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鹿瓜多肽临床应用的疗效评价
鹿瓜多肽(松梅乐注射液,哈尔滨誉衡药业有限公司生产),具有调节骨代谢、刺激成骨细胞增殖、促进新骨形成、调节钙、磷代谢,增加骨钙沉积、防止骨质疏松,以及抗炎镇痛等作用.自2001年2月~2004年12月应用鹿瓜多肽注射液治疗368例骨病患者,并进行了临床观察和疗效分析.现报告如下.
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雌二醇对人成骨细胞增殖及基质金属蛋白酶活性的影响
本文报道了雌二醇对体外分离培养的人成骨细胞增殖的影响,SDS-Gel-PAGE电泳及固体胶原-羟脯氨酸测定法测定成骨细胞基质金属蛋白酶(MMPs)活性.结果表明:低浓度雌二醇对人成骨细胞有刺激增殖的作用,1.3×10-7M时刺激作用强,浓度过高则抑制细胞增殖,成骨细胞的分化则随着雌二醇浓度的增加而分化越好,随雌激素浓度增加成骨细胞MMP活性也相应增大与分化程度一致.
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15种中西药物含药血清对大鼠成骨细胞增殖成熟的影响
目的用含药血清体外观察15种中、西药物对大鼠新生鼠颅骨成骨细胞增殖成熟的影响,比较它们的作用.方法将所试药物口饲大鼠,每日2次,连续5次,于末次给药后1 h采血,分离获得含药血清,加入成骨细胞培养液中,培养3 d,以MTT法和金氏法测定光密度值,探讨对成骨细胞增殖和细胞外液中碱性磷酸酶活性的影响.结果所试15种药物的含药血清对成骨细胞增殖均无显著作用;3种西药、4种中成药能显著增强碱性磷酸酶活性,其作用强度分别依次为安雄、特乐定、福善美以及泰格、骨疏康、鹿茸健骨、仙灵骨葆.6种中医古方对碱性磷酸酶活性无显著增强作用.结论安雄胶囊(雄激素制剂)、特乐定片(氟制剂)、福善美片(双膦酸盐制剂)和中药泰格胶囊、骨疏康颗粒、鹿茸健骨胶囊、仙灵骨葆胶囊的含药血清在体外能促进成骨细胞分化成熟.
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雌激素与流体剪切力对成骨细胞DNA合成的影响
骨质疏松是中老年人骨代谢的主要特征,雌激素缺乏是原发性骨质疏松症的主要原因之一.已有研究表明,雌激素能促进成骨细胞的生长分化,从而影响机体骨代谢.活体细胞对外力的反应是由于外力导致组织间液流动发生改变,从而被细胞感知.本项研究选择流体剪切力作为细胞加力方式,观察雌激素与流体剪切力对体外培养的成骨细胞增殖与 DNA 合成的影响,探讨雌激素与机械力对成骨细胞的影响.
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双靶向治疗骨代谢病的理想候选药奥金肽
许多骨代谢病,如骨质疏松(OP)的病理过程是受破骨细胞(OC)过度活跃及成骨细胞(OB)增殖下降两个环节共同调控的.目前临床上治疗OP的主流药物(除PTH片段肽外)均为以OC为靶点的骨吸收抑制剂.文中概述了成骨生长肽(OGP)的功能、结构改造先导物奥金肽对实验性大鼠骨质疏松的治疗作用;比较了奥金肽与PTH片段肽在化学特征、药理活性、不良反应及制备成本等方面的特点.对骨吸收抑制剂与骨形成促进剂联合应用的前景进行了讨论.
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补肾活血方亲脂性组分的气相色谱分析及诱导成骨细胞分化研究
目的 建立补肾活血方亲脂性组分的气相色谱测定方法,研究该组分诱导成骨细胞分化的活性.方法 采用超临界流体萃取补肾活血方中亲脂性组分SFE Ⅰ和SFEⅡ,气相色谱法测定其中亚油酸和油酸含量;研究SFEⅠ和SFEⅡ含药血清诱导小鼠成骨细胞MC3T3E1增殖和碱性磷酸酶活性的能力.结果 亚油酸甲酯与油酸甲酯在0.2~1.2 μg范围内呈良好线性关系,方法学考察结果符合要求;SFE Ⅰ的亚油酸和油酸含量分别为318.51~328.64 mg/g和454.25~460.82mg/g,SFEⅡ的亚油酸和油酸含量分别205.22~211.32 mg/g和228.55~235.13 mg/g.体外研究显示,SFE Ⅰ与SFEⅡ组含药血清可显著提高成骨细胞MC3T3E1增殖率和碱性磷酸酶活性,且强于醇水提取物组(P<0.05).结论 补肾活血方超临界流体萃取物SFE Ⅰ和SFEⅡ以亚油酸和油酸为主,且诱导成骨细胞分化活性优于醇水提取物.
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大豆异黄酮类对体外培养大鼠成骨细胞的影响
目的: 探讨大豆异黄酮类提取物预防骨质疏松症在细胞水平的作用机制. 方法: 以经口给予大鼠大豆异黄酮类提取物后分离的血清作为干预物,加入新生SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞(OB)中.以噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况;用对硝基酚磷酸盐法测定OB碱性磷酸酶(ALP)活性、用放免法测定OB骨钙素(BGP)含量,以反映OB的分化状况;酶联免疫(ELISA)法检测OB分泌细胞因子IL-6的水平.. 结果: 以大豆异黄酮类提取物灌胃的大鼠血清可使体外培养大鼠成骨细胞MTT吸光值明显增加,成骨细胞ALP活性显著升高,成骨细胞BGP分泌显著增加,而其对IL-6的分泌无明显影响. 结论: 大豆异黄酮类提取物可明显促进体外培养的大鼠成骨细胞增殖和分化;对骨吸收似无明显影响.推测大豆异黄酮类对骨质疏松的预防作用机制是促进骨细胞的增殖和分化.
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注射用骨瓜提取物致过敏性休克早期症状的观察与护理
注射用骨瓜提取物是近年骨科广泛使用的新药,由新鲜冷冻的猪四肢骨和葫芦科植物甜瓜的干燥成熟种子提取制成的无菌冻干品,为中药复方制剂.此药含多种骨代谢的活性肽类,具有调节骨代谢、刺激成骨细胞增殖、促进新骨形成、调节钙磷代谢、增加骨钙沉积、防止骨质疏松和抗炎镇痛作用.临床上主要用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎、腰腿疼痛、骨折创伤修复等,适应证几乎包括了骨科的所有疾病[1].但随着时间的推移和使用量的增加,出现了一些严重的不良反应.我科有9例患者使用注射用骨瓜提取物后出现过敏性休克的早期症状,经及时有效地处理,所有患者均恢复良好,无后遗症,现将护理体会报道如下.
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应力作用下骨缝中成骨细胞的细胞因子改变
正畸治疗中,对上颌发育不足的患者常常需要使用矫形力牵引上颌向前,在这一过程中,骨缝作为继发性生长点在两端行成新骨,宏观上使上颌骨向前生长,矫形治疗得以进行.骨缝受力后发生的变化受到了学者们的广泛研究:外力作用于骨后,由骨细胞将各种机械信号转化为生化信号传导给成骨细胞和破骨细胞,由后两者发挥效应,引起骨的改建.受力后,细胞的形态和活性发生了适应性的变化:在1.0pa的剪切力作用1小时后,细胞由多边形变为纺锤形,微绒毛增多,细胞的长轴的大截面周径明显增大,近半数细胞沿力的方向排列,肌动蛋白微丝(actin filaments)变为沿细胞突起的长轴平行排列[1];应力作用下成骨细增殖且随着施力时间的增加,增殖细胞数增加,细胞增殖活跃程度增加[2,3],在细胞加力的正常范围内增殖和分化指数有显著性改变,细胞功能活跃,分泌表达多种与细胞增殖分化有关的生物活性物质[4],如TGF-β1[5~9]、IGFs[10~13]、bFGF[14~16]等.反过来在这些活性物质的自分泌和旁分泌的调节下,成骨细胞增殖、分化,分泌基质,同时由于应力的作用,细胞基质可在通常不能矿化的情况下矿化.
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骨疏灵缓释微球提取工艺的优选
骨疏灵淫缓释微球是用于治疗骨质疏松的一种纯中药缓解剂,方中含有淫羊藿苷、骨碎补、黄芪等中药.药理实验研究证实,其水煎液具有抑制破骨细胞活性,同时又促进成骨细胞增殖的作用[1].
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骨肽输注过快致高热分析
骨肽,成分为多肽类代谢因子、有机钙、磷、无机钙、无机盐、微量元素、氨基酸等,具有调节骨代谢,刺激成骨细胞增殖,促进新骨形成及调节钙、磷代谢,增加骨钙沉积作用,用于增生性骨关节疾病及风湿、类风湿关节炎的治疗,并能促进骨折愈合.作为骨科常用药,我院自1996年至今只发生了1例应用骨肽引起不适者,报告如下.
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骨肽注射液的临床应用
骨肽注射液含多种骨代谢的活性肽类,具有调节骨代谢,刺激成骨细胞增殖,促进新骨形成,以及调节钙、磷代谢,增加骨钙沉积,防止骨质疏松,及抗炎、镇痛作用.临床上用于增生性骨关节疾病及风湿、类风湿关节炎和骨折等的治疗.现介绍骨肽在临床上的几种作用.
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成骨细胞增殖和钙盐沉积能力:在接骨七厘片药物溶液中的反应
背景:接骨七厘片是促进骨折愈合、临床疗效较好的复方中药,但其作用机制尚不十分清楚。目的:观察接骨七厘片药物溶液对成骨细胞增殖和钙盐沉积能力的影响。方法:以体外培养的MC3T3-E1成骨细胞为研究对象。①常规培养24 h更换无血清DMEM培养液,饥饿培养24 h同步化细胞周期,弃去培养液,实验组每孔加入100μL含接骨七里片药物溶液的DMEM完全培养基,对照组加入DMEM完全培养基,于培养24 h和48 h使用MTS一步法检测细胞增殖活力。②以1×105密度接种MC3T3-E1细胞于96孔板,培养4 h更换成骨诱导培养液,诱导21 d进行茜素红染色观察MC3T3-E1细胞的钙盐沉积能力,对照组细胞不进行成骨诱导。结果与结论:在培养24 h和48 h,接骨七厘片药物实验组细胞增殖程度均较对照组上调(P <0.05);成骨诱导21 d后,茜素红染色发现接骨七厘片药物实验组钙盐结节生成明显多于对照组(P<0.01)。以上结果表明接骨七厘片药物溶液能够明显促进成骨细胞增殖和钙盐沉积能力。
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基于雌激素受体研究氯化锂干预成骨细胞的分化及自噬
背景:临床应用锂治疗造血系统疾病和双极性疾病已经有数十年,并且发现锂可以直接刺激骨髓间充质干细胞的增殖.目的:研究雌激素受体抑制下氯化锂对大鼠成骨细胞增殖分化及自噬的影响.方法:实验选取10只出生72 h的SPF级SD乳鼠(由黑龙江中医药大学提供).采用酶消化法和茜素红染色法获得和鉴定成骨细胞.取对数生长期成骨细胞,于培养基中加入不同浓度的氯化锂(0,1,2,5 nmol/L)处理24 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况.另取成骨细胞随机分为空白组(正常培养细胞)、抑制剂组(10-7 mol/L ICI 182780)、治疗组(5 nmol/L氯化锂+10-7 mol/L ICI182780).采用钙化结节染色及碱性磷酸酶活性检测各组成骨细胞分化情况;Western blot法测定各组成骨细胞中Beclin1和Runx2蛋白表达情况.结果与结论:①倒置显微镜下观察细胞多为单核、多边形及梭形,局部有细胞密集的细胞团;②CCK-8法检测结果显示不同浓度的氯化锂都能对成骨细胞增殖产生促进作用,呈浓度依赖性;③茜素红染色结果显示与空白组比较,抑制剂组成骨细胞矿化能力明显降低,与抑制剂组比较,治疗组成骨细胞矿化结节能力明显增加(P<0.05);活性测定结果显示与空白组比较,抑制剂组中碱性磷酸酶活性明显降低,与抑制剂组比较,治疗组中碱性磷酸酶活性明显增加(P<0.05);④Westem blot结果显示与空白组比较,抑制剂组中Beclin1和Runx2蛋白表达明显降低,与抑制剂组比较,治疗组中Beclin1和Runx2蛋白表达显著增加(P<0.05);⑤结果提示,雌激素受体抑制下氯化锂可以提高大鼠成骨细胞增殖分化及自噬.
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交变拉伸应变及压应力对大鼠成骨细胞FOS蛋白表达及细胞定位的影响
原癌基因c-fos是一种立即早期基因,其表达的蛋白FOS是一种核蛋白,可结合到宿主细胞DNA中负责细胞分裂的基因上,影响基因的转录和复制,促进细胞的有丝分裂.采用免疫细胞化学方法,分别观察受交变拉伸应变和压应力作用下,体外培养的大鼠成骨细胞中FOS蛋白的表达情况及其在细胞中的定位,探索力学作用促进成骨细胞增殖的机理.
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骨乐冲剂对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响
目的 研究中药骨乐冲剂对体外培养大鼠成骨细胞分化和增殖的影响,探讨其调节机制.方法 采用双酶消化法获得大鼠成骨细胞,传代培养3代后用3种浓度的骨乐冲剂含药血清培养.采用MTT法测定成骨细胞增殖率和碱性磷酸酶活性.结果 含高、中浓度骨乐冲剂的血清能显著促进成骨细胞的增殖并提高碱性磷酸酶活性.结论 中药骨乐冲剂能够促进成骨细胞的增殖与分化.
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骨肽注射液的临床应用
骨肽注射液含多种骨代谢的活性肽类,具有调节骨代谢,刺激成骨细胞增殖,促进新骨形成,以及调节钙、磷代谢,增加骨钙沉积,防治骨质疏松;还具有抗炎、镇痛作用.临床用于增生性骨关节疾病及风湿、类风湿关节炎和骨折等治疗.现就骨肽注射液在临床应用作一综述.
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骨肽注射液对新生大鼠的成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响
目的 考察骨肽注射液对新生大鼠的成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响.方法 在体外培养的大鼠成骨细胞中分别加入75,150,300,600和1 200 μg/L的骨肽注射液培养6d,用MTT法测定成骨细胞的增殖能力;用酶联免疫法检测培养12d的细胞内碱性磷酸酶活性.结果 与对照组比,骨肽注射液150~1 200 μg/L组1~6 d的细胞增长速度较快(P<0.05),并呈剂量依赖性,骨肽注射液300μg/L对成骨细胞的增殖的促进作用为明显;骨肽注射液75~l 200 μg/L组培养3,6,9和12 d的成骨细胞碱性磷酸酶活性较高(P<0.05),骨肽注射液300 μg/L的碱性磷酸酶活性强.结论 骨肽注射液可提高细胞内碱性磷酸酶活性并加速成骨细胞的增殖活动.
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甲状旁腺素羧基端肽段的表达及其对大鼠成骨细胞增殖的影响
目的:探讨 rhPTH1~84、rhPTH37~84及 hPTH1~34对大鼠成骨细胞增殖的影响。方法分子生物学方法克隆表达 hPTH1~84、hPTH37~84重组蛋白。体外培养的大鼠成骨细胞给予不同浓度的 PTH 作用后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖。结果获得了浓度约为261.82 mg/L 的 rhPTH1~84和浓度为165.45 mg/L 的rhPTH37~84。10-10~10-7 mol/L 范围的 rhPTH1~84和 hPTH1~34促进大鼠成骨细胞的增殖;rhPTH37~84则抑制大鼠成骨细胞增殖。结论成功获得了高浓度高纯度的 rhPTH1~84及 rhPTH37~84。rhPTH37~84抑制细胞增殖,为进一步研究甲状旁腺激素及其羧基端肽段的功能奠定了基础。
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生长因子在成骨细胞骨形成调控机制中的作用
成骨细胞(OB)是骨组织中的重要细胞,在产生、发展的各个阶段均需借助于精细的调控,以终完成正常的骨形成.多种生长因子可影响成骨细胞的增殖、分化及其合成细胞外基质的作用,寻找一种或联合应用几种不同的生长因子使之既能促进成骨细胞增殖又保持其成骨活性,将是今后研究的热点.