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异甘草素对Nrf2基因敲除/野生型小鼠肝脏小分子代谢物谱的影响
目的 探讨异甘草素(Iso)通过Nr f2防御通路对小鼠肝脏代谢谱的影响.方法 将12只野生型小鼠和12只Nrf2基因敲除小鼠分别分为空白对照组和Iso组,各6只.Iso组以25 mg/(kg·d)灌胃,空白对照组给予同体积的0.5％ CMC-Na,灌胃给药3d后,处死小鼠,取肝组织,采用GC-MS法分析各组小鼠肝脏组织代谢图谱,利用化学计量学方法筛选组间差异代谢物.结果 筛选得到了组间差异代谢物,经文献分析这些代谢物与Nrf2防御通路相关.结论 利用代谢组学技术获得的小分子差异代谢物能够用于探讨Iso与Nrf2通路的关系.
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异甘草素抗肿瘤作用机制及其结构修饰研究进展
异甘草素抗肿瘤活性广泛,机制明朗,修饰物活性增强,具有抗肿瘤新药的开发潜力.本文综述了近年异甘草素的抗肿瘤作用机制及其结构修饰研究进展,总结出异甘草素7种抗肿瘤作用机制和3个方面的结构改造,为该类化合物的抗肿瘤新药研发奠定基础.
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异甘草素预处理对老龄大鼠全身麻醉后认知功能及相关脑区蛋白表达的影响
目的 探讨异甘草素预处理对老龄大鼠全身麻醉后认知功能及相关脑区蛋白表达的影响.方法 将30只老龄雄性SD大鼠随机分为对照组、手术组、预处理组,每组10只.对照组大鼠不给予任何处理;手术组大鼠腹腔注射75 mg/kg氯胺酮+5 mg/kg咪达唑仑进行麻醉,并行剖腹探查术;预处理组大鼠给予15 mg/kg异甘草素灌胃,60 min后进行麻醉及剖腹探查,方法同手术组.麻醉苏醒1d后采用水迷宫法评价各组大鼠的学习记忆能力,蛋白质印迹法检测大鼠海马、前额叶皮层和伏隔核中磷酸化环磷酸腺苷结合蛋白(p-CREB)、即刻早期基因c-fos蛋白的表达水平.结果 与手术组比较,对照组及预处理组的逃避潜伏时间缩短,目标象限停留时间延长(P<0.05),相关脑区p-CREB、c-fos的蛋白表达水平升高(P<0.05);预处理组与对照组以上指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 异甘草素能够改善老龄大鼠全身麻醉后学习记忆能力,这可能与其改善老龄大鼠相关脑区p-CREB、c-fos的蛋白表达水平有关.
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异甘草素抗肿瘤作用机制中相关信号通路的研究进展
异甘草素是从甘草根的水解产物中分解出的一种黄酮类成分,具有多种潜在的药用价值,相关研究发现异甘草素在肝癌、胃癌、黑色素瘤、前列腺癌、口腔鳞状上皮癌、宫颈癌等癌症中具有明显的生长抑制作用,这与异甘草素抗肿瘤相关的信号通路的相互作用有密切关系,而了解这些信号通路可进一步探查异甘草素抗肿瘤细胞的作用机制,为其早日运用于临床发挥其抗肿瘤作用奠定一定的理论基础.
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异甘草素保护创伤性脑损伤大鼠神经功能的实验研究
目的 观察异甘草素对创伤性脑损伤大鼠神经功能的影响.方法 先对大鼠建立脑损伤模型,按随机数字表法随机分成假手术组、脑损伤组、异甘草素组,假手术组、脑损伤组予等量0.9％氯化钠注射液灌胃,异甘草素组予20 mg/kg药物灌胃治疗,1周后处死,均终点法检测过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、酶联免疫吸附法测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,观察在以上指标变化情况.结果 异甘草素组SOD、MDA、Feeney评分、TNF-α、IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-10分别为(123.77±9.35) U/mg、(3.27±1.15) U/mg、(2.12±0.43)分、(38.74±2.35) pg/mg、(106.24±9.13) pg/mg、(83.46±7.24) pg/mg、(367.69±36.13) pg/mg、(417.35±25.35) pg/mg,和其他两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);在组织形态学上,表现为脑皮层损伤灶细胞数明显增多,伤口肉芽组织填平,软脑膜已经形成,且和正常脑组织入脑膜相续,半透明水肿带交窄,水肿带局限在损伤灶底部,与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 异甘草素能保护创伤性脑损伤大鼠神经功能,可能和降低氧化应激和调节脑组织细胞因子有关.
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异甘草素固体脂质纳米粒包封率测定方法的研究
目的:建立异甘草素固体脂质纳米粒(ISO-SLN)包封率测定方法.方法:采用透析法分离样品中的游离药物及载药固体脂质纳米粒,并确定透析介质和透析时间;紫外分先光度法测定包封率,检测波长为396nm.结果:以2%泊洛沙姆188水溶液为透析介质、透析时间为8h,能有效分离ISO-SLN与游离ISO,加样回收率大于95%;ISO检测浓度线性范围为1.12～7.84 μg·mL-1(γ=0.999 5),低、中、高浓度平均回收率为99.54%、99.11%、100.2%,RSD均小于5%;3批ISO-SLN平均包封率为80.2%.结论:所建立的方法可用于测定ISO-SLN包封率,且方法准确、简便.
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HPLC法同时测定炙甘草汤中甘草苷、甘草素、异甘草素的含量
目的:建立同时测定炙甘草汤中甘草苷、甘草素、异甘草素含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为WatersSunfire C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5％冰醋酸(50:50,V/V),检测波长为278 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果:甘草苷、甘草素、异甘草素的检测浓度分别在1.2～24.0、64.0～1 280.0、50.0～1 000.0 μg·mL-1范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 8、0.999 9、0.999 9)；三者平均加样回收率分别为100.38％、99.45％、97.46％,RSD分别为0.45％、0.53％、0.96％(n=6).结论:该方法准确、可靠,可为炙甘草汤的质量控制提供检测依据.
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甘草中异甘草素和甘草素含量测定方法研究
目的：建立同时测定甘草中异甘草素和甘草素含量的方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）等度洗脱和检测波长时间序列采样的方法，流动相为甲醇-水=(45：55)，检测波长0~25 min 时为276 nm，25~70 min 时为360 mn，流速为0.8 mL / min，同时测定甘草中异甘草素和甘草素的含量。结果异甘草素和甘草素进样量线性范围分别为0.028~0.28μg 和0.064~0.64μg，平均加样回收率分别为97.92%和98.27%，RSD 分别为1.29%和1.67%。结论该方法准确、灵敏度高、重现性好、操作简单，可为甘草药材的质量评价提供参考。
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异甘草素诱导人宫颈癌细胞增殖的影响及作用机制的研究
目的 研究异甘草素(ISL)抑制宫颈癌Hela细胞增殖作用及促进细胞凋亡的作用机制.方法 采用 0.025、0.050、0.100、0.200、0.300、0.400 mg/mL浓度ISL处理HeLa细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色 法检测HeLa细胞增殖;采用流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡情况;应用罗丹明123染色法检测HeLa细胞线粒体跨膜 电位的变化;采用RT-PCR检测6种不同浓度ISL对Bcl-2、P53、P21、E6 mRNA基因表达的影响.结果 (1)MTT 检测结果显示:随着ISL浓度增加,对不同时间段HeLa细胞的抑制作用明显增加(P<0.05);(2)流式细胞仪 检测:相比于空白对照组,随着ISL浓度逐渐增加,Hela细胞凋亡率明显升高(P<0.01),且凋亡率呈剂量依赖性;(3)罗丹明123荧光染色检测结果:随着ISL浓度逐渐增加,细胞线粒体膜电位下降(P<0.01);(4)RT-PCR 结果显示:随着ISL浓度逐渐增加,E6、Bcl-2 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),而P53、p21 mRNA表达水平越 升高(P<0.05).结论 ISL通过下调E6、Bcl-2的表达和上调P21、P53基因的表达来抑制宫颈癌细胞的增殖.
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异甘草素诱导人卵巢癌细胞株SKOV3凋亡及自噬的研究
目的：观察异甘草素（ISL）对人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞株SKOV3体外增殖的抑制作用，并探讨其可能存在的分子机制。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察ISL对SKOV3细胞生长的抑制作用；吖啶橙／溴化乙锭双荧光染色后观察细胞形态变化；流式细胞术AnnexinⅤ‐FITC／PI双染检测ISL对细胞凋亡的影响；Westernblot检测凋亡相关蛋白Bcl‐2、Bax及自噬相关蛋白Beclin1、LC3的表达水平。结果ISL能够抑制SKOV3细胞的增殖，呈时间、剂量依赖性；荧光染色后可见细胞核变圆，碎裂，染色质浓缩；流式细胞仪检测ISL（5、10、20μg／mL）作用于SKOV3细胞48h后，凋亡率明显高于ISL0μg／mL组，差异具有统计学意义（P＜0．05）；Westernblot结果显示ISL（5、10、20μg／mL）作用于SKOV3细胞48h后Bcl‐2蛋白的表达下调，Bax、Beclin1、LC3蛋白的表达上调，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论ISL对人卵巢癌SKOV3细胞具有明显的抑制增殖和诱导凋亡的作用，其抗体外肿瘤机制可能与激活线粒体凋亡通路及自噬通路相关。
关键词： 卵巢肿瘤 异甘草素 人卵巢癌SKOV3细胞 凋亡 自噬 -
异甘草素对小儿脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及相关机制研究
目的 研究异甘草素对脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其相关分子机制.方法 取对数生长期人脑胶质瘤U251细胞,用不同浓度(0、10、20、40、60、80μmol/L)异甘草素处理,每个浓度设5个复孔.异甘草素处理24h、48h、72h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡的变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测FoxM1 mRNA的表达水平.结果 U251细胞经过浓度为0、10、20、40、60、80μmol/L的异甘草素处理24h、48h及72h后,细胞增殖均不同程度地受到抑制.在相同作用时间,不同浓度之间细胞增殖情况比较差异有统计学意义(F值分别为38.5、98.9、108.1,均P＜0.05);在相同异甘草素浓度,不同作用时间(24h、48h、72h)细胞增殖情况比较差异均有统计学意义(F值分别为11.4、20.8、43.1、53.9、30.4,均P＜0.05).不同浓度异甘草素作用于U251细胞24h后,随着异甘草素浓度的增加,细胞凋亡率增加(F=120.3,P＜0.05).不同浓度异甘草素处理U251细胞48h后,FoxM1 mRNA相对表达量分别为(71.2±5.1)％、(54.6±3.3)％、(35.4±4.1)％、(20.8±4.0)％,比较差异有统计学意义(F=83.5,P＜0.05).结论 异甘草素体外可有效抑制U251细胞的增殖并诱导其凋亡,其分子机制可能与下FoxM1基因的表达有关.
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异甘草素抗食管癌细胞活性及其机制研究
目的:探讨中药单体异甘草素(isoliquiritigenin,ISL)对人食管鳞癌细胞系EC9706和KYSE450的影响及其作用机制.方法:利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测ISL对上述2株人食管鳞癌细胞系的细胞毒性;流式细胞术分析ISL对细胞周期及凋亡的影响;Western-blotting技术分析IGF1/IGF-1R信号通路相关蛋白表达以了解ISL的可能作用机制.结果:MTT实验结果表明,ISL以剂量依赖性的方式抑制食管鳞癌细胞EC9706和KYSE450的增殖,IC50值分别为25.56 μmol/L和27.78 μmol/L.此外,ISL可将2株细胞周期阻滞在G2/M期及以剂量依赖性的方式诱导细胞发生凋亡,并且显著下调IGF-1R表达及抑制其下游PI3K/AKT和RAS/MAPK信号通路的激活.结论:ISL具有很强的抗食管癌活性,其作用机制与其调节细胞周期和促使细胞凋亡有关.本研究首次证明中药单体 ISL具有抗食管癌活性,为临床运用中药治疗食管癌提供了新思路.
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异甘草素对 PC12细胞缺氧前后 LDH 和SOD 活性的影响
目的：观察异甘草素对缺氧诱导神经细胞损伤过程中乳酸脱氢酶（ LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法采用体外培养PC12细胞；建立细胞缺氧损伤模型。将细胞分为C（对照组）、H（模型组，即单纯缺氧组）、H1（异甘草素低剂量组）、H2（异甘草素中剂量组）、H3（异甘草素高剂量组）。即H1、H2、H3加入对应浓度的异甘草素后与H一同放入缺氧环境中，培养时间结束后，再进行统一处理。光学显微镜观察PC12细胞形态；测定上清液中LDH、SOD的含量。结果 PC12细胞在缺氧后乳酸脱氢酶（LDH）显著升高，超氧化物歧化酶（SOD）明显减低，而经异甘草素（ISL）干预后，细胞上清液中LDH水平明显下降，SOD含量有所提高。结论缺氧对PC12细胞的增殖具有一定的抑制作用，使超氧化物歧化酶（ SOD）活性降低，乳酸脱氢酶（ LDH）漏出增加。异甘草素（ ISL）能够逆转缺氧对PC12细胞的抑制作用，可能通过提高培养液中SOD活性，防止脂质过氧化，稳定细胞膜，降低LDH的释放，而起到细胞保护作用。
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异甘草素联合替莫唑胺对SHG44人脑胶质瘤干细胞增殖的影响
目的 探讨异甘草素联合替莫唑胺对SHG44人脑胶质瘤干细胞增殖的影响.方法 采用含无血清达尔伯克氏改良伊格尔氏培养基(DMEM/F12)(含表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、B27)的悬浮细胞培养板培养、纯化胶质瘤干细胞,并通过CD133联合Nestin标记进行免疫荧光鉴定;实验分为对照组[含二甲基亚砜(DMSO)]、异甘草素(5～160 μmol/L)组、替莫唑胺(12.5～200 μmol/L)组、异甘草素+替莫唑胺组(160 μmol/L+ 12.5～200 μmol/L),通过细胞增殖-毒性检测(CCK-8)法、流式细胞术、免疫荧光染色法分别检测细胞抑制率、细胞周期及干细胞表面相关分化蛋白表达情况.结果 异甘草素随着浓度增加细胞抑制作用越强,且160 μmol/L时抑制率达32％,替莫唑胺随着浓度增加抑制作用越强,且200μmol/L时抑制率达40％;异甘草素联合替莫唑胺组随着浓度增加抑制作用越强,且160 μmol/L +200 μmol/L时抑制率达72％;随着异甘草素浓度增加G0/G1期细胞比例增加,细胞周期阻滞于G0/G1期;随着异甘草素浓度增加干细胞分化越多,且分化细胞的死亡越多.结论 异甘草素能诱导SHG44人脑胶质瘤干细胞向星形胶质细胞和神经元细胞分化,且能抑制增殖,同时增强替莫唑胺化疗敏感性.
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异甘草素诱导人胶质瘤细胞SHG44自噬及凋亡的实验研究
目的 研究异甘草素(ISL)对人胶质瘤细胞SHG44增殖、自噬、凋亡及相关分子信号的影响.方法 应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测ISL在不同时段、不同浓度下对人胶质瘤细胞SHG44的增殖抑制情况.用流式细胞术Annexin V-IP标记检测ISL(0,20,40,60,80 μmol/L)作用于SHG44细胞48 h后细胞凋亡的情况,透射电镜下观测ISL对SHG44细胞内部超微结构的改变,应用免疫荧光染色法观测细胞内部及其周边自噬及凋亡相关蛋白的分布,Western blot检测ISL对SHG44细胞中Caspase-3,Bcl-2以及LC3B等蛋白表达的影响.结果 在ISL作用下,SHG44细胞的增殖过程呈现时间及剂量依赖性抑制,ISL(80 μmol/L)组在作用72 h后对SHG44细胞的抑制率超过了半数;流式细胞术检测ISL作用SHG44细胞48 h后,细胞凋亡率分剐为(1.54±0.85)％,(6.72±2.81)％,(11.82±3.21)％,(16.61±3.79)％,(26.15±3.82)％;透射电镜下可见SHG44细胞内部出现自噬小泡及自噬溶酶体;在荧光显微镜下可见细胞内出现自噬及凋亡相关蛋白的免疫荧光颗粒;Western blot显示ISL作用于SHG44细胞48 h后,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值以及Caspase-3的表达呈上升趋势,而Bcl-2表达呈下降趋势.结论 ISL能有效抑制人胶质瘤细胞SHG44的增殖,诱导SHG44细胞发生自噬和凋亡,并且抑制了抗凋亡分子Bcl-2的表达,增加了凋亡相关分子Caspase-3以及自噬相关分子LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值.
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异甘草素对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响
目的：研究甘草查尔酮类活性成分异甘草素（Isoliquiritigenin，ISL）对人宫颈癌 Siha 细胞增殖和凋亡的影响。方法将细胞接种于96孔板进行培养（每个孔的密度为1×104个／mL），待细胞完全贴壁后（24 h），将细胞分为 ISL 25、50、100、200、300、400μg／mL 组及对照组（正常培养的 Siha 细胞）、顺铂组（顺铂25μg／mL）、DMSO 组（20μL DMSO 加入5 mL 的培养基中），用 MTT 法测定 ISL 对人宫颈癌 Siha 细胞增殖的抑制作用。通过流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞线粒体跨膜电位的变化。通过 Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性检测试剂盒测定 ISL 对半胱天冬酶活性的影响。结果ISL 抑制 Siha 细胞增殖呈时间依赖性及浓度依赖性，可浓度依赖性的升高细胞凋亡率，降低线粒体膜电位，能增强 Caspase-3的表达活性，但对 Caspase-8、Caspase-9的活性不产生影响。结论ISL 能抑制宫颈癌细胞的增殖，其可能机制是诱导细胞线粒体膜电位途径实现的。
关键词： 异甘草素 宫颈癌 Siha 细胞 线粒体膜电位 细胞凋亡 -
酸水解前后甘草中4个黄酮类化合物含量的变化
目的:建立甘草提取物中4个活性成分甘草苷、异甘草苷、甘草素和异甘草素的测定方法,并评价酸水解法对4个黄酮类化合物含量测定的影响.方法:采用高效液相色谱法,分别测定乌拉尔甘草乙醇提取液和酸水解提取液中4个活性成分的含量.色谱柱为Agilent HC - C18(150 mm ×4.6 mm,5μm)柱,流动相为pH 3甲酸溶液-乙腈,梯度洗脱,流速0.8 mL·min -,甘草苷和甘草素检测波长为276 nm,异甘草苷和异甘草素的检测波长为370 nm,柱温为25℃(室温).结果:乌拉尔甘草乙醇提取液中甘草苷、异甘草苷、异甘草素占原药材的质量百分数分别为1.29%,0.33%,0.01%,因药材中甘草素含量过低,未检出；酸水解提取液中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素占原药材的质量百分数分别为0.71%,0.32%,0.26%,0.11%.结论:酸水解法能显著提高甘草素和异甘草素的含量测定值.
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波长切换HPLC法同时测定甘草及其炮制品中7个物质的含量
目的:建立高效液相色谱法测定甘草及炮制品中芹糖基甘草苷、甘草苷、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、异甘草素的含量.方法:采用Dikma Technologies - C18(200 mm ×4.6 mm,5μn)色谱柱,流动相为乙腈-0.05％磷酸水溶液,梯度洗脱,流速:0.8mL·min-1,检测波长为276 nm(O ～ 16 min)、360 nm(16～24 min)、276 nm( 24～ 28 min)、248 nm(28～38min)、370 nm(38 ～42 min),柱温30℃.结果:在本文色谱条件下,芹糖基甘草苷、甘草苷、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、异甘草素的进样量分别在0.056 ～ 0.56,0.095 ～0.95,0.026～0.26,0.015 ～0.15,0.013 ～0.13,0.348～3.48,0.003 ～0.03 μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=6)均在96.1％～98.1％,RSD均小于2.6％.16个来源甘草药材及其4种不同炮制品中7个物质的含量有一定差异.结论:本法快速、准确,重复性好,可更好地控制甘草药材及其炮制品的质量.
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3种不同基原甘草中4个主要黄酮类化合物的含量分析
目的:对中国药典规定的3种不同基原甘草样品中甘草苷、异甘草苷、甘草素和异甘草素的含量进行分析比较.方法:以栽培于同一产地的3种不同基原两年生甘草作为实验材料,HPLC法对材料中的甘草苷、异甘草苷、甘草素和异甘草素含量进行测定.采用CAPCELL PAK C18 MGⅡ(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为276 nm(0～13 min,检测甘草苷)、360 nm(13～23 min,检测异甘草苷)、276 nm(23～28 min,检测甘草素)、376 nm(28～55 min,检测异甘草素),柱温为30℃.结果:甘草苷、异甘草苷、甘草素和异甘草素分离良好,线性范围分别为1.15×10-2～0.230 μg(r=-1.000)、4.45×10-3～8.90×10-2μg(r=1.000)、1.15×10-3～2.30×10-2μg(r=-0.998)、2.27×10-3～4.54×10-2μg(r=-1.000),检测限和定量限依次为1.13 ng和3.42 ng、0.896 ng和2.70 ng、0.463 ng和1.39 ng、0.454 ng和1.38 ng.本方法灵敏度、精密度、准确性、重复性、回收率、耐用性均良好.在3种基原的甘草样品中,4个黄酮类成分的含量存在极显著差异(P＜0.01),甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素在乌拉尔甘草中的含量均高,分别为(20.75±0.524)mg·g-1、(4.453±0.057) mg·g-1、(0.610±0.019) mg·g-1和(0.272±0.008) mg·g-1,光果甘草次之,含量分别为(6.623±0.405) mg· g-1、(1.562±0.053) mg· g-1、(0.325±0.036) mg· g-1和(0.180±0.012)mg·g-1,胀果甘草低,含量分别为(2.700±0.232) mg·g-1、(0.821±0.042) mg·g-1、(0.153±0.006)mg·g-1(0.115±0.005)mg·g-1;甘草苷与异甘草苷、甘草素与异甘草素的含量在3种不同基原甘草样品中均存在极显著相关关系(P＜0.01).结论:本文建立的HPLC方法经方法学验证,可用于甘草中甘草苷、异甘草苷、甘草素和异甘草素的含量分析,并为甘草的质量控制及以黄酮类化合物为目标的优质甘草筛选与定向育种提供科学依据.
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波长切换法测定桂枝芍药知母汤提取物中5个脂溶性成分的含量
目的:建立同时测定桂枝芍药知母汤提取物中异甘草素、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ含量的方法.方法:桂枝芍药知母汤采用70％乙醇提取得到提取物,采用HPLC法测定含量.色谱条件:采用Zorbax SB-C18 (4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.01％甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长220 nm(6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ),275 nm(白术内酯Ⅱ),370 nm(异甘草素),柱温30℃.结果:异甘草素、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ进样量分别在0.013 2 ～0.264 μg(r =0.999 8),0.164 0～3.280 μg(r =0.999 9),0.051 1～1.022 μg(r =0.999 9),0.051 6～1.032 μg(r =0.999 9),0.029 6 ～0.592 μg(r =0.999 9)范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=6)均在96.2％～ 103.3％,RSD均小于3％.异甘草素、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅱ含量分别为0.064 4、1.158、0.319 1、0.247 2、0.1605 mg·g-1.结论:本方法简单、准确,重复性好,为桂枝芍药知母汤物质基础研究提供了基础.
