首页 > 文献资料
-
离心集菌法在尿培养中的应用
目的 研究离心集菌法在中段尿培养中的应用情况.方法 用常规培养法及离心集菌法对297例患者的中段尿培养结果进行比较.结果 297例中段尿样本采用常规培养法所需的时间为(37.3 ±9.7)h,阳性率为20.2％；而离心集菌法培养所需时间仅为(19.8±8.6)h,阳性率则高达55.6％；二者比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 离心集菌法培养速度更快,阳性率更高,能更有效的检出中段尿中的病原菌.
-
乙型肝炎患者外周血单个核细胞中共价闭合环状DNA的检测及其临床意义
目的 分析HBV感染者PBMC中HBV cccDNA与血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg、肝组织学的相关性,并探讨其临床意义.方法 选取108例HBV感染者,密度梯度离心法提取PBMC,实时荧光定量PCR检测PBMC中HBV cccDNA和血清HBV DNA,化学发光定量检测血清中HBsAg和HBeAg,其中59例慢性HBV感染者行肝活组织检查.计数资料比较采用x2检验,计量资料比较采用相关性分析,计量资料不符合正态分布的采用非参数检验.结果 108例HBV感染者PBMC中HBV cccDNA阳性59例,占54.6％,其中15例肝功能衰竭患者HBV cccDNA阳性11例,明显高于8例急性乙型肝炎中2例阳性(x2 =4.960,P＜0.05).根据患者血清HBV DNA载量分为＞5 lg、3～5 lg和＜3 lg拷贝/mL组,其PBMC中HBV cccDNA阳性率分别为76.1％(51/67)、5/18和13.0％(3/23),HBV DNA高载量组与中、低载量组比较,差异有统计学意义(x2值分别为14.751、28.384,均P＜0.05).PBMC中HBVcccDNA与血清HBV DNA载量和HBsAg呈正相关(r值分别为0.554、0.497,均P＜0.05).PBMC中HBV cccDNA在肝组织学≥G2和(或)S2组检出率明显高于＜G2/S2组(x2=9.159,P＜0.05).结论 HBV感染者PBMC中存在HBV cccDNA,且与血清HBV DNA和HBsAg呈正相关,也与肝组织学损伤相关.
-
五种抗真菌药物对马尔尼菲青霉菌的体外抗菌活性观察
目的 了解两性霉素B(AMB)、酮康唑(KET)、氟康唑(FCA)、5-氟胞嘧啶(5-Fc)和伊曲康唑(ICA)5种抗真菌药物对马尔尼菲青霉菌体外抗菌活性,为临床用药提供参考依据.方法 采用浓度梯度法(E-test)测试AMB、KET、FCA、5-Fc、ICA 5种抗真菌药物对52株从不同AIDS患者骨髓、血液、皮肤损害标本中分离的马尔尼菲青霉菌酵母相和菌丝相的体外抗菌活性.数据采用U检验.结暴 AMB、KET、FCA、5-Fc、ICA的90%酵母相马尔尼菲青霉菌的低抑制浓度(MIC90)分别为0.250、0.160、24.000、4.000和0.006 mg/L,低抑制浓度(MIC)范围分别为0.004～0.500、00002～0.016、1.000～256.000、0.002～32.000和0.002～0.008 mg/L;对90%菌丝相马尔尼菲青霉菌的MIC90分别为1.500、0.125、256.000、24.000和0.012 mg/L,MIC范围分别为0.064～4.000、0.006～0.940、1.000～256.000、0.125～32.000和0.002～0.064 mg/L.不同抗真菌药对双相马尔尼菲青霉菌的体外抗菌活性不同,以ICA强,其次为KET.酵母相和菌丝相的马尔尼菲青霉菌对同一药物的MIC比较差异有统计学意义(AMB、KET、FCA、5-Fc和ICA的U值分别为4.221 9、1.912、28.798、6.43、7.21,均P＜0.05).结论 进行马尔尼菲青霉菌体外抗真菌药物敏感实验对临床有重要参考意义.
关键词： 获得性免疫缺陷综合征 马尔尼菲青霉菌 抗真菌药 离心法 梯密度 -
密度梯度离心方式对人工授精结局的影响
目的 探讨精液经密度梯度离心时经水平转子和角转子处理后对精液质量及其对人工授精结局的影响.方法 回顾性分析352个人工授精周期,根据梯度离心时转子的不同,分成水平转子组和角转子组两组,精液经密度梯度离心法处理,形态学分析严格按照WHO(World Health Organization)人类精液检验与处理实验手册第五版标准,比较处理后精液质量及两组对妊娠结局的影响.结果 (1)精液质量比较:水平转子组前向运动精子为(89.2±8.5)％、精子浓度为(47.8±14.3)×106/mL、前向运动精子总数为(13.6±6.3)×106;角转子组前向运动精子为(90.1±8.8)％、精子浓度为(43.4±15.1)×106/mL、前向运动精子总数为(12.9±6.1)×106,无统计学差异(P＞0.05).水平转子组和角转子组正常精子比率分别为(18.5±8.2)％和(14.2±5.7)％,两者存在显著性差异(P＜0.05);(2)妊娠结局比较:水平转子组的临床妊娠率为16.5％ (30/182)、流产率为3.3％ (1/30)、活产率为96.7％ (29/30);角转子组生化妊娠率为临床妊娠率为12.4％ (21/170)、流产率为9.5％ (2/21)、活产率为90.5％(19/21),无统计学差异(P＞0.05),生化妊娠率:两组分别为0％ (0/30),19.2％ (5/26),有统计学意义(P＜0.05).结论 密度梯度离心应用水平转子可以降低对处理后精液的精子形态的影响,减少生化妊娠率.
-
PureSperm密度梯度法对活动力差精液标本的分离效果
精液的体外处理是人工授精实施中的重要环节,目前常用的精子洗涤方法有精子游动法、玻璃纤维滤过法、血清蛋白滤过法、游动-沉淀法和密度梯度离心法等[1].PureSperm是一种新型、无毒的精子分离剂.PureSperm密度梯度离心法具有操作简便,洗涤效果佳等优越性,已被文献多次报道[2,3],但PureSperm密度梯度离心法对活动力差精子的回收情况报道较少.本中心对采用PureSperm梯度密度离心法处理的少、弱精患者的精液情况进行了详细分析,现报告如下.
-
快速融化离心法与虹吸法制备冷沉淀的质量评价
目的:评价快速融化离心法与虹吸法制备冷沉淀的质量与制备效率,选择优质高效的冷沉淀制备方法.方法:取新鲜冰冻原料血浆420袋,分为2组,每组有200 ml原料血浆90袋,100 ml原料血浆120袋,4名成分制备人员连续2日分别采用虹吸法与快速融化离心法制备冷沉淀,记录制备时间,计算制备效率.每组随机抽取100 ml原料血浆制备的冷沉淀30袋,使用半自动血凝仪检测冷沉淀的Ⅷ因子和纤维蛋白原含量,分别计算合格率.结果:快速融化离心法和虹吸法制备冷沉淀Ⅷ因子含量分别为(70.9±8.3)IU和(45.9±7.6)IU,合格率分别为100%和90%,差异均有统计学意义(P<0.05);纤维蛋白原含量分别为(96.0±7.3)mg和(79.0±6.8)mg,合格率分别为100%和90%,差异均有统计学意义(P<0.05).快速融化离心法和虹吸法制备效率分别为46 U/h和40 U/h.结论:快速融化离心法制备冷沉淀具有优质高效的特点,值得推广.
-
Percoll法分离培养肾小管上皮细胞
目的建立良好的肾小管上皮细胞培养方法.方法选用SD幼鼠的肾组织进行细胞培养,采用Percoll密度梯度离心法分离纯化肾小管后,选择含10%新生牛血清的DMEM/F12培养基、5%CO2、37℃孵箱进行细胞培养.利用传1代的细胞,制作细胞爬片,用免疫组化、透射电镜进行鉴定.结果细胞生长4～5天后基本达到融合,细胞呈多边鹅卵石铺路样.结合形态学及免疫组化鉴定,细胞培养传1代后98%的细胞为肾小管上皮细胞.结论用Percoll法分离培养的细胞数量多,均一性生长较好,可重复性操作较好.为体外研究接近组织原位RTECs细胞功能和特征及药物的筛选提供了可行性和可能性.
-
包衣处方和工艺对对乙酰氨基酚缓释微丸释放度的影响
目的 研究包衣处方和工艺对离心法制备的膜控型缓释微丸的体外释药行为的影响.方法 以对乙酰氨基酚为模型药,采用BZJ-360型离心造粒包衣机以液相层积法制备含药丸芯,以微丸的体外释放度为考察指标,分别用单因素考察和正交试验的方法来探讨包衣处方、工艺因素对缓释微丸的释药特征的影响,并筛选出佳水平,通过对药物释放度曲线的药动学模型拟合确定微丸的缓释机制.结果 以丙烯酸树脂(Eudragit RS PO:RL PO=10:1)为包衣材料,包衣增重为10％,聚合物浓度为6％时包衣微丸在pH 6.2的磷酸盐缓冲液中呈现良好的缓释效果,释药机制主要是以膜控为主的扩散作用,骨架溶蚀也起到了一定的协同作用.结论 该技术制备的对乙酰氨基酚缓释微丸包衣均匀,操作简便,质量可靠,可工业化生产.
-
柱前衍生HPLC法测定大鼠肾组织中羟脯氨酸的含量
目的:建立一种测定大鼠肾组织中羟脯氨酸(Hyp)含量的柱前衍生HPLC法.方法:将大鼠肾组织以6 mol · L-1盐酸于110℃水解24 h,加入9-芴甲氧基羰酰氯(FMOC)衍生后,进行HPLC分析.HPLC分析条件为:Phenomenex C18色谱柱(4.60 mm× 150 mm,5(m)；流动相:醋酸钠缓冲液( pH3.78)-甲醇-乙腈(梯度洗脱)；流速:1.0 ml·min-l；柱温:40C；检测波长:265 nm.结果:羟脯氨酸在浓度范围为15.30～612.00 mg·L-1内线性良好(r =0.9999)；回收率为97.4％～103.9％.结论:该方法简单、准确、灵敏,可用于测定大鼠肾组织中羟脯氨酸的含量.
-
PT、APTT检测中的一些影响因素
近年来不断有报道许多因素可以影响凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)测定结果,并强调检测中的质量管理和标准化问题[1-3].作者观察了离心力、血标本存放时间和方式对PT、AFTT测定结果的影响.现报告如下.
关键词： 凝血酶原时间/分析 部分促凝血酶原时间/分析 质量控制 离心法 血液保存 -
成人骨髓间充质干细胞体外培养及其生物学特性鉴定
目的 探讨并优化成人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)体外分离培养方法,鉴定其生物学特性,为BMSCs应用奠定技术基础.方法 将手术弃骨无菌条件下用无血清培养液(α MEM培养基、100 u/ml 青霉素,100 u/ml 链霉素)冲出骨髓,采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离纯化hBMSCs,通过传代培养,扩增hBMSCs.倒置光学显微镜下观察细胞形态及生长情况,细胞计数法绘制细胞生长曲线,并分析冻存细胞复苏后的生长特性,免疫荧光染色测定hBMSCs表面标志,成骨诱导试剂盒检测hBMSCs向成骨分化的潜能.结果 倒置显微镜下观察hBMSCs呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长.细胞生长曲线分析细胞贴壁2 d基本无增殖,处于潜伏期,对数增殖期为3～6 d,第7 天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象.冻存细胞复苏后细胞生长特性无明显改变.免疫荧光染色结果显示,第3代hBMSCs 小鼠IgG、 CD34、CD45表达阴性;CD29、CD90、CD166表达阳性,均为胞浆着色,细胞表型稳定.成骨诱导试剂诱导细胞10d后hBMSCs表现成骨细胞特性,且碱性磷酸酶活性明显增高.结论 密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离纯化的hBMSCs纯度高,增殖活性强,传代培养生长旺盛且生物学特性稳定;可为组织细胞工程和基因治疗提供理想的种子细胞.
-
手工法和机采法制备浓缩血小板质量的比较
输注血小板对血小板减少和功能异常引起的出血有较好的纠正作用,而浓缩血小板中血小板的数量和质量对临床输注效果十分重要.传统离心法(手工分离法)制备的浓缩血小板与连续流动式血细胞分离机采集的浓缩血小板相比,质量上的差异有显著性.本文对两种方法制得浓缩血小板的主要质控指标进行比较.
-
冷沉淀制备工艺改良
目的 比较离心法、虹吸法制备过程,探讨冷沉淀制备工艺的改良.方法 测定两种方法制备的冷沉淀制剂内纤维蛋白原、Ⅶ因子含量.结果 两种方法测定结果的差异无显著性.结论 虹吸法是一种简便易行且具有实用价值的方法.
-
消化离心浓集法检测结核杆菌在临床的应用
结核病是严重危害人类健康的慢性传染病,近年来有死灰复燃的趋势,尤其在青年学生中间发病率偏高,需要快速准确的诊断结核病.以前的普通涂片法操作简单,取样量少,但阳性率低,使许多患者被漏检.我们利用消化离心浓集法检测抗酸杆菌,在不增加医院投入的情况下,提高了检出率,并通过与夹层杯集菌离心法相比较相关性较好,值得在基层医疗机构开展.
-
痰分支杆菌快速培养和药敏试验的评价
2002年本院住院和门诊肺结核病人(按2003年结核病诊断标准确诊为肺结核)痰140份,同时采用改良罗氏培养基分离培养加以对照.痰标本经NALC-NaOH消化振荡离心法前处理后,无菌条件将待测液接种于快速培养瓶和改良罗氏培养基内,同时将标本涂片:萋-纳二氏染色,镜检.
-
恶性胸水肿瘤细胞的分离、纯化及其临床意义
目的探讨恶性胸水肿瘤细胞的分离、纯化方法学以及临床意义.方法在20份胸水标本中,同一份标本分别按离心沉渣法、密度梯度离心法和不连续密度梯度离心法3种方法分为3组检测:细胞病理学(Ⅰ组)、单个核细胞(Ⅱ组)、肿瘤细胞(Ⅲ组).分别计算各组阳性率,各组间率的比较行配对资料χ2检验.结果Ⅰ组:肿瘤细胞阳性率为45%(9/20);Ⅱ组:肿瘤细胞阳性率为65%(13/20);Ⅲ组:肿瘤细胞阳性率为20%(4/20).Ⅰ组与Ⅱ组、Ⅰ组与Ⅲ组组间比较差异均无显著性(P>0.05),Ⅱ组与Ⅲ组比较差异有显著性(P<0.01).结论采用密度梯度离心法和不连续密度梯度离心法可以从恶性胸水中分离出肿瘤细胞,并有助于鉴别恶性胸水中肿瘤细胞的细胞分化和细胞起源.
-
骨髓基质细胞不同培养方法效果比较
目的:观察全骨髓培养法与密度梯度离心法对培养骨髓基质细胞的效果差异,建立简单、经济、实用分离骨髓间充质干细胞方法.方法:体外提取骨髓基质细胞,分别采用全骨髓培养法与密度梯度离心法培养骨髓基质细胞,观察细胞形态学、细胞活力、细胞周期及细胞表面分子表达差异.结果:两种方法均能有效培养出骨髓间充质干细胞,各细胞周期的细胞检出率无显著差异(P>0.05),细胞形态学无差异,细胞表面分子CD34、SH1、SH2、SH3表达差异不显著(P>0.05).结论:全骨髓培养法在分离培养骨髓基质细胞方面与密度梯度离心法具有类似效果.
-
血液成分制作中长尾票夹组合的使用
通常情况下,血站从全血制备悬浮红细胞和新鲜冰冻血浆,利用二次离心法,在一定条件下将全血血袋重离心后,置于分浆夹上,利用分浆夹底部弹簧产生的压力将血袋上部的血浆挤压到另一个血浆袋中…….操作过程中要注意观察,不能将底部的红细胞混入血浆袋中.如果混入了太多的红细胞,一则影响血浆的制备和质量;二则易造成原血袋中红细胞丢失过多而被判为不合格产品.
-
小鼠肝Kupffer细胞分离方法探讨
目的 探讨分离BALB/c小鼠肝Kupffer细胞(KC)的方法.方法采用在体酶灌注和离体酶消化、不连续密度梯度离心、选择性贴壁三步法分离KC,并比较链霉蛋白酶、Ⅳ型胶原酶及联用链霉蛋白酶和Ⅳ型胶原酶等3种不同酶消化分离方法所得KC得率及纯度.结果3种不同酶消化分离方法细胞得率分别为(6.32±0.5)×106 g-1,(3.66±0.4)×106g-1,(10.3±0.7)×106 g-1;细胞纯度分别为(93.2±1.7)％,(90.7±1.5)％,(94.5±1.9)％.结论联合链霉蛋白酶和Ⅳ型胶原酶在体灌注和离体消化是分离小鼠KC的较好方法.
-
二步离心法在浆膜腔积液常规细胞形态学检查中的应用
对有核细胞数较低的浆膜腔积液中,诊断的阳性率长期以来维持在较低的水平.特别是当有核细胞计数＜100×106/L时,不作涂片细胞分类和细胞形态学观察.因此收集尽可能多的细胞,在提高诊断阳性率方面起着关键因素.
