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连二亚硫酸钠诱导SY5Y细胞缺糖缺氧模型及泽泻白术药对的作用观察
目的:建立连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导SH-SY5Y神经细胞缺氧缺糖损伤模型,进行提取物筛选,对筛选出的有活性提取物初步探讨其对神经细胞的保护作用.方法:CCK-8检测细胞存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放,超氧化歧化酶活性(SOD),丙二醛含量(MDA),荧光探针负载法检测细胞内活性氧(ROS)和细胞内钙离子([Ca2+]i)荧光强度.结果:连二亚硫酸钠诱导SH-SY5Y细胞损伤模型上进行提取物初筛,发现泽泻白术药对提取物有一定活性.与模型组比较,提取物组细胞的LDH释放降低,SOD活性升高,MDA含量降低,细胞内ROS水平和[Ca2+]i荧光强度均减弱.结论:泽泻白术药对提取物对连二亚硫酸钠致SH-SY5Y神经细胞损伤有一定的脑保护作用.
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丹参脂溶性成分对心肌细胞缺氧缺糖损伤的保护作用
目的:建立丹参谱-效相关质量评价模型,研究丹参脂溶性成分对缺氧缺糖环境下体外心肌细胞的保护作用,选择适宜的药效学指标.方法:体外培养大鼠原代心肌细胞后,建立缺氧缺糖损伤模型,给予丹参脂溶性成分治疗后,观察心肌细胞的生长状态,检测培养基中乳酸脱氢酶(LDH)含量.结果:丹参脂溶性成分能明显改善受损细胞形态,显著减小心肌细胞的死亡率(P＜0.01),丹参脂溶性中、高剂量可降低细胞培养基中LDH的含量(P＜0.05).结论:丹参脂溶性成分对心肌细胞缺氧缺糖损伤具有显著的保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化、提高细胞膜的通透性和提高心肌细胞对缺氧缺糖的耐受性有关.建立的药效学指标测定方法灵敏度高、重复性好,数据真实可信.
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党参皂苷L1抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠皮质神经细胞凋亡的作用
目的:以原代培养的胚胎大鼠大脑皮质神经细胞进行缺氧缺糖再给氧处理,观察党参皂苷L1对神经细胞凋亡的抑制作用.方法:胚胎大鼠大脑皮质神经细胞原代培养,含连二亚硫酸钠的无糖Earles液进行缺氧/缺糖处理造模,MTT法测定细胞存活率,Hoechst 33342和PI原位双染法荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死、凋亡细胞百分率,APO-BRDU法流式细胞术检测凋亡细胞百分率,Fluo-3法流式细胞术检测细胞内Ca2+浓度,评价药效.结果:(1)细胞存活率(%):与模型组(29.89±6.28)比较党参皂苷L1 1.0mg/L组(46.05±8.92)、0.1mg/L组(46.83±6.76)、0.01mg/L组(41.05±9.18)均能显著提高细胞存活率(P<0.01和P<0.05);(2)细胞坏死率(%):与模型组(44.99±12.81)比较,党参皂苷L1 1.0mg/L组(19.45±2.31)、0.1mg/L组(18.78±4.95)和0.01mg/L组(22.37±4.44)能显著降低细胞坏死率(P<0.001);(3)原位双染法细胞凋亡率(%):与模型组(17.44±4.82)比较,党参皂苷L1 1.0mg/L组(8.75±1.88)、0.1mg/L组(9.73±1.76)能显著降低细胞凋亡率(P<0.01和P<0.05);(4)流式细胞术检测细胞凋亡率(%):与模型组(8.55±3.84)比较,党参皂苷L1 1.0mg/L组(4.21±2.31)、0.1mg/L组(3.83±2.95)能显著降低细胞凋亡率(P<0.05);(5)细胞内Ca2+平均荧光值,与模型组(47.37±9.68)比较,党参皂苷L1 1.0mg/L组(28.67±11.12)、0.1mg/L组(27.34±8.57)能显著降低细胞内Ca2+平均荧光值(P<0.05),表明党参皂苷L1能明显降低细胞内Ca2+浓度.结论:党参皂苷L1对缺血再灌注损伤后神经细胞的坏死和凋亡过程均具有抑制作用,这种作用可能与其能降低细胞内Ca2+浓度有关,提示党参皂苷L1是党参治疗脑卒中急性期的主要效应成分.
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川芎嗪对缺氧缺糖状态下培养的血管内皮细胞ECV-304的影响
目的:观察缺氧缺糖条件下血管内皮细胞(ECV-304)释放乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)水平和细胞膜流动性的变化及川芎嗪对它们的影响.方法:缺氧缺糖诱导血管内皮细胞损伤,自动生化分析仪测定培养液和细胞层中LDH活性;用比色法测定细胞培养液中NO水平;用荧光法检测细胞内脂质过氧化产物MDA以评价脂质过氧化程度;荧光偏振法测定内皮细胞膜流动性.结果:缺氧缺糖引起的血管内皮细胞LDH释放增加、MDA生成增多和膜流动性增高,NO水平降低.而川芎嗪可抑制缺氧缺糖引起的血管内皮细胞释放LDH,MDA生成和降低细胞膜流动性,提高NO水平.结论:川芎嗪可保护缺氧缺糖诱导血管内皮细胞的损伤,其作用机制有待进一步研究.
关键词： 川芎嗪 血管内皮细胞ECV-304 膜流动性 缺氧缺糖 -
mTOR/Akt/FoxO3信号通路在人参皂苷Rg1抗PC-12细胞OGD损伤的作用
目的:研究人参皂苷Rg1对PC-12细胞缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用,并初步探讨与mTOR/Akt调控FoxO3核浆穿梭相关的可能的分子机制.方法:建立OGD损伤PC-12细胞模型,MTT 法检测OGD对PC-12细胞存活率.人参皂苷Rg110,20,40 μmol·L-1预处理PC-12细胞24h,加OGD损伤,MTT 检测细胞存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量.Western blot法检测mTOR,p-Aktser473,p-Aktthr308,Akt,p-FoxO3,细胞核、细胞质FoxO3和总FoxO3蛋白表达.结果:OGD作用4～24h显著抑制PC-12细胞增殖,呈时间依赖性.Rg1(20,40 μmol·L-1)预处理24h可显著增加细胞存活率,减少LDH释放,增加SOD活力和降低MDA含量.Rg1可抑制由OGD引起的rmTOR,p-Aktser473表达降低.OGD 6 h可减少FoxO3磷酸化,并促进细胞质FoxO3进入细胞核;预处理Rg1增加FoxO3磷酸化,促进FoxO3进入细胞质.提示Rg1可经由调控mTOR/Akt/FoxO3信号通路抑制PC-12细胞损伤.结论:人参皂苷Rg1可抑制OGD引起PC-12细胞损伤,作用机制可能与激活mTOR/Akt信号通路调控FoxO3核质穿梭密切相关.
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附子、甘草有效成分不同配伍比例对H9c2心肌细胞缺氧缺糖损伤的影响
目的 研究附子有效成分次乌头碱和甘草有效成分甘草次酸不同比例配伍对H9c2心肌细胞缺氧缺糖损伤的影响及可能作用机制.方法 取长成致密单层的H9c2心肌细胞分成正常组、模型组、地高辛组(80 μmol/L)、次乌头碱组(120 μmol/L)及1∶0.5组、1∶1组、1∶2组(次乌头碱为120 μmol/L,甘草次酸分别为60、120、240μmol/L),每组6个复孔.正常组加入完全培养基1 ml,模型组加入无糖Earle's液1 ml,地高辛组、次乌头碱组和各配伍组分别加相应药时用无糖Earle's液稀释成相应浓度,加入1ml,除正常组外其余各组加药后构建缺氧缺糖模型培养4h.观察各组H9c2心肌细胞的形态学变化,检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β),肌酸肌酶(CK)的含量及Caspase-3、Fas-L、Fas蛋白表达. 结果 正常组心肌细胞呈贴壁生长,多为梭形,形成不规则的星形,并形成呈放射状排列的细胞簇;模型组心肌细胞胞体折光性下降,胞浆皱缩,可见折光性强的脱壁死亡细胞;各配伍组的细胞形态较模型组均有明显改善,并以配伍组1∶1组明显.与正常组比较,模型组TNF-α、IL-1β、CK含量及Caspase-3、Fas-L、Fas的蛋白表达均升高(P＜0.01).与模型组比较,次乌头碱组各组指标均无明显改变(P＞0.05);而地高辛组和各配伍组不同程度降低TNF-α、IL-1 β、CK含量及Caspase-3、Fas-L、Fas蛋白表达,并且以1:1组效果好(P＜0.05或P＜0.01). 结论 次乌头碱配伍甘草次酸对心肌细胞缺氧缺糖损伤有保护作用,并以1:1配伍佳,其作用机制可能与抗炎及抑制细胞凋亡有关.
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神经节苷脂对缺氧缺糖性血管内皮细胞损伤的保护作用
神经节苷脂(ganglioside GM1)是含唾液酸的糖神经鞘脂类物质,是细胞膜的组成成分之一.以往的研究表明,GM1对脑缺血及再灌注导致的神经细胞损伤具有保护作用~([1-6]).由于脑缺血过程不但涉及神经细胞的损伤,而且使缺血脑区的血管也受到损伤.已有的研究表明,GM1具有明显的减少脑缺血过程微血管的损伤~([7-8]),但GM1对减少微血管的损伤的机制目前还不清楚.由于血管的细胞构成包含内皮细胞和平滑肌细胞,为了探讨GM1可能的血管损失保护机制,本文应用离体缺氧缺糖OGD模型,探讨神经节昔脂GM1对缺氧缺糖性内皮细胞的损伤保护作用及其可能的机制.
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依达拉奉、米诺环素及ONO-1078对缺氧缺糖诱导大鼠海马脑片电生理改变的作用
目的建立离体海马脑片缺氧缺糖(OGD)电生理变化模型,观察依达拉奉、米诺环素和ONO-1078 {pranlukast,4-氧-8-[对-(4-苯丁氧基)苯甲酰氨基]-2-(5-四氮基)-4H-1-苯并吡喃半水化合物}的神经保护作用.方法大鼠海马脑片以无氧无糖处理,记录脑片群峰电位(PS),部分实验以TTC染色观察脑片活性.结果 OGD处理4 min为佳损伤条件,1 h后可恢复至基础水平的(29±6)%.自由基清除剂依达拉奉(1和10 μmol*L-1)明显增强PS波的恢复;抗炎药米诺环素(10 μmol*L-1)和白三烯受体拮抗剂ONO-1078(1 μmol*L-1)无显著恢复作用;阳性对照药氯胺酮也浓度依赖性促进PS恢复.结论 4 min OGD为离体海马脑片缺血电生理变化的可行模型;依达拉奉对OGD脑片损伤有浓度依赖性保护作用,而米诺环素和ONO-1078未显示保护作用.
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人参皂苷Rg2对心肌细胞搏动幅度和存活率的影响
目的:研究人参皂苷Rg2对心肌细胞搏动幅度和存活率的影响.方法:采用体外培养心肌细胞法,制备心肌细胞缺氧缺糖模型.结果:人参皂苷Rg2在10和40μmol·L-1浓度时对正常培养心肌细胞搏动幅度和存活率无影响,而对缺氧缺糖心肌细胞均有增加搏动幅度和存活率的作用,但其增加搏动幅度作用不及毒毛花苷G(Str),而其存活率在相同浓度下(10μmo·L-1)略高于Srt.结论:人参皂苷Rg2明显增加缺氧缺糖心肌细胞搏动幅度和存活率.
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红景天苷衍生物S01对谷氨酸及缺氧缺糖所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
目的 探讨红景天苷衍生物S01(3', 4', 5'-三甲氧基苄基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷)对神经细胞的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 用不同浓度S01(2,10和50 mg·L-1)预处理SH-SY5Y细胞,12 h后用谷氨酸或连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导SH-SY5Y细胞损伤, 用MTT法检测细胞存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,荧光探针负载法检测细胞内活性氧(ROS)水平和细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),化学发光法检测细胞中腺苷三磷酸(ATP)水平.结果 在谷氨酸所致SH-SY5Y细胞损伤模型中,与对照组比较,模型组细胞存活率、SOD活性和ATP水平降低,LDH释放、MDA含量和细胞内ROS水平增加.与模型组比较,S01(2,10和50 mg·L-1)可提高细胞存活率,减少谷氨酸引起的LDH释放, 拮抗谷氨酸引起的SOD活性和ATP水平降低,并拮抗MDA和ROS水平升高.在Na2S2O4所致SH-SY5Y细胞缺氧缺糖损伤模型中,与对照组比较,模型组细胞存活率下降,LDH释放增多,细胞[Ca2+]i升高.与模型组比较,S01(2,10和50 mg·L-1)可提高细胞存活率,减少缺氧缺糖引起的LDH释放和细胞内钙超载.结论 S01对谷氨酸和缺氧缺糖所致神经细胞损伤具有保护作用,提示S01可能对脑缺血具有治疗作用.
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葛根素对氧糖剥夺大鼠海马神经细胞Ca2+和NO的影响
目的 研究葛根素(puerarin,Pur)对缺氧缺糖状态下海马神经细胞内ca2+和NO水平的影响.方法 选用新生大鼠体外培养8 d的海马神经细胞,进行3 h的氧糖剥夺(oxygen/glucose deprivation,OGD)或30 min的L-谷氨酸(0.5mmol·L-1)处理后再正常培养24 h,Pur处理组在OGD或谷氨酸处理的同时和以后24 h给予不同剂量(40,100 μmol·L-1)PIlr.Annexin V联合流式细胞仪检测细胞的凋亡率和坏死率;以Fluo-3或DAF-2为荧光标记.用激光共聚焦显微镜观测30 rain的OGD过程中海马神经细胞Ca2+和NO的动态变化以及Pur的影响.结果 OGD诱导海马神经细胞Ca2+和NO水平快速升高,其高值分别达正常对照组的2.9和1.9倍;Pur明显减缓OGD期间神经细胞Ca2+内流和NO合成,与OGD组相比,40和100 μmol·L-1的Pur分别使细胞Ca2+峰值降低29.2%和37.1%(P＜O.05和P＜0.01),N0峰值降低23%和33%(P＜0.05和P<0.01),显著抑制细胞内Ca2+和NO水平的升高;同时Pur可有效抑制OGD和谷氨酸引起的神经细胞死亡.结论 Pur可通过抑制神经细胞谷氨酸/Ca2+/NO通路的活动而有效保护缺氧缺糖对神经细胞的损伤作用.
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党参总皂苷抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠星形胶质细胞损伤的作用
目的 以原代培养的大鼠大脑星形胶质细胞进行缺氧缺糖再给氧处理,观察党参总皂苷对星形胶质细胞损伤的保护作用.方法 1 d龄Wistar大鼠乳鼠大脑星形胶质细胞原代培养,含连二亚硫酸钠的无糖Earle's液进行缺氧缺糖处理造模,MTT法测定细胞存活率,Hoechst 33342和PI原位双染法荧光显微镜观察细胞形态学变化和细胞坏死、凋亡率,比色法测定LDH漏出率,评价药效.结果 与模型组比较,党参总皂苷Ⅰ、Ⅲ组均能显著提高细胞存活率(P＜0.01),党参总皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组均能显著降低细胞坏死率(P＜0.01),党参总皂苷各组对细胞凋亡率均无显著影响(P＞0.05),但均能显著降低细胞LDH漏出率(P＜0.01).结论 党参总皂苷对缺血再灌注损伤后星形胶质细胞的坏死具有显著抑制作用,但对凋亡过程无保护作用,提示党参总皂苷是党参治疗中风病急性期的主要效应成分.
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救脑宁注射液对培养神经细胞缺氧缺糖损伤的保护作用
为了探索“救脑宁”注射液对中风病的疗效机理，将原代培养8～12 d的新生 大鼠皮 层神经细胞进行缺氧缺糖处理，观察该药对缺氧缺糖损伤神经细胞的影响。结果表明：缺氧 缺糖组细胞上清液中丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性较对照组显著升高，细胞超氧 化物岐化酶(SOD)活性和细胞生存率则显著降低，救脑宁组MDA、LDH显著低于缺氧缺糖组， 而SOD活性及细胞生存率则高于缺氧缺糖组(P<0.01)。因此，抗脂质过氧化损伤、提高 神经细胞对缺氧缺糖的耐受性，可能是其疗效机理之一。
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p38丝裂原活化蛋白激酶在β淀粉样肽+缺氧缺糖所致SHSY5Y细胞损伤中的作用
目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性在β淀粉样肽(Aβ)+缺氧缺糖(OGD)所致SHSY5Y细胞损伤中的作用.方法 体外培养SHSY5Y神经母细胞瘤株,以OGD、伴或不伴Aβ(5 μmol/L)处理,以MTT检测SHSY5Y细胞活性,Western blot方法检测p38MAPK活性,fluo-3/AM的荧光强度检测SHSY5Y细胞内钙离子的浓度.结果 与对照组相比,OGD、Aβ、OGD+Aβ组SHSY5Y细胞活性显著下降,分别为对照组的(63±4)%、(68±7)%、(56±1)%,(P<0.05或P<0.01);p38MAPK活性在OGD、Aβ、OGD+Aβ组显著升高,分别为对照组的(121±3)%、(132±4)%、(165±5)%,(P<0.05或P<0.01);fluo-3/AM的荧光强度在OGD、Aβ、OGD+Aβ组显著升高,分别为照组的(169±4)%、(176±4)%、(220±7)%,(P<0.05或P<0.01).结论 与OGD、Aβ比较,OGD+Aβ对SHSY5Y细胞具有更显著的细胞毒性作用.OGD+Aβ通过激活p38MAPK,进而促进细胞内钙超载,终导致SHSY5Y细胞死亡.
关键词： β淀粉样肽 缺氧缺糖 p38丝裂原活化蛋白激酶 钙离子 -
大鼠皮质神经细胞原代培养及缺氧缺糖性损害对其损伤的研究
急性缺血缺氧性脑损伤的发病率、致残率和病死率都很高,严重危害人类健康,因此,对其发病机制的研究和有效治疗方案的探索一直是研究的热点.但在体实验往往受到体液、呼吸、循环等复杂因素的影响,很难解释某单一因素的影响作用及强度.因此探索体外培养方法,建立缺氧缺糖损伤模型,对研究脑神经细胞的缺血缺氧性损害是十分必要的,是神经科学研究中一项不可缺少的手段.
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制备神经细胞实验性缺氧缺糖模型的简易方法
背景:在神经细胞培养中实验性缺氧缺糖在一定程度上模拟缺血性卒中,对于研究缺血性神经元损伤的进程和病理生理学机制有非常重要的用处.目的:在神经元培养时制作实验性缺氧缺糖模型.设计、时间及地点:分组对照观察,实验于2007-01/2008-03在北京大学第三医院中心实验室完成. 材料:17-19 d胎龄的Wistar大鼠.方法:细胞培养取17～19 d胎龄的Wistar大鼠的皮质神经元做原代细胞培养,并且去掉污染的非神经原细胞.缺氧缺糖的诱导分为3组:实验组将第7天的皮质神经元置于无糖甲衡盐溶液和2%去氧酶中,在37℃的潮湿保温箱中培育.空白对照组培养基为含20 mmol/L葡萄糖的无去氧酶平衡盐溶液.假性实验组培养基为含20 mmol/L葡萄糖和失活的去氧酶平衡盐溶液.主要观察指标:以血气分析进行氧浓度的测定;以相差显微镜观察实验组培养细胞神经元死亡状况;以用乳酸脱氢酶检测盒检测乳酸脱氢酶活性;以锥虫蓝染色观察缺氧缺糖对神经元存活力的影响.结果:氧浓度测定显示在加入去氧酶后培养基迅速产生缺氧状态;乳酸脱氢酶检测显示在用去氧酶和无糖平衡盐处理后,培养基中乳酸脱氢酶释放显著增加;锥虫蓝染色和相差显微镜检查显示经去氧酶和无糖平衡盐处理后实验组的细胞活力明显下降,大部分神经元在6 h死亡.结论:实验结果显示去氧酶与无精平衡盐液可联合用于神经元培养时产生缺氧缺糖状态,其在体外模拟脑缺血的相关研究中有重要作用.
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亚低温对体外缺氧缺糖损伤后神经元的保护作用及其对谷氨酸转运体、亲代谢型谷氨酸受体表达的影响
目的 通过研究亚低温对体外缺氧缺糖损伤的神经细胞谷氨酸转运体(GLT-1)、亲代谢型谷氨酸受体(mGluR2/3)表达的影响,探讨亚低温的神经保护途径.方法 分组培养大鼠大脑皮层细胞,亚低温组在33℃条件、常温组在37℃条件,缺氧缺糖培养2h后,复氧复糖37℃培养,经时(6h、12h、24h、3d)检测LDH释放量、GLT-1和mGluR2/3蛋白表达量.结果 在复氧复糖后,两组LDH释放均呈现上升趋势,其中24h和3d亚低温组的LDH上升水平显著降低(P＜0.05);两组GLT-1表达均呈现先下降后上升的趋势,其中6h和12h亚低温组的GLT-1下降水平显著降低(P＜0.05);两组mGluR2/3表达均呈现上升趋势,其中12h和24h亚低温组的mGluR2/3升高水平显著增加(P＜0.05).结论 亚低温能够在体外水平,通过抑制GLT-1蛋白的表达下调,促进mGluR2/3的表达上调,抑制神经元兴奋性损伤.
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表皮生长因子对缺氧缺糖模型大鼠骨骼肌细胞氧化损伤的保护作用
目的:构建体外骨骼肌 L6细胞缺氧缺糖(OGD)模型,在体外水平上探讨表皮生长因子(EGF)对压疮深部组织损伤(DTI)的保护机制.方法:将对数生长期大鼠骨骼肌 L6成肌细胞分为5组,即正常对照组、OGD组、5 μg·L-1EGF +OGD组、10 μg·L-1EGF +OGD组和20 μg·L-1EGF+OGD组.MTT法检测各组细胞生存率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DCFH-DA 法检测各组 L6成肌骨骼肌细胞中活性氧(ROS)水平,Rhodamine 123检测线粒体膜电势,Western blotting法检测各组骨骼肌细胞中 Bcl-2和 Bax蛋白表达.结果:与正常对照组比较,OGD组 OGD 24 h时骨骼肌细胞生存率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),ROS水平升高(P<0.01),线粒体膜电势下降(P<0.01),Bcl-2/Bax比值明显下降(P<0.01).与 OGD组比较,不同浓度 EGF组细胞存活率明显升高,细胞凋亡率降低,其中10和20 μg·L-1EGF组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);不同浓度 EGF组骨骼肌细胞中 ROS水平呈浓度依赖性降低,线粒体膜电势明显增加,10和20 μg·L-1EGF组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);Bcl-2/Bax比值明显下降,并具有浓度依赖性,其中10和20 μg·L-1EGF组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:EGF通过降低细胞内ROS水平保护线粒体功能,改善OGD诱导的大鼠骨骼肌细胞损伤,并具有浓度依赖性.
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蒲公英对体外培养心肌细胞保护作用的研究
有关蒲公英对体外培养缺氧缺糖心肌细胞作用的研究尚未见报道,本实验通过细胞化学和电镜技术相结合的方法,为蒲公英的进一步开发和应用提供必要的形态学依据.
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海马脑片缺氧缺糖模型的制备方法
离体神经组织培养尤其是海马脑片培养,可以弥补在体动物实验方面的一些局限性,是现代神经科学工作者常用的研究方法之一.实验证实,离体海马脑片缺氧缺糖培养模拟"脑缺血",可以重现在体动物实验时海马各区对缺血敏感性不同的特点[1],所以许多学者利用海马脑片缺氧缺糖培养模型来研究缺血性脑损伤的细胞和分子机制.目前海马脑片缺氧缺糖模型的制备有多种,但各方法间存在着差异,本文对目前运用较多的浸没法、充N2法和三气缺氧培养箱法进行了比较,并将其中两种方法予以结合,以期为海马脑片缺氧缺糖模型的应用提供参考.
