首页 > 文献资料
-
生物芯片、生物信息学与高通量中药活性筛选
药物筛选是一个采用适当方法与分析手段对候选物质药理活性评价的主动寻找药物的过程.高通量筛选技术是20世纪80年代后期形成的寻找新药的高新技术,其有3大技术支持,即组合化学、遗传学和高通量筛选,分别为新药开发提供新化合物源,新的作用靶标和大规模的筛选方法.后两者相辅相成,构成较为完整的筛选体系,即基于疾病机理,选择特定生物分子作为靶标的高通量筛选.目前机理筛选一般有两种模式,一种是直接检测化合物对生物大分子如受体、酶、离子通道、抗体等的结合及作用;另一种是检测化合物作用于细胞后基因表达(尤其是mRNA)的变化.不论何种筛选模式,其关键问题是药物靶标的确定和筛选效率的提高,生物芯片及相关技术的出现将在药物筛选的关键问题上发挥巨大的作用,不仅可促进药物基因组学的发展,尤其是对中药活性物质的筛选和方剂作用原理的研究提供有力的技术支撑.
-
从组织切片上分离单个细胞的相关技术及其应用前景
1 从组织切片上分离单细胞方法的建立从组织切片上进行单个细胞分离,并扩增出靶DNA片段的技术是1993年由德国科隆大学的Hansmann等[1]建立起来的一项新技术,并将其称为分子组织学技术(molecular histology).该方法的大优点在于能够针对所需研究的细胞,将组织形态和分子生物学技术密切结合,特别适用于细胞组成复杂的病变.同年,Trumper等用霍奇金病(HD)淋巴结制备细胞悬液,结合免疫组织化学,用微操纵器从细胞悬液中提取单个Reed-Sternberg(RS)细胞,并成功地进行了聚合酶链反应(PCR)[3].两种方法相比较,前者更具优势,因为从组织切片上提取单个细胞,能密切结合形态学特征,更为直观和准确,同时也能将目的细胞与周围微环境中的背景细胞作相关性研究.获得单个细胞还有其他方法,如流式细胞仪、密度梯度离心、高梯度磁性细胞筛选,但细胞体积较大时,这些方法易导致细胞碎裂,而从组织切片上提取单个细胞不存在类似问题[4].
-
分子肿瘤病理学概述
20世纪末期,细胞遗传学和分子生物学的相关技术被广泛应用于肿瘤病理学,分子肿瘤病理学应运而生.应用分子肿瘤病理学的技术手段,能对许多运用电镜和免疫组化无法区分的肿瘤加以鉴别;病理诊断也由形态学的直观性,向以细胞,分子生物学指标为依据、对肿瘤生物学行为进行预测、为临床治疗提供指导的综合方向发展.更具有科学性和可靠性.
-
浅谈创造性评判中技术启示存在暗示的几种情形
专利审查指南第二部分第四章第3.2.1节关于创造性的判断方法中规定,涉及判断要求保护的发明对本领域技术人员来说是否是显而易见时,关键要确定的是现有技术整体上是否存在某种技术启示。以下情况,通常认为现有技术中存在上述技术启示:①所述区别技术特征为公知常识;②所述区别技术特征为与接近的现有技术相关的技术手段;③所述区别技术特征为另一份对比文件中披露的相关技术手段,该技术手段在该对比文件中所起的作用与该区别技术特征在要求保护的发明中为解决该重新确定的技术问题所起的作用相同[1]。对于后一种技术启示,实际上是分为两种情况的,第一种是对比文件给出了明确的技术启示,即对比文件不仅公开了相关的技术特征,而且所述技术手段在该对比文件中所起的作用与该区别技术特征在要求保护的发明中所起的作用相同,这是一种明确也是简单的情况,审查员可以直接通过引用该对比文件评述本发明的创造性;事实上,在实际审查过程中,很多所引用的对比文件并不会直接给出明确的技术启示,但是又不是没有给出技术启示,我们称之为对比文件给出了“暗示”。那么这种情况下,我们又该如何去评述其创造性呢?
-
血液肿瘤的分子诊断
随着分子生物学及其相关技术的迅速发展,血液系统肿瘤的诊断已进入“精确诊断”时代。目前血液学实验室中主要的分子生物学平台包括聚合酶链反应( PCR)技术、测序技术和基因芯片等;这些技术具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,在血液肿瘤的诊断、分型、预后判断、疗效评估、微小残留病的监测及个体化治疗等多个方面发挥了重要作用。我们简要概述分子生物学在血液肿瘤诊断中的应用和进展。
-
甲醛固定及石蜡包埋组织的蛋白质组学研究进展
人体内多数疾病都有其独特的生物学特征,如某些蛋白质表达量的改变,新的肿瘤特异性蛋白质的出现等.近年来蛋白质组学及其相关技术为发现新的疾病特异性生物标志物以及探讨疾病发生发展机制,提供了高效便捷的工具~([1]).
-
数字化网络化病理实验教学中电子版实验报告的应用体会
近十年来,随着计算机、数字、信息、网络等相关技术的迅猛发展,显微数码互动系统、数字切片网络教学、三维大体标本等已广泛应用于病理实验教学中,传统病理实验教学正逐步蜕变成病理实验教学全新模式--数字化网络化病理实验教学。全新的教学模式在课前准备、课堂教学、师生互动、课后复习、作业形式、考试模式等各个环节注入了新元素,极大地提高了教学效率和教学质量。浙江大学在国内较早进行数字化病理学实验教学改革[1-2],经过多年的改革创新完善,积累了丰富的数字化实验教学经验,我们就多年来数字化网络化病理实验教学中实验报告的改革应用谈一些体会。
-
RCA技术的应用及研究进展
滚环复制是噬菌体感染细菌后进行自我复制普遍采取的一种形式.这种复制形式可在同温下对环状单链DNA进行相对无限单链扩增.近年来在一些基因检测技术的研究中被广泛采用,并将与之有关的技术统称为滚环放大(rollingcircle amplification,RCA)技术[1].因为滚环复制的模板必须是封闭的单链环状DNA,许多研究者将这种特性用于单核苷酸多态性(SNP)及病毒基因检测和基因表达图谱等的研究中,还有一些实验直接将滚环的无限复制作为一种单纯的信号级联放大系统,并由此衍生出许多相关技术.本文综述了当前RCA技术及其相关的研究进展,并展望了该技术的应用前景.
-
核苷酸衍生物相关技术在分子诊断中的应用与展望
近年来,一些人工合成的核苷酸衍生物,包括肽核酸(peptide nucleic acid,PNA)、锁核酸(locked nucleic acid,LNA)、己糖醇核酸(hexitol nucleic acid,HNA)等开始在分子诊断领域中得以应用[1].与普通的核苷酸(DNA、RNA)一样,这些衍生物由A、T、C、G四种碱基组成,可通过碱基配对原则与互补的核酸序列结合.这些人工合成的核苷酸衍生物有诸多自身优势,如较高的热稳定性、酶抵抗性等.籍此,其可以明显改善普通分子生物学技术的性能特点,包括灵敏度、特异性、重复性等.譬如,利用3’端LNA修饰的引物可显著提高单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测的特异性,利用PNA夹止技术的抑制作用,可选择性扩增高野生背景中的少量突变[2,3].
-
表皮葡萄球菌引起的复发性腹膜炎的治疗
随着腹膜透析相关技术的不断改进和腹透中心管理水平的日益提高,腹透相关腹膜炎的发病率和病死率明显下降.绝大多数腹膜炎经规范治疗均可痊愈.但是,仍有一些特殊类型的腹膜炎需特殊对待,如复发性腹膜炎,现报道典型病例1例如下.1 病历摘要患者男性,35岁,因“腹膜透析7个月,反复腹痛、腹透液混浊10周”入院.患者7个月前因糖尿病肾病、慢性肾脏病5期开始持续不卧床腹膜透析.
-
声学造影剂及相关技术对肾脏疾病的应用价值
近几年来,随着第三代新型声学造影剂的研制成功,其特有的安全、高效、无创等优点,极大地推动了造影超声的发展。研究的内容也逐渐从心脏造影向腹部实质脏器、外周血管等部位扩展。肾脏是血供为丰富的腹腔脏器,经静脉声学造影与其它新兴超声技术的结合,显著改善了肾脏的声学图像,对肾脏的血流灌注也逐渐从定性走向定量研究,从而大大提高了超声对肾脏疾病的诊断和鉴别诊断,有着广泛的应用前景。
-
声学造影及相关技术在肾肿瘤中的应用
自从1968年Gramiah第一次描述声学造影剂以来,人们一直致力于研究各种声学造影剂及造影方法,目前声学造影的应用领域已从心脏延伸到心外器官,在腹部脏器中的应用研究以肝肿瘤为主要研究对象.超声是诊断肾肿瘤的首选方法,以往肾肿瘤良恶性的鉴别主要靠灰阶回声强弱,缺乏特异性.研究表明声学造影可增强肿瘤及肿瘤内血管显像,提高肾肿瘤的检出率,评价肾肿瘤血供特点及血供丰富与否,有助于肾肿瘤的诊断与鉴别诊断.本文综述声学造影在肾肿瘤中的研究进展.
-
捺取有效母亲指印和新生儿脚印的方法
由于人的指纹和足迹具有人各不同、各指不同和终身不变的基本特点,[1]因此运用指纹、足迹鉴定、识别个人是一种可靠的方法.医学上可以通过指纹、足迹鉴定来确定亲子关系.本文就如何捺取有效指印、脚印的相关技术做一论述.
-
十二指肠镜治疗33例慢性胰腺炎临床分析
慢性胰腺炎(CP)为胰腺炎症性疾病,以胰腺实质发生慢性持续性炎性损害、纤维化及可能导致的胰管扩张、胰管结石或钙化等不可逆性的形态改变为其特征,可引起顽固性疼痛和永久性内、外分泌功能丢失[1].内镜逆行胰胆管造影(ERCP)及相关技术的广泛开展,为慢性胰腺炎的诊断和治疗提供了新的技术和方法.觋将我院2005年1月至2012年6月经十二指肠镜治疗的33例慢性胰腺炎患者情况报道如下.
-
如何合理应用超声心动图新技术进行临床诊断和研究
由于计算机技术的快速发展,推动了超声心动图技术的不断进步,近年来,不断涌现的超声心动图新技术包括组织多普勒成像(tissue doppler imaging,TDI)及其相关技术;二维应变超声心动图(two-dimensional strain imaging,2DSI);自动功能成像(automatic function imaging,AFI);速度向量成像(velocity vector imaging,VVI);超声瞬时波强(wave intensity,WI);超声向量血流成像(vector flow mapping,VFM);心肌对比超声心动图(myocardial contrast echo,MCE);心脏二维血流成像技术(cardiac B-flow imaging,CBFI);四维容积成像(four dimensional volume imaging);三维斑点追踪成像(three dimensional spackle tracking imaging,3DSTI)等.
-
不同银染法和上样模式对双向凝胶电泳影响的初步分析
双向凝胶电泳(2-DE)技术是蛋白质组学研究的重要支撑技术之一.该技术利用蛋白质2项独立物化参数--等电点(pI)和分子量的差异,将高分辨率的等电聚焦电泳(IEF)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)程序相组合.2-DE常用的标本上样方式有溶涨上样和杯上样.前者溶涨与等电聚焦同时进行,后者溶涨与等电聚焦依次进行.常用的下游蛋白质显示技术包括同位素标记法、荧光标记法、染料标记法、金属和重金属离子标记法.银染法属金属离子还原染色,分双胺银染法和非双胺化学显色银染法.本研究通过比较两种上样方式和两种银染法对人肝癌细胞系MHCC97H、97L的2-DE图谱的影响,以期建立较理想的实验室内2-DE相关技术的方法.
-
乙型肝炎与丙型肝炎病毒感染临床检测的进展
随着人们对肝炎病毒感染疾病意义的认识不断加深,临床抗病毒药物研发也在不断发展,同时快速发展的分子生物学及相关技术促进了对乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)临床检测的发展.
-
肿瘤蛋白质组学研究进展
随着后基因组时代的到来,蛋白质组学成为一个发展迅速、日益重要的研究领域.高分辨率的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱技术、生物信息学的结合使蛋白质组分析及其在临床疾病中的应用成为可能.尽管所有的细胞都拥有同样的基因组,但在不同的细胞内会有不同的基因处在活跃状态,从而合成不同的蛋白质.同样,病变细胞和正常细胞的差异在很大程度上也是由功能基因及其合成蛋白质的不同来决定的.恶性肿瘤是一种多基因参与的复杂疾病.蛋白质组学研究直接定位于蛋白质水平,从整体、动态、定量的角度去研究基因的功能.肿瘤蛋白质组学研究不仅有助于进一步揭示恶性肿瘤的发病机制,亦可应用于发现能进行早期临床诊断的肿瘤标记和寻找新的治疗靶标.蛋白质组学同时又是一门由技术推动、受技术限制的科学,需不断完善、发展其相关技术.
-
鼻胆管引流预防ERCP术后胰腺炎及高淀粉酶血症临床分析
目前,ERCP及相关技术已成为肝胆胰疾病有效及重要的诊疗方法.但ERCP术后导致的各种严重并发症在一定程度上限制了该项技术的广泛应用,其中尤以急性胰腺炎(AP)及高淀粉酶血症为常见.我们采用经内镜鼻胆管引流术(ENBD)预防ERCP术后AP及高淀粉酶血症的发生,取得了较满意的效果.现报道如下.
-
蛋白质组学在胰腺癌早期诊断中的应用
蛋白质组学的提出及其相关技术的发展为胰腺癌的早期诊断奠定了基础.其直接定位于蛋白质水平,从整体、动态、定量的角度研究基因功能,有助于发现用于早期临床诊断的肿瘤标志物,同时也可应用于寻找新的治疗靶标和进一步揭示胰腺癌发生、发展机制.本文就近年来蛋白质组学在胰腺癌早期诊断中的应用做一概述.