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"彗星"分析法在放射生物学中的应用
"彗星"分析法(comet assay)又叫单细胞凝胶电泳(single cell gel eletrophoresis, SCGE)或微凝胶电泳,是一种比较理想的单细胞水平检测哺乳类有核细胞DNA损伤的新技术.由Ostling等[1]1984年首次提出,后经Singh等[2]逐渐改进.现主要分为中性SCGE和碱性SCGE.其原理如下:去污剂或高盐裂解溶液破坏细胞膜,使得95%以上的蛋白质及细胞内其他成分渗出膜进入溶解液,DNA由于相对分子质量大而留在原位.
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肾素原受体在肾脏疾病中的研究进展
肾素(renin)是一种天冬氨酸蛋白酶,通过限速反应裂解血管紧张素原以产生血管紧张素Ⅰ.组织局部肾素浓度显著高于循环中的浓度,提示在局部组织可能存在能与肾素结合的高亲和力受体.2002年,Nguyen等[1]首先在人类肾小球系膜细胞克隆出肾素/肾素原受体(prorenin receptor,PRR).肾素原受体能够通过与肾素/肾素原相结合引起肾素原构象变化,激活细胞内信号通路.与肾素原-血管紧张素系统(RAS)其他反应元件不同的是,肾素原受体表达并非完全与RAS系统血流动力学功能相关.
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p53促凋亡蛋白ASPP在恶性血液病中表达的研究进展
细胞凋亡(apoptosis)也称为程序性细胞死亡(programmed cell death),是多细胞有机体为保持自身组织的稳定,调控自身细胞的增殖和死亡之间的平衡,由基因控制的细胞主动性死亡过程 [1].它以质膜发泡、细胞质固缩、核染色体裂解和凋亡小体的形成为特征,因此与病理情况下的细胞坏死有本质的区别.在细胞凋亡过程中,p53蛋白起着至关重要的作用.
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尿素加盐酸胍裂解精子效果分析
目的:探讨尿素加盐酸胍裂解精子的有效性。方法将80例少弱畸精子症患者按随机数字表法分成两组,每组40例,采集精液标本提取精子,分别应用尿素加盐酸胍裂解法或尿素裂解法对精子进行裂解。结果尿素加盐酸胍组得到蛋白质浓度、蛋白质点分别为(1.25±0.13)μg/μl、(864±52)个,均明显高于尿素组的(0.74±0.15)μg/μl、(718±63)个(P<0.05)。结论尿素加盐酸胍裂解法能得到更丰富、更全面的精子蛋白质种类,并提高蛋白质含量,使双向电泳图谱更加完善,更有利于寻找差异蛋白质。
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EB病毒裂解期DNA复制的研究概况
Epstein-Barr病毒(EB病毒)属人类疱疹病毒,是传染性单核细胞增多症,Burkitt淋巴瘤和鼻咽癌的主要诱发因素,其中鼻咽癌在我国南方,特别是广东和广西等省(区)发病率很高(10~30/100 000),占癌症发病率首位.此外,EB病毒与T淋巴细胞瘤,口腔腺体肿瘤,胸腺瘤,器官移植后淋巴瘤等肿瘤的病因关系在国际上也有报道[1,2].
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降钙素原检测的临床意义及应用
降钙素原(PCT)作为严重细菌感染的标志物,对疾病的诊治和预后评估是相当重要的.近年来降钙素原的检测越来越得到重视,本文对PCT的临床意义和应用进行阐述.1 降钙素原的特性降钙素原是一种功能蛋白,由114~116个氨基酸分子组成.PCT是降钙素(CT)的前体,它可以在酶的作用下逐步裂解成氨基末端PCT、32 个氨基酸的CT 和21 个氨基酸的降钙蛋白.正常情况下,降钙素原由甲状腺C 细胞产生与分泌.在病理状态下,甲状腺以外的其他器官组织都可产生降钙素原[1].
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一种适用于流式细胞术的简便红细胞裂解法
目的探讨一种简便、快捷的红细胞列解法,以适宜应用流式细胞仪对白细胞亚群进行检测和分选.方法采用常规试剂配置不同浓度应用液,按步骤完成红细胞裂解过程,上机检测.同时采用密度梯度离心法提取单核细胞和粒细胞,比较两者上机检测的结果.结果在流式细胞仪检测的细胞点图上,可见采用红细胞裂解法处理的标本白细胞成簇分布,淋巴细胞、单核细胞、粒细胞群清晰可辩,通过测定各群细胞上标记的特异性荧光,可进一步分离出淋巴、单核和粒细胞的亚群,细胞纯化程度高.采用密度梯度离心法纯化的粒细胞或单核细胞,在细胞点图上可见细胞散在分布,不成群,纯化程度低.其原因可能是该方法中长时间离心、改变血液渗透压、反复离心洗涤等步骤影响了白细胞的形态结构有关.结论本实验介绍的红细胞裂解法满足了白细胞流式细胞仪检测分选要求,价格低廉,是一种简便快捷、经济实用的白细胞纯化分选方法.
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2-巯基乙醇裂解IgM抗体实验条件的改良
新生儿溶血(HDN)是由母婴血型不相合时,胎儿红细胞进入母体血循环,母体产生了相应的IgG类抗体,此类抗体通过胎盘,作用于胎儿红细胞,使之产生不同程度的溶血[1].产前检查IgG抗体的效价,能够对HDN的发生、发展提供早期辅助诊断依据而具有重要的临床意义.本文分别用2-巯基乙醇通过2种方法3种不同的水浴时间处理IgM,比较其对IgM的破坏率,旨在发现更简便、准确的实验方法,现报道如下.
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脑血红素加氧酶(HO)系统与小鼠学习记忆关系研究
早有报道,HO裂解血红素生成CO,后者涉及学习记忆功能的调节.本研究以NIH雄性小鼠为对象,探讨了HO活性及表达改变对小鼠学习记忆的影响,以及学习过程对HO活性及表达的反影响,结果显示.
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108.用于血栓性血小板减少性紫癜治疗的VW因子抗原,VW因子裂解蛋白酶和S蛋白的比较
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参与白三烯合成的酶基因多态性与支气管哮喘
一、白三烯的合成及其在哮喘发病中的作用1.白三烯的合成过程:白三烯是花生四烯酸(arachidonic acid,AA)的代谢产物.细胞在刺激因素的作用下激活,其膜磷脂被磷脂酶A2(PLA2)裂解为AA,AA结合到5-脂加氧酶激活蛋白(FLAP)上[1].尽管FLAP无酶活性,但它可增强底物与5-脂加氧酶(ALOX5)的相互作用.FLAP将AA呈递给已转移到核膜上的ALOX5,被ALOX5氧化为5-羟过氧化二十碳四烯酸(5-HPETE),然后被ALOX5氧化为不稳定的环化物白三烯A4(LTA4).
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PAI测定及其临床意义
纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor,PAI)是纤溶系统的重要组成成分,是纤溶酶原活化系统(plasminogen activator system,PAs)的重要调节物。随着对PAI,尤其是PAI-1、PAI-2的测定及其与疾病关系的深入研究,发现PAI与许多疾病有较密切的关系,现就其进展综述如下。1 PAI的特性与功能 PAI是PAs特异、快速的抑制物,研究已发现四种不同类型的PAI(PAI-1、PAI-2、PAI-3、PAI-4)均有抑制纤溶酶原活化剂(PA)的作用。PAI与相应的PA作用,形成等摩尔复合物,通过蛋白裂解,导致PA灭活〔1〕。其中PAI-1和PAI-2是主要的特异性抑制物,下面简介两者的特性和功能。
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血管内超声溶栓治疗髂股静脉血栓形成的护理
所谓血管内超声溶栓术,是将高新超声材料、灵敏的传感技术、电子技术、计算机技术集为一体,通过超声导管把高能量、低频率超声波送到血栓部位,通过超声探头直接振荡血栓裂解,加上超声波产生的局部负压作用裂解血管内的血栓,使血栓溶解成血液成分.我科于1999年1月~1999年5月开展这一新技术,现将护理观察体会报告如下.
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腰椎间盘髓核化学溶核术的护理配合
应用椎间盘突髓核溶解术治疗椎间盘突出症,是近年国内骨伤科开展的一项新技术.椎间盘髓核溶解术是将能溶解椎间盘髓核组织的药物,注入髓核腔内硬膜囊外腔,使髓核组织裂解吸收,从而减轻或消除对神经根或硬膜囊的刺激与压迫症状,而达到改善临床症状的治疗目的.我院于1998年11月开始应用胶原酶注射治疗腰椎间盘突出症.现将手术配合介绍如下.
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血细胞分析仪测定红细胞平均体积降低对血小板计数的影响
血小板是从骨髓成熟的巨核细胞胞浆裂解脱下来的具有生物活性的小块物质.血小板计数是血小板检查的一个动态指标,也是其他血小板参数可靠性的基础,其检测结果的可靠性至关重要.血小板由于体积小,特别容易发生黏附、聚集和变性破坏,故常难以准确计数.血液细胞分析仪的普及,大大提高了工作效率,但对血小板检测,其结果往往不很稳定,现对平均红细胞体积(MCV)降低对血小板计数的影响进行分析探讨.
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流式细胞术检测重组LLO溶血的效果
目的:分析rLLO在溶血过程中对CD45+细胞的影响.方法:利用流式细胞术,通过与商品化裂解液和自制NH4Cl裂解液的比较,观察rLLO与以上2种裂解液裂解效果的差异.结果:rLLO具有较强的裂解红细胞的能力,裂解效果与商品化裂解液和自制NH4Cl裂解液基本一致.另外,三种裂解液对细胞膜的渗透性均有较大影响.结论:rLLO对细胞膜CD45表面抗原的损伤程度低于商品化裂解液.
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端粒酶检测方法的改进
TRAP-PCR法是端粒酶检测的经典方法,在此基础上,对细胞裂解液成分、PCR等作了进一步的改进,改进后细胞裂解效率更高,而端粒酶的活性并没有受到影响,同时电泳条带更为清晰.
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试用扩增仪裂解血清标本
HBV-DNA的PCR检测中一般厂家的试剂盒说明书上标本的裂解处理都是在沸水中煮沸15 min后高速离心,但是无专门配置的煮沸装置,在煮沸过程中离心管盖子容易冲开而进水,经常返工,操作很不方便.笔者试用PCR扩增仪裂解血清标本,结果令人满意,现报告如下.
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A型肉毒毒素注射除皱应用体会
皱纹主要分为四种类型:固有性皱纹、重力性皱纹、光化性皱纹、动力性皱纹.肉毒毒素的作用靶点为周围运动神经末梢,通过对乙酰胆碱释放所必需的蛋白质的裂解而阻断神经肌肉传导,从而引起松弛性麻痹,因此对动力性皱纹的效果明确[1];同时,利用肉毒毒素使肌肉麻痹继而发生部分废用性萎缩的特点,可以注射到咬肌,以达到瘦脸的效果[2].
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过敏性紫癜系统性红斑狼疮患者的sICAM-1检测
细胞间粘附分子-1(ICAM-1)是一种90KD的细胞表面唾液酸糖蛋白,属免疫球蛋白超基因家族的一类粘附分子,在免疫和炎症反应中起促进粘附的作用.血清可溶性细胞间粘附分子(sICAM-1)是ICAM-1蛋白裂解脱落的产物,仍具有ICAM-1的生物特性,即仍能与淋巴细胞功能相关抗原(LFA-1)结合发生一系列生物反应.有报道[1],某些血管炎病人血清中sICAM-1水平明显增高.为此,我们对过敏性紫癜与系统性红斑狼疮(SLE)患者血清sICAM-1浓度作了检测,以探讨s ICAM-1在这两种疾病中的临床价值.现将结果报告如下.