首页 > 文献资料
-
CCK-8对吗啡成瘾大鼠戒断症状及尾核内c-jun蛋白表达的影响
目的 从行为学、形态学角度,初步研究了八肽胆囊收缩素(CCK-8)对吗啡成瘾大鼠戒断症状及尾核(Cd)内原癌基因c-jun蛋白表达的影响.方法 采用动物行为学评估和免疫组化的方法,观察吗啡成瘾大鼠Cd内注入CCK-8 (10 mg·L-1,1 μl)对c-jun蛋白表达和戒断症状的影响.结果 ①吗啡成瘾组大鼠戒断症状与生理盐水对照组大鼠行为学相比有差异;②吗啡成瘾大鼠在戒断24 h 时,Cd内注入CCK-8可使戒断症状降低,在戒断40 h时戒断症状总分明显;③单纯吗啡成瘾组大鼠Cd内c-jun蛋白表达与生理盐水对照组大鼠相比下降,而注入CCK-8后c-jun蛋白的表达上升.结论 ①成功建立吗啡成瘾大鼠模型;② Cd内注入CCK-8可使吗啡成瘾大鼠的戒断症状明显减少;③ Cd内注射CCK-8可提高c-jun蛋白的表达.提示CCK-8能调控吗啡成瘾大鼠戒断症状的产生及Cd内c-jun蛋白的表达.
-
CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响
目的 探讨CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响.方法 分离纯化大鼠PIMs,分别用LPS、CCK、LPS+CCK、PMA、SC-3088、LPS+PMA、LPS+SC-3088、CCK+PMA、CCK+SC-3088、LPS+CCK+PMA、LPS+CCK+SC-3088孵育一定时间,采用125I-cAMP放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,用放射激酶法测定PKA活性.结果 单独应用PMA和SC-3088孵育大鼠PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性与正常对照组相比无明显变化(P>0.05).PMA可升高LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性(P<0.01),SC-3088则可使LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01).分别应用PMA、SC-3088与CCK共同孵育,则CCK+PMA组细胞内cAMP含量和PKA活性高于单独应用CCK组(P<0.01),CCK+SC-3088组则降低(P<0.01).与LPS+CCK组相比,PMA+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性升高(P<0.01),而SC-3088+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01).结论 在LPS诱导的大鼠PIMs,CCK-8可通过激活cAMP-PKA信号通路发挥抗炎作用；DAG-PKC信号通路的活化对cAMP-PKA信号通路有正性调节作用.
-
CCK-8对大鼠肺间质巨噬细胞cAMP-PKA信号通路的激活作用
目的 探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)cAMP-PKA信号通路的激活作用.方法 分离纯化大鼠PIMs,采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,放射激酶法测定PKA活性,受体拮抗剂的IC50值由对数-几率单位法求得.结果 正常对照组大鼠静息状态下PIMs cAMP含量和PKA活性分别为(2.04±0.13) nmol·g-1和(118.3±11.2)nmol·min-1·g-1.低浓度CCK-8[(10-12 ～10-10)mol·L-1]对细胞内cAMP含量和PKA活性没有影响(与正常对照组比较: P＞0.05);高浓度CCK-8[(10-9～10-5)mol·L-1]可明显提高细胞内cAMP含量和PKA活性(与正常对照组比较: P＜0.05).10 mg·L-1脂多糖(LPS)刺激大鼠PIMs,可明提高细胞内cAMP含量和PKA活性,分别为(5.15±0.12)nmol·g-1和(188.6±13.5)nmol·min-1·g-1.不同浓度的CCK-8与LPS共同孵育PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性的变化趋势与CCK-8作用于静息状态下大鼠PIMs的变化趋势完全相同.CCK受体拮抗剂丙谷胺、CR-1409、CR-2945可呈剂量依赖性地抑制CCK导致的cAMP含量的升高,它们的IC 50值分别为(0.5×10-6、4.1×10-6、7.2×10-4) mol·L-1.丙谷胺、CR-1409、CR-2945也可明显减弱CCK-8所导致的PKA活性的升高;其中,丙谷胺的抑制作用强,CR-1409次之,CR-2945的抑制作用小.结论 CCK-8可剂量依赖性地激活静息状态和LPS诱导的大鼠PIMs cAMP-PKA信号转导途径,这可能是CCK抗炎作用的分子机制之一.CCK激活cAMP-PKA通路是通过CCK受体来实现的,且CCK-AR的作用比CCK-BR的作用更为明显.
-
胆囊收缩素对大鼠坐骨神经损伤后修复的影响
目的 探讨八肽胆囊收缩素用于大鼠坐骨神经损伤后修复的效果.方法 将24只大鼠建立坐骨神经损伤模型.模型建立成功后,将24只大鼠按不同的给药方法分为2组:八肽胆囊收缩素组(实验组)和对照组,每组12只.实验组给予八肽胆囊收缩素8 nmol·kg-1腹腔注射,1次·d-1;对照组给予生理盐水8 nmol·kg-1腹腔注射,1次·d-1.2组大鼠均连用7 d.并对2组大鼠术后4周进行电生理检测,检测坐骨神经复合神经动作电位(CNAP)、感觉神经动作电位(SNAP)和腓肠肌复合肌肉动作电位(CMAP),分别记录潜伏期(LAT)、波幅(AMP)和神经传导速度(NCV).结果 术后4周,实验组CNAP、SNAP、CMAP的LAT差值及AMP、NCV恢复率与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).实验组大鼠腓肠肌肌电图波幅高,潜伏期短.结论 八肽胆囊收缩素能有效地促进周围神经损伤后的修复.
关键词： 坐骨神经 损伤 八肽胆囊收缩素 坐骨神经复合神经动作电位 感觉神经动作电位 腓肠肌复合肌肉动作电位 动物 实验 大鼠 -
针药合用刺激嗅觉系统对血管性痴呆模型大鼠学习记忆及大脑边缘叶CCK-8含量的影响
目的:探讨针药合用刺激嗅觉系统对血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆功能及大脑边缘叶八肽胆囊收缩素(CCK-8)含量的影响作用.方法:成年SD雄性大鼠48只,随机分为正常对照组、VD模型组、VD嗅球损毁模型组、嗅三针组、丁香酚刺激组和针药合用组,每组8只.制作VD大鼠模型和VD并损毁嗅球大鼠模型,分别通过嗅三针电刺激、丁香酚刺激、针药合用方法,测试大鼠水迷宫定位航行学习记忆能力并测定大脑边缘叶CCK-8含量.结果:大鼠水迷宫定位航行实验显示,平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较,正常对照组明显短于VD模型组(P<0.01),嗅三针组、丁香酚刺激组和针药合用组均明显短于VD模型组(P<0.01).针药合用组短于嗅三针组、丁香酚刺激组(p<0.05),嗅三针组与丁香酚刺激组比较无显著性差异(P>0.05),VD模型组与VD嗅球损毁模型组比较,无显著性差异(P>0.05).大脑边缘叶CCK-8含量比较,VD模型组明显低于正常对照组(P<0.01),嗅三针组、丁香酚刺激组和针药合用组明显高于VD模型组(P<0.01),针药合用组高于嗅三针组和丁香酚刺激组(P<0.05),嗅三针组与丁香酚刺激组比较无显著性差异(P>0.05).VD模型组与VD嗅球损毁模型组比较无显著性差异(P>0.05).结论:嗅三针和丁香酚均能够显著增强VD大鼠学习记忆功能,提高大脑边缘叶CCK-8的含量.针药合用效果更佳,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性.
-
针刺镇痛个体差异谜底揭开
为什么针刺镇痛的效果会因人而异?这道困扰国内外学者数十年的难题,被中科院院主、北京医科大学神经科学研宄所韩济生等揭开奥秘.他们通过15年的研究发现,中枢八肽胆囊收缩素(CCK-8)的抗阿片作用是决定针刺镇痛和吗啡镇痛有效性的重要因素.
-
八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导的小鼠单核细胞 RAW264．7细胞内质网应激的影响
目的：探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对脂多糖（LPS）诱导的单核细胞 RAW264．7细胞内质网应激（ERS）的影响。方法RAW264．7细胞分为对照组、LPS 组、CCK-8组、devazepide 组（DEV 组）、CCK-8＋LPS 组及 DEV＋CCK-8＋LPS 组，采用 RT-PCR 法检测 X 盒结合蛋白1的活性形式（XBP1s）的 mRNA 表达水平，Western blot-ting 检测 ERS 标志性蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和 C ／EBP 同源蛋白（CHOP）的蛋白表达水平，ELISA 法检测细胞培养上清液中 IL-1β水平。结果与对照组相比，LPS 组的 XBP1s mRNA 表达水平、GRP78和 CHOP 的蛋白表达水平均升高（P ＜0．05）；与 LPS 组相比，CCK-8＋LPS 组的 XBP1s mRNA 表达水平、GRP78和 CHOP 的蛋白表达水平均降低（P ＜0．05）；与 CCK-8＋LPS 组相比，DEV ＋CCK-8＋LPS 组的 XBP1smRNA 和 GRP78、CHOP蛋白表达水平均升高（P ＜0．05）。IL-1β含量的变化趋势与 CHOP 蛋白表达的变化趋势一致。结论CCK-8通过1受体抑制 LPS 诱导的 ERS，减少 IL-1β的生成，从而发挥抗炎作用。
-
CCK-8对胶原诱导型关节炎小鼠滑膜组织TNF-α、IL-6的影响
目的 探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)治疗类风湿关节炎(RA)的可行性及机制.方法 DBA/1J小鼠60只,随机分为CCK-8高、中、低剂量组和对照组各15只.将CII完全乳化液于小鼠尾根部皮内多点注射(100μl/只),第21天再次同剂量追加免疫一次,建立CIA模型.于第二次增强免疫同时,对照组腹腔注射生理盐水100μl/只；CCK-8高、中、低剂量组腹腔分别注射CCK-8 1、5、10 nmol/只,每天注射1次,连续注射7d.采用酶联免疫反应法检测各组关节滑膜组织TNF-α和IL-6水平.结果 CCK-8各剂量组关节组织TNF-α和IL-6水平均明显低于对照组；中、高剂量组明显低于低剂量组(P均＜0.05).结论 CCK-8能降低CIA小鼠TNF-α和IL-6水平,此可能是其治疗RA的机制之一.
-
开胃消食糖浆对幼龄厌食大鼠CCK-8的调节作用
目的:研究幼龄厌食大鼠中枢及外周八肽胆囊收缩素(CCK-8)的含量变化以及开胃消食糖浆对它们的调节作用.方法:建立幼龄厌食大鼠模型,用开胃消食糖浆治疗,运用放免检测技术测定动物下丘脑及外周血中CCK-8的含量.结果:模型组下丘脑和血浆CCK-8浓度显著高于正常组(P＜0.05),摄食量明显下降,持续3周以上;治疗组下丘脑和血浆CCK-8浓度较模型组降低(P＜0.05),且摄食量在第3周末与第4周末与正常组比较差异无显著性.结论:开胃消食糖浆具有抑制幼龄厌食大鼠中枢和外周血CCK-8的分泌,增加食量的作用.
-
脑肠肽与针刺镇痛关系的研究进展
文章综述了八肽胆囊收缩素(CCK-8)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、生长抑素(SS)、神经降压素(NT)几种脑肠肽与针刺镇痛相关的研究进展.指出参与镇痛的脑肠肽在针刺镇痛中如何定量定位等问题将是今后研究的重点.
-
颊针疗法对类风湿性关节炎兔的镇痛时效及其作用机制
目的:探究针刺对患有类风湿性关节炎大耳白兔的镇痛时效及其中枢作用机制.方法:将60只大耳白兔随机分为正常组(n=6)、模型组(n=6)、体针组(n=24)和颊针组(n=24),再将后两组分为针后即时(0 h)、针后0.5,1,2h4个亚组,每组各6只.白兔类风湿性关节炎模型采用卵蛋白诱导建立.体针组针刺双侧“膝眼”和“足三里”1次,颊针组双侧颊针针刺“膝”1次,行针15 s,留针30 min.采用PL-200热刺痛仪检测痛阈,以兔出现缩耳挣扎动作为疼痛反应指标,自照射开始至兔出现反应的潜伏期时间作为该兔的痛阈值;使用放射免疫法检测兔脑脊液中β-内啡肽(β-endorplhin,β-EP)及八肽胆囊收缩素(cholecystokinin-8,CCK-8)含量.结果:与正常组相比,模型组痛阈和CCK-8含量显著降低(P＜0.01),β-EP含量显著升高(P＜0.05);与模型组相比,体针组和颊针组的痛阈在0和1 h(P＜0.05或P＜0.01)显著升高;体针组和颊针组兔脑脊液中CCK-8和β-EP含量均显著高于模型组(P＜0.01或P＜0.05);颊针组的即时(0 h)CCK-8和LEP含量显著高于体针组(P＜0.05),其他时间无明显变化.结论:针刺治疗可以有效缓解类风湿性关节炎的疼痛,颊针疗法的即时镇痛效应优于体针治疗,且这种即时镇痛效应与脑脊液中β-EP和CCK-8含量变化相关.
-
开胃消食糖浆对幼龄厌食大鼠模型CCK-8和β-Ep的影响
目的 研究开胃消食糖浆对幼龄厌食大鼠模型摄食及八肽胆囊收缩素(CCK-8)和β内啡肽(β-Ep)含量的影响.方法 用特制饲料喂养大鼠,制作幼龄厌食大鼠模型,采用开胃消食糖浆治疗,观察各组大鼠摄食量的变化,并运用放免检测技术测定各组动物下丘脑及外周血中CCK-8和β-Ep的含量.结果 模型组摄食量明显下降,其下丘脑和血浆CCK-8浓度显著高于正常组(P＜0.05),下丘脑β-Ep浓度与正常组差异无统计学意义(P＞0.05),而胃窦黏膜和血浆β-Ep浓度显著低于正常组(P＜0.01,P＜0.05).开胃消食糖浆治疗后,动物摄食量在第1周末明显增加(P＜0.05),其下丘脑和血浆CCK-8浓度较模型组降低(P＜0.05),下丘脑、胃窦黏膜和血浆β-Ep浓度也较模型组显著增加(P＜0.05).结论 幼龄厌食大鼠模型中枢和外周CCK-8浓度增高,外周β-Ep的浓度降低,对中枢β-Ep的浓度无明显的影响,开胃消食糖浆能明显促进中枢和外周血β-Ep分泌,抑制中枢和外周血CCK-8的分泌,从而增加食量.
-
八肽胆囊收缩素刺激神经元所致信号转导中磷蛋白的动力学变化研究
目的 研究八肽胆囊收缩素(Octa-cholecystokinin,CCK8)刺激小鼠神经元所致信号转导中磷酸化蛋白的时间动力学特征.方法 培养乳小鼠神经元,随机分为CCK8刺激组和对照组,32P-NaH2PO4标记后分别给予CCK8(10-7mol/L)和等量无磷培养基,作用不同时间后液氮终止反应,经双向电泳、放射自显影,获得磷酸化蛋白质的电泳图谱.利用PDQuest 2D分析软件并结合Swiss-Prot蛋白质数据库对磷酸化蛋白质斑点进行分析并绘制出一些重要的磷酸化蛋白质磷酸化改变的时间动力学曲线.结果 CCK8作用不同时间后,神经元蛋白质磷酸化水平出现明显改变,通过对双向电泳图谱中100多个蛋白质斑点的定性分析,初步确定了小鼠神经元CCK8信号转导相关磷酸化蛋白包括多种蛋白激酶、磷蛋白磷酸酶、胞内信号分子、多种受体、转录因子及核蛋白等.对其中11种重要的信号分子动力学分析结果显示:曲线多数呈峰型,且蛋白质分子磷酸化达到峰值时间和高磷酸化状态持续时间各不相同,而PKAα表现为较持续的激活状态,MK07、GBOα则呈现双峰型.结论 CCK8在神经元的信号转导具有整合与复杂自适应控制的特征.
-
八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导大鼠肺组织NF-κB活性增高的抑制作用
目的和方法:研究证实,内毒素激活核转录因子κB(nuclear transcription factor kappa B, NF-κΒ),进而诱导前炎性因子大量生成,是内毒素休克和急性肺损伤的关键发病学环节.
-
八肽胆囊收缩素对肿瘤坏死因子诱导离体兔肺动脉反应性变化的影响及其机制初探
目的:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是内毒素休克(ES)时肺动脉高压(PAH)形成的重要因素,但其作用机理还不清楚.八肽胆囊收缩素(CCK-8)具有抗ES及PAH的作用.本研究观察了CCK-8对TNF-α引起的肺动脉反应性及内皮细胞超微结构改变的影响,及一氧化氮(NO)在其中的作用,初探了CCK-8缓解PAH的作用机制.
-
八肽胆囊收缩素逆转内毒素休克大鼠心功能衰竭及机制研究
目的:观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)改善内毒素休克(ES)大鼠心功能的影响, 探讨CCK-8逆转ES的作用及机制.方法:实验分4组.(1)对照组,静脉注射生理盐水0.2 mL;(2)LPS组,静脉注射8 mg*kg-1 LPS;(3)CCK组,静脉注射 40 μg*kg-1 CCK-8;(4)CCK+LPS组,静脉注射40 μg*kg-1 CCK-8,10 m in后再注入LPS(8 mg*kg-1).右颈总动脉插管测定左室内压峰值(LVP)及心率(HR),左室收缩与舒张期内压变化的大速率(±LVdp/dtmax ),股动脉插管监测平均动脉压(MAP),尾静脉穿刺注射药物.取左室心肌组织,4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋、切片、HE染色,光学显微镜下观察.结果:单独静脉注射CCK-8,计数HR5 min显著下降为(340±15)次/min,10 min后恢复正常(381±22) 次/min;测量MAP、LVP 和±LVdp/dtmax在30 s后开始增加,3-5 min达到高峰为(16.58±1.07) kPa, (18 .73±0.50) kPa和(+723.52±55.95)/(-507.05±30.24) kPa, 持续约15 min恢复正常 (14.20±1.38) kPa, (17.07±1.62) kPa和(+641.38±32.88)/(-419.67±46.41) kPa.静脉注射LPS后5 min HR明显增加(395±12)次/min ,10 min后基本恢复,而在20 min是迅速下降至低水平(313±18)次/ min, 30 min后有所回升 , 至2 h稳定于稍低水平; MAP, LVP和±LVdp/dtmax较对照组快速持续下降, 2 h时下降为(7.16±0.59) kPa、(7.60±0.68) kPa和(+298.01±25.52)/(-166.96±19.25 ) kPa; CCK+LPS组 HR在10-20 min是轻度增加, 30 min后HR恢复正常,30 min内MAP、LVP和±LVdp/dtmax下降幅度与LPS组无显著差异,30 min后即迅速回升,至120 min仍维持在较高水平(10.71±0.45) kPa, (11.70±1 .26) kPa和(+446.04±67.18)/(-347.90±136.98) kPa (P＜0.01).心脏组织形态学变化:CC K-8可明显减轻心肌组织炎性细胞浸润和毛细血管血液瘀积.讨论:整体预先注射CCK-8(40 μg*kg-1)可明显缓解心率的快速变化,逆转ES大鼠MAP、LVP、+LVdp/dtmax下降,其作用机制可能与以下因素有关:(1)心肌细胞保护作用.(2)CCK-8可对抗ES大鼠的阿片肽心血管抑制效应.(3 )CCK-8可能直接作用于心肌细胞,逆转LPS所致胞浆内钙离子浓度降低,恢复心肌细胞收缩力.结论:单独静脉注射CCK-8可短时间内引起心动过缓,MAP上升和心肌收缩力增强;预先注射CCK-8可以明显缓解心率的快速变化,逆转ES大鼠心功能衰竭及顽固性低血压,是其发挥抗ES的主要机制.
-
八肽胆囊收缩素改善内毒素休克大鼠心肌损伤的实验研究
目的:观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)改善内毒素休克(ES)大鼠心肌损伤的变化,探讨CCK-8逆转ES心功能衰竭及顽固性低血压的作用机制.方法:实验分4组:(1)对照组,静脉注射生理盐水0.2 mL;(2)LPS组 , 静脉注射8 mg*kg-1LPS;(3)CCK组,静脉注射40 μg*kg-1CCK-8;(4) CCK+LPS组,静脉注射40 μg*kg-1 CCK- 8,10 min后再注入LPS(8 mg*kg-1).股动脉插管监测平均动脉压(MAP),尾静脉穿刺注射药物.分别测定2 h、6 h心肌组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量变化,用ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β ) 含量.结果:(1)MAP变化:对照组MAP为(14.20±1.38) kPa,静脉注射LPS 后MAP快速持续下降,75 min降至低谷为(7.16±0.59) kPa;CCK+LPS在CCK注入20 min时M AP下降幅度与LPS组无差异 ,20 min后即迅速回升,至120 min仍持续在较高水平(10.71±0.45) kPa,仍未恢复至正常水平.(2)SOD活性变化: 2 h、6 h对照组SOD为(60.51±2.23)×103 U/L和(55 .97±4.96)×103 U/L,LPS组心肌组织匀浆中SOD活性则明显下降为(48.69±2.3 0)×103 U/L和(34.49±4.69)×103 U/L,CCK+LPS组较LPS组SOD活性则明显回升为(56.19±1.83)×103 U/L和(41.95±7.44) ×103 U/L.(3)MDA含量变化: 2 h、6 h对照组MDA为(3.43±1.76) μmol/L和(3.68±1.58) μmol/L,LPS 组心肌组织匀浆中MDA含量明显上升(19.71±3.02) μmol/L和(36.18±5.26) μmol/L ,CCK+LPS组较LPS组MDA含量显著下降为(0.39±2.43) μmol/L和(15.10±2.12) μmol /L.(4)NO含量变化:2 h、6 h对照组NO为(37.96±1.85) mmol/L和(41.98±6.59) mmol/L,LPS组心肌组织匀浆中NO含量明显上升(73.45±8.93) mmol/L和(105.4±3.61) mmol/L, CCK+LPS组较LPS组NO含量显著下降为(60.91±3.15) mmol/L和(70.37±7.68) mmol/ L.(5)TNF-α含量变化: 2 h对照组心肌组织匀浆中为(320.81±110.63) ng/L,LPS 组TNF-α含量明显上升为(1 599.08±227.03) ng/L,CCK+LPS组较LPS组TNF-α含量显著下降为(863.54±123.19) ng/L.(6)IL-1β含量变化: 6 h对照组心肌组织匀浆中为 (163.10±80.20) ng/L,LPS组IL-1β含量明显上升为(620.66±144.57) ng/L,CCK+LP S组较LPS组IL-1β含量显著下降为(282.07±92.68) ng/L.结论:预先注射CCK-8可以减轻ES大鼠心肌氧化损伤,抑制炎性细胞因子TNF-α及IL-1β产生,影响NOS活性,使NO合成下降,发挥心肌细胞保护作用,恢复心肌收缩力,是其逆转ES心功能衰竭及顽固性低血压的主要机制.
-
CCK-8减轻内毒素休克大鼠脾脏和肺脏损伤
目的: 研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对脂多糖(LPS)引起的大鼠内毒素性休克(ES) 的低血压及脾脏和肺脏超微结构改变的影响,进一步探讨与一氧化氮/一氧化氮合酶(NO/NOS)和MDA /SOD含量及活性变化的关系.方法: 使用生理多道记录仪,观察尾静脉注入LPS(8 mg/kg iv)复制的大鼠ES模型、LPS注入前10 min尾静脉注入CCK-8(40 μg/kg iv)、单独注入CCK -8(40 μg/kg iv)或生理盐水(对照)的四组大鼠血压的改变,应用光镜观察给药后30 min 、2 h 、6 h各组脾脏和肺脏结构改变,透射电镜观察6 h各组脾脏和肺脏超微结构改变.检测6 h各组血清、脾脏和肺脏NO/NOS和MDA/SOD含量及活性变化.结果:CCK-8可逆转LPS引起的大鼠平均动脉血压的下降.光、电镜结果显示LPS致肺脏和脾脏中出现炎细胞浸润、凋亡和坏死等征象,CCK-8可减轻LPS引起的脾脏和肺脏超微结构损伤.LPS组血清、脾脏和肺脏NO含量分别增加为对照组的2.6倍、1.5倍和2.1倍,NOS活性分别增加为对照组的3.5 倍、1 .2倍和1.9倍;CCK-8抑制LPS诱导的这种NO含量和NOS活性的增加.LPS组血清、脾脏和肺脏M DA含量显著高于其余组,SOD活力显著低于其余组;CCK-8+LPS组MDA含量和SOD活力接近对照组.讨论:LPS致大鼠血清、脾脏和肺脏MDA含量增高,SOD活性降低及NO过量生成可能是E S时脾脏和肺脏损伤的重要因素之一.SOD/MDA活性和含量是反映氧化损伤的重要指标,NO过量生成进而形成毒性更强的过氧亚硝基阴离子,可能是导致脾脏和肺脏损伤的重要因素之一 .CCK-8直接或间接影响自由基的生成,从而减轻脏器损伤.结论:这些发现提示 CCK-8减轻ES大鼠脾脏和肺脏的损伤,可能与其抗氧化作用及抑制NO的过量生成有关.
-
CCK-8抑制内毒素休克大鼠细胞因子的生成
目的:研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对脂多糖(LPS)引起的大鼠内毒素性休克(ES)的低血压及细胞因子产生的影响.方法:使用生理多道记录仪,观察尾静脉注入LPS(8 mg/kg iv)复制的大鼠ES模型、LPS注入前10 min尾静脉注入CCK-8(40 μg/kg iv)、单独注入CC K-8(40 μg/kg iv)或生理盐水(对照)的四组大鼠血压的改变,应用ELISA试剂盒检测血清、脾脏和肺脏中前炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)的特异性差别.结果:CCK-8逆转 LPS引起的大鼠平均动脉血压的下降.与对照组相比,LPS显著增加血清IL-6水平(3 566.92±686.95 pg/mL vs l28.49±22.06 pg/mL,P＜0.01),而TNF-α和IL-1β含量虽然显著增加(27 6.71±8 6.43 pg/mL vs 检测不到和43.19±9.41 pg/mL vs 检测不到,P＜0.01) ,但增加幅度低于IL-6.CCK-8显著抑制LPS诱导的血清TNFα、IL-β和IL-6的增加.与对照组相比,LPS显著增加脾脏和肺脏的IL-1β含量(分别为5 183.56±84.91 pg/mL vs 1 047.40±21.37 pg/mL和4 04 9.91±613.79 pg/mL vs检测不到,P＜0.01),TNF-α和IL-6水平亦有增加但其程度低于IL-1β.CC K-8抑制LP S诱导的脾脏和肺脏的这些细胞因子的增加.讨论和结论: TNF-α、IL-1β和I L-6是重要的前炎症介质,其内源性产生过量可能是全身性感染合并组织损伤和器官衰竭的原因.CCK-8 可能通过某些环节抑制这些炎症细胞因子的过量生成.这些发现提示CCK-8逆转ES可能与其对细胞因子过量产生的抑制作用有关.
-
CCK-8对内毒素休克大鼠TNF-α表达的影响及其受体机制
目的:研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对脂多糖(LPS)引起的内毒素性休克(ES)大鼠脾脏和肺脏的TNF-α基因表达的影响,进一步探讨CCK-8的受体作用机制.方法:尾静脉注入LPS(8 mg/kg iv)复制大鼠ES模型、LPS注入前10 min尾静脉注入CCK-8(40 μg/ kg iv)、单独注入 CCK -8(40 μg/kg iv)或生理盐水(对照)的四组大鼠分别于LPS注入后30 min、2 h和6 h 取脾脏和肺脏进行RT-PCR检测TNF-α mRNA表达.LPS注入后2 h、6 h和12 h取脾脏进行R T-PCR检测CCKA/B受体mRNA表达.结果:CCK-8可抑制LPS注入后30 min和2 h引起的脾脏和肺脏TNF-α mRNA表达的上调,注入LPS后6 h TNF-α mRNA的表达与对照组比较没有显著差异.LPS注入后2 h、6 h和12 h ES大鼠脾脏CCK-8受体表达较对照组上调,以2 h上调作用为显著.讨论和结论: TNF-α是一个早期的重要炎症介质,由于TNF-α能促进IL-1和IL-6等炎症介质的产生,而引起级链式的炎症反应,引起持续损害,LPS组6 h尽管TNF-α下降,但病理损害仍比2 h明显加重.我室以往研究已证实CCK-8有抗ES的作用.脾脏和肺脏是产生 TNF-α的重要器官,CCK-8能抑制TNF-α的产生,可能通过抑制其转录而起作用.LPS诱导脾脏CCK受体表达增加,属疾病状态下的受体、配体间的正向调节.LPS致机体损伤的同时也启动了机体的保护机制,CCKA/B受体表达增加,是该保护机制之一.这些发现提示CCK-8逆转 ES可能与其抑制TNF-α基因表达的作用有关;LPS可上调脾脏CCKA/B受体表达,说明CCK-8保护作用的受体机制.
