促肝细胞生成素的工艺研究进展

促肝细胞生长素是一种由动物肝组织中提取的多功能生物活性多肽类物质,它参与多种细胞的增殖.迁移和形态发生.本文综合近年来有关文献,对促肝细胞生长因子的来源、结构、工艺研究及应用现状作概括性总结,为促肝细胞生长因子工艺的进一步研究和开发提供参考.

生长激素和肝细胞生长因子对大鼠肝大部切除后再生的影响

目的:了解肝大部分切除后再生过程中甲胎蛋白(α-FP)、端粒酶活性(TA)和肝脏组织学、肝功能的变化,探讨促肝细胞生长因子、生长激素治疗对肝细胞再生及甲胎蛋白、端粒酶活性和肝脏组织学、肝功能的影响.方法:选取体重200g左右大鼠36只并随机分成6组,其中组1进行肝大部分切除后生长激素(GH)治疗;组2进行肝大部分切除后应用肝细胞生长因子(HGF)治疗;组3仅进行肝大部分切除而不给予任何药物治疗;组4、组5、组6均不进行切除手术,但组4和组5分别给予生长激素、肝细胞生长因子治疗,组6则不给予任何治疗.1 wk后取材,再生肝组织端粒酶活性采用PCR-ELISA法检测,血清甲胎蛋白含量采用夹心ELISA法检测.另外,肝组织还作病理切片观察.结果:手术组TA,AFP,ALT,GGT值均显著高于非手术组(两组TA分别为1.33±0.26,0.496±0.054,P＜0.01;两组AFP分别为62.9±13.5μg/L,8.9±2.8μg/L,P＜0.01;两组ALT分别为1 204±0.57 nkat/L,61.11±15.48 nkat/L,P＜0.05;两组GGT分别为10.72±1.58 nkat/L,5.75±1.78nkat/L,P＜0.01),而手术组ALB则显著低于非手术组(分别为28.1±3.0g/L,31.4±2.3g/L,P＜0.01).组1的ALT显著高于组2和组6(三组ALT分别为82.16±18.5 nkat/L,60.83±7.96 nkat/L,66.67±11.02 nkat/L,P分别＜0.01,0.05),组2和组3的ALB显著低于组6(三组ALB分别为28.3±4.1g/L,26.9±2.3g/L,31.8±2.1g/L,P分别＜0.05,0.01).组1、组2和组3的TA(三组TA分别为1.56±0.18,1.38±0.10,1.04±0.12)及AFP值(三组AFP值分别为75.9±9.6μg/L,59.6±12.2μg/L,53.1±7.0μg/L)显著高于组4、组5及组6(三组TA分别为0.48±0.04,0.52±0.06,0.48±0.06)(三组AFP值分别为10.3±3.4μg/L,9.6±2.4μg/L,6.9±0.8μg/L)(两指标P值均＜0.01).组织病理学研究发现手术组的残肝和非手术组的肝脏大体组织形态学差异不大,而手术组的再生肝则无典型的肝小叶结构,但可见肝窦,且细胞排列较残肝和非手术组肝脏更密集.结论:促肝细胞生长因子、生长激素能显著促进肝细胞再生,并且促肝细胞生长因子有利于肝细胞膜的稳定性及肝功能的恢复,而生长激素有明显促进白蛋白合成的作用.

首乌片、养血生发胶囊同服引起肝炎

患者男,28岁.因乏力、纳差、尿黄15 d,于2003年4月11日收入我院.查体:皮肤巩膜中度黄染,全身皮肤未见皮疹、出血点,肝掌(-),未见蜘蛛痣.腹平软,肝脾肋下均未触及,腹水征(-).其余体征均阴性.实验室检查:ALT 1 898 U/L,AST 492U/L,T-Bil 53.9 μ mol/L,D-Bil 36.5 μ mol/L;甲、乙、丙、丁、戊型肝炎血清病毒学标志物检测均阴性;自身抗体检测均阴性;B超除外肝外梗阻和肝内占位性病变,也无慢性肝病的影像学改变.入院后给予护肝片、茵莲清肝合剂、还原型谷胱甘肽、清开灵、促肝细胞生长因子等药物治疗,4月29日肝功能好转出院.

HGF对原代培养大鼠肝细胞的作用

促肝细胞生长因子(Hepatocyte Growth Factor HGF)是从健康乳牛或猪肝脏中提取的多肽类物质，具有促进肝细胞生长的生理活性。临床主要将其用于肝病的治疗。本研究考察HGF对原代培养大鼠肝细胞的作用。现报告如下：

重症肝炎的促肝细胞生长因子疗法/尿路感染复发应如何治疗/为什么要降血脂/降血脂除了药物以外生活上要注意什么/血脂降到什么程度算达标/肝硬化病人恶心、腹胀、食少/甲状腺结节是癌吗/甲状腺结节的治疗/妊娠对慢性肾炎的影响/怎样预防脑卒中/丙型肝炎的新疗法

中西医结合治疗慢性病毒性肝炎疗效观察

目的 观察疏肝健脾祛湿解毒汤配合西药静滴治疗慢性肝炎的疗效.方法 慢性乙肝患者131例,随机分为治疗组66例和对照组65例,采用中西医结合治疗,疗程3周,观察用药前后临床症状及生化指标变化.结果 治疗组治愈率78.79%,总有效率95.45%;对照组治愈率50.77%,总有效率84.62%,治疗组明显优于对照组.结论 慢性病毒性肝炎用疏肝健脾祛湿解毒汤联合西药治疗肝功能恢复更快.

威佳-促肝细胞生长素注射液治疗重型病毒性肝炎的临床观察

重型肝炎来势凶险,病情复杂,病死率极高,近10 a来国内从人胎肝细胞输注疗法进一步发展起来的促肝细胞生长因子疗法已广泛应用于临床综合治疗重型肝炎并取得了一定疗效,总结自2000年以来应用山东威海赛洛金药业有限公司生产的威佳-促肝细胞生长素治疗重型肝炎的临床观察,总结如下:

促肝细胞生长因子对脓毒血症大鼠多器官损伤的保护作用

目的 探讨促肝细胞生长因子(HGF)对脓毒血症诱导的大鼠多器官损伤的保护作用.方法 将雄性SD大鼠分为对照组、假手术组、模型组、HGF治疗组、血红蛋白加氧酶-1(HO-1)抑制剂组及HO-1抑制剂+HGF治疗组.采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制大鼠脓毒血症模型.尾静脉注射给药,2次/d;HO-1抑制剂及HO-1抑制剂+ HGF治疗组于给予HGF后2h静脉注射锌原卟啉.术后72 h处死存活大鼠,取血清及主要脏器检测相关指标.结果 静脉注射HGF(75、150 μg/kg ·d)能够降低脓毒血症大鼠死亡率,显著降低血清IL-1β水平(P＜0.05)；明显改善脓毒血症对大鼠肺、肾和肠的病理改变,增强肺、肾和肠中SOD活性.HO-1抑制剂锌原卟啉可部分拮抗HGF的保护作用.结论 HGF对脓毒血症造成大鼠多器官损伤具有保护作用.

体内动员及诱导骨髓干细胞治疗大鼠糖尿病的疗效

联合应用表皮生长因子(EGF)与促肝细胞生长因子(pHGF)体内诱导动员后的自体骨髓干细胞,探讨能否使其转分化为胰岛素分泌细胞,观察该方法对链脲佐菌素(STZ)大鼠糖尿病的治疗作用.方法 40只SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、动员组及诱导组,每组10只,后3组均用STZ制做糖尿病大鼠模型,成模后动员组和诱导组皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子10μg· kg-1·d-1,连续15 d,对照组和糖尿病组注射生理盐水.诱导组于动员第2日腹腔注射EGF 1μg· kg-1· d-1、pHGF0.3 mg· kg-1·d-1,连续14 d；其他3组注射生理盐水对照.监测大鼠血糖、胰岛素水平,实验结束时免疫组化染色并计算胰腺中胰岛素阳性细胞百分比.结果 治疗后诱导组大鼠血糖明显低于糖尿病组及动员组(P＜0.05),血清胰岛素明显高于另外2组(P＜0.05),胰腺中胰岛素阳性细胞百分比明显高于另外2组(P＜0.01).结论 EGF联合pHGF体内可诱导动员后自体骨髓干细胞转分化为胰岛素分泌细胞,可以增加血浆胰岛素水平,降低血糖,治疗大鼠糖尿病.

肝细胞生长因子与肝纤维化关系研究进展

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种血源性促肝细胞生长因子,初是作为一种对成熟肝细胞有明显促生长作用的细胞因子被发现.其具有多种生物学功能,许多实验研究表明,它不仅能促进肝功能的恢复,而且也可以改善肝纤维化.本文将近年来HGF在肝纤维化方面的研究进展综述如下:

Notch-1蛋白在诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化中的表达

目的 探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、成纤维生长因子-4(fibroblast growth factor-4,FGF-4)和间接共培养条件下诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞定向分化可行性及Notch信号系统在此分化过程中作用.方法 分别采用含有HGF、FGF-4条件诱导液单独培养骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,B MSC)以及Transwell培养板联合培养MSC和肝细胞,同时加入Notch-1蛋白抑制剂DAPT,通过免疫细胞化学检测白蛋白和Notch-1蛋白表达,RT-PCR检测Notch-ImRNA表达.结果 条件诱导液培养第9天免疫细胞化学染色出现白蛋白表达,Notch-1蛋白及Notch-ImRNA表达降低;联合培养组第3天免疫细胞化学染色出现白蛋白表达,Notch-1蛋白及Notch-1mRNA表达降低.加入DAPT抑制Notch信号系统,提高诱导分化率.结论 在一定诱导因素作用下,骨髓间充质干细胞可以向肝细胞转化,而且转化的肝细胞具有合成白蛋白功能.在此转化过程中Notch信号系统起到关键作用.

促肝细胞生长素及其类似物的生物活性研究

目的研究促肝细胞生长素(pHGF)对肝细胞及肝星状细胞生物活性的影响.方法以人肝细胞株及大鼠肝星状细胞株为研究靶细胞,采用MTT法研究pHGF对细胞增殖活性的影响,放免法检测透明质酸(HA),细胞基因转染结合报告基因测活检测Ⅰ型胶原基因转录活性的变化,SDS-PAGE分析pHGF主要成分.结果 pHGF具有明确促进肝细胞增生及抑制肝纤维化主要形成细胞肝星状细胞系增殖的作用,能抑制细胞外间质成分HA的产生,抑制Ⅰ型胶原基因启动子样活性.研究的12种pHGF中仅1种在15% SDS-PAGE中具有明确的蛋白条带.结论 pHGF具有促进肝细胞再生及抗纤维化作用,结构-功能关系需进一步研究.

一种促肝细胞生长因子活性测定方法

目的　 建立一种新的促肝细胞生长因子(HGF)活 性测定 方法。方法　用原位灌流胶原酶制备大鼠肝细胞,经1.5 h预培 养，将HGF加至培养上清，再经 1.5 h孵育后，用溴化四唑蓝(MTT)比色法 测定细胞存活和增殖率。结果　571～ 1 142 μg/m1 HGF显著 提高细 胞存活和增殖率，1 142 μg/m1 HGF使A比值（AHGF／A对照)大 于 2。结论　此方法省时、稳定、重现性好，适用于HGF活性 测定。

促肝细胞生长因子活性检测方法比较

目的比较3种可用于促肝细胞生长因子(HGF)活性检测方法的优劣,以确定HGF活性的常规检测方法.方法以人肝癌细胞HepG2为材料,分别用3H-TdR掺入法、四甲基偶氮唑蓝比色法和XTT-PMS法检测HGF的生物活性,比较线性相关系数(r)和大刺激指数(SI)及3种方法操作的简便性.结果 MTT法的灵敏度(SI=3.65)与准确度(r=0.91)均较差;XTT-PMS法虽然灵敏度(SI=7.72)不如3H-TdR掺入法(SI=23.19),但准确度(r=0.98)佳,操作为简便.结论 3种方法中,XTT-PMS法如以标准品校正,可作为HGF活性常规检测的首选方法.

成功救治重症口服二甲苯中毒一例

近，我科救治重症口服二甲苯中毒患者一例获得成功，报告如下。 患者女，42岁，今年4月9日因口角后自服二甲苯50ml，发现后给予肥皂水口服催吐，因腹胀加重于外院就治，胃肠减压引流出咖啡样液体1500ml，血压逐渐下降而转来我院。患者工作中有二甲苯接触史，平时血小板为70～80×109／L。入院时：T37 ℃，P90／分，R20／分，BP120／75mmHg；神清，巩膜轻度黄染，未见出血点与瘀班，心肺正常，除右上腹轻压痛外余无明显异常，给予护肝、抑酸止血治疗。入院第二天患者病情加重，体温为38.5℃，黄疸加深，胃管引流出暗红色血液及解黑便，血压降至88／60mmHg，血小板由78×109／L降至4.0×109／L，WB C2.9×109／L，Hb77g／L，肝功能明显异常：ALT962U、AST1 526U、Tbili230μmol／L、A／G2.6／0.9；同时出现手臂部皮下瘀班及血尿，PTT延长5.5秒，INR为1.87，但肾功能正常。随即给予新鲜血4 0 0ml，血小板10单位，并静点地塞米松10mg、甘力欣150mg、古拉啶1200 mg及促肝细胞生长因子，补充大量VitC，后血小板升至78×109／L，WBC 6.2×109／L，Hb98g／L。第四天胃管引流已无血性液体，血压稳定，无血尿；第六天停胃肠减压；第八天肝功能明显改善：ALT304U、AST86U、Tbi li36μmol／L；入院后第十四天自觉良好，肝功能轻度异常：ALT221U、A ST77U、Tbili29μmol／L、A／G3.6／2.2，血小板128×10 9／L，两天后出院。出院后两周复查肝功能正常。

重复水高压注射介导hHGF表达载体在小鼠体内的持续高效表达

目的 构建hHGF表达载体并通过水高压注射法研究hHGF在小鼠体内的持续表达.方法 从慢性乙型肝炎患者肝组织提取总RNA,RT-PCR扩增出hHGF基因的cDNA片段,将目的 片断克隆至pMD18-T载体,酶切和测序鉴定,然后将目的片断酶切回收后插入pcDNA3.1质粒,构建真核表达载体pcDNA-hHGF,通过重复水高压注射法将pcDNA-hHGF导入小鼠肝脏,并在首次水高压注射后第0、3、6、9、12、15、18和21天分别收集小鼠血清和肝组织,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测hHGF在小鼠体内的表达情况.结果 扩增出了长约2187bp的基因片段,并将其克隆至pMD18-T载体,酶切和测序鉴定无误;将pMD-hHGF中hHGF基因亚克隆至pcDNA3.0载体,酶切鉴定无误;首次水高压注射后不同时间检测外周血和肝脏均有hHGF的高水平表达.结论 成功构建了hHGF真核表达载体pCMV-hHGF,重复水高压注射法可将该基因导入小鼠肝脏并获得持续高效的表达.

血浆置换术治疗重型肝炎23例护理体会

重型病毒性肝炎(以下简称重肝)病情危重,发展变化快,并发症多,预后不良.2001年4月～2002年6月,我院共对23例重肝患者行血浆置换术(通过血浆分离器滤出并丢弃含有毒素及有害物质的血浆,补充等量健康人的血浆,为患者提供必要的生物活性物质如凝血因子、白蛋白、调理素、促肝细胞生长因子等),取得满意效果.

促肝细胞生长因子治疗肝炎后肝硬化的效果

自2000年以来我们应用促肝细胞生长因子(HGF)治疗120例乙型肝炎后肝硬化,现报告如下.1资料与方法1.1一般资料所选治疗对象均为本院收治的肝硬化患者,均符合2000年全国肝炎会议肝硬化诊断标准.治疗组120例,男96例,女24例,年龄19～57岁,病程1～12年.疾病程度按Child-pugh分级:A级56例、B级43例、C级21例.对照组60例,男44例,女16例,年龄18～59岁,病程1～11年.Child-pugh分级:A级28例、B级21例、C级11例.两组年龄、性别、病程及病情程度分级,均无显著性差异(P>0.05).

促肝细胞生长因子防治缺血性肾损伤18例

促肝细胞生长因子(HGF)临床上常用于治疗肝细胞坏死,我们将其用于肾缺血引起的肾损伤,预防急性肾功能衰竭起到了较好的作用,报道如下:

促肝细胞生长因子对病毒性肝炎疗效观察

目的:观察促肝细胞生长因子(肝复肽)治疗有重型肝炎倾向的病毒性肝炎的疗效.方法:确定有重型肝炎倾向的病毒性肝炎患者,随机分为治疗组和对照组.治疗组在对照组综合治疗的基础上加用促肝细胞生长因子60～100 mg溶于5%葡萄糖溶液250 mL中静脉滴注,观察两组疗效.结果:治疗组显效55.3%,无效5.3%,对照组显效23.3%,无效20.0%,两组差异有显著性(P＜0.05),住院时间短于对照组(P＜0.05).结论:促肝细胞生长因子治疗有重型肝炎倾向的病毒性肝炎,可预防和控制重型肝炎的发生,改善预后.