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人参皂苷Rh2对B16黑色素瘤细胞侵袭、转移能力的影响
目的 探讨人参皂苷Rh2对B16黑色素瘤细胞侵袭、转移能力的影响.方法 培养B16黑色素瘤细胞,同时对其进行药物处理,采用四唑盐比色(MTT)法对细胞活力进行检测.采用划痕试验观察细胞的愈合情况,评价其转移能力;Transwell小室侵袭实验观察细胞侵袭情况.结果 细胞存活力实验显示,不同浓度的人参皂苷Rh20、25、50、100 μmol/L对B16黑色素瘤细胞生存率的影响比较差异无统计学意义(P＞0.05);随着剂量浓度的增加,经人参皂苷Rh2处理的B16黑色素瘤细胞穿越小室的细胞数明显减少,并呈剂量效应关系(P＜0.05);细胞迁移的距离随人参皂苷Rh2剂量浓度的增加而缩短.结论 人参皂苷Rh2能显著抑制B16黑色素瘤细胞迁移及抑制细胞穿越小室,具有抑制细胞B16黑色素瘤细胞侵袭及非定向迁移的作用;随人参皂苷Rh2剂量增加,其抑制作用增强.
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转基因西洋参冠瘿组织化学成分研究
目的 研究转基因西洋参Panaxquinquefolium冠瘿组织中的化学成分.方法 用大孔树脂、硅胶柱色谱等方法对西洋参冠瘿组织乙醇提取物进行分离,根据其理化性质及波谱数据对分离所得的化合物进行结构鉴定.结果 分离并鉴定了9个化合物.分别为:20(R)-拟人参皂苷-RT5(I)、人参皂苷Rh2(II)、胡萝卜苷(II)、棕榈酸甲酯(IV)、亚麻油酸甲酯(V)、邻苯二甲酸二丁酯(VI)、9,12-十八碳二烯酸(VII)、棕榈酸(VII)和β-谷甾醇(IX).结论 9个化合物均为首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到.
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人参皂苷Rh2抗白血病多药耐药细胞K562/VCR作用研究
目的 通过观察人参皂苷RhZ对人白血病多药耐药(MDR)细胞K562/VCR生长、凋亡的作用和逆转耐药的情况,探索该药在抗人白血病MDR方面的应用价值.方法 将人参皂昔Rh:与K562,K562/VCR细胞共培养48 h后采用MTT法分析其对细胞生长的抑制率;将其与K562/VCR细胞于37℃C孵育30 min后,采用Annexin V和PI双染法在流式细胞仪上检测细胞凋亡情况;并观察其对K562/VCR细胞摄取柔红霉素(DNR)能力及细胞表面P-糖蛋白(P-gp)表达的影响;在DNR与K562/VCR培养体系中加入不同质量浓度人参皂苷Rh2,孵育48 h后观察人参皂苷Rh:对K562/VCR细胞耐药的逆转情况.结果 人参皂苷Rh:可明显抑制K562和K562/VCR细胞的生长,并呈量效关系,人参皂苷Rh2对K562和K562/VCR的半数抑制浓度(IC50)分别为44.5,59.4 pg/mL.K562/VCR经人参皂苷Rh2在37℃作用30 min后,细胞的凋亡明显增加,随人参皂苷Rh2质量浓度的增加,凋亡细胞的比例明显增加[人参皂苷RhZ 300μg/mL,Annexin V+细胞(51.5±6.9)%].K562细胞经长春新碱(VCR)诱导耐药后,P-gp表达率明显提高(从4.28%到93.80 %),DNR摄取率减少,25μg/mL以上质量浓度的人参皂苷Rh2即可明显提高K562/VCR对DNR的摄取,但P-gp的表达无明显改变.同时,它可明显提高DNR对K562/VCR的杀伤率,50μg/mL人参皂苷Rh2可使K562/VCR对DNR的敏感性提高到原来的6.30倍.结论 人参皂昔Rh2能抑制K562/VCR细胞生长,诱导其凋亡,还可以逆转K562/VCR的耐药,是一种具有广阔开发前景的抗白血病药物.
关键词： 人参皂苷rh2 多药耐药 白血病 K562/VCR细胞 -
人参皂苷Rg3及人参皂苷Rh2在肠道菌群失调大鼠体内的药动学研究
目的 研究人参皂苷Rg3及其脱糖基代谢物人参皂苷Rh2在林可霉素诱导的肠道菌群失调大鼠体内的药动学特征.方法 建立同时测定大鼠血浆中人参皂苷Rg3及人参皂苷Rh2的LC-MS/MS分析方法,并进行专属性、线性、回收率、准确度、精密度的考察.采用ig林可霉素诱导菌群失调大鼠模型,测定正常大鼠及模型大鼠粪便含水量及β-葡萄糖苷酶活性.正常大鼠及肠道菌群失调大鼠分别ig给予人参皂苷Rg3(20 mg/kg),于不同时间点眼眶取血测定血药浓度.结果 与对照组比较,模型组大鼠粪便含水量显著增加(P＜0.01),β-葡萄糖苷酶活性显著降低(P＜0.01);大鼠血浆中人参皂苷Rg3的Cmax、AUC0-∞值均有所升高,但不具有显著性差异;而其活性代谢物人参皂苷Rh2的Cmax,AUC0-t值与对照组相比显著降低(P＜0.01).结论 肠道菌群失调对人参皂苷Rg3的药动学行为影响较小,但显著改变了其活性代谢物人参皂苷Rh2的药动学,可能与菌群失调后导致大鼠肠道菌大幅下降进而影响了人参皂苷Rg3的肠道脱糖代谢有关.
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人参皂苷Rh2通过自噬途径对KG1α细胞增殖和凋亡的影响
目的 研究人参皂苷Rh2(Rh2)对人白血病细胞KG1α增殖的抑制作用,并从自噬凋亡角度来探讨其机制.方法 采用CCK-8法检测Rh2对KG1α细胞增殖的抑制作用;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;Hoechest染色观察细胞核染色质的形态;吖啶橙染色观察Rh2对细胞自噬的影响;Western blotting和RT-PCR检测Rh2对白血病细胞自噬重要蛋白和基因表达的影响;运用自噬抑制剂(3-MA)研究自噬对细胞增殖和凋亡的影响.结果 CCK-8显示Rh2在低浓度时能有效抑制KG1α细胞增殖,且其抑制作用具有浓度和时间依赖性;FCM检测和Hoechest染色结果显示Rh2能增加细胞的凋亡,使染色质呈凋亡形态改变;吖啶橙染色发现Rh2组细胞绿色荧光增强,细胞出现大量的酸性自噬小泡;Western blotting和RT-PCR结果发现Rh2上调Beclin-1、LC3A、LC3B、激活型Caspase-3表达和增加Bax/Bcl-2值,并激活MAPK、ATK、ERK信号通路;细胞自噬剂(3-MA)会削弱Rh2对KG1α细胞的增殖抑制和促凋亡作用.结论 Rh2可能通过激活MAPK、ATK、ERK信号通路,诱导细胞自噬途径,从而抑制KG1α细胞增殖和促进其凋亡.
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人参皂苷Rh2对胃癌细胞SGC7901/ADR耐药敏感性的影响
目的 观察人参皂苷Rh2(G-Rh2)对人胃癌SGC7901/ADR耐药细胞增殖、细胞周期及化疗敏感性的影响.方法 MTT法检测G-Rh2与阿霉素(ADR)联用对SGC7901/ADR细胞增殖的影响,并计算逆转倍数(RF);流式细胞术检测G-Rh2对SGC7901/ADR细胞周期的影响;蛋白印迹法检测G-Rh2对SGC7901/ADR细胞P糖蛋白(P-gp)、Bcl-2蛋白表达水平的影响.结果 与ADR单药处理后细胞的半数抑制浓度(IC50)值(54.52 μmol/L)比较,G-R112与ADR联用时SGC7901/ADR细胞IC50值(30.14 μmol/L)明显下降,RF为1.81;G-Rh2与ADR联用能够将SGC7901/ADR细胞周期阻滞在G2/M期,与ADR单药处理比较,联用组细胞P-gp、Bcl-2的蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论 G-Rh2联合ADR能够提高SGC7901/ADR细胞的化疗敏感性,可能通过阻滞细胞周期、增加细胞凋亡进而抑制细胞增殖.
关键词： 人参皂苷rh2 SGC7901/ADR细胞 阿霉素 耐药 化疗敏感性 -
人参皂苷Rh2通过激活GSK-3β降解β-catenin发挥抗肝癌作用研究
目的 探讨人参皂苷Rh2抗肝癌作用机制.方法 HE染色观察HepG2和HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠肿瘤组织的细胞形态;免疫组化检测GSK-3β、β-catenin和MMP-3表达;ELISA法检测肿瘤细胞GSK-3β活性;PCR检测GSK-3β、β-catenin、Bcl-2、Cyclin D1、Bax和MMP-3基因的表达;Western blotting蛋白印迹法检测GSK-3β和β-catenin的表达.结果 HepG2组和HepG2-β-catenin组荷瘤裸鼠肿瘤细胞核成异型性,占整个细胞比例大,但HepG2-β-catenin组更明显.HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组和HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞胞核固缩,出现大量破碎细胞,而HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞核固缩及破碎细胞更明显.免疫组化结果显示人参皂苷Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β表达增强,β-catenin、MMP-3表达降低;HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、MMP-3表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β表达则无明显差异.ELISA结果显示,人参皂营Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β的活性均升高.PCR结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、Cyclin D1、Bcl-2基因表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,Bax基因表达增强更明显,而GSK-3β基因表达无明显差异.Western blotting结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin蛋白表达弱于HepG2--catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β蛋白表达无明显差异.结论 人参皂苷Rh2对肝癌的抑制作用是通过激活GSK-3β降解β-catenin而实现的,且能抑制肿瘤的转移.
关键词： 人参皂苷rh2 HepG2 糖原合成酶激酶-3β β-链蛋白 肝癌 -
下调PGI/AMF基因协同人参皂苷Rh2对白血病KG1α细胞作用的体外研究
目的 通过干扰RNA的方法下调人磷酸葡萄糖异构酶/自分泌因子(PGI/AMF)基因的表达,研究人PGI/AMF基因协同人参皂苷Rh2对白血病KG1α细胞的影响.方法 将对数生长期KG1α细胞及转染细胞分成对照组和用药组,对照组常规培养,药物组细胞培养体系中分别加入30、45、60、75、90 μmol/L的人参皂苷Rh2,各组分别培养24、48、72 h后,CCK-8检测人参皂苷Rh2对白血病KG1α及转染株细胞增殖的影响;台盼蓝检测人PGI基因对KG1α细胞增殖的影响;Antibody Array检测人参皂苷Rh2对Akt通路蛋白的影响;Western blotting检测下调PGI/AMF与人参皂苷Rh2在mTOR、Raptor、Rag蛋白表达变化方面的相关性.结果 人参皂苷Rh2抑制KG1α的增殖;下调PGI/AMF使KG1α对人参皂苷Rh2更加敏感;下调PGI基因抑制细胞增殖;Antibody Array结果显示人参皂苷Rh2通过下调P38、mTOR、Akt、AMPKα、PARP、Bad的表达影响KG1α增殖;Western blotting结果显示下调PGI基因通过抑制mTOR、Rag、Raptor表达与人参皂苷Rh2产生协同作用调节人白血病细胞增殖.结论 下调PGI基因协同人参皂苷Rh2抑制KG1α细胞的增殖.
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HPLC-ESI-MS/MS法同时测定珠子参中15种皂苷类化合物
目的 建立了高效液相色谱-电喷雾三重四极杆质谱法(HPLC-ESI-MS/MS)同时测定珠子参中15种皂苷类化合物(人参皂苷Rb2、人参皂苷Re、人参皂苷Ro、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rh2、人参皂苷F2、人参皂苷Rg3、人参皂苷Rf、三七皂苷R1、姜状三七皂苷R1、竹节参皂苷IVa)的检测方法.方法 采用Waters Sunfire TM C18色谱柱(150 mm× 1.5 mm,5μm),以含0.05％甲酸的乙腈-水(10∶90)为流动相,梯度洗脱分离,HPLC-ESI-MS/MS多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量.优化了色谱分离条件、质谱去簇电压(DP)、碰撞能量(CE)和碰撞池出口电压(CXP)等参数,并考察了浓缩温度、提取时间等对提取率的影响.结果 15种皂苷类化合物在0.000 9～2 952.592 3 μg/mL线性关系良好,r=0.999 6,检出限范围为0.003～626.554 ng/mL,定量限为0.075～1 762.150 ng/mL,平均加样回收率在98.15％～101.12％,RSD为0.82％～2.15％.结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,可以对珠子参中多种皂苷类化合物进行分析鉴定.
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HPLC法测定林下山参制浆前后人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rg3、Rh1、Rh2含量的变化
目的 分析林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rg3、Rh1、Rh2含量的变化情况.方法 采用HPLC-UV法,Innoval ODS-2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水溶液进行梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;进样体积20μL;检测波长203 nm.结果 林下山参中6种人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rg3、Rh1、Rh2质量分数分别由制浆前的0.651、0.506、0.363、0.014、0.023、0.031 mg/g变化为制浆后的0.517、0.413、0.105、0.122、0.214、0.098 mg/g.人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rg3、Rh1、Rh2分别在2.5～100 mg/L具有良好的线性关系,r2均大于0.999 5;精密度、稳定性及重复性良好;平均加样回收率为95％～105％,RSD为1.25％～3.05％.结论 林下山参中6种人参皂苷Re、Rg1、Rb1、R93、Rh1、Rh2的含量在制浆前、后发生变化.林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量降低,稀有人参皂苷Rg3、Rh1、Rh2的含量分别增高8.7、9.3、3.2倍.基于HPLC佳分离参数建立的6种人参皂苷成分同时分析的方法具有较好的准确性和可靠性,可为林下山参浆的质量评价提供科学依据.
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HPLC法同时测定人参及其制剂中16种人参皂苷
目的 建立同时测定人参及其制剂中16种人参皂苷的HPLC方法.方法 采用C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈和水,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长203 nm,柱温35℃.结果 16种人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、Rh2及原人参三醇、compound K、原人参二醇均得到良好分离,线性关系良好(r≥0.999 0).加样回收率均在95％～102％,RSD＜2％.结论 该方法快捷简便、稳定可靠,可应用于人参及其制剂的质量控制.
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人参皂苷Rh2-羟丙基-β-环糊精包合物的鉴定和热力学参数考察
目的 研究人参皂苷Rh2与羟丙基-β-环糊精在水溶液中形成的包合物的鉴定及包合过程中的热力学参数变化.方法 分别采用薄层色谱法、差热扫描法、红外光谱法和相溶解度法研究人参皂苷Rh2与HP-β-CD的包合产物及包合过程中的热力学参数变化.结果 在水溶液中,人参皂苷Rh2与HP-β-CD形成包合物的相溶解度图呈AL-型;人参皂苷Rh2与HP-β-CD在水溶液中的包合过程可自发进行(△G＜0),且为放热反应(△H＜0),同时也是熵减过程(△S＜0).结论 人参皂苷Rh2与HP-β-CD在水溶液中可自发形成包合物,使其溶解度增加近80倍.选择适宜的包合温度将有利于包合过程的进行.
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人参皂苷Rh2对人食管癌Eca-109细胞TFPI-2表达的影响
目的 探讨人参皂苷Rh2对人食管癌Eca-109细胞组织因子途径抑制物2(TFPI-2)表达的影响.方法 按人参皂苷Rh2不同浓度设置3个实验组(10,40,80mg/L)和1个对照组,分别采用RT-PCR法检测细胞TFPI-2 mRNA表达水平、Western blot法检测TFPI-2蛋白表达水平以及Transwell小室法检测细胞的侵袭能力等.结果 10,40,80mg/L人参皂苷Rh2均可抑制人食管癌细胞Eca-109的侵袭力并能上调TFPI-2 mRNA及蛋白的表达,且40,80mg/L与对照组比较有显著性差异(P均<0.05).结论 人参皂苷Rh2具有上调人食管癌Eca-109细胞TFPI-2基因表达和抑制其侵袭力的作用.
关键词： 人参皂苷rh2 食管癌 Eca-109细胞 组织因子途径抑制物2 -
20(R)-人参皂苷Rh2抗B16-BL6黑色素瘤转移的作用
目的:探讨20(R)人参皂苷Rh2抗B16-BL6黑色素瘤转移的作用及其机制.方法:采用B16黑色素自发转移模型观察Rh2对B16黑色素瘤转移的作用,观察Rh2对B16黑色素瘤细胞自身侵袭能力的影响.结果:在B16黑色素瘤自发肺转移的实验中,Rh2组C57BL/6N小鼠肺部转移结节数明显减少,Rh2作用后的B16黑色素瘤细胞侵袭人工基底膜能力明显下降.结论:Rh2可明显抑制B16黑色素瘤的肺转移,该作用可能与降低B16黑色素瘤细胞的侵袭能力有关.
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西洋参茎叶总皂苷制取人参皂苷Rh2的应用研究
西洋参原产于北美加拿大和美国东部,现国产西洋参已种植成功.卫生部已认定国产西洋参与西洋参通用.西洋参的药理作用与人参相似,但比人参作用缓和.
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人参皂苷Rh2干预催产素诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的转化
背景：课题组前期实验已证明了10μmol/L催产素能诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化。目的：观察人参皂苷Rh2在催产素诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化过程中的作用。方法：采用贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞。实验共分为5组，空白对照组细胞常规培养2周；催产素诱导组：10μmol/L催产素连续诱导培养2周；人参皂苷Rh2低、中、高剂量组：分别加入0.5，1，2μmol/L人参皂苷Rh2，培养24 h后加入10μmol/L催产素，连续诱导培养2周。结果与结论：光学显微镜下观察显示，与空白对照组相比，催产素诱导组的细胞部分细胞体积变大，部分细胞密集重叠生长，随人参皂苷Rh2剂量增大细胞密集重叠生长的范围增大。免疫组织化学染色和免疫印迹法结果显示，催产素诱导组和人参皂苷Rh2低、中、高剂量组中心肌肌钙蛋白T，连接蛋白43的蛋白表达均显著高于空白对照组(P <0.05)；人参皂苷Rh2剂量增大而阳性表达增强，并显著高于催产素诱导组(P <0.05)。激光共聚焦检测结果显示，催产素诱导2周后，催产素诱导组骨髓间充质干细胞中游离钙的相对荧光强度显著升高(P <0.05)，而人参皂苷Rh2处理组的荧光强度高于催产素诱导组，与剂量呈正相关(P <0.05)。结果证实，人参皂苷Rh2在体外可显著增强催产素诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化的作用。
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人参皂苷Rh2对高脂膳食大鼠心肌缺血再灌注时内皮祖细胞的影响
目的 观察人参皂苷Rh2对高脂膳食大鼠心肌缺血再灌注(IR)时内皮祖细胞数量的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠,体重180 ～ 240 g,高脂饲料喂养24周后,随机分为缺血再灌注组(GIR组)、人参皂苷Rh2组(Rh2组)、假手术组(GS组),另设正常对照组(N组),给予基础饲料喂养24周.每组6只,记录各组大鼠体重.在高脂饲养基础上,采用结扎冠状动脉左前降支30 min,再灌注120 min的方法建立心肌缺血再灌注模型,GS组只穿线不结扎.Rh2组大鼠于缺血再灌注前30 min腹腔注射人参皂苷Rh2 10 mg/kg,GS组、GIR组大鼠于术前30 min腹腔注射等体积生理盐水.于再灌注120 min后处死大鼠,测定血脂水平以及血清血管内皮生长因子(VEGF)水平,流式细胞仪计数大鼠外周血内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)的数量.结果 喂养24周后,与正常对照组比较,其余组大鼠体重与血脂水平均升高(P＜0.05),假手术组大鼠外周血EPCs数量与血清VEGF水平较正常对照组稍有下降,差异有统计学意义(P＜0.05);与假手术组比较,缺血再灌注组与人参皂苷Rh2组大鼠外周血内皮祖细胞数量及血清VEGF水平均有升高,且人参皂苷Rh2组升高更为显著(P＜0.05).结论 人参皂苷Rh2可增加高脂膳食大鼠心肌缺血再灌注后外周血内皮祖细胞数量,从而减轻心肌缺血再灌注损伤,可能与提高血清VEGF水平相关.
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人参皂苷Rh2提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-氟尿嘧啶诱导凋亡的敏感性
目的 探讨人参皂苷Rh2( ginsenoside Rh2,G-Rh2)能否提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的敏感性,通过协同作用扩大细胞凋亡信号.方法 先用MTT法确定G-Rh2的无毒增敏质量浓度,随后将对数生长的人乳腺癌细胞MCF-7分为4组:control(不加药),G-Rh2(加入10 mg·L-1 G-Rh2),5-FU(加入25 mg·L - 5-FU),G-Rh2 +5-FU组(加入10 mg·L-1 G-Rh2和25 mg·L- 5-FU),通过MTT计算联合作用指数,激光共聚焦观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光染色检测caspase-3、多聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)的剪切情况.结果 MTT结果显示,G-Rh2可导致5-FU诱导的人乳腺癌细胞MCF-7死亡率增加,形态学、细胞周期检测、caspase-3和PARP凋亡蛋白免疫荧光染色结果都显示,G-Rh2+5-FU组可显著提高人乳腺癌细胞MCF-7死亡率,且引起的细胞死亡为细胞凋亡作用.结论 G-Rh2可以提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-FU的敏感性,通过协同作用诱导细胞凋亡.
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人参叶中人参二醇组皂苷降解转化为人参皂苷Rg3和Rh2的工艺考察
目的 研究人参叶中人参二醇组皂苷降解转化为人参皂苷Rg3、Rh2的佳工艺,以适应工业化生产的需要.方法 用均匀设计法优化降解工艺条件,采用HPLC法测定人参皂苷Rg3、Rh2的含量.结果 佳降解工艺条件为体积分数60%的乙酸、55℃降解1 h.结论 该工艺合理、可行,适用于工业化大生产.
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人参皂苷Rh2通过激活Gsk-3β削弱β-catenin在肝癌HepG2细胞中的作用
目的：研究人参皂苷Rh2对HepG2细胞的作用机制。方法：用pLOV-EF1a-MCS-3FLAG-β-catenin慢病毒感染HepG2细胞，运用荧光显微镜观察细胞荧光强度变化。通过CCK-8法检测细胞增殖反应。采用FCM检测细胞周期及凋亡变化；利用ELISA法检测细胞产生Gsk-3β活性；用PCR法检测细胞Gsk-3β、β-catenin、Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3基因的表达；用CHIP法检测细胞Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3基因的表达；运用Western blot法检测细胞Gsk-3β、β-catenin、Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3蛋白的表达。结果：用pLOV-EF1a-MCS-3FLAG-β-catenin慢病毒感染HepG2细胞，被感染的HepG2细胞命名为HepG2-β-catenin；CCK-8分析结果显示，加药组给予（10～160μmol／L） Rh2后HepG2及HepG2-β-catenin细胞的增殖受到抑制，且Rh2对肝癌HepG2-β-catenin和HepG2细胞的生长抑制呈剂量和时间依赖。在HepG2细胞中48、72 h半数抑制率分别为100μmol／L，58.12μmol／L，在HepG2-β-catenin细胞中48、72 h半数抑制率分别是129.2μmol／L，83.33μmol／L，故Rh2作用于HepG2-β-catenin细胞浓度均高于HepG2细胞，与HepG2细胞组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）。 FCM检测结果显示，Rh2可诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞周期阻滞在G0／G1期，HepG2＋Rh2组G0／G1期（64.57±0.65），而HepG2-β-catenin＋Rh2组G0／G1期（58.61±2.01）；FCM检测结果显示，Rh2可诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞早期凋亡，HepG2＋Rh2组凋亡率（17.27±2.77），而HepG2-β-catenin＋Rh2组凋亡率（9.02±1.76）。 ELISA结果显示，Rh2作用HepG2细胞12、24、48、72 h后，Gsk-3β的活性随着作用时间延长，逐渐升高，在48 h高，随后其活性开始降低。 Rh2诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞48 h，与对照组相比，Gsk-3β的活性均增高，而加入Bio后其活性降低，HepG2＋Rh和HepG2-β-catenin＋Rh2组间无明显差异；PCR、CHIP、WB结果显示，人参皂苷Rh2诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞后，Gsk-3β、Bax基因及蛋白表达增加，而β-catenin、CyclinD1、Bcl2、MMP3基因及蛋白表达水平下调。与HepG2-β-catenin＋Rh2组相比，HepG2＋Rh2组除Gsk-3β外各基因及蛋白的表达变化更为显著。结论：过表达β-catenin可削弱人参皂苷Rh2对肝癌HepG2细胞的药理作用。人参皂苷Rh2通过激活Gsk-3β降解β-catenin，影响下游基因的表达，促进肝癌细胞的凋亡及抑制其转移。
