首页 > 文献资料
-
α-平滑肌肌动蛋白在大鼠肾小管间质纤维化中的表达及意义
目的 探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在大鼠肾小管间质纤维化过程中的表达及意义.方法 雄性3月龄SD大鼠60只,随机分为对照组和模型组各30只,以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型,对照组以等体积20g/L淀粉溶液灌胃,分别于实验第7、12、17周时随机处死10只大鼠,进行血Cr、BUN、24 h尿蛋白定量和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)检测,光镜下观察肾组织病理变化及免疫组织化学法检测肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-SMA表达情况.结果 与对照组比较,模型组各时相点大鼠尿蛋白、尿NAG、血Cr、BUN均升高(Pa＜0.01);7周时模型组即有肾小管间质损害,随病程进展,肾小管间质损害逐渐加重;肾脏α-SMA表达明显增多.结论 α-SMA表达增多促进肾小管间质纤维化发生.
-
百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾小管上皮-间质转分化的干预作用
目的探讨百令胶囊对小管间质纤维化大鼠小管上皮-间质转分化的干预作用.方法利用腺嘌呤诱导建立肾小管间质纤维化大鼠模型,实验SD大鼠随机分为模型组、干预组、对照组各30只,分别于实验第7周、12周、17周收获动物各10只,进行功能学和肾脏组织病理学检测和观察.利用免疫组织化学对骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾小管间质纤维化大鼠中的表达变化进行动态观察及百令胶囊的干预影响.结果实验第7周模型组大鼠即表现出大量蛋白尿、小管损伤、间质的轻度纤维化和炎症细胞浸润(P＜0.01);随病程进展,上述病变呈进行性加重(P＜0.01).百令胶囊干预组动物在实验第7周、12周功能学组织学的改善同实验组相比有明显差异(P＜0.01),17周后二者无显著差异.免疫组织化学显示百令胶囊12周前能显著上调BMP-7的表达和降低α-SMA和TGF-β1在肾脏小管间质中的表达(P＜0.01),12周后这种变化无差异.结论百令胶囊在发病早期通过有效干预上皮-间质转分化达到改善肾脏纤维化的作用,随着肾小管间质纤维化程度的加重,百令胶囊逐渐失去其阻断作用.
关键词： 冬虫夏草 肾小管间质纤维化 肾小管上皮-间质转分化 腺嘌呤 -
氨体舒通对环孢素A致大鼠慢性肾毒性的改善作用
目的:探讨氨体舒通对大鼠慢性环孢素A(CsA)肾病(CCN)的改善作用.方法:36只雄性SD大鼠在低盐饮食基础上随机分对照组、模型组、治疗组.模型组及治疗组皮下给予CsA15 mg/(kg·d),治疗组同时给予氨体舒通20 mg/(kg·d)灌胃.第14天和第28天每组随机处死6只大鼠,处死前入代谢笼收集24 h尿,测尿肌酐及血肌酐(Scr),计算肌酐清除率(Ccr).放免法测血浆醛固酮水平.肾脏组织标本行HE和Masson染色,检测肾组织单个核细胞浸润、肾间质纤维化及转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况.结果:与对照组大鼠相比,实验第2周开始至第4周末,模型组大鼠Ccr降低,单个核细胞计数、TGF-β1明显升高,模型组大鼠血醛固酮、间质纤维化积分在第4周末明显升高;给予氨体舒通治疗后,各项指标在不同时间点均向正常方向发展.结论:醛固酮在CCN的结构和功能变化中起了重要的致纤维化作用,氨体舒通通过抑制肾组织中TGF-β1表达和肾小管间质炎症细胞的浸润,对CCN起到改善作用.
-
水飞蓟素对肾小管间质纤维化大鼠转化生长因子-β1mRNA和金属蛋白酶组织抑制物-1mRNA表达的影响
目的 探讨水飞蓟素对肾小管间质纤维化大鼠肾脏病理、肾组织Ⅲ型胶原蛋白及转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达的影响.方法 SD大鼠72只随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组24只.行单侧输尿管梗阻(UUO)术诱导肾小管间质纤维化模型.治疗组大鼠给予30 mg·kg-1水飞蓟素,模型组及假手术组给予生理盐水灌胃.分别于UUO术后第7、14、21天各组随机处死8只大鼠,光镜下观察肾组织的病理改变,免疫组织化学法评价肾组织Ⅲ型胶原蛋白的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组肾组织TGF-β1 mRNA及TIMP-1 mRNA的表达水平.结果 各时间点肾小管间质损伤和肾组织Ⅲ型胶原蛋白表达量在治疗组和模型组均较假手术组明显增多(P均＜0.01),治疗组较模型组则明显减轻(P均＜0.05).各时间点治疗组和模型组肾脏TGF-β1mRNA和TIMP-1 mRNA表达量明显高于假手术组(P均＜0.01),治疗组则明显低于模型组(P均＜0.05).UUO大鼠肾间质中TGF-β1 mRNA、TIMP-1 mRNA表达量与肾小管间质损伤评分均呈正相关(r=0.915、0.838、P均＜0.01).TGF-β1mRNA、T1MP-1 mRNA表达量与肾组织Ⅲ型胶原蛋白表达量均呈正相关(r=0.833、0.786、P均＜0.01).结论 在UUO大鼠模型中,水飞蓟素通过下调TGF-β1mRNA、TIMP-1 mRNA的表达,减少Ⅲ型胶原的产生,从而发挥延缓肾间质纤维化的作用.
关键词： 水飞蓟素 转化生长因子-β1 金属蛋白酶抑制剂-1 Ⅲ型胶原 肾小管间质纤维化 -
肝细胞生长因子在大鼠肾小管间质纤维化中的表达及意义
目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)在肾小管间质纤维化过程中的表达及意义.方法 雄性3月龄SD大鼠60只,随机分为对照组和模型组各30只,以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型,对照组以等体积的2%淀粉溶液灌胃,分别于实验第7周、12周、17周时随机处死10只大鼠,进行血肌酐(Cr )、血尿素氮(BUN),24 h尿蛋白定量和尿NAG酶检测,光镜下观察肾组织的病理变化及免疫组织化学法检测肾脏HGF、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况.结果 与对照组比较,模型组各时相点大鼠尿蛋白、尿NAG酶、血Cr及血BUN均升高(P＜0.01); 7周时模型组即有肾小管间质损害,随着病程进展,肾小管间质损害逐渐加重;肾脏HGF表达7周、12周时增加,17周时降低;与TGF-β1、α-SMA表达呈负相关(r=-0.999, P＜0.01; r=-0.980, P＜0.01).结论 肾小管间质纤维化过程中,肾脏HGF的表达早期上升是一种有益的防御反应.HGF抑制TGF-β1、α-SMA的表达,发挥其抗纤维化作用.
-
73例IgA肾病临床与病理分析
IgA肾病是常见的原发性肾小球疾病,他以主要表现为肾小球系膜区以IgA或IgA为主的免疫球蛋白沉积为主要特点[1].本病是导致肾小球硬化、肾小管间质纤维化和终末期肾衰的常见重要病因.现将本院2000年1月～2004年收治的73例原发性IgA肾病的临床、病理(光镜或电镜)、免疫荧光资料进行分析.
-
肾小管间质纤维化动物模型的研究进展
肾间质纤维化与肾功能的恶化密切相关,而动物实验是研究肾间质纤维化尤为重要的手段. 文章拟对常见的肾间质纤维化动物模型,包括单侧输尿管梗阻模型、环孢素A肾病模型、马兜铃酸肾病模型、镇痛剂肾病模型、阿霉素肾病模型等10种模型的制作和研究进展作一综述,以利于实验者根据不同的实验目的 选择适宜的动物模型.
-
解毒活血法对UUO大鼠MCP-1的影响
目的 采用单侧输尿管梗阻的方法建立肾小管间质纤维化模型,通过观察解毒活血法对大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的影响,探讨其对UUO大鼠的保护作用及可能机制.方法 SD大鼠随机分为假手术组,模型组,缬沙坦组,解毒活血低剂量组,解毒活血高剂量组,每组10只.除假手术组,其余各组大鼠结扎左侧输尿管复制UUO模型.所有大鼠灌胃给药,缬沙坦组给予26 mg/(kg-d)；解毒活血低剂量组予解毒活血中药12 g生药/(kg·d)；解毒活血高剂量组予24 g生药/(kg·d),假手术组和模型组予等容量生理盐水,共14天.左肾组织行HE、Masson染色,观察病理形态学改变,免疫组化检测肾组织中MCP-1的蛋白表达.结果 模型组大鼠MCP-1呈强阳性表达,各治疗组表达较模型组明显减弱.结论 解毒活血方药可降低肾组织中MCP-1的高表达,通过抑制炎症反应来减缓肾小管间质纤维化的进程.
关键词： 肾小管间质纤维化 单侧输尿管梗阻 解毒活血法 单核细胞趋化蛋白-1 -
糖尿病肾病大鼠模型肾小管间质纤维化与瘀血阻络的相关性分析
目的 探讨糖尿病肾病大鼠模型肾小管间质纤维化与瘀血阻络的相关性.方法 30只SD大鼠随机平分为三组-瘀血阻络型组(A组)、非瘀血阻络型组(B组)、正常组(C组),均予高糖高脂饲料喂养,A组与B组采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病肾病模型,观察大鼠行为,分别测定随机血糖、24h尿微量白蛋白含量;取大鼠的肾皮质,病理切片染色观察肾小管间质的变化;也采用western blot检测各组大鼠肾组织TGF-β1的表达情况.结果 A组与B组的不同时间点的血糖明显高于C组(P＜0.05),A组与B组的组间对比无明显差异(P＞0.05).A组与B组的24h尿微量白蛋白定量分别为(24.20 ±4.10) mg/24h和(24.29±3.89) mg/24h,都明显高于C组的(5.93±2.14) mg/24h(P＜0.05).A组与B组的TGF-β1表达量明显高于C组(P＜0.05),同时A组的TGF-β1表达量也高于B组(P＜0.05).形态学观察显示相对于B组,A组的肾小球体积增大,基底膜增厚,系膜基质增多.结论 糖尿病肾病大鼠模型中瘀血阻络型的TGF-β1表达量相对比较高,伴随有肾小管间质纤维化,可导致大鼠病情恶化,也确认了糖尿病肾病瘀血阻络型的存在.
-
肾小管上皮间充质转化发病机制的研究进展
肾小管间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)是各种慢性肾脏病进展到终末期肾衰竭的主要病理基础.其主要病理改变表现为肾间质细胞外基质堆积、肾小管萎缩、肾间质肌成纤维细胞增多等,其过程受多种因素的共同影响,而肾间质肌成纤维细胞是合成细胞外基质的主要细胞.已有研究表明[1],36%的肌成纤维细胞来源于肾小管上皮细胞转分化,这种现象被称为肾小管上皮细胞-间充质转化(epithelial to mesenchymal trans-differentiation,EMT).EMT已被认为是RIF发生的重要机制之一.
-
足细胞病变与慢性肾脏病进展
慢性肾脏病(CKD)是2001年由美国肾脏病基金会(NKF)首次提出.CKD由多种不同病因引起,可发生在任何年龄段人群,具有较高的致残率及致死率,很大比例的CKD患者终进展至终末期肾衰竭而接受肾脏替代治疗.CKD进展的损伤机制十分复杂,其特征主要是由于各种初始原因触发了肾脏纤维化的过程,终导致尿毒症的发生.总体来说,CKD进展损伤的共同路径是肾小球硬化、肾血管硬化和肾小管间质纤维化.在CKD进展中,影响肾损害的因素很多,主要包括全身及肾小球高血压、各种细胞因子和生长因子的表达改变、肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)改变、血脂异常、蛋白尿、糖尿病及年龄因素等,此外,还包括先天性及遗传因素等[1].
-
高同型半胱氨酸血症与足细胞损伤研究进展
众所周知,慢性肾脏疾病已成为全世界范围内重要的公共卫生问题.一般认为,肾小球硬化和肾小管间质纤维化是慢性肾脏疾病进行性发展的共同通路.足细胞又称为肾小球上皮细胞,其足突为肾小球滤过屏障的重要组成部分.近10余年来的研究已证实,足细胞损伤是肾小球硬化的初始事件[1].
-
梗阻性肾病大鼠肾小管间质进行性纤维化的监测
目的:探讨梗阻性肾病肾小管间质进行性纤维变性的发展过程.方法:建立大鼠单侧输尿管梗阻模型(UUO),采用免疫组化染色方法测其双侧肾形态学改变及胶原Ⅳ蛋白和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的沉积;应用RT-PCR定性和半定量的方法测其金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)mRNA、胶原Ⅳ mRNA的表达.结果:随着梗阻时间延长,梗阻侧肾脏肾小管间质变宽,肾小球无明显变化.梗阻肾内的胶原Ⅳ蛋白和α平滑肌肌动蛋白沉积增加,差异有统计学意义(P＜0.05).胶原Ⅳ mRNA、TIMP-1 mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05);对侧肾脏各项指标变化差异无显著性.结论:该模型稳定可靠,能较好地体现梗阻性肾病中肾小管间质纤维化进行性发展过程.
-
槲皮素通过转化生长因子-β1/Smad通路减轻环孢素诱导的大鼠肾小管间质纤维化
目的 探讨槲皮素对环孢素诱导的大鼠肾小管间质纤维化的影响及其机制.方法 将SD大鼠分为3组:模型组(环孢素灌胃,剂量为每天25 mg/kg),干预组(在给予等量环孢素基础上加用槲皮素,剂量为每天15 mg/kg),对照组(不给药物).实验过程均采用低盐饮食,6周后处死大鼠获取标本,Masson染色评判肾脏组织病理学改变及纤维化程度;免疫组织化学检测肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)的染色;Western blot检测Smad2、Smad3和Smad7蛋白表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA的表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠肾组织间质纤维化积分明显升高(2.25±0.27,P＜0.01),TGF-β1、COL-Ⅳ表达明显增加(5.94±0.10、6.20±0.09,P＜0.01),TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达明显升高(1 265.73±195.40、212.75±22.97、123.34±26.13、87.37±9.06,P＜0.01),Smad2、Smad3蛋白表达均升高(P＜0.01);与模型组比较,槲皮素干预组间质纤维化积分(干预组比模型组1.63 ±0.14比2.25±0.27,P＜0.05)、TGF-β1 mRNA及蛋白(干预组比模型组876.76 ±221.71比1 265.73±195.40,P＜0.01)、COL-Ⅳ蛋白(干预组比模型组5.62 ±0.19比6.20±0.09,P＜0.01)、Smad2、Smad3 mRNA(分别为155.78±32.49、84.17±15.34,P＜0.05)及蛋白表达均不同程度降低,而Smad7 mRNA及蛋白表达进一步升高(干预组比模型组151.63±5.25比87.37 ±9.06,P＜0.01).结论 槲皮素可能通过TGF-β1/Smad通路减缓环孢素诱导的大鼠肾小管间质纤维化.
-
吡非尼酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化的影响
目地 探讨吡非尼酮(PFD)对单侧输尿管梗阻(UUO) 模型大鼠肾小管间质纤维化(TIF)的影响及其可能机制,为临床使用PFD防治肾脏纤维化提供理论依据.方法 SD大鼠35只,分为3组、假手术组7只,模型组14只,治疗组14只.治疗组给予PFD 250 mg·kg-1 ·d-1,疗程14 d.假手术组于手术后14 d处死,后两组于手术后7及14 d分两批处死.行过碘酸希夫染色(PAS)及Masson染色观察病理变化;原位末端标记法(TUNEL)观察肾小管上皮细胞(RTC)凋亡的情况;免疫组化法检测肾小管半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的蛋白表达;比色法测定肾组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 假手术组肾组织无明显病理改变;模型组TIF明显加重,RTC凋亡及Caspase-3表达增加(P＜0.05),且14 d时较7 d时更明显,但治疗组以上指标明显改善(P＜0.05);与假手术组比较,模型组MDA含量明显增加(7 d较14 d时更明显),SOD活性明显下降(14 d较7 d时更明显);但与模型组比较,治疗组MDA 7 d时显著改善,14 d时差别不明显,SOD 7及14 d均明显改善,以14 d为甚.结论 PFD能明显减少UUO大鼠RTC的凋亡,从而改善TIF,上述作用可能与该药物抑制氧化应激和Caspase-3相关的凋亡途径有关.
关键词： 吡非尼酮 肾小管间质纤维化 凋亡 半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶 氧化应激 -
γ-氨基丁酸对慢性肾衰竭大鼠肾小管间质纤维化的抑制作用
目的 建立大鼠慢性肾衰竭模型,观察γ-氨基丁酸(GABA)对慢性肾衰竭大鼠肾小管间质纤维化的抑制作用并对其机制进行研究.方法 5/6肾切除法建立慢性肾衰竭大鼠模型,大鼠随机分为3组:对照组,慢性肾衰竭组(模型组),慢性肾衰竭GABA给药组(治疗组).手术后60 d处死各组大鼠,测定各组大鼠血清尿素氮和肌酐水平,观察第60天肾脏组织病理改变,免疫组化法检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的表达,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肾组织TIMP-1 mRNA的表达水平.结果 与模型组比较,治疗组大鼠肾功能改善,残肾组织肾小管萎缩及肾小管间质纤维化减轻,而肾小球硬化改变不明显. 结论 GABA可以通过抑制肾小管间质纤维化和肾小管萎缩,改善5/6肾切除肾衰竭大鼠的肾功能.
-
曲尼司特对TGF-β1刺激的人肾小管上皮细胞表达结缔组织生长因子的影响
目的 研究曲尼司特(tranilast,Tran)对转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激人肾小管上皮细胞(HKCs)表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响,以探讨其抗肾小管间质纤维化的机制.方法 将培养的HKCs,按随机化分为:①对照组,②TGF-β1(5 ng/m1)干预组,③TGF-β1(5 ng/ml)+Tran(100μmol/L)干预组.免疫荧光检测爬片细胞的磷酸化Smad2(PSmad2)蛋白的表达,用RT-PCR方法评价CTGF mRNA的表达,Western blot方法评价CTGF和胶原Ⅵα蛋白的表达.结果 TGF-β1刺激30 min时,HKCs的细胞核PSmad2蛋白的表达明显增强,TGF-β1+Tran干预组PSmad2蛋白的表达明显下降(P<0.05),对照组细胞核未见明显PSmad2蛋白的表达.在48 h时,TGF-β1干预组HKCs的CT-GF mRNA、CTGF和胶原Ⅵα蛋白表达明显高于对照组(均P<0.05),而TGF-β1+Tran干预组则明显下降(均P<0.05).结论 曲尼司特可能是一个很有潜力的抗肾间质纤维化的药物,其机制是通过抑制TGF-β1诱导的CTGF的表达及其下游的Smad2信号通路的激活而发挥作用.
-
曲尼司特对结缔组织生长因子刺激人肾小管上皮细胞胶原Ⅳ合成的影响
蛋白的表达水平.结果:rhCTGF刺激48 h后,HKCs由正常的卵圆形变为梭形,细胞内胶原Ⅳα1mRNA和蛋白的表达均明显增高(P<0.05),而rhCTGF+Tran干预组,HKC大部分为卵圆形,部分仍为梭形,胶原Ⅳα1 mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05).结论:曲尼司特可能通过抑制CTGF诱导的细胞外基质的合成,从而减轻肾纤维化,发挥其肾脏保护作用.
-
pax2基因在肾小管上皮细胞转分化中的作用
目的 探讨pax2基因在大鼠慢性肾小管间质纤维化过程中的表达及其对肾小管上皮细胞转分化的可能作用.方法 大鼠5/6肾切除造模,分别于术后2、4、6、8、10、12周取左肾皮质,采用逆转录(RT)-PCR及免疫组织化学的方法检测模型组和正常对照组的pax2和α-SMA的表达.结果 病变组织见系膜细胞和基质增生,间质炎症细胞浸润,基底膜变厚.5/6肾切除模型组大鼠在术后第2周出现pax2 mRNA的强表达,第4周达高峰,与正常对照组比较P＜0.05,此后下降至痕量表达;α-SMA mRNA也在术后第2周表达逐渐增强,第8周达高峰,与正常对照组比较P＜0.05,此后逐渐下降.免疫组织化学染色显示,5/6肾切除模型组pax2蛋白的表达、肾小管上皮细胞中α-SMA的表达与pax2 mRNA、α-SMA mRNA的表达趋势相同.结论 在大鼠慢性肾间质纤维化的过程中,受损的肾小管上皮细胞可向肌成纤维细胞转分化,肾小管发育胚胎基因pax2在此过程中的一过性表达可能起到重要的作用.
-
缬沙坦联合雷公藤多苷治疗慢性肾小球肾炎蛋白尿的疗效观察
慢性肾小球肾炎(以下简称慢性肾炎)是由多种原因导致的肾小球的慢性疾患.蛋白尿是其主要症状之一,它不仅能反映肾小球损伤,而且与肾小管间质纤维化的发生发展密切相关,是一个导致肾脏病变进展的独立因素,大量和持续性蛋白尿是肾实质慢性进行损害和加重的标志.控制蛋白尿有利于延缓慢性肾脏病的进展.我们应用缬沙垣联合雷公藤多苷治疗慢性肾小球肾炎蛋白尿60例,疗效满意,报告如下.
