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PAI-1与不同年龄阶段2型糖尿病患者大血管病变关系的研究
目的 探讨不同年龄阶段,2型糖尿病患者血浆纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)与糖尿病大血管病变的关系.方法 246例2型糖尿病患者,按年龄及有无大血管并发症分为6组,采用酶联免疫吸附法测定其 PAI-1的水平.选取49例正常对照组.结果 糖尿病各年龄组在糖尿病病程无差异的情况下,随年龄增长PAI-1水平逐渐升高(P＜0.01);各相应年龄组中有大血管病变组比无大血管病变组PAI-1水平升高(中青年组P＜0.05,老年组P＜0.01);多元相关回归分析显示糖尿病有大血管病变组PAI-1与年龄、游离脂肪酸(FFA)、体重指数(BMI)和空腹胰岛素(FINS)相关;仅在青中年组与PAI-1表现相关性的指标是腰臀比(WHR)、甘油三酯(TG)、糖化血清蛋白(GSP)、血尿酸(UA)和FINS.仅在老年组表现相关性的指标是TCH.结论 PAI-1水平升高与糖尿病大血管病变有关.PAI-1与年龄显著相关,可能使老年人糖尿病大血管病变发生的机会增加.
关键词： 糖尿病 2型 糖尿病血管病变 纤溶酶原激活物抑制物1 -
沙鼠脑缺血性再灌注及西比灵干预对PAI-1表达变化的影响
目的研究沙鼠脑缺血再灌注后脑内1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)蛋白表达变化,以及西比灵干预的影响.方法制作沙鼠脑缺血再灌注模型,实验前给沙鼠喂食西比灵,分别在缺血再灌注(IR)1、3、7 d,用免疫组织化学方法检测脑内PAI-1蛋白的表达,并与其他各组比较.结果正常对照组与假手术组沙鼠脑组织中有微弱PAI-1的阳性表达.缺血再灌注1、3、7d PAI-1呈阳性或强阳性表达,蛋白的表达随再灌注后时间的延长而递增,7 d达高峰,不同时间点PAI-1的表达差异有统计学意义(P＜0.01).西比灵干预后PAI-1的表达趋势亦同缺血再灌注组,但阳性率高于缺血再灌组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论沙鼠脑缺血再灌注可诱导脑组织神经元和胶质细胞表达PAI-1蛋白,西比灵可上调PAI-1蛋白表达而有利于抵御脑缺血再灌注造成的脑损伤.
关键词： 再灌注 脑缺血 氟桂利嗪 纤溶酶原激活物抑制物1 -
2型糖尿病合并高血压患者大血管病变的炎性机制
目的 探讨2型糖尿病合并高血压时慢性炎性因子与大血管病变的关系.方法 131例2型糖尿病患者分为4组,比较各组糖尿病并发高血压和大血管病变时的细胞因子水平.结果 正常对照与4组糖尿病亚组相比,CRP、IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α、PAI-1水平差异均有统计学意义.糖尿病并大血管病组的CRP、IL-6、TNF-α、PAI-1水平显著高于糖尿病无大血管病变组(P＜0.05);糖尿病高血压合并大血管病变组IL-6、TNF-α水平显著高于糖尿病合并大血管病变组(P＜0.05).IL-6、TNF-α与BMI、WHR、FFA、TC、FINS、UA均呈正相关,BMI、FINS作为独立因素影响IL-6、TNF-α的水平.结论 IL-6、TNF-α可能在2型糖尿病大血管病变尤其同时合并高血压时发挥了一定的炎性作用.
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脑梗死患者血糖和糖化血红蛋白与纤溶酶原激活物抑制物1的相关性研究
目的 探讨血浆纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)活性与急性脑梗死患者空腹血糖(FPG)及糖化血红蛋白(HbAIC)的关系.结果 应用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测急性脑梗死患者(162例)血浆PAI-1活性.结果 (1)血脂、体重指数、C-反应蛋白(CRP)、神经功能评分与PAI-1活性无明显相关(P>0.05).(2)急性脑梗死患者FPG、HbA1c与PAI-1活性密切相关(R=0.177,0.179,P<0.05).结论 FPG、HbA1c与PAI-1活性升高有关.积极控制FPG、HbA1c可能降低PAI-1活性,改善预后.
关键词： 脑梗塞 血糖 血红蛋白A 糖基化 纤溶酶原激活物抑制物1 -
脂肪因子在代谢综合征中的作用新进展
代谢综合征（ metabolic syndrome ，MS）是心血管多种危险因素在个体内集聚的状态，包括肥胖尤其是向心性肥胖、胰岛素抵抗（ insulin resistance ，IR）、2型糖尿病（ type 2 diabe-tes mellitus，T2DM ）、血脂异常、高血压、冠心病、非酒精性脂肪肝、低度炎症反应等。其中肥胖和IR为中心环节［1］。白色脂肪组织（white adipose tissue，WAT）是不均匀的混合物，主要成分为前脂肪细胞和脂肪细胞，还包括渗透入WAT的非脂肪细胞和组织成分：如内皮细胞、巨噬细胞、血管、神经等。 WAT可分泌多种脂肪因子［2］，自1994年Halaas等应用DNA重组技术，在大肠杆菌中合成肥胖基因表达产物，并命名为瘦素以来，已发现10余种脂肪因子，包括瘦素（ Lep-tin）、脂联素（ Adiponectin ）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（ plas-minogen activator inhibitor-1， PAI-1）、血管紧张素原（ angio-tensinogen，AGT）、血清淀粉样蛋白 A （ serum amyloid A， SAA）、抵抗素（Resistin）、锌α2糖蛋白（zinc-α2-glycoprotein， ZAG）、Apelin、视黄醇结合蛋白-4（ retinol binding protein-4， RBP-4）、Vaspin （ visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor ）、内脂素（ Visfatin ）、网膜素（ Omentin ）、趋化素（ Chemerin ）。渗透入WAT的炎症细胞分泌的炎症因子：肿瘤坏死因子-α（ tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）也属于脂肪因子。现将脂肪因子在MS，特别是在肥胖及IR中的作用新进展综述如下。
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PAI-1基因多态性与2型糖尿病患者股动脉内中膜厚度的关系
目的探讨人类纤溶酶原激活物抑制物-1 (PAI-1) 基因4G/5G多态性与2型糖尿病(T2DM)患者股动脉内中膜厚度(FA-IMT)的关系.方法采用等位基因特异性多聚酶链式反应技术检测303例T2DM患者和93例健康个体PAI-1 基因4G/5G多态性,利用B型超声检测T2DM患者FA-IMT同时检测其代谢指标.结果 303例T2DM患者与93例健康对照基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg氏平衡;健康对照组与T2DM组2组患者PAI-1基因型及等位基因频率比较差异无统计学意义(P＞0.05);PAI-1各基因型人群的一般资料、代谢指标和FA-IMT等相比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PAI-1 4G/5G基因型多态性可能不是致T2DM的遗传易感因素,也可能不是致T2DM患者FA-IMT的遗传易感因素.
关键词： 糖尿病 2型 纤溶酶原激活物抑制物1 股动脉 血管中膜 -
山东沿海地区2型糖尿病血浆纤溶酶原激活物抑制物-1活性与基因多态性的相关性研究
目的探讨山东沿海地区2型糖尿病血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)活性的变化及与基因多态性的相关性.方法对116例2型糖尿病、40例健康对照者分别运用等位基因特异性PCR扩增技术测定PAI-1基因启动子区4G/5G多态性,发色底物法测定血浆PAI-1活性.结果⑴2型糖尿病患者血浆PAI-1活性明显高于对照组(P＜0.01)⑵2型糖尿病与对照组相比4G/4G、5G/5G基因型频率差异无统计学意义(χ2＝2.956,P＝0.225)⑶血浆PAI-1活性与基因类型及空腹胰岛素呈显著相关性(P＜0.01)⑷甘油三酯与PAI-1活性的相关性与基因类型有关, 4G/4G基因型者甘油三酯与PAI-1活性密切相关(r＝0.42,P＜0.01).结论 2型糖尿病患者PAI-1活性升高是代谢和遗传因素共同作用的结果,甘油三酯和PAI-1活性的相关性与4G/5G基因多态性有关.
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体外培养的血管内皮细胞低氧低糖损伤后 tPA、PAI-1表达变化
目的:观察体外培养的血管内皮细胞低氧低糖损伤后组织型纤溶酶原激活剂(tPA)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)表达变化,探讨脑缺血后纤溶系统的变化及机制.材料和方法:制备体外内皮细胞低氧低糖损伤模型,利用HE染色、免疫细胞化学染色观察tPA、PAI-1表达变化.结果:低氧低糖损伤后,tPA、PAI-1表达均明显增强.结论:成功制备体外内皮细胞低氧低糖损伤模型.内皮细胞低氧低糖损伤可以诱导tPA、PAI-1表达增多,进一步说明脑缺血损伤后tPA、PAI-1表达增加并参与损伤过程.
关键词： 内皮细胞 组织型纤溶酶原激钗伙 纤溶酶原激活物抑制物1 -
蚯蚓蛋白激酶对体内纤溶活性的增强作用研究
目的:探讨蚯蚓蛋白激酶制剂( LK)的纤溶增强作用.方法:采用静脉给药方法,观察LK对SD大鼠纤溶激活因子t-PA及其抑制物PAI-1的急性作用.结果:给药后,PAI-1活性被显著抑制(P＜0.01),t-PA活性则明显增强(P＜0.01).剂量1 200 U/kg体重的LK,其增强t-PA作用显著大于600 U/kg体重剂量LK(P<0.05).此外,体外观察表明:LK具有明显的激活纤溶酶原(Plg)作用,且有量-效关系,具有一定的浓度依赖性(1.56-25 kU/L).结论:结果表明,LK具备增强纤溶的特性,静脉给药作用快速而肯定.
关键词： 蛋白激酶类 纤维蛋白溶解 组织型纤溶酶原激活物 纤溶酶原激活物抑制物1 -
凝血和纤溶失衡在急性肺损伤中的作用
急性肺损伤(acute lung injury,ALI),以肺泡上皮细胞和血管内皮屏障损伤、急性炎症反应、富含蛋白的肺水肿为特征,是一种临床常见的危重病症,可进一步发展为急性呼吸窘迫综合症(acute respiratory distress syndrome,ARDS).
关键词： 急性肺损伤 呼吸窘迫综合征 组织因子 蛋白质C 纤溶酶原激活物抑制物1 -
转化生长因子β1对系膜细胞内1型纤溶酶原激活物抑制物基因组蛋白乙酰化修饰的影响
目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)基因启动子及转录区域内组蛋白尾部乙酰化修饰的影响.方法 采用染色质共免疫沉淀与实时定量PCR技术,观察高糖及TGF-β1对PAI-1基因启动子及转录区组蛋白H3赖氨酸残基9位乙酰化(H3K9Ac)修饰的影响；并应用共免疫沉淀方法探讨转录因子CREB结合蛋白(CBP)与Smad3、Sp1蛋白之间的相互作用.结果 在PAI-1基因启动子的4个区域内,TGF-β1(10 μg/L)刺激显著增加了P1、P2、P3区域的H3K9Ac修饰(均P＜0.05),而在距离转录起始点较远的P4区域,H3K9Ac修饰水平没有明显改变；而在PAI-1基因的转录区,TGF-β1刺激显著增加了T1区域的H3K9Ac修饰(P＜0.05),而T2区没有明显改变.高糖刺激引起系膜细胞内PAI-1基因的表达水平及其启动子P1区域H3K9Ac修饰显著增加(P＜0.05),应用TGF-β1中和性抗体预处理显著抑制了高糖引起的PAI-1基因启动子区H3K9Ac修饰(P＜0.01).TGF-β1刺激能够显著诱导Smad3、CBP蛋白结合在P1、P2、P3区域(均P＜0.05)；同时,TGF-β1刺激能够诱导CBP、Sp1与Smad3蛋白的结合,进而引起H3K9Ac修饰.结论 TGF-β1能够诱导PAI-1基因启动子与转录起始区发生H3K9Ac修饰,促进Smad3与Sp1及CBP蛋白相互结合,促进PAI-1基因的转录表达.
关键词： 转化生长因子β1 纤溶酶原激活物抑制物1 乙酰化作用 启动子 smad3 -
利拉鲁肽对肿瘤坏死因子α刺激下大鼠肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物1和胞间黏附分子1表达的影响
目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠肾小球系膜细胞(RGMC)中纤溶酶原激活物抑制物1 (PAI-1)和胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响以及利拉鲁肽(Liraglutide,Li)的干预作用.方法 将培养的RGMC株分为6组,分别为正常对照组、TNF-α组、Li低浓度( 10 nmol/L)组、中浓度(100 nmol/L)组、高浓度(1000 nmol/L)组,以及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐( PDTC)组.用ELISA法测定各组RGMC的PAI-1以及ICAM-1蛋白表达.用RT-PCR法测定各组RGMC的PAI-1以及ICAM-1基因表达. 结果 TNF-α可上调RGMC中PAI-1、ICAM-1蛋白及基因表达(均P＜0.05),利拉鲁肽可抑制TNF-α诱导的RGMC中PAI-1、1CAM-1蛋白及基因的高表达(均P＜ 0.05).与TNF-α组比较,PDTC组PAI-1、ICAM-1表达量显著减少(均P＜ 0.05).结论 利拉鲁肽可减轻体外培养RGMC中TNF-α诱导的PAI-1和ICAM-1表达.
关键词： 糖尿病肾病 肿瘤坏死因子α 纤溶酶原激活物抑制物1 胞间黏附分子1 利拉鲁肽 -
组蛋白乙酰化修饰对系膜细胞内纤溶酶原激活物抑制物1基因表达的影响
目的 探讨改变组蛋白乙酰化修饰水平对转化生长因子β1(TGF-β1)调控系膜细胞(MC)内纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)基因表达的影响.方法 利用细胞转染技术使MC内高表达组蛋白乙酰化酶(HAT)的CREB结合蛋白(CBP)、P300或去乙酰化酶(HDAC)1、3、5,通过荧光素酶检测、实时定量PCR和Western印迹法,观察TGF-β1(5μg/L)刺激下MC内PAI-1基因转录活性、mRNA及蛋白水平的改变；并利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA),观察其对PAI-1基因表达及TGF-β1-Smad蛋白信号途径的活性影响.结果 TGF-β1刺激增加了PAI-1基因的转录活性和mRNA水平(P＜0.05)；高表达CBP和P300显著促进了TGF-β1对PAI-1基因转录活化和mRNA及蛋白表达的调控(P＜0.05)；而高表达HDAC1、3、5及突变型CBP、P300则明显抑制了TGF-β1诱导PAI-1基因转录表达的调节(P＜0.05).改变细胞内HAT/HDAC水平没有影响TGF-β1诱导Smad2/3蛋白磷酸化的作用.HDAC抑制剂TSA显著增加了TGF-β1诱导PAI-1基因转录表达的调节,但对TGF-β1-Smad2/3信号途径的活化作用没有影响.结论 改变细胞内组蛋白乙酰化修饰水平能够影响TGF-β1对PAI-1基因的表达调控.
关键词： 组蛋白类 乙酰化作用 转化生长因子β1 纤溶酶原激活物抑制物1 系膜细胞 -
ERK1/2信号通路在甲状旁腺激素致人近曲小管上皮细胞分泌纤溶酶原激活物抑制剂1中的作用
目的 从体外观察ERK信号通路在甲状旁腺激素(PTH)致人近曲小管上皮细胞(HK-2)合成纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)中的作用.方法 以HK-2细胞株为研究对象,用不同浓度PTH(10-8、10-9、10-10、10-11、10-12 mol/L)作用细胞48 h,以及10-10 mol/LPTH 作用细胞不同时间(12、24、36、48、72 h),分别用RT-PCR法检测PAI-1 mRNA表达,Western 印迹法检测PAI-1蛋白表达.以10-10 mol/L PTH作用细胞48 h,分别观察细胞ERK 1/2抑制剂预处理前后磷酸化(p)ERK1/2、PAI-1mRNA及蛋白的变化情况.结果 10-12 mol/L PTH可促进细胞在基因及蛋白水平合成PAI-1,随着PTH浓度逐渐上升,PAI-1 mRNA及蛋白浓度均相应增加,以10-10 mol/L PTH组刺激作用显著,分别为对照组的4.01倍和3.81倍(均P＜0.01).但随着PTH浓度进一步增加,PAI- 1mRNA及蛋白浓度却随之下降.10-10 mol/L PTH作用细胞,12 h时有少量PAI-1表达,72 h时达峰值,并呈时间依赖性,分别为0h组的4.06倍和4.03倍(均P＜0.01).10-10 mol/L PTH作用细胞48 h,有大量的p-ERK1/2合成(P＜0.01),经ERK 1/2抑制剂预处理后,PAI-1及ERK均显著下降(均P＜0.01),但仍高于对照组(均P＜ 0.05).结论 ERK信号通路部分参与PTH致HK-2细胞合成PAI-1的作用.
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螺内酯对糖尿病大鼠肾小球保护作用的机制探讨
目的 观察螺内酯对糖尿病大鼠肾小球的保护作用并探讨其机制.方法 将SD大鼠随机分为健康对照组、病理组、螺内酯治疗组.治疗30 d后处死,观察肾小球病理形态变化;RT-PCR法观察肾脏皮质纤溶酶原激活剂抑制物1(PAI-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的变化;Western印迹法观察肾脏皮质PAI-1的表达;免疫组化方法观察肾脏皮质TGF-β1、纤连蛋白(FN)变化及检测肾皮质丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)活性.结果 与病理组比,螺内酯治疗后可下调肾皮质TGF-β1、PAI-1 mRNA与蛋白表达(P均＜0.05);降低肾皮质MDA水平[(0.95±0.20)比(1.23±0.31)nmol/mg,P＜0.05];增强SOD、GSH-Px、T-AOC活性[分别为(550.19±20.06)比(509.53±33.25)U/mg,(21.67±2.70)比(18.91±2.30)U/mg,(1.15±0.21)比(0.86±0.26)U/mg,P均＜0.05];减少FN在肾小球的沉积(P＜0.01);改善肾小球的病理状况.结论 螺内酯可能通过下调糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、PAI-1表达,降低肾皮质氧化应激水平,起到保护糖尿病大鼠肾脏,延缓肾小球硬化的作用.
关键词： 糖尿病肾病 醛固酮 转化生长因子β 纤溶酶原激活物抑制物1 氧化性应激 -
马兜铃酸对人脐静脉内皮细胞的作用
目的 探讨马兜铃酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的作用.方法 用马兜铃酸钠盐(AA-Na)干预体外培养原代HUVEC.用四唑盐比色法及乳酸脱氢酶释放法分别检测细胞增殖反应及细胞毒性作用.RT-PCR及酶联免疫吸附法分别检测转化生长因子β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)及血小板反应蛋白1(TSP-1)的mRNA表达及上清液含量.结果 10、20、40及80 mg/L浓度的AA-Na能显著抑制HUVEC增殖及有明显细胞毒效应(P＜0.01).与对照组相比,5 mg/L的AA-Na显著上调了HUVEC的TGF-β1、PAI-1及TSP-1 mRNA和蛋白表达(P＜0.05).结论 AA-Na可上调HUVEC的TGF-β1、PAI-1及TSP-1表达,此作用可能在慢性马兜铃酸肾病小动脉管壁病变的发病中起一定作用.
关键词： 马兜铃酸 内皮细胞 转化生长因子β1 纤溶酶原激活物抑制物1 血小板反应蛋白1 -
活性氧和转化生长因子β1在醛固酮上调纤溶酶原激活物抑制剂1中的作用
目的 探讨活性氧(ROS)、转化生长因子β1(TGF-β1)在醛固酮促进系膜细胞生成纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)途径中的作用.方法 用醛固酮刺激大鼠肾脏系膜细胞.采用激光共聚焦检测系膜细胞内ROS水平.以貂肺上皮细胞(Mvllu)生长抑制MTT法检测上清中TGF-β1活性.然后用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)与抗TGF-β1中和抗体阻断醛固酮刺激肾脏系膜细胞所产生ROS和TGF-β1.用RT-PCR观察系膜细胞PAI-1 mRNA的变化.用Westem印迹法测定系膜细胞培养上清液中的PAI-1.结果 醛固酮刺激大鼠肾脏系膜细胞24 h后,细胞内ROS水平上升到对照组的5倍(P＜0.01);细胞上清中活性TGF-β1浓度明显升高(P＜0.01);PAI-1 mRNA与蛋白表达分别上升到对照组的1.8倍(P＜0.01)和1.7倍(P＜0.01).而采用NAC抑制ROS水平的升高、采用抗TGF-β1中和抗体阻断TGF-β1的作用后,PAI-1mRNA表达分别下降了32%和30%(P＜0.01);PAI-1蛋白表达分别下降了21%与11%(P＜0.05),但仍未下降到正常水平.结论 ROS、TGF-β1在醛固酮上调系膜细胞的PAI-1表达方面起了重要作用,但醛固酮并非完全依赖ROS、TGF-β1促使PAI-1的表达上调.
关键词： 醛固酮 纤溶酶原激活物抑制物1 转化生长因子β 活性氧 -
结缔组织生长因子反义寡核苷酸对肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制物1表达的影响
目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ODN)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)mRNA表达和蛋白产生的影响,以明确CTGF在肾脏细胞外基质(ECM)降解中的作用.方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HKC),以脂质体介导方法将CTGF反义ODN转染细胞.以TGF-β1(5μg/L)刺激HKC不同时间后,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测PAI-1 mRNA表达;流式细胞仪法检测胞内PAI-1蛋白合成;Westem印迹方法检测HKC分泌到上清中的PAI-1蛋白含量.结果TGF-β1可诱导HKC高表达CTGF和PAI-1.转染后6 h,CTGF反义ODN可显著抑制TGF-β1诱导的HKC PAI-1 mRNA表达.转染后24 h,CTGF反义ODN可明显抑制胞内PAI-1蛋白合成,并减少了HKC分泌到胞外的PAI-1.结论CTGF在肾小管间质纤维化时ECM降解中起了关键调控作用,其反义ODN的导入可能是延缓肾小管间质纤维化的有效手段之一.
关键词： 结缔组织生长因子 反义寡核苷酸 纤溶酶原激活物抑制物1 肾小管上皮细胞 -
环加氧酶在梗阻性肾病大鼠肾脏的表达及莫比可的作用机制研究
目的观察环加氧酶(COX)在梗阻性肾病大鼠肾脏的表达,比较选择性COX-2抑制剂莫比可与消炎痛对COX、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)和基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)基因转录的影响.方法将输尿管梗阻大鼠随机分成不用药组(U)、消炎痛组(I)和莫比可组(M),设假手术组(C)为对照.4周后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-1、COX-2、PAI-1及TIMP-1的mRNA表达,免疫组织化学检测COX-1和COX-2的蛋白水平,并采用放射免疫法测定术侧肾脏残余尿液的血栓烷素B2(TXB2)浓度.结果COX-1的mRNA和蛋白水平在4组间差异无显著性意义.U组大鼠尿TXB2浓度急剧上升,术肾PAI-1和TIMP-1的mRNA表达明显上调,COX-2的基因表达和蛋白质合成大幅增加.莫比可能够显著抑制上述基因的转录(P＜0.05),而I组的数值则与U组相仿.M组和I组的尿TXB2浓度明显下降,尤以M组为著.结论COX-2参与了UUO发生、发展的病理过程.选择性COX-2抑制剂能够从抑制COX-2活性、下调COX-2、PAI-1及TIMP-1的基因转录等多方面发挥其积极的治疗作用.
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人纤溶酶原激活物抑制物1转基因小鼠的建立
目的建立人纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)转基因小鼠.方法利用构建的高效真核表达载体pCAGGS-PAI-1,制备注射用DNA.以显微注射法将目的DNA注入小鼠受精卵,再将受精卵移植到受体母鼠,制备转基因小鼠.经鼠尾组织DNA提取、PCR筛选、Southern杂交、DNA序列测定对转基因小鼠进行鉴定.结果对获得的29只小鼠经PCR筛选、Southern杂交分析、DNA序列测定,得到了2只整合了人PAI-1cDNA的转基因小鼠.在刚出生的转基因小鼠尾部及后肢发现出血性改变,免疫组织化学观察到在,肾脏局部PAI-1表达稍有增高.结论本研究中,我们建立了人PAI-1基因转基因小鼠,为进一步研究PAI-1在肾脏疾病中调控细胞外基质降解的机制提供了动物模型,为研究利用抗凝、促纤溶疗法治疗慢性肾炎奠定了基础.
关键词： 纤溶酶原激活物抑制物1 转基因小鼠
