首页 > 文献资料
-
骨髓间充质干细胞成骨分化的潜能和影响因素
骨髓干细胞包括骨髓间充质干细胞(MSCs)、造血干细胞、内皮干细胞3个干细胞群.MSCs的多向分化潜能使其对组织损伤修复具有特殊意义.
-
内皮祖细胞与骨髓干细胞联合移植治疗兔心肌梗死的实验研究
目的:探讨兔急性心肌梗死后内皮祖细胞和骨髓干细胞联合移植对其心室重塑的干预作用.方法:取60只新西兰大白兔等分为3组:骨髓干细胞与内皮祖细胞联合移植组20只、并心梗后第8天进行移植:对照组20只,仅建立心梗模型和正常对照组20只,于细胞移植4周后分别处死3组动物,测量梗死区局部室壁厚度,并对移植区存活心肌、微血管数定量及移植细胞的鉴定进行免疫组化检查和形态学观察及心功能的测定.结果:联合移植组的心肌血管数明显高于AMI对照组,有显著差异(P<0.05);在与正常组全心重量和左心重量比较中,发现联合移植组和AMI对照组明显高于正常对照组,但联合移植组低于AMI对照组;AMI对照组的室间隔厚和游离壁厚明显高于正常对照组(P<0.05),而联合移植组增厚少,无统计学差异;而在梗死区的厚度上.联合移植组和AMI对照组较前显著增厚,但联合移植组的厚度低于AMI对照组;AMI对照组的EF值低于正常对照组,而联合移植组显著高于正常对照组(P<0.05).结论:兔急性心肌梗死后内皮祖细胞和骨髓干细胞联合移植对其心室重塑有明显的干预作用,有助于临床心肌细胞移植的干细胞源选择.
-
急性心肌梗死患者自体骨髓干细胞移植对改善心功能和VEGF影响的临床研究
目的 探讨急性心肌梗死患者自体骨髓干细胞冠状动脉内注射对改善心功能和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响.方法 将急性心肌梗死住院并行介入治疗的患者25例,按照随机分组的原则分为干细胞移植治疗组(10例)和对照组(15例),治疗组患者在心肌梗死发生14 d后进行冠状动脉内注射自体骨髓干细胞治疗.术前1周和术后6个月时,二维超声心动图评价患者左室射血分数(EF%),术后第3、7、14、28、56天时用酶联免疫吸附法测定患者血清VEGF浓度.结果 干细胞移植治疗组与对照组比较,自体骨髓干细胞移植前两组间左室射血分数差异无统计学意义(P>0.05),术后6个月时治疗组明显高于对照组(P<0.05),患者发生再梗死、再次血运重建和死亡的概率两组间差异无统计学意义(P>0.05),而心力衰竭的发生率治疗组少于对照组(P<0.05);血清VEGF浓度移植治疗组明显高于对照组(P<0.05).结论 急性心肌梗死后通过自体骨髓干细胞冠状动脉内移植能增加患者血清VEGF浓度,改善患者的心功能,减少心力衰竭的发生.
关键词： 急性心肌梗死 骨髓干细胞 移植 心功能 血管内皮细胞生长因子 -
大鼠骨髓源性肝干细胞形态学特征的实验研究
目的:探讨大鼠骨髓源性肝干细胞的形态特性和来源.方法:HGF体外诱导大鼠骨髓干细胞向肝样细胞分化,诱导第0、7、14、21天,相差显微镜观察细胞形态特征,电镜观察第21天诱导组与非诱导组细胞超微结构变化;免疫细胞化学法检测甲胎蛋白(AFP)、细胞角质蛋白18(CK18)的表达;PAS检测细胞糖原.结果:HE染色较深的小圆形细胞在非诱导条件下各时相直径未发生明显变化, AFP、CK18、糖原染色均为阴性;诱导组HE染色较深的小圆形细胞与AFP、CK18、糖原染色阳性的细胞形态大小一致,随诱导时间延长其直径增大.透射显微镜观察:第21天诱导组细胞间有大量的微绒毛,细胞内可见到丰富的粗面内质网、线粒体、溶酶体、吞饮泡;第21天非诱导组细胞间仅有少量微绒毛,细胞质较少.结论:骨髓源性肝干细胞很可能来源于集落中HE染色较深的小圆形细胞,在HGF诱导下可以分化为肝样细胞,其形态学及超微结构与肝细胞结构相符合.
-
自体骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死的实验研究
目的:探讨兔自体骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死的效果.方法:结扎左前降支建立兔心梗模型.抽取骨髓进行干细胞分离和培养.培养基对照组的心肌瘢痕区注入培养基;间充质干细胞组注入骨髓间充质干细胞,单个核细胞组注入骨髓单个核细胞,移植4周后观察各组心功能、病理变化及细胞的存活情况.结果:间充质干细胞组和单个核细胞组移植4周后,超声检查左室射血分数、短轴缩短率均较对照组改善(P＜0.05);间充质干细胞组梗死区有细胞存活.结论:自体骨髓干细胞移植治疗急性心梗可改善心功能;骨髓间充质干细胞可在心肌内存活.
-
骨髓干细胞治疗心肌梗死的研究进展
心肌梗死时,心肌细胞大量死亡,成纤维细胞增生修复,在心脏受损区形成瘢痕组织,梗死心肌重构,使心脏功能受到影响.另外,在与心肌梗死的瘢痕区域相接触的心肌组织中,缝隙连接分布紊乱,引起梗死后心律失常.尽管目前应用血运重建(心血管介入和外科手术)和药物治疗来阻止心功能的恶化和心律失常的发生,但效果却是有限的.近年来,应用干细胞移植技术,可使干细胞在瘢痕组织内分化成有功能的心肌组织,以减少瘢痕组织的产生,改善心功能及减少心律失常发生,从而达到治疗心肌梗死的目的.目前,用于心肌细胞移植研究的干细胞有胚胎心肌细胞、骨骼肌干细胞和骨髓干细胞.本文就骨髓干细胞治疗心肌梗死的研究作一综述.
-
不同血清浓度培养基对小鼠骨髓干细胞生物特征的影响
目的 探讨不同血清浓度培养基对小鼠骨髓干细胞(MSCs)生物特性的影响. 方法 小鼠全骨髓培养法培养细胞,原代细胞分别采用10%、15%、20%血清浓度的培养基(分别为A组、B组、C组) ,观察细胞形态及增殖情况. 结果MSCs在血清浓度为10%的培养基中增殖速度快,细胞形态以梭型为主;血清浓度为20%时细胞胞体面积增大,且增值速度减慢. A组接种7 d时细胞总数及梭形细胞比例分别为(6.0 ±0.2) ×108 个/L、(86.3 ±3.2)%,均高于B组及C组( P<0.05);增殖80.0%所需的时间为(7.1 ±0.6)d,短于B组及C组(P<0.05);但老化时间为(14.4 ±1.2)d,较B、C组长(P<0.05).结论 10%的血清浓度可以作为体外培养小鼠骨髓干细胞较为合适的培养基血清浓度.
-
人参皂苷Rg1对心肌梗死大鼠心脏的促血管生成作用研究
目的 探讨人参皂苷Rg1对心肌梗死大鼠冠状动脉新生血管形成的影响及其作用机制.方法 结扎wistar大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死(AMI)模型,应用人参皂苷Rg1动员自体骨髓干细胞,建模后第24小时、1周和4周时分别处死大鼠,取出心脏,HE染色检测梗死面积,免疫组化方法观察心肌梗死灶、边缘区和正常心肌组织CD34阳性细胞、VEGF及其受体的表达,以及Ⅷ因子表达.结果 应用人参皂苷Rg1治疗后,治疗组大鼠心梗区可见CD34阳性细胞浸润;梗死面积明显减小;梗死灶及周围组织中微血管密度、VEGF及其受体(Flk-1)的表达量均明显高于AMI组及假手术对照组.结论 在大鼠AMI模型中,应用人参皂苷Rg1治疗,可动员骨髓干细胞归巢于缺血心肌,有效促进微血管形成,通过上调VEGF和VEGF受体Flk-1的表达,促进血管再生,促进缺血心脏功能恢复.
-
缺血性脑卒中大鼠模型骨髓干细胞的动员和神经修复作用
目的 研究粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF)对卒中后骨髓干细胞的动员与血管再生和神经修复的影响.方法 线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,成功造模大鼠(60只)分为生理盐水对照组和G-CSF治疗组.治疗组皮下注射G-CSF[2、10、50、250 μg/(kg·d)],对照组以等量生理盐水进行处理.治疗1、3、5、7d后,进行行为学评分并取外周血计数单个核细胞,提取RNA进行RT-PCR检测单个核细胞CD31、CXCR4mRNA的表达水平；实验动物灌注固定后取脑组织切片检测G-CSF作用后脑组织中CD31、CD133及基质细胞衍生因子SDF-1表达.结果 与生理盐水对照组相比,G-CSF治疗组神经功能有明显的改善(P＜0.05)；G-CSF作用后外周血中单个核细胞数量明显增加；G-CSF低剂量作用组[2、10μg/(kg·d)]外周血单个核细胞CD31及CXCR4mRNA表达随着用药时间的延长而增强；高剂量[50、250μg/(kg·d)]在短时间内(1、3 d),外周血单个核细胞CD31、CXCR4 mRNA随着用药剂量的升高而增强,250μg/(kg· d)强,且随着用药时间的延长(5、7d),G-CSF 作用逐渐减弱；G-CSF作用后脑组织内皮细胞标志CD31、CD133及SDF-1阳性表达明显增加.结论 G-CSF能改善MCAO后大鼠症状,其机制可能在于动员骨髓干细胞进入外周血并促进脑组织SDF-1表达以趋化干细胞,继而促进脑组织的血管再生和神经修复.
-
多聚赖氨酸修饰的山羊脱钙骨富集骨髓干细胞的性能评价
目的 研究经多聚左旋赖氨酸修饰的山羊脱钙骨基质(demineralized bone matrix decorated with poly-L-lysine,PLL-DBM)的性能,为选择性细胞滞留技术(selective cell retention,SCR)提供一种对骨髓干细胞黏附性能良好的富集基质材料.方法 将取材于山羊股骨近端的松质骨去皮质理化处理制成脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM),用多聚左旋赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)对其进行修饰.扫描电镜分析其显微结构;氨基酸成分分析检测PLL与DBM的复合情况;通过纤维母细胞集落形成单位(CFU-F)计数,检测山羊PLL-DBM对骨髓干细胞的富集效果;在山羊横突间融合模型中,通过X线片及组织学评价其成骨能力.结果 PLL-DBM具有天然网状孔隙结构系统,空隙内修饰有PLL形成的蜘蛛网样结构;PLL与DBM能较好地复合;山羊PLL-DBM对骨髓干细胞富集效果明显优于空白DBM(P<0.01).PLL-DBM的成骨能力与自体髂骨相当.结论 山羊PLL-DBM对骨髓干细胞有较好的富集效果,成骨能力强,是一种理想的富集基质材料.
-
加味四物汤动员心肌梗死小鼠骨髓干细胞改善心室重构
目的 观察加味四物汤(mSWT)对心肌梗死(MI)小鼠骨髓干细胞动员的影响,探讨mSWT改善心室重构的机制.方法 结扎冠状动脉前降支建立小鼠MI模型,灌胃给予mSWT,小鼠被分为4组:假手术对照组,MI模型组,mSWT低剂量(5 g·kg-1·d-1)组和mSWT高剂量(10 g·kg-1·d-1)组,每组10只.行心肌组织病理学检查,流式细胞术分析造血干细胞(HSCs)和间充质干细胞(MSCs)占骨髓和外周血细胞的百分比.结果 mSWT高、低剂量组治疗14 d后,较MI模型组小鼠左心室壁较厚,MI面积减小,梗死区域可见大量岛状分布的心肌细胞,心室重构明显改善.且小鼠骨髓和外周血中HSCs及MSCs细胞百分比明显增加(P＜0.05).结论 mSWT可能通过促进MI小鼠骨髓HSCs和MSCs的增殖和向外周动员,参与改善MI后的心室重构.
-
自体骨髓干细胞移植治疗终末期肝病的研究进展
成人骨髓干细胞(bone marrow-derived stem cell,MSCs)早由Friedenstein等于1966年发现并提出.他将MSCs描述为由骨髓分化而来具有克隆源性、可塑性及黏附性的细胞,并且具备分化为骨细胞、脂肪细胞及软骨细胞的潜能.
-
自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病足(附1例报道)
目的评价自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病足的临床疗效及影响因素.方法确诊2型糖尿病伴糖尿病足患者1例,在硬膜外麻醉下进行骨髓采集(300 ml),分离出干细胞,配成干细胞混悬液.将干细胞混悬液小腿肌肉注射进行左侧下肢移植.同时进行左足第三跖趾关节远端切除术.结果自体骨髓干细胞移植后,患者患肢冷感、麻木、疼痛、间歇性跛行明显好转,切除坏疽足趾伤口完全愈合,移植后1个月后患者踝肱压指数(ABI)明显上升,未出现并发症和不良反应.结论采用自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病足患者,方法简便、安全有效,值得临床推广和深入研究.
-
MDR1基因转染小鼠骨髓干细胞在化疗中骨髓保护作用的研究
多药耐药基因(MDR1)属于人类正常防御性基因,其编码产物P-糖蛋白(P-gp)在部分肿瘤细胞的高表达是肿瘤细胞对化疗药物产生多药耐药的主要原因.
-
骨髓干细胞移植治疗骨缺损研究
目的 本研究旨在使用骨髓干细胞治疗骨缺损,观察其临床疗效.方法 将某院2009 ～2011年间因骨外伤而骨缺损的患者随机分为两组,A组使用自体骨移植治疗骨缺损,B组使用自体骨髓干细胞移植治疗骨缺损,观察两组的骨头生长情况,愈合过程中疼痛评分,平均愈合时间和疗效.结果 B组愈合情况优于A组,愈合过程中疼痛评分低于A组,B组平均愈合时间短于A组,疗效判定优于A组.结论 相比自体骨移植方法,自体骨髓干细胞治疗骨缺损具有优良的临床疗效和良好的临床应用前景.
-
胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化的实验研究
目的 探讨胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化的可行性.方法 通过密度梯度分离法分离出骨髓中单个核细胞,进行体外培养和鉴定.在BMSCs传代培养7d后,把培养细胞分为诱导组和非诱导组；诱导组加入胚胎肝细胞提取液的培养体系,非诱导组加入不含胚胎肝细胞提取液的基础培养体系.在诱导培养d0,d 10,d 20,d30,d 40对诱导分化的细胞进行形态学观察、肝系细胞特异性标志物的鉴定.结果 ①形态学:诱导培养2周后,长梭形细胞大多数转变成圆形、卵圆形及多角形,细胞呈肝干细胞样圆形.②免疫细胞化学检测:诱导培养d 10～20细胞表达AFP、CK19逐渐增强,d 30～40逐渐减弱；诱导培养d 10～40细胞表达ALB呈上升趋势；阳性染色细胞胞浆内出现棕黄色颗粒.非诱导组细胞不表达AFP、CK19、ALB 3种蛋白,为阴性染色.③糖原染色:诱导培养的细胞d 10～40BMSCs均有糖原表达,非诱导细胞未见糖原表达(P＜0.05).结论 胚胎肝细胞提取液在体外可以诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化,并分化为具有合成、代谢、分泌及储存功能的肝系细胞.
-
基于中医属性谈自体骨髓干细胞注射治疗下肢缺血性疾病
自体骨髓干细胞注射联合中药治疗下肢缺血性疾病疗效确切.我们认为骨髓干细胞体阴而用阳,属于“正气”的范畴,具有生发、温煦、推动等作用,阳生则阴长,阴得阳生而泉源不竭,骨髓干细胞通过产生阳属性的多种促血管生成因子,促进形成毛细血管、微小动脉等阴属性的组织进而改善缺血肢体的血流量.在中医理论指导下,注射自体骨髓干细胞联合中药治疗下肢缺血性疾病将会取得更好的疗效.
-
珠子参皂苷诱导骨髓干细胞分化为肝样细胞的体外实验研究
目的:观察珠子参皂苷对骨髓干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)分化为肝细胞的影响.方法:在无菌条件下快速处死SD大鼠,收集骨髓细胞,快速悬浮于预冷的NH4Cl低渗盐溶液中裂解红细胞,离心去上清,收集沉淀的细胞,D-Hanks充分洗涤后,用含10％的低糖型DMEM培养基进行扩增培养;取生长状态良好的第四代细胞,随机选择空白组、HGF组(20ng/ml)、珠子参皂苷(50、100和200μg/ml)组,分别与第7天和第14天后观察细胞形态、检测细胞合成糖原,摄取LDL及分泌尿素的能力,进行HGF、c-MET、AFP、Albumin、CK18基因表达和AFP、Albumin、CK18蛋白表达分析.结果:珠子参皂苷和HGF可诱导BMSCs分化为肝细胞,促进其合成糖原、摄取LDL及分泌尿素的能力;可显著增加肝细胞特异性HGF、c-MET、AFP、Albumin、CK18基因表达和AFP、Albumin、CK18蛋白表达.结论:珠子参皂苷体外能促进BMSCs分化为肝细胞,本研究为后续体内进行BMSCs移植和珠子参皂苷联用治疗终末期肝病(ESLD)提供了理论基础和实验依据.
-
用流式细胞仪富集大鼠骨髓干细胞
目的建立大鼠骨髓干细胞富集的方法.方法用常规方法从大鼠胫骨中获取骨髓细胞,采用红细胞裂解液去除红细胞,然后以PE标记的CD3、CD45RA抗体及FTTC标记的Thy抗体标记细胞,后通过流式细胞仪检测并分选Thy+CD3-CD45RA-细胞.结果①大鼠骨髓细胞中CD3+、CD45RA+和Thy+细胞分别约占14.1%、4.2%和20.8%;②流式细胞仪分选的Thy+CD3-CD45RA-细胞约占2.8%.结论应用红细胞裂解液去除红细胞及通过流式细胞仪分离Thy+CD3-CD45RA-细胞是一种较有效的富集大鼠骨髓干细胞的方法.
-
骨髓干细胞向肝细胞分化的研究进展
传统观点认为,胚胎干细胞具有分化为机体所有细胞的能力,而成体组织中干细胞只能分化产生其所在组织中的某个或某些特定的细胞.
