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微柱玻璃珠法和试管法鉴定红细胞同种抗体的应用评价
细胞同种抗体在临床可引起输血反应和新生儿溶血病的发生,严重者会影响患者生命安全[1-3],而临床对红细胞同种抗体的鉴定一般采用传统试管法,该方法操作繁琐、耗时,且需熟悉免疫血液学的专业人员进行,因此,建立一种既简单、快速,又具有特异敏感的试验室鉴定方法尤为重要。本研究通过微柱玻璃珠法和经典试管法在红细胞同种抗体鉴定中的比较,探讨2种方法在临床工作中的应用价值。
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中法两国输血相关免疫血液学检测的差异与思考
红细胞、白细胞和血小板抗原及其对应抗体的检测鉴定,供受血者之间各系统抗原抗体相合相配程度是决定临床输血安全的基础,也是预防免疫性输血反应首要考虑的因素.自20世纪90年代初发达国家建立血液监控系统以来[1],法国、荷兰等国家先后将输血后新的同种异体血型抗体的出现作为一种不良输血反应进行监控,把输血后同种免疫发生率作为评价临床输血效果的指标之一,并且进一步分析同种异体抗体的产生原因是实验室检测还是临床血液选择与输注过程管理[2,3].现对法国输血相关免疫血液学检测系统概况和血液选择的基本原则进行介绍,并对照我国输血相关免疫血液学检测系统的现状,探讨提高我国该检测体系水平的方法,总结可以借鉴的经验.
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输血质量及安全管理探讨
输血作为医院工作的一个重要部分,是临床抢救和治疗疾病无法替代的一个重要的治疗手段.输血学是一门研究安全血液和输血安全的新兴学科,它涉及免疫血液学、临床医学、免疫遗传学、分子生物学等多种学科.当今的输血工作是成分输血时代,其不仅临床疗效好,输血反应少,而且能"一血多用",节省宝贵的血液资源,利国利民.输血工作中重要的是安全血液和输血安全,输血是一种移植,这种移植因血液的复杂成分和潜伏传播传染病的可能变的极其危险.这是每个涉足输血工作的医务工作者必须高度重视的.
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加强检验质量管理,确保实现质量目标
临床实验室又称医学实验室,主要任务是对从体外获得的各种标本进行生物学、微生物学、免疫学、化学、免疫血液学、血液学、生物物理学、细胞学、病理学或其它检验,为疾病的诊断、预防和治疗,或对健康状况评估提供信息.实验室也提供检验涉及的各方面的咨询服务,包括对检验结果的解释和进一步作所需检查的建议.
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输血不良反应情况分析
不适当的输注全血或各种血液成分制品将造成不良后果,轻者导致各种输血不良反应,严重者可危及生命.受血者不良反应发生率可多达1%~10%[1].特别是随着免疫血液学的发展,逐渐对红细胞、白细胞、血小板、血清型等血型及血型不相容性导致的免疫性输血反应有了充分的认识.因此对广大医务工作者特别是输血工作者来说,认识输血反应的类型、机制,开展输血反应的预防、诊断和治疗等方面的工作是十分重要的,有助于避免输血不良反应的发生,保证输血安全,提高输血治疗的水平.
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流式细胞术在Rh血型系统研究中的应用
目前Rh血型的主要研究手段是传统的免疫血液学方法,随着科技进步,已经有越来越多的新技术应用于Rh血型的研究,流式细胞术就是其中之一.本文就流式细胞术在Rh血型系统研究中的应用作一综述.
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重视专业组长工作促进检验科室发展
ISO 15189中对临床实验室工作目的定义为:"目的为诊断、预防,治疗疾病,或为判断人类健康对源自人体物质进行生物学的,微生物学的,免疫学的,化学的,免疫血液学的,血液学的,生物物理学的,细胞学的,病理学的或其它方面的检查."为临床诊疗提供服务的目的,决定了检验科工作内容的复杂性和多样性[1].因此,国内绝大多数医院检验科都根据检验原理方法的不同,并结合仪器设备资源以大化利用为原则,对科内进行了专业组的划分.每一个专业组,都成为了临床实验室在某一检验领域的具体存在形式和实际执行者,而专业组组长,肩负着承上启下、管理兼操作的双重任务,成为临床实验室构建中必不可少的一环.根据本人多年从事专业组长的经历,下面就检验科专业组长的职能做一简单阐述.
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山东地区汉族RhD阴性献血者RHD基因的纯合性分析
目的:Rhesus血型(简称Rh血型)因其抗原众多、变种各异和临床疾病相关性而备受重视。该血型系统中与临床疾病关联密切的抗原即RhD抗原具有较高的免疫原性。编码RhD抗原的RHD基因两侧各有一个序列高度相似的Rh盒子基因,RhD阴性即是由上、下游Rh盒子基因之间的基因重组引起。分析RhD阴性孕妇丈夫RHD基因的纯合性可预测胎儿患新生儿溶血病的几率。本研究的目的是分析山东地区汉族人RhD阴性表型形成的分子机制,并对Rh盒子基因的扩增产物进行分析以确定RHD基因的纯合性。方法:74例RhD阴性献血者的DNA样品首先进行多重聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分析。然后对Rh盒子基因进行PCR基因扩增,其扩增产物采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法进行RHD基因的纯合性测定。结果:46例(62%)样品在多重PCR-SSP分析中显示缺失RHD基因,在PCR-RFLP分析中显示为纯合的RHD基因阴性。22例(30%)样品显示存在RHD基因,其中19例显示为杂合的RHD基因,3例显示为纯合的RHD基因。5例(7%)样品缺失RHD基因,但PCR-RFLP分析显示存在一个RHD基因,进一步的分析表明它们至少存在RHD基因第1和10外显子。1例(1%)样品显示存在RHD基因,但缺失第6外显子。结论:HD 基因缺失是引起中国汉族人RhD阴性表型形成的主要分子机制。RhD阴性个体主要表现为纯合的RHD基因阴性,少部分RhD阴性个体存在杂合的RHD基因和纯合的RHD基因。
关键词: Rhesus血型系统 RHD抗原 RHD基因 基因纯和性 免疫血液学 -
中国汉族RhD阴性个体Rh盒子基因的测序及RHD基因的纯合性测定
目的分析中国汉族人RhD阴性个体Rh盒子基因的序列以阐明中国汉族人群RhD阴性表型形成的分子机理,并对Rh盒子基因的扩增产物进行分析以确定RHD基因的纯合性.方法 74例RhD阴性个体的DNA样品首先进行多重聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-sequence specific primer,PCR-SSP)分析.然后对Rh盒子基因进行特异性测序分析,同时对Rh盒子基因的扩增产物采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(restrict fragment length polymorphism,RFLP)方法进行RHD基因的纯合性测定.结果 46例(62%)样品在多重PCR-SSP分析中显示缺失RHD基因,在PCR-RFLP分析中显示为纯合的RHD基因阴性.22例(30%)样品显示存在RHD基因,其中19例显示为杂合的RHD基因,3例显示为纯合的RHD基因.5例(7%)样品缺失RHD基因,但PCR-RFLP分析显示存在1个RHD基因,进一步的分析表明它们至少存在RHD基因第1和10外显子.1例(1%)样品显示存在RHD基因,但缺失第6外显子.对27例在多重PCR分析中显示缺失RHD基因的RhD阴性样品的杂化Rh盒子基因进行DNA测序分析,表明中国人存在与白人相一致的杂化Rh盒子基因序列.结论 RHD基因缺失是引起中国汉族人RhD阴性表型形成的主要分子机理.中国人RHD基因缺失发生于与白人相一致的断点区域.
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087.荧光细胞计数免疫血液学实验方法的改进
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一种用流式细胞计数的精确免疫血液学自动化试验
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中国汉族RhD血型呈阴性无偿献血者RHD基因的分子生物学研究
目的 探讨RhD血型呈阴性无偿献血者的RHD基因结构,并且对1例新发现的RHD基因突变进行分子生物学分析.方法 采用随机数字表法选择2016 2017年于山东省血液中心参加无偿献血的85例RhD血型呈阴性献血者为研究对象.采用实时荧光定量(RQ)-PCR方法对85例献血者DNA样本的RHD基因第7号外显子进行检测.采用多重PCR-序列特异性引物(SSP)方法对献血者DNA样本的RHD基因第3~7和9号外显子进行检测.并且采用荧光标记的Sanger双脱氧链终止法对表达RHD基因第7号外显子的献血者DNA样本的RHD基因进行测序.本研究遵循的程序符合2013年修订版《世界医学会赫尔辛基宣言》的要求,与受试者签署临床研究知情同意书.结果 ①本研究85例RhD血型呈阴性献血者中,30例献血者的DNA样本存在RHD基因第7号外显子,55例献血者的DNA样本RHD基因第7号外显子缺失.②30例DNA样本存在RHD基因第7号外显子的献血者中,29例献血者的DNA样本存在RHD基因的第3~7和9号外显子;1例DNA样本存在RHD基因第3、4、5、7和9号外显子,但是缺失第6号外显子.55例DNA样本RHD基因第7号外显子缺失献血者的RHD基因第3~7和9号外显子均缺失.③30例DNA样本存在RHD基因第7号外显子的献血者中,29例献血者DNA样本的RHD基因第9号外显子上均存在1个c.1227G>A点突变.多重PCR-SSP检测结果显示,缺失RHD基因第6号外显子的1例献血者DNA样本,在RHD基因第6外显子上存在1个c.933C>A的无义突变,该突变产生1个终止密码子,导致该例献血者RHD基因多重PCR-SSP与DNA测序结果不一致.结论 RHD基因缺失是引起中国汉族人群RhD阴性表型的主要分子机制.RHD基因c.1227G>A突变是Del表型的主要特征.1个新发现的RHD基因c.933C>A突变,导致RhD阴性表型产生.
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产前血型鉴定与抗体检测指南
导言目的本指南旨在确定用于产前检查的孕妇红细胞免疫血液学检测方案.以预防胎儿和新生儿溶血性疾病.由于大多出版物所使用"新生儿溶血病(HDN)"一词中,其新生儿均包括新生儿和胎儿,故本文仍沿用这一概念.
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抗体鉴定问题的解析
1前言抗体检测和鉴定是免疫血液学的基础.抗体鉴定可以作为抗体临床重要性判定的指南,并为选择合适血液输注提供信息.在某些情况下,抗体鉴定可能是一个困难和费时的过程,因而可能延误患者的治疗.已经有抗体检测、ABO血型和D定型的操作指南,但很少有抗体鉴定必要程序的指南.
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免疫血液学新进展
前言免疫血液学领域的重要的目的是保证给病人提供成功的血液输注.对于红细胞输注而言,这主要包括血红蛋白水平的预期提高和避免发生速发或迟发输血副作用.上个世纪,大量重要的发现使该领域有了显著的发展,血液供者和受者之间的血型相容性有了显著提高.很明显其中突出的部分包括ABO血型分型、交叉配血、抗人球蛋白试验及后来与输血前检测相关的ABO之外多种其它的血型抗原和抗体的阐明.在20世纪后期,血清学方法学上发生了一些有意义的进展,如低离子强度溶液、蛋白酶处理、自动化装置、增强剂、单克隆抗体和新的检测系统如凝胶和固相方法.另外二十世纪八十年代末和九十年代兴起的分子生物学革命开始影响免疫血液学,从而给这个经典的学科开拓了崭新的时代.
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心外科手术患者输血前疑难配血原因分析及其应对措施
目的 探究心外科患者输血前疑难配血产生的原因和应对措施.方法 选择2011年1~12月在本院行心血管外科择期手术术前常规备血病例11 848例及其参与配血的献血者红细胞为18 148(人)份.回顾性分析其输血前免疫血液学相容性检测结果,包括采用盐水法、凝聚胺法和微柱凝集法对患者做ABO、RhD血型鉴定和抗体筛选,以及与献血者血样交叉配血的结果.结果 在交叉配血中疑难标本的比例为0.64% (76/18 148),包括疑难血型8例、患者抗体筛选阳性50例、献血者抗体筛选阳性10例和直接抗球蛋白试验阳性9例.患者标本中,筛选出的血型抗体阳性率为0.42%(50/11 848),其中MNS抗体占38% (19/50)、Rh抗体14% (7/50)、Lewis抗体4% (2/50)、Kidd抗体2% (1/50)、Du毋抗体4% (2/50).结论 总结心外科患者发生疑难血型鉴定和疑难配血的原因,了解心血管外科手术患者意外抗体的分布,能及早发现和判断发生疑难配血的原因,从而采取正确有效的应对措施,保证输血安全.
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婴幼儿和儿童的血小板输注
血小板是临床上常用的血液制品,尽管已采用很多方法来保证血小板输注的安全性,但仍有一些已知和未知的隐患.由于儿童,特别是婴幼儿正值生长发育阶段,各器官系统尚未成熟,与成人存在生理解剖和免疫血液学差异,故婴幼儿和儿童的血小板输注有其特殊性.为使患儿获得好的疗效和少的并发症,临床医生应严格掌握婴幼儿和儿童血小板输注的适应证并选择合适的血小板制品.
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免疫血液学研究在临床输血中的意义
免疫血液学起源于研究输血配型时所涉及的红细胞血型、抗原-抗体反应等免疫学问题,现在已经发展成为1个具有完善的理论体系和多项知识框架的新兴交叉学科,它伴随着临床输血的历史而发展,是临床安全有效输血的保障.该学科主要的任务是利用血清学、分子生物学技术,研究血型的多态性、遗传及血液输注、细胞治疗等方面的情况,将研究取得的成果用于输血前试验、疑难血型鉴定和疑难配血、输注无效、自身输血、新生儿溶血病、治疗性输血、细胞治疗等等方面来指导临床.
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输血前免疫血液学相容性检查的重要性及其注意事项
临床输血前免疫血液学相容性检查,包括患者和供血者信息及血标本的核对与处理,患者和供血者的ABO、RhD血型鉴定,不规则抗体筛选及其特异性鉴定,交叉配血试验等.本文简述了输血前免疫血液学相容性检查的重要性,检查内容方法及其注意事项.
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收检临床标本的回顾性统计分析
多年来,我科室每年都收检了一些临床标本,这些临床标本系我中心供血区域内的医院所送检.医院送检临床标本的目的,通常是要求我科室帮做一些有关免疫血液学方面的检查,检查的内容主要涉及母婴红细胞血型不合所致新生儿溶血病检查、疑难交叉配血试验、抗球旦白试验、ABO疑难血型鉴定、红细胞输血反应检查及常规交叉配血试验等6个项目.近期,笔者统计了2001年~2009年期间,我科室每年收检上述每个检查项目的标本总例数及每年收检上述6个检查项目的标本总例数,然后作相关分析,以评价我中心供血区域内的医院,在这段时间内开展上述6个检查项目的工作情况,为确定我科室以后在免疫血液学方面的工作目标提供参考,现报道如下.