首页 > 文献资料
-
抑郁症大鼠杏仁核微管相关蛋白表达及神经元凋亡
目的 观察抑郁症大鼠杏仁核磷酸化微管相关蛋白-2(pMAP-2)表达和神经元凋亡的变化,探讨抑郁症的发病机制.方法 随机将20只雄性Wistar大鼠分为对照组和模型组,采用慢性不可预见性温和应激(GUMS)方法建立抑郁大鼠模型,采用糖水偏好实验、悬尾实验、Morris水迷宫实验进行行为学检测,免疫印迹方法检测pMAP-2变化,透射电镜观察神经细胞凋亡.结果 模型组体重增长率、糖水偏好百分比低于对照组(P<0.05),悬尾不动时间和逃避潜伏期长于对照组(P<0.05);模型组pMAP-2蛋白表达高于对照组(P<0.05);模型组观察到明显的神经细胞凋亡.结论 抑郁症大鼠杏仁核神经细胞凋亡增加,可能与MAP-2磷酸化增高有关.
-
体外诱导的皮肤源性神经干细胞在大鼠受损伤脊髓内的存活和分化
为寻找新的神经干细胞来源用于治疗急性脊髓损伤的实验研究,本实验采用绿色荧光大鼠(GFP转基因鼠)有毛皮肤在体外经剪碎,胰酶消化,过滤细胞,无血清培养液培养分离细胞,用表皮生长因子和成纤维细胞生长因子促进细胞增殖,去除生长因子后用含血清培养液培养细胞等过程,采用神经上皮于细胞蛋白(nestin)、微管相关蛋白(MAP2)、神经丝蛋白(NF-200)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫细胞化学染色法对培养细胞的分化状况进行鉴定.
-
细胞骨架蛋白调节囊泡转运及其与神经疾病的关系
细胞内囊泡转运依赖于细胞骨架系统,细胞骨架为囊泡转运提供了轨道,而细胞骨架表面的马达蛋白则为其提供了动力.近年来,随着活细胞成像技术以及相关的生化、药理实验方法的不断进步,人们对囊泡转运的分子机制有了更加深入的认识.越来越多的实验结果表明,细胞骨架蛋白对囊泡转运有着重要的调节作用.囊泡转运的紊乱与多种神经疾病相关.囊泡转运分子调控机制的研究,将为多种神经疾病的治疗提供新的思路.
-
功能性电刺激治疗对急性脑梗死大鼠运动功能和缺血半影区微管相关蛋白-2表达的影响
目的:观察功能性电刺激(FES)治疗对急性脑梗死大鼠运动功能和缺血半影区微管相关蛋白-2(MAP-2)表达的影响.方法:制作急性大脑中动脉栓塞模型大鼠.随机分为假手术组、FES安慰治疗组和FES治疗组共三组,每组又分为治疗0d、3d、7d、14d四个亚组,每亚组共6只,术后3天开始FES治疗.FES治疗引起瘫痪侧伸腕伸指动作,每天1次,每次10min.在治疗前和治疗后的各个时间点采用网屏试验评定运动功能,评定后取材,应用免疫组化技术观察半影区MAP-2变化.结果:治疗7d和14d后,FES治疗组的运动功能较安慰治疗组明显改善(P<0.05)、MAP-2阳性细胞数和光密度值明显增加(P<0.01).结论:FES治疗可以改善急性脑梗死大鼠的运动功能,并增强脑梗死周围缺血半影区MAP-2的蛋白表达.增强脯的可塑性.
-
细胞自噬在急性肝损伤中的变化及作用
近年来,细胞自噬已成为热点研究领域,而细胞自噬在肝脏疾病中的作用也越来越受到重视,抑制或促进自噬可能成为一个新的治疗靶点,本文就细胞自噬在急性肝损伤中的变化及作用作一综述。
1细胞自噬的概述
细胞自噬(autophagy)是存在于真核细胞内的一种溶酶体依赖的降解途径,形成过程包括膜状结构包裹部分胞质和细胞内需降解的长寿蛋白质、受损的细胞器等形成自噬小体,再与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物,产生的氨基酸、脂肪酸、核糖酸等降解产物再被细胞重新利用[1,2]。在自噬发生过程中,Ⅰ型微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3, LC3)脂酰化形成Ⅱ型LC3并聚集到自噬小体膜上[9],当自噬小体和溶酶体融合形成自噬溶酶体后,LC3-Ⅱ就会去脂酰化又转变成LC3-Ⅰ释放到胞质中,因此可知LC3-Ⅱ可在一定程度上反映出自噬的变化。根据底物转运到溶酶体途径的不同,细胞自噬可分为3种类型:巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬,通常说的自噬泛指巨自噬,本文若无特殊说明均指巨自噬。 -
结核性脑膜炎患者脑脊液中微管相关蛋白1轻链-3的表达
结核性脑膜炎可能导致严重的后果[1],早期诊断是影响患者预后的关键因素[2],但目前尚缺少行之有效的方法[3].MTB感染后,免疫细胞对病原体的自噬性吞噬是宿主对MTB感染天然免疫的重要机制,也是获得性免疫抗原呈递过程的重要环节,且具有潜在的治疗意义[4].为探讨中枢神经系统MTB感染的自噬过程,我们测定了结核性脑膜炎和其他类型感染患者脑脊液中微管相关蛋白1轻链-3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC-3)的表达.
-
三七总皂苷对脑出血大鼠微管相关蛋白-2及神经生长相关蛋白表达的影响
多数临床医师对活血化瘀等中药治疗超早期脑出血持慎重怀疑态度,目前,缺乏确切的实验和临床证据证明脑出血超早期应用活血化瘀中药是否有益.本研究选择大鼠脑出血后12、72 h 2个不同时间点作为开始应用三七总皂苷治疗的时间,观察三七总皂苷超早期应用,对脑出血大鼠微管相关蛋白-2(MAP-2)及神经生长相关蛋白-43(GAP-43)表达及脑水肿的影响.
-
成纤维细胞生长因子及其受体信号调节器官发生(二)
2.9大脑、小脑、垂体和视网膜发生研究证实,FGF2,FGF3,FGF8,FGF10和FGF23及其特异性阻遏物分别参与了胚胎期大脑、小脑和垂体器官的发生.在胚胎的(F)14 d时,将高剂量FGF2注射到小鼠脑室,引起颅盖骨变形,脑室空间扩大和脑皮质疏散.虽未见大脑神经层排列异常,但大脑皮质的上层(Ⅱ/Ⅲ)和下层(Ⅳ-Ⅵ)细胞密度和数量均增加,脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸羟化酶、nestin和微管相关蛋白-2异常或异位表达于大脑皮质的深部区域,很多细胞共表达这些抗原[1].由此说明FGF2在调控胚胎小鼠大脑诱导脑积水、脑形态发生、神经元前体增殖和神经细胞异常分化中扮演重要角色.Lelievre等[2]对胚胎后脑前体细胞的深入研究发现,FGF2通过兴奋垂体腺苷酰环化酶活性肽(PACAP)来抑制后脑前体细胞的生长活性和DNA合成,该抑制作用对PD98059拮抗剂反应迟钝,而完全被蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89阻滞.此外,FGF8通过遏制Otx2表达来诱导异位峡部机化中心形成和峡部小脑发育[3].
-
新生大鼠HIBD后海马p-Tau蛋白与脑神经元凋亡表达变化
目的:观察微管相关蛋白磷酸Tau( p-tau)在缺氧缺血性脑损伤( HIBD)新生大鼠脑组织中的表达变化. 方法:将80只7日龄SD清洁级大鼠随机分为假手术组40 只和HIBD组(均按处死时间点分为3、6、12、24、48 小时5 个亚组)40只. 参照Rice法建立HIBD动物模型,假手术组仅暴露左颈总动脉,不作缺氧处理,2 组均于HIBD手术结束后3、6、12、24、48小时5个时间点断头取脑. 并分别取其脑组织切片,采用免疫组化S-P法检测其脑室周围白质区 p-tau 的表达,末端脱氧核苷酸转移酶缺口标志 ( TUNEL) 法检测其神经细胞凋亡. 结果:假手术组海马区有部分 p-tau蛋白表达及少量凋亡细胞, 各时间点无明显变化. HIBD组 p-tau的表达在3 小时后开始增加,12 小时达表达高峰后即开始呈下降趋势,与假手术组比较差异均有统计学意义 (F=95.67,p=0.000 <0.05) ;细胞凋亡在处理后3 小时即开始增加,至24小时小时达表达高峰,与假手术组比较差异均有统计学意义(F=18.829,p=0.001 <0.05). 结论:HIBD可造成新生大鼠海马区p-tau蛋白及神经元凋亡表达增加.
-
神经系统遗传变性病:从分子定位向定性研究的展望
一、神经变性病分子生物学研究的现状20世纪下半叶是分子生物学大发展的时代,同时也带动了神经系统变性病分子遗传学的进展[1].其中,有一部分疾病是根据病理生物学方面的证据,从而发现了相关的候补基因[例如阿尔茨海默病患者的淀粉样前体蛋白(APP)基因和神经原纤维缠结上的微管相关蛋白(MAP)-tau基因].
-
阿尔茨海默病与颅脑外伤相关性因素临床研究
目的:探讨研究阿尔茨海默病与颅脑外伤患者发病的相关因素.方法:选取本院治疗的AD患者、颅脑外伤患者及非神经系统疾病手术行蛛网膜下腔阻滞麻醉的患者(对照组)各30例,配对分组抽取脑脊液,检测微管相关蛋白(tau)含量.结果:AD组与颅脑外伤组患者,脑脊液tau蛋白含量接近,且与对照组患者脑脊液tau蛋白含量有明显差异.结论:创伤性颅脑损伤可能会影响AD的发病率和发病时间,以此为出发点,积极探索寻求综合性的检测AD特异性过度磷酸化tau蛋白方法,是一个有可行性的研究方向.
-
局灶性脑缺血微管相关蛋白-2表达及依达拉奉保护作用的研究
缺血性脑损伤机制及其治疗一直是研究重点,其中对脑梗死神经细胞的再生、结构重建及可塑性机制等方面近几年已引起高度重视.MAP-2(微管相关蛋白-2)在神经发育、轴突再生、突触生长、结构重建等起着重要作用,是神经可塑性的重要物质基础.目前选择有效方法(康复、药物等)促进中枢神经可塑性与脑功能恢复是亟待解决的重点问题之一.
-
轻度颅脑创伤增加脑对再次损伤的易感性
宾夕法尼亚大学医学院的研究表明,轻度颅脑创伤后再次遭受脑损伤容易导致神经行为障碍,并能诱发神经系统变性性疾病.研究人员将C57BL/6成年雄性小鼠分成单次脑损伤组(43只)、二次脑损伤组(49只)和无损伤对照组(36只)3组进行研究.分别测定动物的认知功能、神经运动功能以及心血管功能;观察血-脑脊液屏障和神经轴突的损伤程度以及神经变性和组织病理学改变.实验结果显示,各组动物均无认知功能障碍,单次脑损伤组仅在伤后3日发生轻微功能障碍,而二次脑损伤组则在第2次损伤后3日和7日产生明显的不同于单次脑损伤的功能障碍.单次脑损伤后可观察到小区域血-脑脊液屏障破坏并伴有轴突损伤,二次脑损伤组损伤明显加重,进行微管相关蛋白-2的免疫组织化学染色,显示标记区域免疫活性降低;但各组脑损伤动物均未发现有β淀粉样变性沉积物.研究者认为,轻度颅脑创伤后24小时之内脑对再次损伤的易感性增加.姜小国编译自《Crit Care Med》,2001,29(11):2060-2066 胡森审校
-
脑缺血再灌注期间海马神经元微管相关蛋白-2免疫活性的变化
短暂脑缺血后,马CA1区神经元的死亡多发生在缺血后3~4天,故称之为"延迟性神经元死亡"(delayed neurondeath,DND)[1].本实验采用沙土鼠前脑缺血再灌注模型,观察脑缺血再灌注期间微管相关蛋白-2(MAP-2)活性的变化,以探讨MAP-2和DND的关系.
-
Sp8阳性细胞在健康及放射性脑损伤豚鼠 SGZ 区的表达
目的:①观察 Sp8阳性细胞(Sp8+)在健康成年豚鼠海马齿状回颗粒细胞下区(SGZ 区)的表达,并探讨其表达与年龄的相关性;②观察放射性脑损伤豚鼠放射侧 SGZ 区 Sp8及 DCX 的表达变化,进一步探讨 X 线对海马齿状回神经干细胞群的影响。方法①运用免疫组化染色及免疫荧光技术对脑组织切片进行染色。随机选取6个月龄健康成年豚鼠4只用于形态学观察,观察正常成年豚鼠 SGZ 区的 Sp8表达;② Sp8分别与 Neun、CB、GFAP、PSA-NCAM、Sox2、Ki67抗体进行免疫双标;③新生、6个月龄、2岁以及3.5岁豚鼠各4只,用于观察Sp8在不同年龄组豚鼠SGZ区表达的差别;④建立单侧颅脑放射性脑损伤模型:6个月龄健康成年豚鼠20只分别在第1、3、7天接受左侧颅脑 X 线照射,每天照射2次,单次照射剂量为5Gy,于第14天进行断头处理。选取海马部位清晰完整的冠状位组织切片,分别进行 Sp8及 DCX 的免疫组化染色,观察两者在放射侧 SGZ 区的表达变化。结果① Sp8+细胞在健康成年豚鼠 SGZ 区广泛表达;② Sp8+细胞与神经干细胞标记物 Sox2共存;③豚鼠 SGZ 区 Sp8+细胞的表达随着年龄的增长呈逐渐下降趋势(P<0.05);④放射侧 SGZ 区 DCX 阳性细胞数量较对照侧显著减少(P<0.05),而两侧 Sp8+细胞数量差异不明显(P>0.05)。结论① Sp8+细胞在豚鼠海马齿状回神经发生区广泛表达;② Sp8可能是海马齿状回神经发生区静息状态神经干细胞的一种标记物;③豚鼠 SGZ 区神经干/祖细胞的减少与年龄呈负相关性;④ X 线抑制 SGZ 区新生神经元的生成,而 Sp8+细胞可抵抗 X 线损伤。
关键词: Sp8 放射 海马齿状回颗粒细胞下层 微管相关蛋白 -
选择性自噬的研究
自噬(autophagy)是广泛存在于真核细胞内的一种溶酶体降解途径。这个古老而保守的降解途径主要有三种形式:巨自噬(giant autophagy)、微自噬(microautophagy)和分子伴侣介导的自噬(chaperon-mediated autophagy,CMA)。自噬一直被认为是一个饥饿诱导的非选择性本体降解途径,通过细胞质成分的“自我消化”,细胞在有限的能源中回收所有的营养成分。泛素化底物通过泛素受体传递,后者包括 p62/SQSTM1(sequestosome1)、BRCA1基因1邻位(neighbor of BRCA1 gene 1,NRB1)、核点蛋白质52(nuclear protein 52,NDP52)、组蛋白去乙酰酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)及自噬相关 FYVE 蛋白(autophagy-linked FYVE protein,ALFY),泛素依赖的传感器系统负责底物特异性。自噬清除之前,这些受体将泛素化底物连接到初期自噬体,后者携带有泛素样(ubiquitin-like,UbL)蛋白,如其表面的微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)或 GABAA 受体相关蛋白(GABAA receptor associated protein,GABARAP)。因此,自噬受体结合到泛素和 LC3或 GABARAP 蛋白能够通过选择性自噬调控蛋白质降解。依据其底物名称来区别各种类型的选择性途径,如线粒体自噬(mitophagy)、过氧化物酶体自噬(pexophagy)、内质网自噬( reticulophagy)、核糖体自噬( ribophagy)和异源自噬(xenophagy)。
-
微管相关蛋白在幼犬脑组织的表达
目的::探讨微管相关蛋白(Doublecortin)在幼犬脑组织不同部位的表达,进一步研究出生后家犬神经发生和神经元迁移机制。方法:4只出生后幼犬给以正常饮食饲养2周,4%多聚甲醛溶液灌注取脑,通过免疫组织化学方法检测微管蛋白在幼犬脑皮层、室管膜下区、白质和海马的分布表达情况,观察不同部位新生神经元的形态和突起的伸展走行分布。结果:微管蛋白在脑皮层、室管膜下区、白质和海马均有分布,室管膜下区和海马齿状回表达高,神经元突起表达明显,伸展方向较为一致,朝向大脑皮层。脑皮层第Ⅱ层以下层面均有表达。结论:家犬出生后早期脑组织仍有新生神经元产生,神经元生发区位于室管膜下区和海马齿状回,室管膜下区和齿状回新生神经元在迁移的过程中分化成熟,终迁移至脑皮层,完成神经系统发育。
-
长期大脑中动脉闭塞后远隔部位微管相关蛋白和胶质纤维酸性蛋白变化
目的探讨长期大脑中动脉闭塞(MCAO)后丘脑、黑质网状部(sNr)微管相关蛋白(MAP-2)以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的变化.方法 35只SD大鼠分为7组,即正常组、伪手术组2周组、伪手术1个月组、MCAO后2周组、1个月组、3个月组和6个月.每组5只,Tamura法制作动物模型.脑切片分别用鼠脑MAP-2、GFAP抗体,ABC法染色.结果缺血后1个月MAP-2减少,GFAP增加,6个月后丝极消失.结论神经细胞MAP-2减少和胶质细胞GFAP增加是长期MCAO后丘脑、sNr萎缩的基础.
-
脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的变化
背景:目前神经于细胞(Neural Stem Cells,NSCs)的来源仅限于胚胎,因此寻找一种新的NSCs的来源对于神经科学领域基础与应用研究的发展至关重要,而脐血中资源丰富.目的:探讨脐血单个核细胞培养前后神经细胞特有标志物的表达差异.地点与材料:研究地点为郑州大学医学院干细胞研究中心.材料为用肝素抗凝采血袋从郑州大学第一附属医院及第三附属医院产科无菌收集健康产妇足月孕娠顺产或剖宫产的要儿脐带血50~100 mL,充分混匀后,置保温盒中带回实验室.设计与方法:采用RT-PCR方法对脐血单个核细胞培养前后nestin,NF-M及MAP2 mRNA的表达进行检测.主要观察指标:脐血单个核细胞培养前后nestin,NF-M和MAP2 mRNA的表达.结果:nestin,NF-M及MAP2 mRNA在培养前后的脐血单个核细胞中表达呈阳性;同未培养的脐血单个核细胞相比,nestin,NF-M及MAP2mRNA在培养的脐血单个核细胞表达增强.结论:在直接分离的脐血单个核细胞中存在着神经(干)细胞;培养后,神经元样细胞增多,nesth,NF-M及MAP2 mRNA表达增强.
-
微管异常在心肌病发生中的作用机制
微管是由微管蛋白二聚体构成的中空管状结构.微管蛋白二聚体是微管的基本结构,由α、β-微管蛋白亚基头尾相连交替螺旋状排列而形成.微管大量存在于真核细胞的胞质中.微管作为一种细胞骨架的重要组成成份,参与细胞的多种活动,包括细胞形态的维持、胞内转运、纺锤体的形成、调节细胞的极性和参与鞭毛形成等.有多篇文献报道微管蛋白的修饰异常及微管相关蛋白调节异常均会引起微管的稳定性失衡.有文献报道微管稳定性的改变可能与心肌肥大、杜兴肌营养不良性心肌病、糖尿病心肌病的发生有关,但微管异常导致心肌病发生的具体机制尚不清楚.该文结合新的研究成果,对微管异常导致心肌病的发生机制作一综述.