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表达重组人可溶性TRAIL的毕氏酵母发酵工艺
目的优化rhsTRAIL毕氏酵母工程菌在5 L发酵罐中的发酵表达工艺参数.方法研究培养基种类、细胞密度、甘油含量、pH值、甲醇浓度、甲醇流加速率及诱导时间等参数对工程菌生长及目的蛋白表达的影响,并用电镜观察其诱导肿瘤细胞凋亡特征.结果在无机盐培养基中,按10%接种A600=8～12的种菌后,24h酵母菌增殖至A600=76;甘油含量为1%时,菌体生长速度快(A600=160);培养基pH值5.0,甲醇终浓度为1%时,诱导96h表达量高达到120 mg/L,并具有诱导肿瘤细胞凋亡特征.结论rhsTRAIL毕氏酵母的发酵工艺参数为:无机盐培养基,pH值5.0,接种10%A60o=8～12的种菌,甘油含量1%,甲醇终浓度1%,诱导96h.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 发酵 毕氏酵母 -
Pichia酵母表达重组人可溶性TRAIL的纯化与生物活性
目的分离纯化Pichia酵母表达的重组人可溶性TRAIL,并检测其生物活性.方法以Pichia酵母分泌型表达TRAIL,采用硫酸铵沉淀和柱层析纯化可溶性TRAIL蛋白.以SDS-PAGE、ESI-MS和Western blot法鉴定其纯度及特异性.以细胞透射电镜、DNA Ladder和MTT法检测其诱导肿瘤细胞凋亡活性.结果目的蛋白以可溶形式存在,蛋白相对分子质量22 000,纯化后纯度95%.Western blot证实为TRAIL蛋白.电镜、DNA Ladder和MTT均证实其具有诱导肿瘤细胞凋亡活性.结论 Pichia酵母表达rhsTRAIL可用柱层析法纯化,并具有诱导肿瘤细胞凋亡的生物活性.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 Pichia酵母 生物活性 -
重组2型腺相关病毒肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因治疗制剂的质量分析
目的 对重组2型腺相关病毒肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(recombinant adeno-associated virus 2 encoding tumor necrosis factor-related apoptosis-induced ligand,rAAV2-TRAIL)基因治疗制剂进行质量分析,并针对其关键质量属性建立质控方法.方法 采用PCR法对rAAV2-TRAIL基因治疗制剂中插入的启动子CAG和目的基因TRAIL进行鉴别;在腺病毒(Ad5)的辅助下,将rAAV2-TRAIL体外感染293T细胞后,采用ELISA法检测培养上清中目的蛋白TRAIL的表达量,检测rAAV2-TRAIL对神经胶质瘤U251细胞的体外杀伤活性;设计引物及探针,采用Q-PCR法检测rAAV2-TRAIL基因治疗制剂中的rAAV2-TRAIL滴度、可能存在的复制型rcAAV滴度以及残余辅助病毒1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1,HSVl)滴度.结果 启动子CAG和目的基因TRAIL的PCR鉴定结果与理论及理化对照品相符;rAAV2-TRAIL感染293T细胞48 h后,上清中TRAIL表达量为(0.36±0.18) ng/ml,RSD为50.0％;rAAV2-TRAIL体外作用于神经胶质瘤细胞U251,细胞生长相对抑制率为(26.6±3.75)％,RSD为14.1％;制剂中rAAV2-TRAIL滴度为(4.72×1011±0.52×1011) copies/m1,RSD为11.0％,rcAAV滴度为(2.49×107±0.18×107) copies/ml,RSD为7.2％,HSV1滴度为(6.02×106±0.51×106) copies/ml,RSD为8.5％.rAAV2-TRAIL/rcAAV为1.90×104,rAAV2-TRAIL/HSV1为7.84× 104.结论 建立的质控方法可用于rAAV2-TRAIL的质量控制,为该产品质量标准的建立奠定了基础,同时对以AAV为载体的基因治疗制剂的质量研究提供参考.
关键词： 腺相关病毒 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 基因治疗 质量控制 -
抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段单克隆抗体的制备
目的 制备抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)的单克隆抗体.方法 用重组sTRAIL免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/O细胞融合.捕获ELISA筛选阳性克隆,制备腹水抗体.间接ELISA测定单抗效价,并进行单抗亚类、特异性鉴定及杂交瘤细胞染色体和单抗识别位点分析.将杂交瘤细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后.检测细胞培养上清的效价.结果 3株杂交瘤细胞分泌的单抗均为IgG1型,腹水单抗效价均高于10~(-6),杂交瘤细胞染色体数介于94～98条之间,均识别sTRAIL分子上线性表位.细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后的上清效价保持稳定.结论 已成功制备了3株町稳定分泌抗sTRAIL单克隆抗体的杂交瘤细胞,为TRAIL的定性定量检测及组织表达分析奠定了基础.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 胞外区 单克隆抗体 捕获ELISA -
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在多种疾病中的生物学作用
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Apo2L/TRAIL)是肿瘤坏死因子家族的一员,可以诱导表达特异性死亡受体TRAIL-R1 (DR4)或TRAIL-R2 (DR5)的细胞凋亡.TRAIL可诱导多种肿瘤细胞凋亡,对正常细胞无杀伤性,因此将其作为抗肿瘤靶向治疗候选药物之一,备受关注.近期研究发现,TRAIL既通过其受体介导细胞凋亡信号通路,又可传导非凋亡的信号通路,在自身免疫病和感染性疾病中发挥重要生物学作用.因而简单阐明TRAIL在人类多种疾病中生物学作用的研究进展,对今后TRAIL研究方向和治疗策略的选择具有指导意义.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 肿瘤 自身免疫病 感染性疾病 生物学作用 -
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及抗肿瘤作用
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员之一,能选择性的诱导肿瘤细胞、转化细胞凋亡,而对正常组织无毒性,有望成为肿瘤治疗的新方法,备受人们的关注.本文从TRAIL的结构、受体、诱导肿瘤细胞凋亡机制及在肿瘤治疗中的应用等方面作了介绍,以期为了RAIL临床应用提供参考.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 细胞凋亡 肿瘤治疗 -
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因1525位点的多态性与结节性甲状腺疾病的关系
目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因(TRAIL)1525位点多态性与结节性甲状腺疾病的关系.方法 125例甲状腺疾病患者来自于内蒙古包头医学院第一附属医院内分泌科,其中结节性甲状腺肿(结甲)患者67例,甲状腺腺瘤患者58例.患者中男54例、女71例,平均年龄为(41.05±14.42)岁.结甲患者接毒性或非毒性进行分组,甲状腺腺瘤患者按高功能或非高功能分组.正常对照人群100例,来自本院同期体检者,其中男47例,女53例,平均年龄为(42.35±16.52)岁.根据知情同意的原则,采集两组人群的静脉血,采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RLFP)方法进行TRAIL基因多态性测定,计算TRAIL基因的基因型(纯合子GG、杂合子GA、突变纯合子AA)和等位基因频率(G、A),比较相对风险度(比值比,OR).结果 结甲组TRAIL基因1525位点基因型(GG:40.3％,AG:44.8％,AA:14.9％)、等位基因频率(G:62.7％,A:37.3％)与对照组(GG:17.0％,AG:65.0％,AA:18.0％;G:49.5％,A:50.5％)比较,差异有统计学意义(x2值分别为11.376、5.633,P＜0.01或＜0.05)；腺瘤组1525位点基因型(GG:44.8％,AG:38.0％,AA:17.2％)、等位基因频率(G:63.8％,A:36.2％)与对照组比较,差异有统计学意义(x2值分别为15.342、6.054,P＜0.01或＜ 0.05).结甲组TRAIL基因1525位点等位基因频率风险度与对照组的比较,OR=1.714(P＜ 0.05),95％可信区间(CI):1.097 - 2.679;腺瘤组TRAIL基因1525位点等位基因频率风险度与对照组的比较,OR=1.797(P＜0.05),95％CI:1.124～2.874.毒性与非毒性结节组、高功能与非高功能腺瘤组TRAIL基因1525位点基因型、等位基因频率比较,差异无统计学意义(x2值分别为3.714,2.792;1.103,2.020；P均＞0.05).结论 TRAIL 基因1525位点多态性与结节性甲状腺疾病发生关系密切.
关键词： 甲状腺结节 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 基因频率 多态性 限制性片段长度 -
TRAIL抑制人喉鳞癌裸鼠动物模型的实验研究
发展存在着抑制作用.其作用可能是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的.
关键词： 喉肿瘤 癌 鳞状 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 裸小鼠 -
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在外周血单个核细胞中的表达
目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其意义.方法:用免疫组织化学的方法检测PBMC中TRAIL的表达情况.结果:淋巴细胞分离液得到的PBMC中,淋巴细胞占(97.48±3.43)%,单核细胞占(3.15±0.83)%,TRAIL免疫反应阳性的淋巴细胞占总数的(26.31±3.18)%,呈TRAIL免疫反应阳性的单核细胞占总数的(1.04±0.13)%,TRAIL免疫反应阳性物质分布于胞质内,核呈阴性反应.结论:正常人外周血分离的淋巴细胞及单核细胞有TRAIL表达.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 外周血单个核细胞 免疫组织化学 -
TRAIL基因修饰的树突状细胞诱导黑色素瘤细胞凋亡的实验研究
为研究TRAIL基因修饰的树突状细胞诱导黑色素瘤细胞凋亡的作用,研究用携带TRAIL基因的重组腺病毒转染小鼠来源的树突状细胞(dendritic cell,DC),采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测DC TRAIL蛋白的表达水平;将DC-TRA IL与B16黑色素瘤细胞混合培养,显微镜观察细胞生长情况,FCM检测B16细胞的凋亡情况;构建小鼠黑色素瘤模型,分别将DC-TRAIL、DC和PBS皮下注射于肿瘤接种部位,观察小鼠的瘤体生长情况,测量瘤体的体积.结果显示:用Ad-TRAIL转染DC后DC可高表达TRAIL.DC-TRAIL组与DC组相比可明显诱导肿瘤细胞凋亡.用DC-TRAIL、DC和PBS处理黑色素瘤移植小鼠2周后,发现DC-TRAIL组小鼠平均肿瘤体积为(0.33±0.10) cm3,DC组小鼠平均肿瘤体积为(1.32±0.29) cm3,PBS组小鼠平均肿瘤体积为(3.01±0.52) cm3.与DC组和PBS组相比,DC-TRAIL组可明显抑制肿瘤生长.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 树突状细胞 黑色素瘤 -
原发性胆汁性肝硬化患者外周血TRAIL基因表达水平初探
目的 建立检测人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA的实时荧光相对定量方法,探讨其基因表达与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性.方法 基于TaqMan-MGB探针技术,以β-actin基因为内参照,通过目的 基因与内参基因荧光强度达到一定阈值时的循环数之差,即△Ct值定量原始模板浓度,建立实时荧光逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)相对定量方法,检测30例PBC患者、25例乙型肝炎(简称乙肝)后肝硬化患者及30名正常人外周血单个核细胞(PBMC)TRAIL基因的表达,同时检测血浆τ-谷氨酰转肽酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP)浓度,并作相关性分析.结果 PBC患者PBMC TRAIL基因检测的ACt值为2.4±1.2,其相对表达量是正常对照组的6.96倍,差异有统计学意义(P＜0.05),乙肝后肝硬化患者TRAIL基因△Ct值为3.3±1.7,其相对表达量是正常对照组的3.73倍,差异有统计学意义(P＜0.05),而PBC组与乙肝后肝硬化组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).PBC患者TRAIL的△Ct值与GGT浓度的对数值呈显著相关(r=-0.396,P＜0.05).结论 PBC患者及乙肝后肝硬化患者PBMC TRAIL基因表达水平明显升高,提示TRAIL在自身免疫性肝病及肝脏病毒损伤中均具有重要作用.
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血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体检测的临床意义
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL)是TNF超家族成员之一，其早由Wiley等[1]于1995年从人心肌cDNA文库中克隆并命名。TRAIL具有膜结合型和可溶型（sTRAIL)2种形式，在金属蛋白酶作用下，可被水解形成sTRAIL，sTRAIL保留了死亡受体结合域及功能域，与膜型TRAIL具有相同的生物学活性。目前大量研究表明，在自身免疫性疾病、肝病、感染、肿瘤等多种疾病中，血清sTRAIL 水平可发生明显变化，考虑其可能参与了多种疾病的发生、发展，而测定血清sTRAIL水平，不仅可发现其参与某些疾病的发病机制，也可成为反映疾病病情、评估疗效、预测疾病预后的重要指标。
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 检测 临床意义 -
携带TRAIL的溶瘤腺病毒治疗三阴性乳腺癌的研究
目的:构建携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)基因的溶瘤腺病毒p55-hTERT-HRE-TRAIL,评估该病毒在体外和体内对三阴性乳腺癌的杀伤能力.方法:将质粒p55-hTERT-HRE与pPE3-TRAIL通过Lipofectamine 2000共转染至人胚肾293细胞,获得溶瘤腺病毒p55-hTERT-HRE-TRAIL;采用病毒体外增殖实验观察乳腺癌细胞株MDA-MB-231和人正常乳腺细胞株MCF-10A中的增殖情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法比较不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)的病毒对两种细胞的抑制效应;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测病毒感染细胞后上清液中TRAIL的含量,采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测细胞内TRAIL蛋白的表达.建立三阴性乳腺癌的原位成瘤模型及左心室注射模拟转移瘤裸鼠模型,应用“活体内光学成像系统”动态观察肿瘤的生长及转移情况.结果:p55-hTERT-HRE-TRAIL感染乳腺癌细胞株后表现出强大的增殖、复制能力,而在人正常乳腺细胞株内增殖并不明显;很低浓度的p55-hTERT-HRE TRAIL就对乳腺癌细胞产生明显的杀伤效应,而对正常乳腺细胞没有明显的杀伤作用;p55-hTERT-HRE-TRAIL感染乳腺癌细胞后,TRAIL蛋白的表达明显增多,而感染正常乳腺细胞后表达的TRAIL维持在较低的水平.乳腺癌原位成瘤模型中,空白对照组的光子数多于其他各组,肿瘤体积大于其他各组(P＜0.05).左心室注射模拟转移瘤模型中,对照组活体内光学成像与TRAIL治疗组差异有统计学意义,TRAIL治疗组的生存天数延长(P＜0.05).结论:成功构建高滴度的溶瘤腺病毒p55-hTERT-HRE-TRAIL,该病毒在乳腺癌细胞中具有特异性增殖并杀伤肿瘤细胞的能力.
关键词： 溶瘤腺病毒 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 乳腺癌 -
TRAIL及其受体促凋亡机制与消化道肿瘤治疗的前景
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)因其选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特点而受到关注.TRAIL促肿瘤细胞凋亡的机制及其受体对它的调控机制尚在探索中.目前,TRAIL及其受体已被广泛运用于消化道肿瘤的治疗研究中,不同的消化道肿瘤细胞株对TRAIL诱导的凋亡敏感性不同,某些细胞株对TRAIL耐药.克服肿瘤细胞对TRAIL的耐药,同时保护正常细胞免受伤害,充分发挥TRAIL选择性杀伤肿瘤细胞的优点,将使TRAIL在抗癌方面发挥积极的作用.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 凋亡 胃肠道肿瘤治疗 -
瘦素对TRAIL诱导大鼠肝星状细胞凋亡的影响及机制研究
目的：了解瘦素对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导肝星状细胞（HSC）凋亡的影响及调控机制。方法MTT比色法、流式细胞术检测瘦素对外源性TRAIL诱导HSC-T6细胞增殖和细胞凋亡的影响；采用Western印迹检测信号传导与转录激活因子3（STAT3）、磷酸化STAT3（pSTAT3）、Bcl-2。结果TRAIL抑制HSC-T6细胞增殖、诱导HSC-T6细胞凋亡，而瘦素使TRAIL诱导的HSC-T6细胞凋亡明显减少（P＜0．05）；当TRAIL诱导HSC-T6细胞凋亡时加入瘦素，pSTAT3、Bcl-2表达上调。结论瘦素可以使外源性TRAIL诱导的HSC-T6细胞凋亡减少，可能与瘦素促使STAT3磷酸化，Bcl-2表达上调有关。
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TRAIL体外诱导人肝星形细胞LX-2 凋亡作用及调控机制
目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝星形细胞凋亡情况及调控机制.方法 用RT-PCR检测LX-2中α-SMA mRNA和DR5 mRNA的表达;MTT比色法、流式细胞术检测外源性TRAIL对LX-2细胞增殖和诱导细胞凋亡的影响;采用Western blot检测Bax、Caspase3表达.结果 培养的LX-2表达α-SMA mRNA和DR5 mRNA逐渐增加,TRAIL可以抑制其细胞增殖,与剂量相关(P<0.05).与对照组比较,TRAIL诱导活化的LX-2细胞凋亡明显增加(P<0.05),Western blot分析显示TRAIL作用下,LX-2线粒体Bax、细胞质Caspase3表达上调.结论 外源性TRAIL可以诱导活化的LX-2凋亡,其机制与DR5及线粒体Bax表达上调有关.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 肝星形细胞 细胞凋亡 线粒体 Bax -
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在肺动脉高压发病中的潜在作用
肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL),即Apo2配体(Apo2 ligand,Apo2L),属于TNF家族配体超家族.TRAIL与TNF家族其他配体成员Fas配体(FasL)、TNF-α具有较 高序列同源性,都可以诱导细胞凋亡.TRAIL只诱导肿瘤细胞、转化细胞及病毒感染细胞凋亡,却不会引起正常细胞凋亡,这是其大的生物学特点.随着研究深入,TRAIL在心血管疾病中的作用逐渐被发现,但是其主要的信号通路和分子机制尚未明了.本文就TRAIL在肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)发病中的潜在作用作一综述.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 肺动脉高压 血管内皮细胞 血管平滑肌细胞 -
XAF1增强TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的实验研究
背景:肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性诱导肿瘤细胞凋亡.X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新型抑癌基因,在肿瘤细胞中呈低表达.目的:研究XAF1联合TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的作用.方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、对照病毒Ad5/F35-Null,分别以相同感染复数(M01)感染人结肠癌细胞株HCT116,并设立空白对照组,感染4h后加入重组入TRAIL (rhTRAIL).以RTPCR法检测XAF1 mRNA表达；以蛋白质印迹法检测XAF1、PARP、caspase-3、-8、-9蛋白表达；以Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率；以MTT法检测细胞增殖抑制率.结果:Ad5/F35-XAF1组和TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组XAF1 mRNA和蛋白表达显著高于其余各组.TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组PARP、caspase-3、-8、-9蛋白可见明显凋亡裂解带,其余各组未见明显裂解带.Ad5/F35-XAF1组、TRAIL组、TRAIL+ Ad5/F35-Null组、TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组细胞凋亡率较空白对照组和Ad5/F35-Null组显著增加(P＜0.05),以TRAIL+ Ad5/F35-XAF1组增加为显著.TRAIL+ AdS/F35-XAF1组HCT116细胞增殖抑制率显著高于TRAIL组和TRAIL+ Ad5/F35-Null组(P＜0.05),并呈浓度和时间依赖性.结论:XAF1可增强TRAIL诱导的HCT116细胞凋亡和抑制增殖的作用.
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可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体重组腺病毒载体的构建及其在肝癌细胞株中的表达
背景：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)能诱导30余种人类肿瘤细胞凋亡．在抗肿瘤治疗中具有广阔应用前景.目的:构建携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体,鉴定其在肝癌细胞株中的表达.方法:以重叠延伸聚合酶链反应(PCR)扩增白细胞介素(IL)-2信号肽和TRAIL膜外区融合片段,克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV．转化含复制缺陷型腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌pAdBJ5183,经细菌内同源重组产生重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL,以脂质体法转染HEK293细胞包装病毒,感染肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达.结果:成功构建了携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体.病毒感染HepG2细胞48 h后．超过95％的细胞中出现绿色荧光.结论:所构建的复制缺陷型重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL可在肝癌细胞中高效表达可溶性TRAIL．为进一步行肿瘤TRAIL基因治疗提供了实验依据.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 自细胞介素2 腺病毒科 复制缺陷 遗传载体 -
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导胃癌细胞凋亡机制的研究
背景:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)可诱导不同胃癌细胞株的凋亡,但凋亡的途径尚不清楚.目的:通过研究TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的作用机制,为TRAIL的临床应用提供理论依据.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测SGC-7901胃癌细胞TRAIL受体(TRAILR),包括死亡受体TRAILR1、TRAILR2和诱惑受体TRAILR3、TRAILR4的表达;应用免疫组化法检测SGC-7901胃癌细胞Bcl-2和caspase-3的表达,并观察两者在不同浓度(50 ng/ml和500 ng/ml)的TRAIL处理后的变化.结果:SGC-7901胃癌细胞仅表达TRAILR1和TRAILR2,不表达TRAILR3、TRAILR4.TRAIL可引起SGC-7901胃癌细胞Bcl-2阳性表达,不同浓度的TRAIL作用12 h、24 h、48 h其表达无影响;与对照组比较,不同浓度的TRAIL作用24 h后SGC-7901胃癌细胞caspase-3表达均有显著增加(P<0.01).结论:TRAIL诱导胃癌细胞凋亡是因胃癌细胞仅表达TRAILR1、TRAILR2,不表达TRAILR3、TRAILR4.TRAIL是通过TRAILR1、TRAILR2增加细胞内caspase-3的表达而导致胃癌细胞凋亡,其诱导胃癌细胞凋亡的作用不受Bcl-2的影响.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 胃肿瘤 细胞系 细胞凋亡 逆转录聚合酶链反应
