Ki67反义寡核苷酸及联合紫杉醇对PC-3细胞增殖的影响

目的 研究Ki67反义寡核苷酸(antisense oligodexynucleotides,AS-ODN)对人前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用及与紫杉醇联用的协同作用.方法 Ki67反义寡核苷酸在脂质体介导下转染PC-3细胞,以RT-PCR技术检测Ki67基因表达情况,以CCK8法检测Ki67反义寡核苷酸以及联合紫杉醇对PC-3细胞增殖的影响.以金正均Q值法评价二者是否有协同作用.结果 31.25 nmol/L AS-ODN能显著抑制PC-3细胞的增殖(P＜0.05),且抑制作用随AS-ODN浓度增加而增强;各不同浓度的AS-ODN能显著降低Ki67 mRNA的表达:31.25 nmol/L AS-ODN与0.001 μmol/L紫杉醇联用,Q=1.77.结论 Ki67反义寡核苷酸可以通过抑制增殖蛋白Ki67的表达进而抑制PC-3细胞的增殖,且与紫杉醇(0.001 μmol/L)联用有协同作用.

广东凉茶颗粒对应激小鼠生殖器官过氧化状态的改善作用

目的 研究广东凉茶颗粒对拘束负荷诱发小鼠生殖器官过氧化状态的改善作用.方法 18 h拘束负荷诱发小鼠生殖器官过氧化损伤,分别利用硫代巴比妥酸法测定睾丸和卵巢丙二醛(MDA)水平,HPLC法测定谷胱甘肽(GSH)含量,比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和黄嘌吟氧化酶(XOD)活性,Griess化学法测定一氧化氮(NO)含量,荧光酶标仪测定抗氧化能力指数(ORAC).结果 与拘束负荷模型组相比,广东凉荼颗粒可以明显降低因拘束负荷引起的小鼠睾丸和卵巢组织MDA水平、NO含量和XOD活性升高,同时显著升高睾丸和卵巢组织中的GSH含量、GSH-Px活性和ORAC指数.结论 广东凉茶颗粒对拘束负荷诱发的小鼠生殖器官过氧化状态具有一定的改善作用,其作用可能与减少拘束负荷小鼠的氧化应激水平和改善组织脂质过氧化过程有关.

中药有效成分对HepG2细胞中CYP相关基因表达的影响

目的 观察8种中药有效成分对细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP)1A1,2E1,3A4和3A5基因表达的影响.方法 采用实时定量PCR技术检测HepG2细胞中各CYP mRNA的表达.结果 黄芩苷、黄芩素和青蒿素在不同浓度下均明显地诱导CYP1A1的表达.与黄芩苷和黄芩素相比,青蒿素对CYP1A1的诱导作用较弱.七叶皂苷钠、黄芩素和青蒿素能明显诱导CYP3A4的表达.结论 HepG2细胞可作为CYP诱导剂的体外筛选模型.黄芩苷、黄芩素、青蒿素和七叶皂苷钠对CYP1A1或CYP3A4的诱导作用,为中西药代谢性相互作用及毒理学研究提供了实验依据.

甲蓉片对子宫内膜腺癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 观察甲蓉片对子宫内膜腺癌裸鼠移植瘤生长的影响.方法 将HEC-1-B细胞接种于裸鼠肩胛区,建立子宫内膜腺癌动物模型.将36只荷瘤裸鼠随机分为3组,即甲蓉片组(2.162 g/kg)、雌激素组(倍美力0.045 mg/kg)和空白对照组,每组12只,观察给药前后肉眼和光镜下移植瘤的形态,并根据肿瘤体积的变化情况绘制移植瘤生长曲线图.结果 甲蓉片组、空白对照组与雌激素组生长曲线斜率依次增大,表明各组肿瘤的生长速度依次增快.肿瘤生长速度在甲蓉片组和空白对照组之间无显著性差异(P>0.05),雌激素组明显快于甲蓉片组和空白对照组(P＜0.05).各组荷瘤鼠出现不同程度的消瘦,其中以雌激素组尤为明显.用药后雌激素组肿瘤细胞排列密集,核异型性大,核分裂多,而甲蓉片组及空白对照组光镜下所见与用药前比较无明显变化.结论 甲蓉片对裸鼠移植瘤生长无明显影响.

木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对缺血缺氧培养乳鼠心肌细胞的保护作用

目的 观察木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对缺血缺氧培养乳鼠心肌细胞的保护作用及其可能机制.方法 采用原代培养的乳鼠心肌细胞造成缺血缺氧损伤模型,观察木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对损伤后心肌细胞存活率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影响,推断细胞内活性氧的生成量;观察培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,以判断细胞损伤情况;并进行hochest33258 染色,判断细胞凋亡程度.结果 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(100,50 μg/mL)组可显著升高缺血缺氧损伤时细胞存活率、提高细胞SOD活性,降低MDA含量、降低LDH的漏出量,细胞凋亡率降低.结论 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对缺血缺氧培养的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与清除氧自由基,稳定细胞膜,抑制细胞凋亡有关.

复方五味子素B抑制人胃癌细胞株增殖的机制研究

目的 观察复方五味子素B(Sch-C)对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的抑制作用并探讨其可能机制.方法 MTT法观察Sch-C对人胃癌细胞的增殖抑制作用,计数法观察细胞分裂指数,流式细胞术和组化法检测细胞周期和PCNA蛋白,RT-PCR法观察CyclinDl mRNA的表达.结果 Sch-c(25,50,100 μg/mL)作用人胃癌细胞12,24,48 h能明显抑制胃癌细胞的增殖和分裂,其中以50μg/mL Sch-C作用48 h的抑制作用为明显;50μg/mL Sch-C作用胃癌细胞48 h时,流式细胞仪可以检测到凋亡峰,G0/G1期细胞明显增多且能明显抑制胃癌细胞PCNA蛋白和CyclinD1 mRNA的表达.结论 Sch-C可能通过下调CyclinD1mRNA表达阻滞细胞周期,下调PCNA蛋白表达降低细胞增殖活性来抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖.

牛蒡子苷元复方抗流感病毒的实验研究

目的 观察牛蒡子苷元复方的体内外抗流感病毒作用及诱生干扰素水平.方法 于狗肾细胞上观察牛蒡子苷元对流感病毒复制的抑制作用.以病毒滴鼻感染小鼠,观察对肺指数、病毒致小鼠死亡率等的影响;对正常小鼠研究诱生干扰素水平.结果 牛蒡子苷元复方在体外对甲1型流感病毒未显示有抑制作用.牛蒡子苷元复方能降低流感病毒感染所致小鼠肺指数;对流感病毒致死小鼠有明显的保护作用及延长生命率的作用;对正常小鼠有一定的诱生干扰素作用.结论 牛蒡子苷元复方有一定的抗流感病毒作用,其体内抗病毒作用的机制之一可能是诱生体内产生干扰素.

抗戾饮抗甲1型流感病毒的实验研究

目的 以狗肾细胞株(MDcK)及小鼠流感病毒肺炎模型为基础,观察抗戾饮体内、外抗流感病毒的作用.方法 将甲1型流感病毒FM1株接种于MDCK细胞,观察抗戾饮对细胞的毒性及体外抗流感病毒的作用;以甲1型流感病毒FM1株滴鼻感染致小鼠肺炎,观察抗戾饮对小鼠肺指数和肺指数抑制率及死亡保护作用的影响.结果 抗戾饮的大无毒浓度为0.21 mg/mL,其大无毒浓度在MDCK细胞对甲1型流感病毒FM1株无明显抑制作用;抗戾饮组的肺指数和肺指数抑制率与模型对照组相比,均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01):抗戾饮组的死亡保护率和延长生命率与模型对照组相比,均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论 抗戾饮体外对甲1型流感病毒无明显抑制作用,但对甲1型流感病毒FM1株致小鼠肺炎具有良好的治疗效果.

姜黄素对肺纤维化大鼠肺功能的影响

目的 研究姜黄素对博莱霉素致大鼠肺纤维化的治疗作用.方法 雄性SD大鼠144只,分为假手术组,模型组,姜黄素高、中、低剂量组,醋酸泼尼松组,每组24只.除假手术组外其余各组大鼠气管内一次性滴注盐酸博莱霉素,假手术组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水.造模后第1天开始给药,持续到处死动物的前一天.姜黄素高、中、低剂量组的剂量分别为200,100,50 mg·kg,-1·d-1,醋酸泼尼松组0.56mg·kg-1·d-1,假手术组,模型组分别灌服等体积的生理盐水.各组动物于7,14,28 d随机处死8只,分别观察各组大鼠肺功能的变化,同时取肺组织进行HE、Mallory染色.结果 姜黄素明显改善肺纤维化大鼠的肺功能.病理组织学检查亦表明,姜黄素明显改善实验性肺纤维化.结论 姜黄素对博莱霉素致大鼠肺纤维化有一定的治疗作用.

黄芩苷下调TGF-β1、PKC表达减少肾小管IV-C沉积的作用

目的 研究黄芩苷对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏TGF-β1、PKC活性的调节作用,从分子水平探讨其防治DN的机制.方法 采用链尿佐菌素单次腹腔注射法造成DN大鼠模型,腹腔注射黄芩苷水溶液.6周后处死所有大鼠,取右侧肾脏,一半置于4%多聚甲醛固定液中免疫组化测TGF-β1活性,另一半置于10%福尔马林固定液中免疫组化测PKC活性及IV-C含量.结果 黄芩苷组TGF-β1的表达数量减少、强度减弱,接近正常组水平;黄芩苷组肾小管上皮细胞膜PKC的表达数量减少、强度减弱,;黄芩苷组IV-C在肾小管的表达较模型组减少,与模型组比较差异具有显著性.结论 黄芩苷可降低TGF-β1、PKC在肾小管的表达,减轻DN大鼠肾小管IV-C沉积,延缓DN的发展进程.

麦冬皂苷肠溶微球制剂对大鼠胃黏膜的影响

目的 比较麦冬皂苷提取物和麦冬皂苷肠溶微球对大鼠胃黏膜的影响.方法 采用幽门结扎法制备大鼠胃渍疡模型.将大鼠随机分为6组,即麦冬皂苷提取物高、低剂量组(480,240 mg·kg-1)、麦冬皂苷肠溶微球高、低剂量组(1536,768 mg·kg-1)、空白对照组(0.5%CMC-Na)和阴性对照组(空白肠溶微球溶液1152mg·kg-1),观察各组产生溃疡的动物数,比较各组溃疡发生百分率、溃疡指数和胃蛋白酶活力.结果 与麦冬皂苷提取物组比较.麦冬皂苷肠溶微球组能明显减少溃疡发生百分率,降低溃疡指数,降低胃蛋白酶活性.结论 麦冬皂苷肠溶微球能减轻麦冬皂苷提取物对胃黏膜的刺激.

HPLC法测定蒙药浩道墩-10丸中胡椒碱的含量

目的 建立高效液相色谱法测定蒙药浩道墩-10丸中胡椒碱含量的方法.方法 采用Shim-pack VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为水-甲醇(23∶77);检测波长为343 nm;流速为0.8 mL/min;柱温为室温.结果 胡椒碱在0.5～5.0μg范围内具有良好的线性关系,r=0.999 8;加样回收率为98.1%,RSD为1.76%(n=5).结论 该方法简便、快速、重复性良好,结果准确可靠,可作为浩道墩-10的质量控制方法之一.

HPLC法测定南北五味子中子甲素和五味子酯甲的含量

目的 建立HPLC法同时测定南北五味子中五味子甲素和五味子酯甲的含量.方法 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-水(77∶23)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长230 nm.结果 五味子甲素和五味子酯甲的线性范围分别为0.125～1.25μg和0.08～0.8μg,r分别为0.999 0和0.998 6,平均加样回收率分别为100.1%、100.0%(RSD为0.15%、0.28%.南五味子)和99.7%、101.2%(RSD为0.32%、0.67%.北五味子)(n=5).结论 该方法简便、专属、重现性好,可用于测定五味子中五味子甲素和五味子酯甲的含量.

HPLC法测定舒痹宁颗粒中次乌头碱、新乌头碱的含量

目的 建立舒痹宁颗粒中次乌头碱及新乌头碱的含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法.色谱条件:色谱柱:Akasil C<,18>(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-0.1%三乙胺(70∶30)为流动相,流速1.0 mL·min-1;检测波长:230 nm.柱温:30℃.结果 该法可用于测定舒痹宁颗粒中次乌头碱、新乌头碱的含量.乌头碱、次乌头碱、新乌头碱在0.22～4.4μg、0.126～2.520μg、0.152～3.04μg范围内成良好线性关系,平均回收率次乌头碱为101.12%;新乌头碱为99.68%.结论 该测定方法简便可行、重复性好,可用于本制剂中有效成分次乌头碱、新乌头碱的含量测定.

HPLC法测定前列舒乐颗粒中淫羊藿苷的含量

目的 测定前列舒乐颗粒中淫羊藿苷的含量.方法 结合适当的前处理,采用高效液相法,色谱柱为C18柱(250 mm×4.6 mm 5μm),流动相为乙腈-水(29∶71),检测波长为270 nm.结果 淫羊藿苷峰与杂质达到基线分离.淫羊藿苷的线性范围是0.16-1.2 mg·mL-1,回归方程是Y=0.028 7X-0.009 62(r=0.99 9).结论 所用方法准确,专属性高.

HS-GC测定复方麝香注射液中龙脑和薄荷脑的含量

目的 采用顶空气相色谱法(head-space gas chromatography,HS-GC)测定复方麝香注射液中龙脑、薄荷脑的含量.方法 气相色谱柱为Rtx-Wax(30 m×0.25 mm×0.25 μm);FID检测器,进样口温度260 ℃,检测器温度260℃,采用程序升温,起始温度140 ℃,保持2 min,升温10 ℃·min-1,终止温度220℃,保持4 min.结果 龙脑、薄荷脑线性范围分别为:13.025～416.8μg·mL-1 (r=0.999 5,n=6);13.125～420 μg·mL-1(r=0.9997,n=6);平均回收率分别为98.97%(RSD=3.0%,n=6)、97.65%(RSD=2.1%,n=6).结论 该方法灵敏、准确、重现性好,可同时测定样品中薄荷脑、龙脑含量.

动态浊度法测定复方毛冬青注射液中的细菌内毒素含量

目的 建立复方毛冬青注射液细菌内毒素的含量测定方法.方法 将复方毛冬青注射液作倍比稀释,采用动态浊度法通过干扰试验和验证试验考察其佳稀释倍数,测定复方毛冬青注射液中细菌内毒素的含量.结果 将样品作80倍稀释可以有效消除对鲎试验的干扰,检测内毒素平均回收率均在50%～200%范围内.结论 使用动态浊度法定量检测复方毛冬青注射液中的细菌内毒素是可行的.

不同繁殖方式的广藿香药材挥发油分析

目的 比较扦插繁殖与组织培养繁殖广藿香药材挥发油含量及成分差异.方法 挥发油测定法和GC-Ms法.结果 扦插繁殖和组织培养繁殖的广藿香药材样品中挥发油平均含量分别为14.2 mL/kg 、12.2 mL/kg,两者10个指标性成分合计百分含量的平均值分别为81.31%、82.98%.结论 组织培养繁殖与扦插繁殖的广藿香药材挥发油含量及其10个指标性成分的百分含量相当.

正交实验优选盐炙怀牛膝的佳炮制工艺

目的 筛选盐炙怀牛膝的佳炮制工艺.方法 以齐墩果酸含量为指标,采用正交实验设计L9(34)对盐炙怀牛膝的炮制工艺进行优选.结果 盐炙怀牛膝的佳炮制工艺为:取厚度为5-10 mm的怀牛膝饮片,加3%的盐量在100 ℃二下烘制20 min.结论 所选的佳炮制工艺较为合理.

超声波提取法与索氏提取法提取化橘红柚皮苷的比较研究

目的 确定化橘红中柚皮苷的适宜提取方法.方法 分别以索氏提取法与超声波提取法提取化橘红柚皮苷后,采用RP-HPL法测定其含量.结果 超声法提取不用年份化橘红中柚皮苷含量平均值为13.53%;索氏提取法提取不用年份化橘红中柚皮苷含量平均值为11.98%,两法提取柚皮苷的测定值差异有统计学意义.结论 两种提取化橘红中柚皮苷方法的比较结果显示,超声波提取法提取的柚皮苷百分含量略高于药典收载的索氏提取法,并具有操作简便、省时的优点,可考虑应用于化橘红中柚皮苷的提取.

复苏饮治疗急性脑血管病意识障碍患者83例

目的 观察复苏饮对急性脑血管病患者意识障碍的影响.方法 将Glasgow昏迷评分(GCS)为4～8分的急性脑血管病意识障碍患者83例随机分为两组,复苏饮组42例,对照组41例.复苏饮组在常规西医治疗基础上,给予复苏饮胶囊4粒,凉开水化开后鼻饲,每日3次.于用药前、后进行GCS评分、神经功能缺损评分.治疗第14天后观察疗效.结果 复苏饮组患者GCS评分明显高于对照组(P＜0.01),神经功能缺损评分较对照组明显降低(P＜0.05),复苏饮组总有效率为83.7%,与对照组(总有效率74.7%)比较有统计学意义(P＜0.05).结论 复苏饮用于急性脑血管病意识障碍患者,可以改善意识障碍,减轻神经功能损伤,改善预后.降低致残率.

益脑胶囊治疗神经衰弱的临床研究

目的 评价益脑胶囊治疗神经衰弱(肝肾不足、气阴两虚证)的,临床疗效及其安全性.方法 采用多中心、随机、单盲、平行对照临床研究方法(试验组益脑胶囊,对照组脑灵素胶囊),试验组342例,对照组111例.结果 益脑胶囊治疗组临床愈显率为523.1%,总有效率为93.6%;对照组临床愈显率为363.0%,总有效率为82.8%.经统计学分析,治疗组疗效优于对照组,有显著性差异(P＜0.01).结论 益脑胶囊治疗神经衰弱(肝肾不足、气阴两虚证)有良好的临床疗效,能明显改善患者的失眠等临床症状,且临床应用安全.

浅谈溃疡性结肠炎中药新药临床设计的几个关键问题

笔者结合国内外对溃疡性结肠炎的新药临床评价,就目前该适应症的中药新药临床研究设计中需关注的几个关键问题,如病例选择、对照药设置、评价指标等进行讨论,希望与业内人士共同探讨,以提高此类中药新药的,临床研究水平.

美国第一个植物药VeregenTM简介及其对中药研发的启示

对美国食品药品监督管理局于2006年10月31日批准的第一个植物药制荆VeregenTM的基本情况和研究背景作一介绍,同时结合美国<植物药研制指南>的基本情况,通过分析该植物药研发的思路与特点,为中药新药研究开发提供参考.

从技术评价角度对合理应用《中药新药临床研究指导原则》的几点思考

从中药新药技术评价角度,归纳总结了近年来在中药新药临床试验中引用和参考<中药新药临床研究指导原则>所存在的主要问题,引导企业与研发者合理应用<中药新药临床研究指导原则>,同时加强中药新药临床试验设计方法的学术研究与交流,为重新修订<中药新药临床研究指导原则>奠定基础,以期共同提高中药新药,临床试验的水平.

中药滴眼剂新药临床试验若干问题的思考

为了提高现代中药滴眼剂的临床研究水平,作者分析了中药滴眼剂新药临床试验存在的一些问题,并提出了相应的建议.作者从中药滴眼剂临床试验的辨证、纳入标准、排除标准、疗效判定及角膜毒性、刺激性等方面进行探讨,以期规范中药滴眼剂临床试验,为解决临床试验中遇到的难点提供思路.

染料木素自微乳在家兔体内的相对生物利用度研究

目的 研究染料木素自微乳在家兔体内的药物动力学和相对生物利用度.方法 家兔分别灌胃染料木素自微乳和染料木素CMC-Na混悬液,用HPLC法测定不同时间血浆样品中染料木素的浓度,绘制药一时曲线,计算药动学参数及相对生物利用度.结果 染料木素自微乳和染料木素混悬液药一时曲线下面积(AUCo-10h)分别为(24.90±1.24)和(10.7l±0.86)p,g·h·mL-1,血药峰浓度(Cmax)分别为(4.02±0.20)和(0.99±0.04)μg'mL-1,达峰时间(Tmax)分别为2 h和4 h,染料木素自微乳较染料木素混悬液的相对生物利用度为232.49%.结论 染料木素自微乳可显著提高染料木素的生物利用度.

玉屏风散水提醇沉浸膏的指纹图谱研究

目的 研究和建立玉屏风散指纹图谱的测定方法并建立玉屏风散水提醇沉浸膏的HPLC标准指纹图谱.方法 采用反相高效液相法,选用Agilent Hc-C18(4.6 mm x 250 mm,5μm)分析柱,乙腈一水为流动相梯度洗脱,检测波长为238 nm,采集时间为80 min,流速为1 mL/min.结果 在所建立的玉屏风散水提醇沉浸膏的HPLC指纹图谱中,共标定了19个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求.结论 该方法稳定、准确、可靠,为控制玉屏风散的内在质量提供了科学依据.

玉屏风方饮片与汤剂HPLC指纹图谱的相关性研究

目的 建立玉屏风汤剂的HPLC指纹图谱分析方法,研究黄芪、防风、白术饮片与全方汤剂指纹图谱的相关性.方法 采用HPLC法分析,色谱柱为Hypersil ODS;流动相为乙腈一水(梯度洗脱);检测波长为220am;流速为1 mL·min-1;柱温为30℃.结果 药材黄芪、防风、白术(炒)饮片分别标示出9,8,7个主要共有峰;玉屏风汤剂标示出11个共有峰,其中有6个为黄芪特征峰,4个为防风特征峰,1个为白术特征峰.结论 黄芪、防风饮片与玉屏风汤剂的HPLC指纹图谱具有一定相关性,玉屏风汤剂的主要特征峰为黄芪异黄酮类及防风色原酮类成分,为玉屏风汤剂配伍规律与物质基础的研究提供了一定参考.

启事

书讯

薄层色谱结合凝胶成像系统测定小鼠表皮神经酰胺含量

目的 建立皮肤表皮中神经酰胺含量的测定方法.方法 抽提动物表皮脂质,采用薄层层析、BIO-RADGelDoc凝胶成像系统采集图像、Quantity One软件分析测定神经酰胺含量.结果 神经酰胺在0.416～2.08μg范围内,含量与密度积分值有良好线性关系,相关系数r=0.995 3;同板精密度良好,RSD=1.09%;异板精密度良好,RSD=2.10%;对照品溶液与供试品溶液在2 h内显色稳定,重现性良好,RSD=3.03%;平均加样回收率为99.58%,RSD=1.46%;样品测定结果RSD=3.10%.结论 该法可用于皮肤表皮中神经酰胺的含量测定.