21-氨基类固醇抗石英细胞毒性及抑制其促成纤维细胞生长的研究

目的 研究21-氨基类固醇(Lazaro id,U-75412E)在体外对石英毒性的抑制作用.方法 观察体外培养的肺泡巨噬细胞(AM)释放H2O2、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD) 和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)的水平,评价U-75412E对石英细胞毒性的消除能力;电子自旋共振俘获法评价U-75412E清除石英催化H2O2产生.OH的作用;噻唑蓝比色法比较 U-75412E对矽肺大鼠肺泡AM促成纤维细胞(FB)生长活性的抑制作用. 结果 在U-75412E作用下,与石英共孵的肺泡AM释放H2O2、SOD、LDH的水平显著下降,40 μmo l/L U-75412E组各值分别为(0.16±0.04) nmol/L、(48.6±22.2) μg/L、(33.0 ±4.6) U/L,而阳性对照组分别为(0.63±0.07) nmol/L、(117.5±30.3) μg/L、(6 0.3±5.5) U/L.在Fenton反应体系中,石英催化H2O2生成.OH,平均峰值为(53.25 ±2.3) mm ;当与U-75412E共存时,反应体系中的.OH水平显著下降,平均峰值为(28.4±1.3) mm. 矽肺或受石英攻击的肺泡AM培养液促进了NIH 3T3细胞增殖(平均指数:77.8±8.0、85.9±7. 0),U-75412E显著抑制了这一活性(平均指数:58.0±15.4、52.6±11.8). 结论 U-75412E具有较强的清除.OH、保护AM抵御石英细胞毒性、抑制矽肺肺泡AM促FB生长活性的能力.

亚硝酸钠对小鼠体内硫血红蛋白和羟自由基的影响

目的 探讨亚硝酸钠染毒对小鼠体内硫血红蛋白和羟自由基的影响.方法 将60只小鼠随机分为低、中、高剂量组(亚硝酸钠浓度分别为0.055 mg/ml、0.110 mg/m1、0.220 mg/ml)和对照组(蒸馏水),每组15只,雌雄各半.采用自由饮模式,共染毒2周.分别于染毒前和染毒1周及2周时,称量小鼠的体重.于染毒结束后,小鼠腹腔注射水杨酸钠以捕获羟自由基,生成2.5-二羟基苯甲酸和2.3-二羟基苯甲酸,高效液相法测两者的含量;同时分光光度法测各组小鼠的硫血红蛋白的相对含量.结果 染毒2周后,低、中、高剂量组小鼠的体重分别为(22.8±2.8) g、(21.6±2.8) g、(21.2±3.0)g,均低于对照组的(25.6±2.2)g,差异有统计学意义(P＜0.05).低、中、高剂量组总羟自由基的含量分别为(0.015 3±0.006 5)μg/ml、(0.016 4±±0.017 2)μg/ml、(0.062 7±±0.091 0)μg/ml,均高于对照组[(0.009 0±±0.007 3)μg/ml],差异有统计学意义(P＜0.05).低、中、高剂量组硫化血红蛋白的相对含量分别为1.54％±0.73％、2.22％±0.44％、2.80％±0.69％,与对照组(1.76％±0.60％)比较,中、高剂量组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).羟自由基含量与硫血红蛋白的相对含量呈正相关关系(r=0.837,P＜0.05).结论 亚硝酸钠染毒能使小鼠血液中硫血红蛋白和羟自由基的含量增高,两者之间呈正相关.

不同产地冬虫夏草清除羟自由基作用的研究

目的比较不同产地冬虫夏草对羟自由基的清除作用.方法采用邻二氮菲-Fe2+氧化法检测不同产地冬虫夏草水提液对H2O2/Fe2+体系产生的羟自由基的清除作用.结果来自西藏那曲地区、云南滇西北地区和四川川西北地区的冬虫夏草均对Fenton反应产生的羟自由基有显著或极显著的清除作用,且来自不同微生态环境的样品之间的清除作用差异比来自不同主产区样品之间的清除作用差异更明显.结论冬虫夏草水提液有明显地清除羟自由基的作用,且微生态环境对该作用有较大的影响.

羟基红花黄色素A抗氧化作用的研究

红花Carthamus tinctorius L.为活血化瘀药,可活血通经、化瘀止痛,临床上主要以水煎液入药.组织缺血-再灌注等过程中,自由基引发的氧化反应为许多血液循环障碍疾病的重要损伤机制.红花水提液可清除羟自由基,抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化[1].羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellowA,HSYA)为红花主要水溶性活血化瘀有效成分,可抑制血小板激活因子诱发的血小板聚集,为血小板激活因子受体拮抗药[2].本实验观察HSYA的多种抗氧化作用,以探讨红花活血化瘀作用机制.

生血丸对小鼠低剂量辐射损伤的预防与修复作用及机制

目的 探讨生血丸对低剂量辐射致小鼠肝、脾、骨髓细胞、外周血淋巴细胞损伤的预防与修复作用及机制.方法 将小鼠随机分为5组:对照组、生血丸预防给药组(预防给药组)、生血丸治疗给药组(治疗给药组)、模型1组(对应治疗给药组)、模型2组(对应预防给药组).ELISA法检测肝、脾细胞中羟自由基、超氧阴离子自由基、鸟氨酸脱羧酶(ODC)的活性.高倍镜下观察骨髓细胞及外周血淋巴细胞的微核率.结果 与对照组相比,2个模型组小鼠肝细胞内羟自由基、超氧阴离子自由基的量显著增加；与各自模型组相比,治疗给药组、预防给药组上述指标显著减小.与对照组相比,2个模型组小鼠肝细胞内ODC活性显著增强,外周血淋巴细胞与骨髓细胞的微核率显著增加;与各自模型组相比,预防给药组和治疗给药组ODC活性显著减弱,外周血淋巴细胞与骨髓细胞的微核率显著降低.各组小鼠脾细胞中各指标间未见明显差异.结论 生血丸能有效预防和改善小鼠肝细胞、外周血淋巴细胞和骨髓细胞由于低剂量辐射所造成的损伤.

生血丸对甲醛致小鼠细胞损伤的影响

目的 探讨生血丸对甲醛致小鼠肺、肝、脾、骨髓细胞及外周血淋巴细胞损伤的预防与修复作用及机制.方法 将小鼠随机分5组:对照组、生血丸预防给药组(预防组)、生血丸治疗给药组(治疗组)、模型1组(对应治疗组)、模型2组(对应预防组).ELISA法检测肺、肝、脾组织中羟自由基、超氧阴离子自由基、鸟氨酸脱羧酶(ODC)的活性.高倍镜下观察骨髓细胞及外周血淋巴细胞的微核率.结果 2个模型组小鼠肺、肝、脾组织内羟自由基、超氧阴离子自由基、ODC活性比对照组显著增加,骨髓细胞及外周血淋巴细胞的微核率显著增加(P＜0.05);生血丸预防组及治疗组小鼠的肺、肝、脾组织中羟自由基、超氧阴离子及ODC的活性与对应模型组比较显著降低(P＜0.05),外周血淋巴细胞的微核率显著降低(P＜0.05).结论 生血丸能有效预防和改善小鼠肺、肝、脾、骨髓细胞及外周血淋巴细胞由于甲醛造成的损伤.

西红花酸对羟自由基损伤的原代心肌细胞的保护作用

目的研究西红花酸(crocetin)对羟自由基(OH·)损伤的原代培养心肌细胞的保护作用.方法培养的原代心肌细胞加入不同浓度的西红花酸后,用0.5mmol/L OH·损伤原代培养的心肌细胞,检测细胞培养上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶(MSD)的活性,心肌细胞线粒体膜电位(MMP)的变化,并用流式细胞仪及DNA梯度电泳检测细胞凋亡.结果 0.5mmol/L OH·使细胞培养上清液中LDH活性增加、MSD的活性降低、MMP降低、心肌细胞凋亡率增加.西红花酸1.0,0.1 μmol/L明显降低培养上清液中LDH活性、提高MSD的活性及MMP、降低心肌细胞凋亡率,与模型组比较差异显著(P＜0.05).结论西红花酸对OH·所致的心肌细胞损伤(凋亡)具有保护作用.

黄芩苷对化学性肝损伤的保护作用

黄芩Scutellaria baicalensis Georgi为常用中药,其有效成分为黄酮类,其中含量较高的是黄芩苷及其苷元.研究表明黄芩苷具有清除羟自由基、超氧自由基、烷自由基的功能,在抗氧化及抗炎等方面具有显著的作用[1],本实验进一步研究其对化学性肝损伤的保护作用.

罗布麻、绿茶及其配伍对活性氧清除能力的比较

茶叶中含有多种对人体健康有益的物质,能有效清除氧自由基和脂类自由基,预防脂质过氧化,提高血清SOD酶的活性,延缓衰老[1].罗布麻茶是近年来常见的一种保健茶,具有清除过氧亚硝酸离子[2],清除羟自由基[3],抑制脂质过氧化[4],提高血清中SOD、CAT和GSH-PX酶活性的作用[5].罗布麻和绿茶的抗氧化能力的差别以及将两者混合,实现功能互补还未见研究报道.因此本实验考察了绿茶和罗布麻抗氧化能力的差异以及两者混合后抗氧化能力的改变.

不同性别及长期运动对大鼠肝脏羟自由基代谢与脂质过氧化作用的影响

目的:观察长期运动对大鼠肝脏自由基的影响,及不同性别间可能的差异.方法:SD大鼠随机分为雄性运动组(MEG),雄性静息组(MSG),雌性运动组(FEG),雌性静息组(VSG).运动组游泳每天2小时,每周游泳5 d(休息2 d),持续3个月.期满后检测肝脏OH·及MDA水平,并分析性别差异.结果:抑制OH·能力FEG(18.78±2.77 U/mg prp)显著高于FSG(14.36±3.94 U/mgpro)(P<0.01),MEG(16.56±3.44 U/mg pro)显著高于MSG(12.85±2.00 U/mg pro)(P<0.05);MDA含量FEG(0.499±0.095 nmol/mg pro)显著低于FSG(0.625±0.073 nmol/mg pro)(P<0.01),MEG与MSG之间无显著差异;肝脏OH·与MDA水平无显著相关.结论:长期运动可降低雌雄大鼠肝脏OH·含量,无性别差异;降低雌性但不影响雄性肝脏脂质过氧化水平,性别差异明显.

5-羟基-1-甲基海因对百草枯所致大鼠肾毒性防护作用的实验研究

目的探讨5-羟基-1-甲基海因（HMH）对百草枯所致大鼠肾损伤的保护作用及其可能机制。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、百草枯组、维生素C组、HMH组4组，每组6只。对照组腹腔注射无菌生理盐水2 mg/kg；百草枯组腹腔注射等体积稀释的百草枯溶液50 mg/kg；维生素C组和HMH组腹腔注射百草枯溶液的同时分别灌胃维生素C或HMH溶液1 mmol/kg。应用Fenton法测定HMH和维生素C清除羟自由基的能力。各组分别于染毒后24 h采血并处死动物取肾组织，测定血清尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）及肾皮质蛋白、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果维生素C和HMH均有很好的清除羟自由基的能力，50%抑制浓度（IC50值）均为4.02 mg/mL。与对照组比较，百草枯组血清BUN、SCr及肾组织MDA含量显著升高，肾组织蛋白、GSH含量及SOD活性显著下降〔BUN（mmol/L）：40.80±2.49比13.67±1.58， SCr（μmol/L）：163.46±8.67比51.80±4.37， MDA（nmol/g）：7.51±0.23比4.52±0.33，蛋白（μmol/L）：0.94±0.14比1.35±0.10， GSH（mg/g）：1.08±0.48比3.30±0.44， SOD（kU/L）：70.74±6.42比112.89±8.72，均P＜0.01〕。与百草枯组比较，维生素C组和HMH组血清BUN、SCr及肾组织MDA显著下降，肾组织GSH含量和SOD活性显著升高〔BUN（mmol/L）：22.64±2.36、18.71±5.23比40.80±2.49， SCr（μmol/L）：97.28±4.81、89.20±6.72比163.46±8.67， MDA（nmol/g）：4.67±0.31、4.21±0.42比7.51±0.23，GSH（mg/g）：1.78±0.10、1.86±0.39比1.08±0.48，SOD（kU/L）：98.69±5.43、103.76±4.45比70.74±6.42，均P＜0.01〕；HMH组较维生素C组可显著降低SCr含量（P＜0.05），而两组在血BUN及肾组织MDA、GSH含量和SOD活性方面差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论 HMH能防护百草枯所致的大鼠肾损伤，其机制可能与其抗氧化和清除羟自由基的作用有密切关系。

133 高LET照射后用核酸内切酶-Ⅲ孵育所致DNA链断裂及羟自由基聚集

芙蓉菊多糖体外抗氧化活性研究

目的 研究芙蓉菊多糖的体外抗氧化活性.方法 采用1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基、还原力、超氧阴离子、羟自由基4种体外抗氧化模型研究芙蓉菊多糖的抗氧化活性,用维生素C作对照.结果 芙蓉菊粗多糖对DPPH自由基、还原力、超氧阴离子、羟自由基均有明显的清除能力,其中DPPH、超氧阴离子、羟自由基的EC5o值分别为0.273、0.669、0.594 mg/mL,对羟自由基清除能力强于维生素C.芙蓉菊多糖对自由基清除率与其质量浓度存在着明显的量效关系.结论 芙蓉菊多糖具有良好的体外抗氧化活性,作为天然抗氧化剂和自由基清除剂有进一步研究的价值.

枸杞子乙酸乙酯提取部位的抗氧化活性研究

[目的]研究枸杞子乙酸乙酯提取部位的抗氧化作用.[方法]采用荧光分光光度法研究其抗羟自由基作用;采用紫外可见分光光度法研究其抗氧自由基作用及氧自由基对红细胞的氧化作用.[结果]枸杞子乙酸乙酯提取部位对·OH有很强的抑制和清除作用,并具有浓度依赖性;可清除邻苯三酚自氧化体系产生的O2-·对抗O2-·对红细胞的氧化作用.[结论]枸杞子乙酸乙酯提取部位具有较好的抗氧化能力.

饮水铅暴露对大鼠脑组织过氧化氢、羟自由基和脂质过氧化的影响

目的：探讨乙酸铅对大鼠大脑皮质、小脑、海马组织自由基和脂质过氧化的影响。方法48只刚断乳雄性SD大鼠，按体质量采用随机区组法分为4组（对照组和低、中、高剂量组），对照组大鼠饮用去离子水，低、中、高剂量组分别饮用200、400、800 mg/L的乙酸铅溶液。连续染毒60 d后，取血进行血铅测定，取各组脑组织（大脑皮质、小脑和海马）进行羟自由基抑制活力、过氧化氢（H2O2）水平及丙二醛（MDA）含量的测定。结果与对照组相比，各染铅组大鼠血铅含量显著升高，大脑皮质、小脑和海马组织羟自由基抑制活力明显下降，且随染铅剂量的升高呈逐渐下降趋势（P<0.05）；大脑皮质、小脑和海马组织H2O2水平及MDA含量高于对照组，并随着染铅剂量的升高呈逐渐升高趋势（P<0.05）；大脑皮质、小脑和海马组织的羟自由基抑制活力与血铅含量呈负相关（r分别为-0.505、-0.414、-0.448，P<0.05），H2O2和MDA含量均与血铅含量呈正相关（r分别为0.301、0.411、0.378和0.404、0.324、0.510，P<0.05）。结论铅可通过诱发自由基产生，导致大鼠脑组织发生脂质过氧化反应。

自由基与疾病

自由基又称游离基,是化合物分子中的共价键,为人体代谢过程中形成的原子或原子团.人体的自由基是一种活性氧,活性氧是人体内极不安定的原子碎片,因为它本身缺少一个电子,它总想从正常细胞里拉出一个电子作为它的配偶.但是正常的细胞失去一个电子后,可能导致癌变.机体内常见的自由基有羟自由基、脂质自由基、氧化脂质自由基、过氧化脂质自由基……

海尔福口服液对自由基清除率影响的实验研究

目的 研究海尔福口服液对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O·-2)清除率的影响,以进一歩探讨其药理作用.方法 根据Fenton反应原理,利用H2O2与2价铁离子Fe2+混合产生·OH,加入水杨酸产生有色化合物,在波长510 nm处有大吸收峰,可比色测定.利用AP-TEMED系统产生O·-2,显色用分光光度法测定,加入抗氧化药物干扰后,系统产生自由基受抑制或清除,计算药物对·OH和O·-2清除率.结果 海尔福口服液(浓度0.1 g/mL生药)、维生素C(浓度为1 g/L) 和金银花对·OH清除率分别为(100.75±8.07)%,(99.42±0.14)%,(59.61±2.21)%.前两者比较,P>0.05,无显著性差异.前两者与金银花比较,P均<0.001,均有显著性差异.海尔福口服液对·OH和O·-2清除率分别是(100.75±8.07)%,(92.07±1.37)%,两者比较,P>0.05,无显著性差异.存放1个月、6 a、12 a的海尔福口服液样品对O·-2清除率分别为(91.72±1.38)%,(89.18±4.50)%,(70.37±1.24)%,存放12 a降低明显(P<0.01);维生素C作为标准对照,不同浓度对O·-2清除率r=0.996 7,有直线关系.不同浓度海尔福口服液对·OH清除率r=0.999 0,有直线关系.结论 海尔福口服液对O·-2和·OH有明显的清除率,是其药理作用之一.

延迟性神经元死亡与脑缺血后海马羟自由基产生和ATP含量变化的关系

短暂脑缺血后海马Cal区锥体细胞常发生延迟性神经元死亡(delayed neuronal death,DND)[1、2].研究认为,脑缺血后的DND可能与缺血再灌注期间大量产生的氧自由基有关[3].本实验拟动态测定脑缺血再灌注后海马羟自由基(OH·)含量的变化,同时进行病理检查,以探讨二者之间的关系.并动态测定海马ATP、ADP和AMP含量的变化.

粉防己多糖的组成及其清除活性氧自由基的作用

目的:提取并纯化粉防己多糖(SMP),确定其组成,研究其清除活性氧自由基的作用.方法:利用水提醇沉得到粉防己粗多糖,再经DEAE纤维素和聚酰胺纯制.利用Fenton反应研究SMP清除·OH的作用;利用邻苯三酚自氧化法研究SMP清除·O2-的作用.结果:纸色谱显示SMP是由葡萄糖组成的匀多糖;SMP清除·OH的能力较弱;清除·O2-时的效果稍强,IC50为1956.1μg/ml.结论:粉防己多糖为首次提取制得,有一定的清除羟自由基和超氧阴离子自由基的作用.

木防己多糖的组成及其清除活性氧自由基的作用

目的:提取并纯化木防己多糖(AFMP),确定其组成,研究其清除活性氧自由基的作用.方法:利用水提醇沉得到木防己粗多糖,再经DEAE纤维素和聚酰胺纯制.利用Fenton反应研究AFMP清除·OH的作用;利用邻苯三酚自氧化法研究AFMP清除·O2-的作用.结果:纸色谱显示AFMP由葡萄糖和半乳糖组成.AFMP清除·OH的能力较弱;清除·O2-时的效果稍强,IC50为1407.4μg/ml.结论:木防己多糖为首次提取制得,有一定的清除羟自由基和超氧阴离子自由基的作用.