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细胞印片在乳腺肿块诊断中的作用
乳腺肿块的术中细胞印片,方法简单,因细胞的及时固定,不受冷冻和切片的影响,细胞及核的结构较清晰,可为术中乳腺肿块良恶性冷冻诊断提供参考.现将我院1995年1月至1999年11月乳腺肿块术中冷冻诊断前先行的细胞印片观察情况总结于下.
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猫体华支睾吸虫肝切片标本制作的体会
有关猫体华支睾吸虫肝组织标本制作的报道较少,为了夺实验教学中让学生观察华支睾吸虫之肝组织的病理变化,作乾于2004年5月在华支睾吸虫流行区江西省信丰县大塘购买了一条重度感染华支睾吸虫的病猫,制作警备体华支睾吸虫肝组枳切片标本,现将标本制作过程和体会报道如下.
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生物样本的常用保存方式及效果
生物样本是医学研究的重要资源,病理学组织和细胞样本是临床常见的生物样本,主要来源于临床手术、活检、穿刺等操作,可通过制备切片、涂片以及提取生物大分子,用于病理诊断及医学研究。样本是医学研究的基础,其质量在很大程度上决定着研究结果的准确性和可靠性。随着基因组学、转录组学以及蛋白质组学等研究手段的飞速进步,各种分析技术对生物样本的质量也提出了更高的要求[1-2]。
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骨髓活检与涂片在非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润诊断中价值的比较
非霍奇金淋巴瘤(NHL)通常发生于淋巴结,骨髓作为NHL的原发灶较少见,但却是NHL常见的浸润部位.探讨骨髓侵犯对指导恶性淋巴瘤的正确分期、治疗和预后有重要意义.目前除了骨髓穿刺和骨髓活检,检测骨髓侵犯的方法还包括MRI、流式细胞术、聚合酶链反应、骨髓三维结构重建等[1],但骨髓涂片和切片作为一种经典可靠且安全简便的方法,仍具有重要的应用价值.
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心脏直视术后真菌性感染
一、材料和方法总结北京安贞医院1993~1998年间心脏直视术后真菌性感染5例,4例再次手术治疗,终在术中或术后死亡.1例失访.4例术后标本行病理检查,其中1例行尸体解剖检查.标本经4%甲醛固定,石蜡包埋切片,厚5 μm,做HE、六胺银及PAS(高碘酸Schiff法)染色.
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膀胱副神经节瘤的临床病理学特征
一、材料与方法收集我院1990~2003年间外科手术切除膀胱副神经节瘤6例及1例会诊病例 .HE染色,光镜观察.3例膀胱副神经节瘤行网状纤维染色.1例行Perls普鲁士蓝染色.2例行PAS染色.5例行Fontana银浸法染色.7例均行免疫组织化学染色.所用广谱细胞角蛋白(CK)、上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、嗜铬粒素A (CgA)、S-100、突触素(Syn)抗体及LSAB试剂盒均购自Dako公司,染色前切片经微波处理,抗原修复,染色步骤按试剂盒说明书进行.用已知阳性切片进行阳性对照.
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消化道神经鞘瘤的临床病理分析
一、材料与方法1.病例来源与随访:5例消化道神经鞘瘤源自四川大学华西医院病理科1995~2000年5月共116例消化道间叶源性肿瘤存档切片中,经免疫组织化学确诊.5例随访时间为36~72个月,平均为48个月.
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子宫颈蓝痣的病理学观察
一、研究对象和方法2000年11月~2001年12月期间我院收治子宫平滑肌瘤而行子宫全切术的患者660例,其中发现9例宫颈蓝痔,年龄分别为39岁(1例)、40~47岁(5例)和51岁(3例).所有全切子宫标本常规甲醛固定,石蜡包埋,切片,HE、Masson-Fontana法、Perls法染色,光镜观察;并行S-100蛋白、HMB45和细胞角蛋白(CK)、上皮膜抗原(EMA)免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法染色,DAB显色.以细胞质或细胞核着棕褐色为阳性.
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微波滴染法在临床肾穿组织特殊染色中的应用
肾穿标本的光镜病理诊断在临床诊断肾病方面具有重要作用,作者采用微波湿盒滴染法,应用于肾穿标本的PASM-Masson、PAS、HE 3种染色,既明显缩短时间,又节省大量试剂,不用使用染色缸等,效果满意,现予报道.一、材料与方法1.标本与切片:临床肾穿标本,均经皮肾穿刺活检.经PBF-A液(甲醛-乙醇-磷酸盐缓冲液)固定[1]1 d,换成0.1mol/L PBS保存,然后按石蜡包埋程序包埋,每步脱水及透明各10 min,浸蜡1 h,用58~60℃石蜡包埋.用一次性刀片切片2 μm厚,60℃烤片过夜,脱蜡入水.
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染色方式与制片污染相关性的探讨
组织交叉污染是病理诊断的严重隐患,组织污染发生的环节很多,在被公认的易发生污染的环节(如取材、包埋、切片及捞片),不管是医师还是技术人员均会加以防患,但还是难以杜绝组织交叉污染。除上述环节易出现污染外,HE染色所使用的试剂有没有可能造成组织交叉污染?其发生概率有多高?我们通过检测并统计了组织学HE染色仪上的每种试剂中脱落的组织碎片数量及空白玻片的污染率,现总结如下。
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抗体鸡尾酒法在免疫组织化学标记中的应用
肿瘤组织常含有多种抗原成分,要在一张切片上同时显示多种组织抗原,往往需要采用双标记或三标记方法.然而,反复在一张切片上进行操作容易引起脱片,从方法学角度看也颇为费时费力.为此,作者设计了抗体鸡尾酒标记法,用p53/CD34标记了325例肺、食管、胃肠、膀胱及子宫等部位的上皮性肿瘤,同步显示p53表达水平、微血管密度及脉管受累情况;用p63/α-平滑肌肌动蛋白(SMA)标记了15例乳腺病变组织,显示肌上皮细胞的基本结构.
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三维病理大体标本制备及应用
病理学是一门介于基础医学和临床医学之间的桥梁学科,学好病理学对医学生至关重要.实验教学是病理教学的重要内容,通过观察病理大体标本和切片可以加深对疾病发生发展过程及临床症状的理解和认识.
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切片中组织和细胞的转移制片法
在病理工作中,有时会遇到因为标本材料不足,不能做进一步分析而影响病理诊断质量的情况.如果我们仅有一两张切片或涂片,又想要进行免疫组织化学分析时,可以采用如下办法.
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石蜡包埋组织HE染色切片的短串联重复序列荧光标记复合扩增
短串联重复序列(short tandem repeats,STR)的复合扩增是病理组织进行个体识别的常用技术.我们对石蜡包埋组织HE染色切片的STR荧光标记复合扩增进行实验研究,现报道如下.
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一种简便的皮肤、肌肉石蜡制片方法
皮肤层次丰富,结构较复杂.由于皮肤各层致密度不同,其制片过程中常需特殊处理,才能获得较理想的切片.皮肤制片改进的方法有的操作繁琐,有的仍难以避免真皮(网状层)出现松散、分离或浅层出现较多裂隙等现象.另外常规方法制作骨骼肌切片,镜下也可见到肌间隙张裂.本改进方法能够较好地保存皮肤各层组织结构和使骨骼肌结构紧密.并且操作简便,易于掌握.
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HER2银染色原位杂交结果与前处理条件的相关性
HER2基因扩增和/或HER2蛋白过表达是判断乳腺癌患者预后的重要风险评估因子,同时也是判断曲妥珠单抗靶向治疗是否适用的重要依据。评价HER2状态的方法有免疫组织化学染色法( IHC)、荧光原位杂交( FISH)、显色原位杂交(CISH)及银染原位杂交(SISH)。 SISH法在亮视野下观察切片,切片可长期保存,观察结果与FISH结果的符合率高达90%~99%[1-5]。2013年美国临床肿瘤学会/美国病理医师学院(ASCO/CAP)乳腺癌HER2检测指南及中国乳腺癌HER2检测指南(2014版)相应增加了亮视野原位杂交的检测及判读指南等内容[6-7],使得HER2 SISH检测技术逐步走向规范化、标准化。为了更顺利的开展HER2 SISH的检测,提高检测的成功率,我们分析不同前处理条件对HER2 SISH染色结果的影响。
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骨髓活检标本石蜡包埋制片方法
塑料包埋技术用于骨髓活检有许多优点,但目前还未能完全满足病理诊断需要.经过聚合后的骨髓组织,虽然能制成较薄的切片,但如需作免疫组织化学染色就相当困难.我们经过用多种脱钙液反复试验比较,后选用 "Formical-4"脱钙液用于骨髓活检标本脱钙,不论HE或免疫组织化学染色均收到良好效果.现将108例骨髓活检标本石蜡包埋制片方法介绍如下.
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Pinpoint显微切割术分离切片DNA用于分子病理学研究
恶性肿瘤的分子病理学和分子遗传学研究的进展常受到肿瘤组织成分多样性和取材准确性的影响[1,2].原发肿瘤组织通常由肿瘤细胞和非肿瘤细胞混合构成.瘤体内除癌细胞外,还有基质细胞,如:成纤维细胞、内皮细胞等,白细胞以及原器官组织成分[1].大多数肿瘤活检标本都是非肿瘤细胞和肿瘤细胞的混合物,各种成分的多少取决于肿瘤类型、瘤体内的取材部位及既往的处治结果[2].来源于非肿瘤细胞基因组的DNA将影响分子生物学研究结果,其程度决定于肿瘤细胞和非肿瘤细胞基因组DNA的比值和所用方法的敏感性[1].
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免疫组织化学切片再行荧光原位杂交检测方法的探索
荧光原位杂交( FISH)技术是一种分子细胞遗传学技术,其原理是通过标记有荧光素的探针与特异性的染色体和/或基因位点相结合,在细胞核中检测染色体和相应基因的变化[1]。 FISH技术被认为是目前检测乳腺癌HER2基因状态准确、可重复性高的方法,是当今白血病/淋巴瘤诊断和分型的重要手段之一,在发达国家正成为常用的辅助诊断技术。临床病理诊断中,常会遇到前期HE、免疫组织化学染色之后,要做FISH检测时,因组织太小或会诊的白片用完以致不能进行FISH检测。我们在工作中经过反复实验,尝试将免疫组织化学染色后的阴性切片,重新进行FISH检测,摸索出一种简便有效的方法,现介绍如下。
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HE染色切片褪色后免疫组织化学染色抗原修复方法
经甲醛固定的组织,由于各种交联键的形成,引起蛋白质的空间结构的改变,终导致部分或全部的抗原决定簇被封闭,从而影响免疫组织化学检测的敏感性.