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PI3K在TCR和CD28协同激发的γδT细胞活化信号转导中的作用
目的探讨CD28协同结核杆菌(M.tb)低分子多肽激活人外周血γδ+ T细胞时,其胞内信号的传递经过磷酸肌醇3激酶(PI3K)的介导作用. 方法用激发型抗CD28单抗模拟第二信号,与M.tb抗原一起刺激纯化的T细胞,同时用特异性PI3K抑制剂LY294002阻断PI3K的活性,用流式细胞仪分析γδ+ T细胞上CD69分子的表达及γδ+ T细胞的增殖效应. 结果随着LY294002浓度的增加,γδ+ T细胞表面CD69分子的表达率降低,其增殖效应亦被不同程度地阻断. 结论抗CD28单抗可协同M.tb抗原激活γδ+ T细胞,其活化信号在γδ+ T细胞内的转导经过PI3K的介导.
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人γδT细胞TCR分子与结核杆菌多肽抗原特异性结合的证据
目的探讨γδT细胞对结核杆菌抗原(Mtb-Ag)识别的分子机制. 方法采集人外周血(PB),分别经抗TCRγδ-PE和FITC标记的Mtb-Ag及其纯化的不同组分,结核杆菌高分子量蛋白组分(Mtb-HW-Ag)、低分子量多肽组分(Mtb-LW-Ag)或Mtb-Ag峰3单一主肽抗原(Mtb-Ag-Pk3)进行双标记染色,或使用过量Mtb-Ag先与细胞预处理,然后再做上述染色,用流式细胞仪检测γδT细胞上结合的抗TCRγδ-PE荧光强度变化.将人外周血PBMC经Mtb-Ag刺激24 h后,使用抗TCRγδ-PE和Mtb-Ag-FITC染色,用激光共聚焦显微镜观察γδT细胞表面TCRγδ分子的聚集. 结果经流式细胞仪分析,Mtb-Ag及其纯化的Mtb-LW-Ag、Mtb-Ag-Pk3均可与γδT细胞发生特异性直接结合,而且Mtb-Ag可有效阻断抗TCRγδ单抗与γδT细胞的结合.而Mtb-HW-Ag与γδT细胞并无特异性结合效应.经激光共聚焦显微镜观察,Mtb-Ag可显著激活γδT细胞而诱导TCRγδ分子发生功能性聚集化. 结论γδT细胞通过其表面的TCRγδ分子可直接结合Mtb-Ag,而Mtb-Ag-Pk3多肽可能是Mtb-Ag发挥其结合效应的有效成分.Mtb-Ag可激活γδT细胞并诱导TCRγδ分子聚集,而可能参与功能性脂筏(raft)的形成.
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结核杆菌Rv0309重组蛋白的免疫原性研究
Rv0309重组蛋白可引导重组蛋白进入抗原提呈细胞,本文进行了免疫原性的观察.
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结核杆菌异烟肼耐药与katG基因突变分子的关系
近年来,全球结核病疫情回升,结核病依然是一个全球性的、严重的公共卫生问题和社会问题.异烟肼(isoniazid,INH)是治疗结核病的主要一线药物之一,2000年第4次结核病流行调查资料显示,INH的耐药率达17.6%,仍居第一位.故结核分枝杆菌对INH耐药的问题备受关注.新疆是我国耐多药结核病(MDR-TB)的高发区,研究新疆结核杆菌耐INH的机制,建立一种对临床分离株耐药的快速检测手段,是临床迫切需要解决的问题.
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实时荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌方法的建立与初步应用
结核分枝杆菌不产外毒素和侵袭性酶,而结核分枝杆菌分泌的蛋白及菌体蛋白在宿主抗结核分枝杆菌的细胞免疫和体液免疫应答中发挥着重要作用.结核分枝杆菌mRNA的半衰期很短(3~5 min),是结核分枝杆菌活菌诊断及检测药物敏感性很好的分子标志.因此通过检测临床上分离的结核分枝杆菌的mRNA可以快速判断是否为致病性结核杆菌及结核分枝杆菌是否为活菌.
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分析5种结核杆菌耐药基因突变与耐药水平的关系
目的分析5种结核杆菌(M.tb)耐药基因突变的情况,了解基因突变和耐药水平的关系.方法134例临床分离株均做传统梯度药敏试验和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)试验.结果耐PZA(pncA)、SM(rpsL)、REP(rpoB)、INH(katG)、EMB(embB)基因突变率分别为42.7%、72%、78%、69%和43.9%.其中,上述高耐株基因突变率分别为70%、87.2%、93.4%、80%、43.9%.低耐株分别为12.5%、28.5%、45.4%、18.7%,EMB在低耐区无基因突变.结论M.tb耐药基因突变与耐药水平联系密切.多数M.tb耐药基因突变易发生在高耐药区,也有少数菌基因突变易发生在低耐药区.
关键词: 结核杆菌 药敏试验 聚合酶链反应-单链构象多态性 -
结核杆菌毒力的研究进展
据世界卫生组织(WHO)统计,结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)近年来每年引起全球约300万人死亡.我国在全球22个结核病(TB)高负担国家中居第2位[1],且具有患病率高、分布广、病死率高等特点.结核菌侵入人体后,有些感染者发展为重症结核,有些成为潜伏感染[2-3],未出现活动性结核病的症状和表现[4].研究表明,不同毒力的MTB感染巨噬细胞后可诱导宿主细胞产生不同的转归:高毒力结核菌株H37Rv能够抑制细胞凋亡,在胞内存活、繁殖、扩散,导致细胞坏死,进而引发炎症反应、细菌扩散;而H37Ra、卡介苗(BCG)等减毒株则能诱导宿主细胞产生大量凋亡,研究提出该凋亡途径与TNF-α无关[5].毒力具体机制仍不清楚,现在就结核杆菌毒力的部分问题作一综述.
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结核分枝杆菌含信号肽的Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗免疫保护效果研究
目前人类预防结核病的惟一疫苗棗卡介苗(BCG)存在着不足,研制新型、有效、安全的预防结核病的疫苗成为国内外学者共同关注的一个重要课题.目前由于大多数结核病DNA疫苗的免疫保护效果尚不如BCG,因此,提高DNA疫苗免疫效力是目前结核病核酸疫苗研究的热点.本研究选择新近从结核杆菌培养滤液(CF)中纯化分离出的一种低分子量蛋白抗原棗含信号肽的Mtb8.4(MS)作为目的抗原,与人白细胞介素12(hIL-12)构建成结核病嵌合基因疫苗,旨在提高MS的免疫效力.
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更正
本刊2015年第35卷第7期发表的论文《结核杆菌抗原诱导非人灵长类特异性IFN-γ的差异性分析》,基金项目更正为:国家自然科学基金(81201261)。
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HSP70BCG修饰的DC抗肿瘤作用的机制研究
近年来发现Toll样受体(TLR)是结合病原微生物的受体,参与固有免疫及适应性免疫,在DC上有所表达.结核杆菌中有多种抗原物质可激活细胞免疫功能,并对多种肿瘤细胞株有细胞毒作用.在上述研究的基础上,本文应用卡介苗来源的热休克蛋白70(HSP70BCG)修饰小鼠骨髓DC及经抗-TLR4抗体封闭TLR4后的小鼠骨髓DC,观察其抑瘤效果及TLR4的作用.
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联合检测ADA,INF-γ,CEA在结核性与癌性胸腔积液鉴别诊断中的价值
引发胸腔积液原因很多,常见于结核和肿瘤.结核性和恶性胸腔积液治疗和预后迥然不同,故正确鉴别非常重要.开胸或胸腔镜下胸膜活检为确定胸腔积液病因的"金标准".但此项检查创伤大,手术风险较高.普通的胸膜活检阳性率不高,胸腔积液中的结核杆菌和肿瘤细胞检出率更低.
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FQ-PCR法和染色涂片法检测脑脊液结核杆菌结果对比分析及意义
目的 通过荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)法和染色涂片法检测脑脊液(CSF)结核杆菌,结果与临床确诊结果进行对比分析,探寻提高抗酸杆菌(AFB)的检出率的检验方法.方法 近年来怀疑结核性脑膜炎患者62例,取脑脊液用两种方法检测结核杆菌.结果 FQ-PCR和染色涂片阳性率分别为14.52%和4.84%.结论 FQ-PCR技术是一种快速、敏感、特异性较强的结核分枝杆菌辅助诊断方法.在检测脑脊液结核杆菌有其应用价值和意义.
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一起由假结核耶氏杆菌引起的群体性食物中毒
假结核耶氏杆菌是肠杆菌科耶尔森氏菌属中的一种细菌,又称假结核杆菌.该菌初是引起啮齿动物的疾病,但也可传染给人.引起人的疾病有两个类型:一是暴发性败血症,通常是致命的;另一型则是肠系膜淋巴腺炎[1].
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自我管理教育对结核杆菌/HIV 双重感染患者服药依从性的影响
目的:探讨自我管理教育对提高结核杆菌/HIV双重感染患者服药依从性的影响。方法将96例结核杆菌/HIV双重感染患者随机分为对照组和观察组各48例。两组均进行系统的抗结核及抗病毒药物治疗和一般的卫生宣教,观察组在此基础上实施自我管理教育,出院时和出院后1年评估,对两组服药依从性进行比较。结果出院时,观察组服药依从性良好率为100.0%(48/48),高于对照组的83.3%(40/48),差异有统计学意义(χ2=6.68,P<0.01)。出院1年后评估,观察组服药依从性良好率为95.7%(45/47),高于对照组的68.2%(30/44),差异有统计学意义(χ2=11.91,P<0.01)。结论自我管理教育可提高结核杆菌/HIV双重感染患者的服药依从性。
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改造一次性集痰器用于痰标本留取的方法
痰结核杆菌阳性是诊断传染性肺结核的依据.痰标本的质量也直接影响痰结核杆菌阳性的检出率,因此痰标本的采集、留取至关重要.对于昏迷、病情危重、无力咯痰、气管插管、气管切开等不能自行排痰的患者需要留取24 h痰或者夜间痰标本时,要借助吸痰管来留取痰标本.
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立复欣雾化吸入治疗初治菌阳性肺结核的疗效观察
肺结核的治疗主要用化学合成药物即"化疗"全身用药,而药物的杀菌作用,不在经常维持一定的血药浓度,而在于它在体内的顶峰血药浓度[1],欲增加药物剂量,则易发生不良反应.临床上我们对30例结核杆菌阳性病人在常规化疗(SHRZ)用药基础上采用立复欣雾化吸入治疗初治菌阳性肺结核,疗效满意,现总结如下.
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慢性嗜酸粒细胞性肺炎1例的超声表现
患者女,49岁.因"间歇性咳嗽、咳痰、喘息3年,加重2个月伴发热1周"入院.入院时胸片示:左上肺炎症.给予抗炎治疗效果不佳.1周后CT示:双肺野可见多发散在不规则片状密度影,边界不清,以左肺为著.纵膈可见增大的淋巴结.提示:结核可能性大.检验:C 反应蛋白53 mg/l,血沉74 mm,结核菌素试验(-),结核杆菌抗体三项、支原体、衣原体、军团菌抗体均为(-),给予抗结核治疗,效果不明显,患者体温波动在38.0~39.0 ℃ ,血常规检查白细胞正常,中性粒细胞55%~70%,嗜酸性粒细胞12%~17%,淋巴细胞13%~1 9%.纤维支气管镜组织活检病理回报支气管黏膜下见少量嗜酸性粒细胞;支气管肺泡灌洗液中见少量嗜酸性粒细胞.复查胸片提示病变有游走现象.因此考虑为过敏性肺炎.B超所见 :左上肺(左锁骨中线外侧第2~4肋间)可见不均质实性低回声区,范围约8.0 cm×4.1 cm,形态不规则,无包膜,内可见多个中强回声点;CDFI示其内血流信号丰富,呈树枝状分布(图1),PW示动、静脉频谱,动脉峰值流速32 cm/s.左侧胸腔可见条样无回声区.
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B超诊断前列腺结核性脓肿1例
患者男, 34岁.因尿急、尿频半年, 完全不能排尿3个月, 收住院.既往患系统性红斑狼疮9年, 一直用激素治疗.检查:体温37.4度, 脉率84次/分, 血压16/10.7kPa, 神志清, 体位自如, 腹部移动性浊音阳性.肛诊:前列腺Ⅲ度大、质韧、表面欠光滑、压痛(+)、中央沟消失.实验室检查Alb3.1g/dl, A/G1.19, 尿结核杆菌(+).CT示前列腺增大、腹水.B超示前列腺约4.7cm×6.2cm×4.7cm, 呈球形增大, 内部呈不均匀低回声表现, 实质回声减低.超声提示前列腺增大待查, 前列腺结核不除外.行经尿道前列腺切除术, 术中见前列腺两侧叶大部坏死, 大量干酪样坏死组织阻塞尿道内口.病理镜下检查:前列腺组织间质水肿, 慢性炎症, 大片干酪样坏死, 抗酸染色阳性, 病理诊断为前列腺结核性脓肿.患者于术后12天突发昏迷, 经头颅MRI及腰穿查脑脊液等多种检查后, 证实为结核性脑膜脑炎, 转神经内科治疗.
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女性盆腔结核56例分析
女性生殖器结核一般是肺结核或其他器官结核的继发性病变,主要来源于结核杆菌的血行传播,近年来发病率有增长趋势.因病理改变过程不同,其临床表现多种多样而缺乏特异性,临床症状隐匿,易造成误诊.为提高对此病的认识,现将我院1998.2007年3月收治的56例临床分析如下.
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实时荧光定量聚合酶链反应检测脑脊液中结核杆菌DNA的临床应用
结核病是严重危机全球公共卫生的问题之一.结核病的病原学检测是发现传染源的主要手段,是确定结核病的依据,在结核病的预防和治疗工作中起着不可或缺的重要作用[1].近年来随着结核分子生物学诊断技术的快速发展,其快速、敏感、特异性高等的优点使其在临床逐渐得到应用.其中实时荧光定量聚合酶链反应(FQ PCR)阳性结果可作为结核病诊断的重要临床依据.本文应用Real time-FQ PCR技术与传统抗酸染色方法对比分析56例脑脊液标本,结果报告如下.