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多色探针荧光原位杂交检测未受精卵18、21、X、Y染色体非整倍体
多色探针荧光原位杂交技术已广泛应用于临床助孕.应用间期细胞行原位杂交是检测染色体异常的新技术.我们应用多色探针荧光原位杂交(fluorescence in situ hybrid- ization,FISH)检测未受精卵X/Y、18、21等染色体的非整倍体,以分析未受精卵与染色体非整倍体之间的关系.
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树状DNA原位杂交技术在子宫颈癌人乳头状瘤病毒DNA分型检测和细胞学定位中的应用
人乳头状瘤病毒(human papilloma virus, HPV)是一种环状双链DNA病毒,其基因组大小为7.9 kb.目前,传统的细胞学和血清学方法诊断率较低,特异性欠佳.树状DNA杂交(DDH)技术是一种信号放大技术,它通过增加标记探针的拷贝数或标记物的信号强度来提高敏感度[1],具有与PCR技术相似的高敏感性.本研究采用以4层单体组成的3DNA树状体作为靶序列探针载体的DDH技术,并结合原位杂交方法,对45例临床诊断为宫颈癌患者的癌组织分别进行HPV16、18DNA检测,并就提高杂交敏感性的方法学做进一步探讨,为临床推荐一个行之有效的新方法.
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多色探针荧光原位杂交技术用于染色体疾病的诊断
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术是近几年来由细胞遗传学、分子生物学及免疫学技术相结合而产生的一种新技术,克服了使用单一细胞遗传学技术的局限性,故在产前诊断、基因定位、肿瘤细胞学、临床遗传病检测等领域中显示出重要应用价值[1,2]。我们将多色探针FISH用于染色体疾病的诊断,取得了良好效果,现报告如下。
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微孔处女膜合并妊娠1例
患者女,24岁,因停经43 d,要求终止妊娠于2005年7月10日入院.病史采集:14岁月经初潮,规律,2005年5月27日末次月经.14岁时因"无月经来潮周期性下腹痛"曾在当地医院手术(术式不详).术后月经来潮,仍周期性下痛.停经41 d,来我院要求终止妊娠.入院后妇科检查:外阴发育正常,处女膜闭锁,见0.1 cm小孔,探针无法进入.肛查:子宫前位,稍大,双附件未见异常超声显示:早孕,宫内孕囊2.2 cm×0.7 cm×1.7 cm,囊内胚芽0.3 cm,可见胎心搏动.
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子宫内膜结核致阴道上端-宫颈闭锁1例
患者女,22岁,已婚,G0P0.因"继发闭经6年"入院.既往月经正常,经量少,伴轻微痛经.入院前6年无明显诱因出现月经量渐少,后闭经,偶伴下腹部阵发性隐痛,可自行缓解,不具有周期性,无阴道溢液,不伴恶心、呕吐、腹胀痛及尿急、尿频、尿痛等症状,无午后低热及盗汗史.继往体健,无咳嗽、咳血及胸痛等症状.查体:发育正常.妇科检查:已婚未产式,阴道通畅,深8 cm,顶端呈盲状,有1针尖样小孔,探针不能进入,阴道穹隆消失,未见子宫颈.子宫水平位,偏右后,正常大小.
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荧光原位杂交技术分析足月小样儿染色体畸变一例
患儿男,足月小样儿,胎龄40周,出生体重2200 g,头围28cm,身长45cm.患儿呈现小颅、扁平脸、宽额,小眼且睑裂狭小,耳小低位,小鼻.鼻梁较低且鼻根宽大.全身体格检查未发现明显异常,超声检查未见内脏异常,初步怀疑患儿可能存在染色体异常.染色体核型分析显示患儿父亲为46,XY,t(10;15)(q25;q26),为表型正常的相互易位携带者;患儿母亲为46,XX,核型正常;患儿核型为46,XY,-15.+der(15)t(10;15)(q25;q26)pat.为了寻找染色体易位断点,选择位于10q24的RP11-170O19探针和位于10q26.2的RP11-31A20探针进行荧光原位杂交(nuorescence in situ hybridization,FISH)分析.结果显示RP11-170O19探针与两条10号染色体的长臂均有杂交,RP11-31A20探针除与两条10号染色体的长臂均有杂交外,还与衍生的15号染色体长臂有杂交.
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妊高征患者产前后血小板膜结合纤维蛋白原的动态变化
近年有关妊高征患者血小板功能异常的研究增多.有学者发现血小板膜结合纤维蛋白原(Fg)量与血小板聚集性呈高度正相关,可作为研究血小板功能的一个重要指标[1,2].我们以荧光标记的特异单克隆抗体为探针,应用流式细胞术对妊高征患者外周血血小板膜结合Fg进行动态观察,以探讨血小板聚集性增高在妊高征发病机制及判断病情中的作用.
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HLA-DQBI等位基因与妊娠肝内胆汁淤积症的相关性研究
妊娠肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)是常见的妊娠并发症,该病常致早产及死胎,围产儿死亡率远高于正常妊娠.本病病因至今未明,流行病学证实本病具有明显复发性及家族性[1].近来有资料表明妊娠后母胎免疫失调可能与本病密切相关[2].出于ICP遗传背景考虑及人白细胞抗原(human leucocyte antigen, HLA)及基因型与自身免疫性疾病的密切关联,本研究从免疫遗传学角度采用聚合酶链反应序列寡核苷酸(PCR-SSO)探针杂交法对江苏籍汉族ICP患者HLA-DQBI等位基因多态性进行了探讨.
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聚合酶链反应-酶联免疫法筛选孢子丝菌特异性探针
目的:筛选出对孢子丝菌结合效率相对较高的探针。方法以50株纯培养的孢子丝菌及标准株为样本,以毛霉、烟曲霉、念珠菌各1株为阴性对照,用聚合酶链反应-酶联免疫法(PCR-ELISA)对已报道的5个孢子丝菌特异性探针(U26852、U26866、U26866'、M85053及AF117945)进行筛选。记录各探针与合成DNA片段杂交底物显色与否及酶免疫测定指数(EI)值。结果 PCR产物测序证实5个探针均位于产物序列上;在相同的ELISA条件下,探针U26852显色强,EI值高。结论针对28SrRNA的探针U26852是目前与孢子丝菌结合效率相对较高的探针。
关键词: 孢子丝菌 探针 聚合酶链反应-酶联免疫法 -
阻断协同受体功能防治HIV-1感染的新策略
自发现趋化因子受体是HIV-1的协同受体以来,人们就一直在探讨以协同受体为抗HIV一1病毒治疗靶标,通过阻断或限制CCR5和CXCR4的功能阻止HIV-1的复制与传播.协同受体的种类很多,它们在HIV-1感染和AIDS病程中的作用机制已有综述[1,2],有关中国人群中协同受体多态性及其意义的研究已有初步报道[3].近年来,针对HIV-1结合协同受体CCR5和CXCR4感染靶细胞的关键环节,利用趋化因子(及衍生物)、抗体、核酶、化学药物、细胞因子、协同受体探针等手段阻断HIV-1感染和AIDS病程的研究取得了一些进展,现综述如下.
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通过辅助受体阻断HIV-1感染的机制与新药研究的相关进展
自1996年发现趋化因子受体是HIV-1的辅助受体(以前翻译为协同受体,在本文中统一称之为辅助受体)以来[1,2],人们就希望以辅助受体为抗HIV-1病毒治疗靶标,通过阻断或限制CCR5和CXCR4的功能阻止HIV-1进入宿主细胞[3-5].近年来,已发现许多小分子抑制剂,部分已进入Ⅲ期临床试验.这些小分子抑制剂将很有希望成为廉价的抗艾滋病(AIDS)的药物.我们已经论述了[6]通过细胞因子下调辅助受体表达、单克隆抗体中和辅助受体、核酶失活辅助受体和辅助受体探针捕获等方法来阻断辅助受体,以防治HIV-1感染.现将HIV辅助受体研究新进展、辅助受体的小分子抑制剂及其与HIV感染的机制等综述如下.
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石蜡切片人乳头瘤病毒6/11原位杂交的体会
目的 探讨原位杂交技术在检测组织标本中人乳头瘤样病毒的应用.方法 组织标本固定、制片后,应用标记探针与组织细胞中的核酸序列特异性杂交,信号放大后用DAB进行显色,从而检测人乳头瘤样病毒的表达.结果 40例标本,阳性38例,阳性率为95%.结论 此方法定位准确,特异性强,敏感度高.
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自制泪道探针治疗不同年龄段先天性鼻泪管阻塞
目的 探讨不同年龄段先天性鼻泪管阻塞泪道探通术的疗效.方法 先天性鼻泪管阻塞206例(282眼),按年龄分为3~6个月、7~12个月、13~54个月3组.所有患儿均于局部麻醉下用自制的泪道探针行泪道探通术.结果 3~6个月组为99.48%,7~12个月组为92.65%,13~54个月组为66.67%.随着年龄增长总治愈率逐渐降低.治愈率组间比较:3~6个月组高于7~12月组,差异有统计学意义(P=0.005);7~12月组高于13~54月组,差异有统计学意义(P=0.006).结论 局部麻醉下自制泪道探针泪道探通术是治疗先天性鼻泪管阻塞的有效方式,3~6月是佳的探通时机,随着年龄增长,治愈率逐渐下降.
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潇莱威滴眼液在泪道再通术中的应用
我们自1998年10月始应用探针或高频电灼、Md:YAG激光探通泪道,联合潇莱威滴眼液填充泪道治疗泪道阻塞,取得良好疗效,现报告如下.
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新生儿泪囊炎的治疗
新生儿泪囊炎是小儿常见眼病,治疗方法较多,各家意见不一.我科自1998年至2000年采用泪道加压冲洗法及自制探针探通法治疗新生儿泪囊炎80例,效果满意,现报告如下.
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泪道阻塞注水式引导线逆行置管术的设计
泪道阻塞是临床常见病多发病,治疗方法较多,但疗效各异.我院自1993年起应用留美博士王永龄教授传授的硅管留置术或联合激光、高频电灼等治疗,取得较为理想的临床效果.其中硅胶管插管操作比较简单而且人们已设计出各种各样的器械,并进行技术改进.然而即使有经验的眼科医师,当他试图从鼻腔中找到金属探针时,有时也会遇到困难.我科自行设计一种简单易行的注水式单丝引导线逆行置管法,大大缩短了手术操作的难度、时间,提高了成功率,患者无任何痛苦,而且取材方便.
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泪道抽吸探通术治疗新生儿泪囊炎
新生儿泪囊炎为婴幼儿常见病,是由于鼻泪管下端的胚胎性残膜没有退化,阻塞鼻泪管下端,泪液和细菌潴留在泪囊内引起继发性感染所致.约有2~4%的足月产婴儿,可能有此种残膜阻塞[1].作者自1995年以来用自制探针行泪道抽吸探通术治疗272例,取得了较好疗效,现报告如下:
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眼眶内多发巨大木质异物漏诊一例
患者张××,女,43岁,主因"右眼斜且下睑间断脓液流出半年而就诊,查:右眼下睑可见不规则瘢痕,瘢痕中央有脓痂覆盖,清除后可见一孔,探针可进入约1cm,轻压周围组织,有极少量脓液流出,右眼位偏向颞上方,眼球向下运动受限,眼底未见明显改变.
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改良探针治疗顽固性婴幼儿泪囊炎
婴幼儿泪囊炎临床上常见,多是新生儿鼻泪管先天性阻塞致泪道感染而成.绝大多数患儿经泪道冲洗或泪道探通术可以治愈.曾有报道治愈率达98.1%[1],但仍有极少数难治病例形成顽固性婴幼儿泪囊炎.笔者试用改良探针治疗32例,收到满意效果,现报告如下.
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冲洗式泪道探针治疗先天性鼻泪管阻塞冲洗式泪道探针治疗先天性鼻泪管阻塞
先天性鼻泪管阻塞是常见的婴儿眼病,有的并发泪囊炎,自1997年1月~1999年12月我科用冲洗式泪道探针对连续两日常规加压冲洗无效者行泪道探通术,效果满意,总结如下。1 资料和方法 本组共44例(44只眼),男性27例,女性17例;年龄1月~3月2例,3+月~6月9例,6+月~1岁27例,1+岁~3岁6例;单纯性鼻泪管阻塞25例,并发泪囊炎者19例。 治疗方法:泪道探通术前均连续两日作常规泪道加压冲洗,并发泪囊炎者加抗菌素控制炎症,待分泌物减少或消失后再行探通术。患儿取仰卧位。表面麻醉后由助手将患儿四肢及头部固定,用5号或6号苏州施强医疗器厂生产的冲洗式泪道探针,暂不接注射器,按常规泪道冲洗方法,由下泪小点进针。碰到骨壁后接上装有庆大霉素滴眼液的5ml注射器,注液冲洗,可见冲洗液自上泪小点返流,证明鼻泪管阻塞。同时也说明探针所在的位置正确。将泪囊中的分泌物冲洗干净,取下接在探针上的注射器,不拔针,将碰到骨壁的探针稍退后转至垂直位,逐渐将探针慢慢的插进鼻泪管,此时进针的阻力并不大,当探针的顶端到达鼻泪管下端闭锁处时阻力加大,稍用力下插探针时出现落空感,停止进针。进针深度约2.5~3.5cm。再将注射器接上探针进行冲洗,患儿即有吞咽动作和同侧鼻孔有冲洗液流出,证明闭锁处已探通,一边慢慢退针,一边继续注射冲洗液进行冲洗,后将探针拔出。探通过程应小心进行,操作要轻柔,不可造成假道,尽量避免和减少粘膜的损伤。探通后注洗应缓慢,注洗液量不要太多,一般3~4ml即可。以免患儿因来不急吞咽而吸入气管,术后连续3天冲洗泪道,以检查泪道是否通畅,如果不通次日可再次探通。