为后续川崎病的相关研究提供实验材料。方法LCWE组小鼠经腹部及肌肉注射LCWE ,每只注射0.1 mL(含200 mg LCWE),PBS组小鼠注射0.1 mL PBS ,分别于注射后第1、3、28天对小鼠进行眼眶取血,并解剖取心、肺、肝、肾、脾等脏器组织进行病理切片、H E染色,观察组织病理变化,并对小鼠血液进行血常规检验。结果 LCWE组在注射LCWE后第1、3、28天,WBC逐渐上升,在注射LCWE后第3天PLT及MPV上升,第28天基本恢复正常。病理切片显示LCWE组小鼠心脏组织可见血管壁增粗且周围有炎症细胞浸润,有些可出现斑块。结论成功建立了川崎病动物模型。
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低频低强度超声对白色念珠菌急性损伤效应的实验研究
目的:探讨低频低强度超声对白色念珠菌的急性损伤情况,以及对其细胞壁通透性的影响。方法取5 ml浓度为1.5×107 cfu/ml的白色念珠菌菌液于六孔板中。采用频率为42 kHz、探头直径为5 cm的圆形平面超声治疗头,分别选择超声强度0.13 W/cm2、0.35 W/cm2辐照六孔板中的白色念珠菌菌液5 min(0.13 W/cm2组、0.35 W/cm2组);对照组不经超声辐照。培养48 h计数各组菌落在培养皿上的存活数。扫描电镜和透射电镜观察细菌外部形态、内部结构的损伤情况。结果对照组菌落计数为21 cfu,0.13 W/cm2组菌落计数为20 cfu;0.35 W/cm2组菌落计数为14 cfu。低频低强度超声辐照白色念珠菌后,扫描电镜下可见0.13 W/cm2组和0.35 W/cm2组菌体均明显肿胀、外形变大,细胞外液进入细胞内明显增加;0.35 W/cm2组透射电镜下见核物质在边缘聚集,细胞壁受损,形成空泡,大量细胞外液进入细胞。结论随着超声辐照强度的增加,白色念珠菌的死亡率显著增加;低频低强度超声辐照白色念珠菌能促进其细胞壁通透性的增加。
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真菌性阴道炎与抗真菌药
真菌(霉菌)有别于细菌,其个头大,细胞壁肥厚,有明显的细胞核.通常寄生于健康人的口腔、消化道和阴道等处.一旦人体的抵抗力降低或正常的菌群失去平衡,真菌便可在阴道繁殖,引发感染从而导致真菌性阴道炎.
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利福平对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用
目的 探讨利福平对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用.方法 将脓肿分枝杆菌分别接种于含256μg/mL利福平和无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养.含利福平的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基内返祖培养.将含利福平和无利福平的培养物及返祖菌进行细胞壁染色和透射电镜观察其细胞壁完整性,扫描电镜观察其表面微观结构.含利福平的培养物转种L型菌琼脂平板培养,无利福平的培养物和返祖菌转种营养琼脂平板培养,观察其菌落形态.对诱导前接种菌和返祖菌的16S rDNA进行鉴定.结果 在含256μg/mL利福平浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌的细胞壁缺失,形态为球形,L型细菌琼脂平板上菌落呈典型油煎蛋样,而无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上呈圆形菌落.256μg/mL利福平浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌经返祖后,返祖菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上菌落也呈圆形.16S rDNA鉴定返祖菌与诱导前接种菌的同源性达100%,为同一种细菌,即脓肿分枝杆菌.结论 利福平成功诱导脓肿分枝杆菌L型.
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肺炎球菌感染性疾病的研究进展
肺炎球菌感染性疾病由肺炎球菌感染所引起,在世界各地均导致很高的发病率和死亡率[1~3].本文就肺炎球菌感染性疾病的病原菌、流行病学临床特点、治疗和预防要点做一系统综述.1 肺炎球菌的微生物学、血清型及其发病机制1.1 微生物学肺炎球菌为革兰氏阳性的兼厌氧微生物,这种链球菌为柳叶刀形,可以单个、成对(双球菌)或以短链形式出现.肺炎球菌的细胞壁主要由肽聚糖、磷壁酸以及可维持细胞壁完整性的许多肽的侧链所组成[1].
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C-反应蛋白的测定及临床应用
C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是早认识的重要的急性时相蛋白,Tillett和Francis于1930年首次在急性大叶性肺炎患者的血液中发现,能与肺炎链球菌细胞壁中的C-多糖发生特异性沉淀反应.1941年被测知是一种蛋白质,故称为C-反应蛋白.采用超敏感方法检测到的CRP即称超敏CRP(high sensitive C-reactive protein,hs-CRP).CRP在炎性反应或组织损伤发生后6~8小时开始升高,24~48小时达峰值,可升高到平时的100~1000倍而不同于其他蛋白升高(2~3倍),被誉为炎症标志物[1].CRP可于炎性反应7~12天后可恢复正常水平.测定CRP对于鉴别感染、监测疾病活动情况及严重程度、器质性疾病的筛检、监测器官移植受体排斥反应及疗效观察、冠心病等急性血管意外事件的预测与诊治等有很好的导向作用.
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壳寡聚糖对变形链球菌影响的电镜观察
[目的]研究壳寡聚糖对变形链球菌细胞壁结构的影响,探讨壳寡聚糖对变形链球菌产生抑制作用的可能机制.[方法]选择变形链球菌S.mutans ATCC25175作为实验菌株,实验分壳寡聚糖处理组及空白对照组,厌氧环境(80%N2、10%H2、10%CO2)下培养24 h,使用扫描电镜及透射电镜分别观察变形链球菌细胞表面和细胞壁及细胞内部的变化情况,了解壳寡聚糖对变形链球菌结构的影响.[结果]扫描电镜观察显示壳寡聚糖处理后的变形链球菌细胞表面有凹陷及内容物溢出等表现,而透射电镜观察显示壳寡聚糖使变形链球菌细胞壁的完整性被破坏,胞浆内有空泡形成.[结论]本实验结果提示壳寡聚糖可能通过影响变形链球菌细胞壁结构和功能的完整性而产生抑制作用.
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双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β-防御素2(hBD-2)mRNA的表达
目的:检测双歧杆菌对人肠腺上皮细胞β-防御素-2基因的激活作用及其活性组分.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Northern杂交检测HT-29细胞hBD-2mRNA的表达;采用超声破碎细胞、超速离心、蛋白萃取等方法分离双歧杆菌胞壁蛋白质成份.结果:RT-PCR和Northern杂交分析显示,在正常培养条件下HT-29细胞无可见的hBD-2mRNA表达信号,但在双歧杆菌菌体、细胞壁和胞壁蛋白刺激下均检测出显著的hBD-2mRNA表达.结论双歧杆菌能诱导人肠腺上皮细胞hBD-2 基因的表达,双歧杆菌胞壁蛋白可能是其诱导作用的活性组分.
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卡介苗增强人肺腺上皮细胞β-防御素-1基因的转录
目的:检测卡介苗(BCG)胞壁蛋白对人β-防御素-1(hBD-1)基因表达的影响,并初步分析该基因5′-端旁侧区中的BCG作用元件. 方法:经Sephadex G-150层析柱分离得到BCG细胞壁蛋白组份.用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和Northern杂交分析法检测hBD-1 mRNA在肺腺上皮细胞的表达.
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结核病的现行疗法和新药开发进展
分枝杆菌感染,包括结核病和麻风病,均属于世界范围的感染性疾病.由于治疗周期长,无法根除潜伏态细菌,以及多药耐药性结核分枝杆菌的检出率不断增加,给结核病的控制工作带来很大难度.目前,急需开发能有效控制该病的新药,包括可使耐药菌出现小化的短期抗菌药物、可治疗多药耐药性结核病的新药以及可根除潜伏态结核分枝杆菌的药物.近年来,已发现了很多具有新化学结构的抗分枝杆菌的药物,其中有些展现出显著的抗敏感和耐药结核分枝杆菌的活性.特别是近发现的二芳基喹啉具有绝佳的抗结核杆菌活性,此外,在对硝基咪唑吡喃类(nitroimidazopyrans)和(口恶)唑烷酮类(oxazolidinones)的研究中也发现了令人鼓舞的结果.在明确了分枝杆菌基因组的前提下,对其的遗传学和生物化学研究使人们更加明确了分枝杆菌细胞壁的生物合成过程以及与其他病原菌不同的代谢途径,以致发现了许多可能的药物作用靶位.其中某些研究进展涉及到新的靶标酶或生化途径.本文对抗结核药物的开发进展进行综述,同时对那些现在临床上用来控制其他感染性疾病的药物在结核病治疗方面的应用加以讨论.此外,还就包括分枝杆菌细胞壁通透屏障在内的抗生素耐药机制和其他新的耐药机制进行讨论.
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棘孢小单孢菌绛红变种细胞壁肽聚糖对庆大霉素吸附机制的初步研究
提取棘孢小单孢菌绛红变种的细胞壁和肽聚糖.肽聚糖是细胞壁的主要成分,吸附的庆大霉素占细胞壁吸附总量的95%左右.肽聚糖吸附庆大霉素的适pH是4~9,当溶液中没有自由状态的庆大霉素存在时,肽聚糖多能吸附庆大霉素约为88000u/g肽聚糖(干重).金属离子和胺类化合物都能够竞争肽聚糖上的庆大霉素吸附位点,镁离子和钠离子在庆大霉素浓度分别小于1000u/ml和大于2000u/ml时解吸附效果好,Tris也具有一定的解吸附作用.
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细胞壁缺陷结核分枝杆菌耐药性的基因研究
目的 检测与分析细胞壁缺陷结核分枝杆菌的耐药性相关基因,探讨细胞壁缺陷结核分枝杆菌耐药性的基因基础.方法 分别分离16株自发形成和用利福平、异烟肼、乙胺丁醇诱导形成的结核分枝杆菌的染色体DNA,PCR扩增IS986序列以及rpoB、katG和embB基因后进行凝胶电泳和序列分析.结果 自发形成及抗结核药物诱导形成的结核分枝杆菌稳定L型可在含利福平(4μg/ml)、异烟肼(0.2μg/ml)、乙胺丁醇(7.5μg/ml)的培养基内生长与传代培养.基因检测与分析显示,结核分枝杆菌稳定L型仍然保留IS986基因,rpoB、katG、embB基因也未见突变.结论 结核分枝杆菌稳定L型可自发形成,也可被利福平、异烟肼和乙胺丁醇诱导形成.结核分枝杆菌稳定L型对利福平、异烟肼、乙胺丁醇形成耐药性,但其染色体上耐药相关基因并没有发生突变.除染色体耐药相关基因突变可造成结核分枝杆菌形成耐药性外,细胞壁缺陷也是造成结核分枝杆菌形成耐药性的一个重要机制.
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金葡菌细胞壁变化与对万古霉素耐药的关系
目的 了解金葡菌细胞壁变化与万古霉素耐药的关系,探讨耐药机制.方法 将l株从临床标本中分离的异质性耐万古霉素的金葡菌(h-VRSA)在含有不同浓度的万古霉素培养基上连续诱导转种,用微量肉汤稀释法和菌谱分析法检测其对万古霉素的敏感性;同时采用扫描电镜和透射电镜分别对细胞壁的表面结构和厚度进行摄片观察;用PCR方法检测万古霉素耐药基因(vanA、vanB和vanC).结果 随万古霉素诱导浓度的增加,金葡菌对万古霉素的MIC逐渐增加;菌谱分析显示耐药亚群逐渐增加;电镜摄片可见细胞壁增厚,细胞壁粗糙,有结节状凸起;van基因检测为阴性.结论 在万古霉素的选择性压力下金葡菌的耐药性可逐渐增加,细胞壁增厚是金葡菌对万古霉素耐药的重要机制.
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细菌L型与肿瘤
肿瘤的形成是一个多因素、多阶段、长期相互作用的正常细胞恶性转化的过程.从生物角度对肿瘤病因进行的研究证明病毒是一重要生物致癌因素.细菌L型即细胞壁缺陷型,细菌失去细胞壁后,其菌落形态、生长行为、生化反应、致病性等均与原菌显著不同,而表现出与病毒相似的生物学特性和致病特征,并作为一种慢性致病因子长期在人体内存活,具致突变和增加宿主细胞对其它致突变物易感性的可能.一些研究显示细菌L型可能促进肿瘤的形成与发展,一些研究却支持L型具抑癌作用.本文就细菌L型与肿瘤关系的研究进展及存在的问题作一综述.
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细菌L型与肿瘤
肿瘤的形成是一个多因素、多阶段、长期相互作用的正常细胞恶性转化的过程.从生物角度对肿瘤病因进行的研究证明病毒是一重要生物致癌因素.细菌L型即细胞壁缺陷型,细菌失去细胞壁后,其菌落形态、生长行为、生化反应、致病性等均与原菌显著不同,而表现出与病毒相似的生物学特性和致病特征,并作为一种慢性致病因子长期在人体内存活,具致突变和增加宿主细胞对其它致突变物易感性的可能.一些研究显示细菌L型可能促进肿瘤的形成与发展,一些研究却支持L型具抑癌作用,本文就细菌L型与肿瘤关系的研究进展及存在的问题作一综述.