首页 > 文献资料
-
细粒棘球绦虫DNA聚合酶δ小亚基EgPolD2基因的克隆及序列分析
目的 从新疆株细粒棘球绦虫原头蚴中克隆DNA聚合酶δ小亚基EgPolD2,进行序列测定和生物信息学分析.方法 设计EgPolD2特异性引物,用RT PCR方法从细粒棘球绦虫原头蚴cDNA中克隆EgPolD2基因,然后将其克隆至pMD18 T载体,测序并进行生物信息学分析,半定量反转录PCR分析其在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡中的表达情况.结果 EgPolD2基因开放阅读框为1218 bp,编码405个氨基酸,等电点为4.74.NCBI保守功能区分析软件预测EgPolD2蛋白第113~378个氨基酸为MPP_PolD2_C结构域.登陆GenBank进行Blast比对,EgPolD2与曼氏血吸虫SmPolD2基因同源性为32.1%,与线虫和人等其他物种PolD2基因同源性在18.3%~22.8%之间.进化树分析表明EgPolD2与SmPolD2相聚集,与其他物种同源性较低.半定量RT-PCR显示,EgPolD2在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡中均有表达,且表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 本实验成功克隆出细粒棘球绦虫EgPolD2新基因,为进一步研究抗细粒棘球绦虫药物靶标奠定了基础.
-
转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗诱导小鼠脾T淋巴细胞增殖的研究
目的 探讨细粒棘球绦虫(Eg)转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗免疫小鼠用Eg原头节攻击后脾T淋巴细胞增殖的变化.方法 热絮凝法提取转基因苜蓿的叶蛋白,配成浓度为20 μg/μl.分别用100 μl(约含1 μg融合抗原)口服灌胃和10 μl(约含0.1 μg融合抗原)滴鼻接种免疫BALB/c小鼠,每3 d 1次,连续免疫2个月.同时设转空质粒(pBI121)苜蓿叶蛋白及正常苜蓿叶蛋白对照组.末次免疫后8周,每只小鼠用50个Eg原头节腹腔注射感染.感染后24周杀鼠,检获包囊并称重,计算囊重减少率;分离脾细胞,体外经Eg粗抗原(EgAg)或刀豆素A(ConA)刺激培养,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测免疫小鼠脾T淋巴细胞增殖情况.结果 与正常蛋白对照组相比,疫苗口服灌胃组小鼠检获包囊质量明显降低,囊重减少率为64.1%.两免疫组小鼠的脾T细胞增殖水平显著高于正常蛋白对照组(P<0.01);口服灌胃组小鼠的脾T细胞增殖水平高于滴鼻接种组(P<0.01).结论 细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗接种可诱导小鼠脾脏T淋巴细胞增殖,口服接种是一种较好的免疫途径.
-
IGF-ⅠR抑制剂OSI-906体外抗细粒棘球绦虫原头蚴作用的研究
目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅰ受体(insulin-like growth factor Ⅰ receptor,IGF-Ⅰ R)抑制剂OSI-906体外抗细粒棘球绦虫原头蚴作用. 方法 体外培养细粒棘球绦虫原头蚴,用6个浓度梯度(100、50、25、12.5、6.25、3.125μmol/L)的OSI-906进行干预,分别于给药后1、2、3、4d用伊红染色,在倒置荧光显微镜下观察其活力(每组设置3个复孔),绘制原头蚴活力曲线;透射电镜下观察不同浓度OSI-906组原头节超微结构变化. 结果 100和50 μmol/L OSI-906作用不同时间原头蚴存活率与空白对照组组间和溶剂组相比差异有统计学意义(P<0.05);其余浓度组间比较原头蚴存活率差异无统计学意义(P>0.05).第3d时100 μmol/L的OSI-906组原头节存活率为(42.38±1.05)%;第4d时100 μmol/L的OSI-906组原头蚴全部死亡.透射电镜观察OSI-906高浓度组原头蚴微毛结构消失,皮层细胞坏死,细胞膜严重破损,核形不规整,核仁大且边界不清,核基质密度极低,异染色质增多、边集. 结论 IGF-Ⅰ R抑制剂OSI-906体外抗细粒棘球绦虫原头蚴作用显著,是一种潜在的抗包虫药物.
关键词: IGF-Ⅰ R抑制剂 OSI-906 细粒棘球绦虫 原头蚴 体外试验 -
手术治疗肝包虫病的临床体会
肝包虫病(肝棘球蚴病)是西北地区分布较广的常见寄生虫病,是细粒棘球绦虫幼虫侵入人体肝脏所致.对人体危害极大.本文总结我院近年来收治的23例肝包虫病病例资料,讨论其手术治疗效果.
-
1 230例胸部包虫病的外科治疗效果
棘球蚴病(Hydatidosis),又称包虫病,是细粒棘球绦虫幼虫寄生人体组织器官所致的疾病.胸部包虫病包括肺、胸膜腔、纵隔、胸壁、肝顶部、心肌、心包等组织的包虫囊肿.目前该病仍以手术治疗为主,化学药物治疗还处于临床验证阶段.为了提高胸部包虫病的治疗水平,现将我院1957年6月~2002年12月手术治疗的1 230例胸部包虫病病例资料总结如下.
-
肝棘球蚴病17例穿刺治疗疗效观察
肝棘球蚴病,又称肝包虫病,由细粒棘球绦虫幼虫引起.属人畜共患寄生虫病,我国的内蒙、新疆、西藏、青海等地为该病流行区.近年来东北地区肝包虫病例也有增多的趋势.
-
细粒棘球绦虫EgA31疫苗的分子生物学特征
免疫预防是控制棘球蚴病经济、快速且有效的方法.近年来棘球蚴病的免疫学和疫苗研制方面均取得了很大进展,分子疫苗成为预防包虫病流行较理想的方法.其中细粒棘球绦虫EgA31疫苗是一有希望的疫苗候选分子,本文从EgA31抗原的基因结构和免疫特性等方面介绍了其分子生物学特征.
-
细粒棘球绦虫EgA31蛋白分子研究进展
本文综述了细粒棘球绦虫EgA31蛋白分子的分子生物学和分子免疫学研究进展,为进一步研究细粒棘球绦虫疫苗提供参考.
-
细粒棘球绦虫分子生物学研究进展
细粒棘球蚴病(Echinococcosis)又称囊型包虫病(Cystic echinococcosis,CE ),是由细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg )幼虫引起的一种人畜共患寄生虫病.Eg幼虫称棘球蚴(Hydatid cyst),寄生于人体的肝、肺和脑等不同脏器,表现出不同的临床症状.若囊肿破裂入胸腔和腹腔可引起继发性感染、过敏性休克,甚至死亡.CE已成为我国新五大寄生虫病之一.
-
骨包虫病1例报告
骨包虫病是细粒棘球绦虫的幼虫寄生于骨组织所致.骨包虫与软组织包虫的生长方式迥然不同,本病易发生于血运丰富的松质骨或长管骨的干骺端[1].骨包虫病临床罕见,易与其他疾病混淆,诊断比较困难.本科于2003年7月收治了1例骨包虫病患者,诊断和治疗情况报告如下.
-
制作细粒棘球绦虫原头蚴染色标本方法的初探
目的探索制作结构清晰、颜色鲜明、能长期保存的细粒棘球绦虫原头蚴标本的方法.方法孔雀绿染色法:将原头蚴分别用1%、2%和4%孔雀绿水溶液,在室温或36℃染色24 h、48 h和72 h.结果4%孔雀绿水溶液,36℃,染色48 h为佳条件.染色后原头蚴头钩呈亮绿色,而吸盘和实质部分无色透明,标本的对比性和立体感强.结论用孔雀绿染色法制作原头蚴标本在临床诊断和教学中有实用价值.
-
细粒棘球绦虫原头蚴复合染色方法的探讨
目的改进染色方法,制作结构清晰、颜色对比鲜明的细粒棘球绦虫原头蚴标本. 方法原头蚴经4%孔雀绿36 ℃初染48 h后,分别用石碳酸复红、稀释石碳酸复红、沙黄、伊红,醋酸洋红,苏木精洋红,盐酸洋红染液复染. 结果经4%孔雀绿初染的原头蚴标本分别用稀释石碳酸复红或沙黄染液复染5 s、伊红染液复染30 s、洋红染液复染5 min均能获得满意效果.染色后原头蚴头钩呈亮绿色,吸盘和其余实质部分着淡红色或浅紫红色,层次分明,立体感强.结论用孔雀绿初染,用红色染液复染制作原头蚴标本,染色效果好,操作简单,值得推广.
-
细粒棘球蚴囊液对肝细胞表面TLR4表达的调节
目的 通过研究细粒棘球绦虫囊液对人肝细胞中Toll样受体(TLR)4表达的影响,探讨TLR在启动囊液抗细粒棘球绦虫信号转导通路中的作用.方法 用定量PCR检测肝细胞7404囊液处理前后TLR4和TGF-β1的表达变化.结果 肝细胞7404经囊液处理后随剂量增加TLR4表达减弱,TGF-β1随剂量增加表达增强,TLR2表达在各组均很低.结论 囊液可以上调TLR4的表达,提示囊液诱导的抗细粒棘球绦虫的信号转导途径町能由TLR4引起.高剂量囊液有助于TGF-β1所致的免疫逃避作用.
-
高强度聚焦超声波杀伤小鼠体内细粒棘球绦虫棘球蚴的声像变化
目的 探索高强度聚焦超声波(high intensity focused ultrasound,HIFU)对动物体内细粒棘球绦虫棘球蚴的杀伤作用.方法 用采自感染包虫病羊肝内的原头节接种小鼠腹腔,建立小鼠棘球蚴病模型.用一定剂量的HIFU照射小鼠腹腔棘球蚴后,B超观察HIFU杀伤棘球蚴的破坏作用并测量照射区域灰度值.结果 HIFU对棘球蚴有明显的急性杀伤作用,随着HIFU照射时间延长,HIFU治疗时B超图像改变,囊腔边界渐模糊,囊内逐渐模糊,回声增强.在一定的照射强度下,随着照射时间的延长,灰度值逐渐减少.结论 高强度聚焦超声破坏小鼠体内棘球蚴,B超声像图及灰度值证明其改变.
-
B超在腹部包虫病鉴别诊断中的应用
包虫病是一种人畜共患的寄生虫病,根据其流行病学、形态学、形态病理、临床过程及转归等,国内将此分为两种类型:一种由细粒棘球绦虫的囊性包虫病和由多房(泡状)棘球绦虫所致的泡状棘球蚴病(泡型包虫病).根据国内外文献报道及我院统计,以囊型包虫病居多.本组均为囊性病,报道如下.
-
细粒棘球绦虫亲环素A的重组表达产物的纯化及免疫学鉴定
目的 克隆细粒棘球绦虫亲环素A(EgCypA)基因并体外表达纯化该蛋白以评价EgCypA的血清学免疫检测价值.方法 利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫cDNA文库中的EgCypA的理化及生物学特性并设计引物,以细粒棘球绦虫cDNA为模板进行PCR扩增得到EgCypA基因,将该基因克隆到原核表达载体pET28a中,将重组载体导入大肠埃希菌,IPTG诱导该重组菌株表达EgCypA,使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)明确重组蛋白表达情况;利用Western blot法进行纯化的重组蛋白对细粒棘球绦虫感染血清及其他寄生虫感染血清免疫反应性的鉴定,以此评价该重组蛋白的免疫检测价值.结果 SDS-PAGE显示重组菌株在相对分子质量18 400~25 000表达了大量蛋白,该蛋白的分子量同生物信息学分析的EgCypA的分子量吻合.Western blot结果显示细粒棘球绦虫相关血清与重组蛋白作用后于17 000 ~26 000之问出现了特异性的反应条带,其他寄生虫血清则无此反应.结论 EgCypA具有良好的抗原性,是很有前景的细粒棘球绦虫特异性诊断抗原,可以作为免疫学检查细粒棘球绦虫早期感染的候选分子.
-
颅内巨大脑包虫摘除1例
1临床资料:患者女,9岁。以“头痛头晕半年余伴左侧肢体抽搐1次”入院。入院时查体:患儿神志清,头围增大。双侧瞳孔等大等圆,对光放射灵敏。颈部无抵抗,双肺心腹部未见异常。四肢未见畸形,左侧上下肢肌力级,感觉正常。双侧巴氏征阴性。 CT检查示:右侧顶枕部囊性占位,中线左偏。实验室检查:肝肾功能正常,血常规正常。包虫凝集试验阳性。完善术前准备,在全麻下行包虫摘除术。手术方法:取右侧顶枕部马蹄形切口,常规开颅,显露硬膜,见硬膜张力大,剪开硬膜,见右侧顶枕部脑组织膨隆,从右枕部皮质进入,电凝切开脑皮质至能显露包虫直径,放低病人头部,使包虫囊位于低部位,用生理盐水注入包虫囊与周围脑组织之间。(因包虫囊与周围角质化的脑组织既无血管沟通又无紧密粘连,故借助水的冲力和包虫囊自身重力作用,包虫囊即逐渐从囊床分离直到从大脑深部脱出,此称为水力漂浮分离法)。将包虫完整摘除,称重503 g。术后病检:细粒棘球绦虫棘球蚴。术后脑组织塌陷,给予生理盐水填充。术后给予抗炎、止血、抗癫痫对症治疗。2周后痊愈出院。
-
肝包虫破裂误诊阑尾炎分析
包虫病是人感染细粒棘球绦虫的幼虫所致的一种慢性寄生虫病,主要流行区在西北或内蒙古牧区。虫卵从口进入后,在胃及十二指肠内脱壳入肠壁,进入肠系膜静脉而到达门静脉系统,大多数幼虫被阻于肝脏。少数幼虫可通过肝静脉,经下腔静脉、右心而达肺部。因此包虫寄生部位以肝脏多(75%~78%),肺脏次之(10%~15%)[1]。肝包虫病的特点是肝脏受损的临床表现不严重,肝功能轻度异常,经杀虫治疗后,肝脏受损可有明显好转[2]。
-
学龄前儿童肝包虫病的诊断和治疗体会
肝包虫是由寄生在狗小肠内细粒棘球绦虫的虫卵被感染所致.小儿喜欢与狗玩耍的生活习惯致幼儿期受染.我院自1978~2000年对93例学龄前儿童肝包虫外科手术治疗,现报告如下.
-
细粒棘球蚴抗原B对小鼠早期实验性1型糖尿病的影响
目的 探讨细粒棘球蚴抗原B对小鼠1型糖尿病发病的早期影响及其机制.方法 30只BALB/c小鼠随机分组:细粒棘球蚴抗原B+糖尿病组(A组);生理盐水+糖尿病组(B组);糖尿病组(C组);A组给予细粒棘球蚴抗原B,B组给予生理盐水,随后A、B、C组均给予小剂量链脲佐菌素诱导1型糖尿病.观察血糖变化,留取标本进行细胞因子等指标测定.结果 在糖尿病成模后3周,A组<40%的胰岛可见淋巴细胞浸润,B组和C组有80%的胰岛见淋巴细胞浸润,差异有统计学意义(A组、B组和C组的平均Ridit值分别为:0.423、0.519、0.561,P<0.05);糖尿病模型建立3周末,A组小鼠血清白细胞介素-4(IL-4)水平高于B组和C组[(71.6±12.4) ng/ml比(12.6±5.6) ng/ml和(14.2-7.2) ng/ml,P<0.05],A组小鼠血清γ-干扰素(IFN-γ)水平低于B组和C组[(276.1 ±41.7) ng/ml比(352.2±52.2)ng/ml和(358.1 ±53.4) ng/ml,P<0.05]. 结论 细粒棘球蚴抗原B对小鼠1型糖尿病早期胰岛细胞的自身免疫损害具有拮抗作用,其机制可能与Th1/Th2免疫偏移有关.