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用固相试验和标准实验设备进行自动血清学配血试验
简介近,几种固相技术正在取代常规血凝法、离心试管法、针对含抗体血清的血细胞血清学实验.一般认为固相技术的敏感性比试管技术要高,或至少相当,并可处理大量的标本.固相技术已广泛用于抗体筛选,但还未用于红细胞交叉配血.本文介绍一种自动交叉配血法用于常规实验检测病人血清及红细胞浓缩物标本.该方法基于商业来源的微滴定板的固相抗体检出试验,用普通血型实验室的设备运作.本文将评价常规试验中这种自动试验的敏感性及可行性.
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D+个体的表观抗-D:临床和血清学表现
患者为68岁男性,有冠心病、高血压、糖尿病和慢性肾病史,因肺炎继发急性呼吸窘迫入院.用两份不同的血样做ABO、Rh血型定型和抗体筛选,显示患者为A,D+,并有表观抗-D.
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IgM、IgG抗-E和IgG抗-c1例
目的 研究抗-E和抗-c的检测和输血的关系.方法 分别用盐水法、凝集胺法和微柱凝胶法对患者血清进行抗体筛选和抗体鉴定,分析患者抗体的特异性.结果 在患者血清中存在IgM、IgG抗-E和IgG抗-c.结论 当抗-E、抗-c同时存在时,抗-c的效价低而难以检出,应该选择2种以上的介质做不规则抗体的筛选和鉴定,以防漏检.
关键词： 抗体筛选 IgM、IgG抗-E IgG抗-c 交叉配血 -
长期输血治疗患者的免疫血清学分析1例
除ABO血型系统外,临床在输血治疗中也越来越重视Rh血型系统,虽然目前RhD血型鉴定已成为临床输血治疗前必检的项目之一,但是Rh血型其他抗原尚未引起大家的广泛重视.我们回顾分析了1例患者从2006年6月～2012年12月多次输血治疗后的免疫血清学变化,旨在探讨分析Rh血型其他抗原免疫性与临床输血的相关性,以期引起临床工作者的重视.现报道如下.
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心外科手术患者输血前疑难配血原因分析及其应对措施
目的 探究心外科患者输血前疑难配血产生的原因和应对措施.方法 选择2011年1～12月在本院行心血管外科择期手术术前常规备血病例11 848例及其参与配血的献血者红细胞为18 148(人)份.回顾性分析其输血前免疫血液学相容性检测结果,包括采用盐水法、凝聚胺法和微柱凝集法对患者做ABO、RhD血型鉴定和抗体筛选,以及与献血者血样交叉配血的结果.结果 在交叉配血中疑难标本的比例为0.64％ (76/18 148),包括疑难血型8例、患者抗体筛选阳性50例、献血者抗体筛选阳性10例和直接抗球蛋白试验阳性9例.患者标本中,筛选出的血型抗体阳性率为0.42％(50/11 848),其中MNS抗体占38％ (19/50)、Rh抗体14％ (7/50)、Lewis抗体4％ (2/50)、Kidd抗体2％ (1/50)、Du毋抗体4％ (2/50).结论 总结心外科患者发生疑难血型鉴定和疑难配血的原因,了解心血管外科手术患者意外抗体的分布,能及早发现和判断发生疑难配血的原因,从而采取正确有效的应对措施,保证输血安全.
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抗体筛选试验在临床输血中的应用
目的减少或杜绝溶血性输血反应的发生,保证输血安全.方法对有输血史或妊娠史的患者做抗体筛选试验,先用凝聚胺(Polybrene)法对2353份标本进行抗体筛选,阳性者用酶法、抗球蛋白法进行抗体特异性鉴定,同时观察抗体筛选的阳性率.结果共筛选抗体阳性9例,阳性率为0.38%;通过抗体鉴定,检出抗-M 1例,抗-MiⅢ1例,抗-D 3例,抗-E 1例,抗-M、抗-cE 1例,抗-c、抗-E 2例.结论抗体筛选试验能有效地减少和避免溶血性输血反应的发生.
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新乡地区人群不规则抗体分布
在临床输血中由ABO血型以外的抗体即同种抗体引起的溶血性输血反应和新生儿溶血病时有发生~([1,2]).为了解本地区人群ABO以外的抗体、抗原分布规律,建立稀有血型库.减少或避免这种输血反应的发生,我们对新乡地区不规则抗体分布进行了研究,结果报告如下.
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抗-JKa导致迟发型溶血性输血反应1例
患者,女54岁,于2012年7月20日因车祸入院做髋关节置换术治疗.入院检查:RBC 3.04×1012/L,WBC 6.7×109/L,Hb 61g/L,Hct 24.4％,血型鉴定为B型,Rh阳性.曾经有4次妊娠史,在半年前曾经因子宫肌瘤手术治疗输注2U红细胞悬液.此次入院后主治医师要求对患者配血3U红细胞.配血结果:抗体筛选为阴性,交叉配血试验:盐水、凝聚胺法均无异常.手术中输注3U红细胞.术后患者Hb78g/L,恢复良好.但在d4开始患者出现血红蛋白降低,d5、d6血红蛋白持续降低,医师决定再对患者输注2U红细胞,当进行交叉配血时发现凝聚胺配血主侧不合.将患者d6的血液标本送检,要求对患者进行抗体筛查及鉴定,现报道如下.
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2010年度全国采供血机构及部分医院输血科血型血清学室间质控错误分析
目的 分析2010年度上海市血液中心发放的全国血型血清学室间质控品返回的错误检测结果的原因.方法 采用国际血型参比实验室(iBGRL)建立的国际血型血清学室间评分标准,对参评的65家血站及医院输血科或血库血型实验室的回执评分,并计算各项试验的正确率,寻找错误原因.结果 全国血站血型室及部分医院血输的ABO定型(包括亚型)正确率为91.5％[243/345:同参考答案数/参评标本数(60×3+65×3)],RhD定型正确率为100％,抗体筛选的正确率为97.86％(367/375),抗体鉴定的正确率为92.97％(172/189:同参考答案数/需参评标本数),交叉配合试验的正确率为99.20％ (1 116/1 125).结论 1)血站血型实验室和医院输血科对ABO亚型的血清学鉴定存在一定缺陷,特别是针对表达较弱的ABO亚型鉴定尚需改进；2)部分实验室抗体筛选存在漏检或鉴定错误,说明漏检实验室所用的血清方法学应迸一步改进,鉴定错误的实验室需要改进单特异性抗体和联合抗体的鉴定以及特异性抗体的反应条件等,要对不同的特异性抗原设定不同的反应温度与介质能够区分,避免造成免疫性输血反应；3)交叉配合试验的错误率提示需要对交叉配合试验的方法学加以改进.
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2011年度全国采供血机构及部分医院输血科血型血清学室间质控结果分析
目的 分析2011年度上海市血液中心发放的全国血型血清学室间质控品返回的回执结果.方法 采用国际血型参比实验室(iBGRL)建立的国际血型血清学室间评分标准,对参评的74家血站及医院输血科血型实验室的回执进行评分,计算各项试验的准确率,并通过Z检验(标准统计量检验法)进行满意度统计.结果 全国血站血型室及部分医院输血科的ABO定型准确率为99.76％,RhD定型准确率为100％,抗体筛选准确率为93.52％,抗体鉴定准确率为93.41％,交叉配合试验准确率为89.85％；实验室结果评价满意率为94.24％,其中血液中心为97.56％,中心血站为97.05％,医院输血科为88.46％,地区级检测中心为100％.结论 本次室间质评在ABO/Rh血型定型中,绝大部分单位的结果统一,在抗体筛选和鉴定中,仍有一部分的单位抗筛漏检或者抗体鉴定错误.在交叉配血中,对于献血者直抗阳性的细胞交叉配血过程中,由于各个单位所用的试剂和方法不同,导致出现迥异的结果.总的满意度,血液中心的免疫血液学水平高于中心血站和医院输血科.
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广西12家医疗机构514例临床疑难配血分析
目的 了解广西地区临床疑难配血产生的原因现状及不规则抗体的分布特点.方法 收集区内10家三级医院、2家二级医院2003年1月～2012年4月疑难配血患者病历资料476925份,对其中514例交叉配血不合的病例及经确认的抗体特异性作回顾性总结分析.结果 交叉配血不合原因中,不规则抗体常见,占86.38％(444/514),其中又以同种抗体常见,占52.25％(232/444),其次为自身抗体,占41.22％ (183/444)；抗体特异性鉴定中以Rh血型单一或联合抗体及多系统抗体混合为主,占86.19％ (206/239),其次是MNSs系统单一抗体及多系统抗体,占10.88％(26/239),其中抗-Mur占为4.18％(10/239).结论 不规则抗体是导致本地区临床疑难配血的主要原因,不规则抗体的特异性及分布有地区特点.
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输血相容性试验标准检测流程
输血前相容性检测直接关系着输血安全,检测内容包括受血者和献血者的ABO和RhD血型测定,受血者的抗体筛选,受血者与献血者间的血液交叉匹配试验[1-5].建立本标准流程旨在规范输血前相容性试验采用的实验室检测程序,确保受血者的ABO及RhD血型抗原抗体与献血者的相容,确定受血者血清中是否有临床意义的不规则抗体、受血者血清与献血者红细胞是否有相对应的抗原抗体,从而达到安全、有效输血.
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凝聚胺技术在交叉配血、抗体筛选中的应用探讨
目的探讨凝聚胺技术在交叉配血、抗体筛选中的作用.方法利用凝聚胺技术与常规技术分别检测临床病人配血不合标本,临床反复输血产生抗体病人标本,发生输血反应标本和正常献血者标本,比较二者的优缺点.结果凝聚胺技术较常规检测技术灵敏10～20%.结论凝聚胺技术检出免疫性抗体的能力以及其特有的快速、简便,高度灵敏性,对临床免疫输血中有重要作用.
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冷抗体型自身免疫溶血性贫血及输血对策
自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic bemolytic anemia AIHA),分为温抗体型、冷抗体型、混合型和药物型四种,AIHA涉及较为复杂的免疫学问题,如若盲目输血,其潜在危险巨大,如何对AIHA病人进行血型检测,抗体筛选和鉴定,交叉配血,选择合适的血液供给是至关重要的问题,本文就1例高浓度冷自身抗体免疫性溶血性贫血作相关报道.
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抗c和抗E抗体引起配血不合一例
目的 检测对临床输血有意义的不规则抗体,保证输血安全.方法 检测对临床输血有意义的不规则抗体,保证输血安全.结果 患者血型为O型,CCDee,血清含抗c、抗E抗体,选择不含c、E抗原的献血者悬浮红细胞交叉配血并输注,无任何不良反应发生.结论 在输血前血型血清学试验中,抗体筛选对检测抗c、抗E等临床有意义的不规则抗体,对有效避免溶血性输血反应的发生有重要意义.
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抗体筛选和交叉配血中4种方法的比较
笔者主要对经典抗人球蛋白法和其它几种方法的试验步骤进行探讨,报告如下.
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凝聚胺技术的优越性及其在临床输血检验中的应用
目的探讨凝聚胺技术在临床输血检验中的优越性.方法用凝聚胺技术对200名正常人进行试验,并采用盐水介质试验、木瓜酶试验、抗球蛋白试验等常规配血试验作对比,又对41例疑难标本进行了检测.结果凝聚胺技术比盐水介质试验等常规配血技术灵敏10%～20%,能快速检测出IgG抗体.结论凝聚胺技术具有灵敏度高、反应快速、操作简便等优点,对临床输血防止溶血性输血反应有重要意义.
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微柱凝胶法输血相容性检测弱凝集现象的影响因素分析
目的 探讨微柱凝胶法在输血相容性检测中出现弱凝集的影响因素及其处理方法.方法 对微柱凝胶法在ABO血型鉴定、抗体筛选及交叉配血试验中出现弱凝集的患者血标本,采用增加红细胞或血清量、2次离心血清标本、37℃洗涤红细胞及吸收放散试验进行处理后,再采用盐水法和间接抗人球蛋白法进行对照检测.结果 在156例微柱凝胶法输血相容性检测出现1+w～2+w弱凝集患者血标本中,ABO血型抗原性弱38例(24.4％)、ABO抗体效价低19例(12.2％)、ABO亚型血16例(1O.3％)、高效价冷凝集素24例(15.4％)、纤维蛋白增高32例(20.5％)、自身免疫性抗体27例(17.3％).156例弱凝集血标本在输血相容性检测中引起ABO血型正反定型不符129例(82.7％),抗体筛选阳性51例(32.7％).交叉配血不合99例(63.5％),其中正反定型不符合并交叉配血不合48例,交叉配血不合合并抗体筛选阳性51例.结论 血型抗原性弱、抗体效价低、高效价冷凝集素、纤维蛋白增高及自身免疫性抗体的干扰,是微柱凝胶法出现弱凝集的主要影响因素.采用增加红细胞及血清量,2次离心血清标本、37℃洗涤红细胞及吸收放散试验等方法处理后,再进行检测可排除上述影响因素对检测结果的干扰.
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16例Duffy血型不规则抗体血清学检测结果分析
目的 探讨Duffy血型不规则抗体的血清学特征及其临床意义.方法 采用微柱凝胶卡对16例Duffy血型不规则抗体筛选阳性患者的血标本进行ABO及Rh血型鉴定,采用盐水试管法和间接抗人球蛋白法进行不规则抗体特异性鉴定、抗体性质及其效价测定,采用抗Fy抗体血型定型试剂检测患者红细胞Duffy血型抗原.结果 16例患者血标本在不规则抗体筛选及交叉配血试验中出现1+ ～2+意外凝集,经血型血清学鉴定为Duffy血型不规则抗体,即抗Fya抗体1例(6.3％)、抗Fyb抗体15例(93.8％),其中抗Fyb抗体联合抗E抗体2例;男5例(31.3％)、女11例(68.8％).Duffy血型抗原鉴定为Fya-b+1例(6.3％)、Fya+b-15例(93.8％).患者自身对照试验阴性,直接抗人球蛋白试验阴性.抗体性质为IgG类,抗体效价为1∶4～1∶16.结论 患者Duffy血型抗原为Jka-b+或Jka+b-表现型的个体,由于反复输血或妊娠的免疫刺激而产生IgG类抗Fya或Fyb抗体,该抗体可导致溶血性输血反应和新生儿溶血病的发生,在输血相容性检测中也可引起抗体筛选阳性及交叉配血不合.
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用于制备抗体芯片的抗人甲胎蛋白单克隆抗体的制备及特性分析
目的:制备抗人甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(mAb),并用于制备抗体芯片.方法:利用杂交瘤技术建立能稳定分泌抗人AFP mAb的杂交瘤细胞株;对抗体的亲和力、特异性等特性进行分析;利用抗体相加实验,双抗体夹心ELISA、胶体金免疫层析实验以及抗体芯片技术对抗体表位及其配对情况进行分析研究.结果:共获得16株稳定分泌抗人AFP mAb的杂交瘤细胞株,从中筛选出多组性能优良的配对抗体,结合抗体芯片技术,终筛选出适合制备抗体芯片的配对抗体.结论:当抗体包被材料或包被方法发生改变时,会引起mAb构象发生变化,从而影响抗体的配对效果.因此,筛选适合制备抗体芯片的配对mAb时,需要对mAb的特性进行综合分析,选取特异性好,亲和力高的mAb进行配对筛选.
