大鼠肢体缺血再灌注致肺损伤时肺内诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮的作用

目的:观察肢体缺血再灌注致肺损伤时肺内诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide syn thase,iNOS)/一氧化氮(nitric oxide,NO)的变化和作用.方法: 夹闭大鼠腹主动脉下段造成双后肢缺血及再灌注后肺损伤模型.将动物随机分为4组:假手术(sham)组,缺血4 h再灌注8h组(I/R) 、Sham+氨基胍(aminoguanidine,AG)组和I/R+AG组.后两组于再灌注2 h或相应的假手术时间点给予舌静脉注射iNOS阻断剂-AG,前两组给予等量溶剂处理.分别以Northern blotti ng和免疫组化的方法检测肺组织中iNOS mRNA和蛋白表达的变化;以硝酸还原法检测肺组织匀浆中NO代谢产物NO-2/NO-3含量的变化;以硫代巴比妥酸比色法检测肺组织匀浆中丙二醛(mal ondialdehyde,MDA)含量的变化;检测肺组织学变化和肺组织湿重和干重之比(wet-to-dryw eight ratio,W/D)的变化.结果: I/R组肺组织出现水肿、出血和炎症细胞(主要是多形核白细胞)聚集等病理变化.与sham组相比,I/R组肺组织中MDA含量、W/D以及NO-2/ NO-3含量均显著增高(P＜0.05).Northern blotting检测显示I/R组肺组织中iN O S mRNA表达增强,免疫组化检测,可见I/R组肺组织中iNOS蛋白表达增强,阳性颗粒几乎遍布所有肺组织. 与I/R组相比,I/R+AG组肺组织中NO-2/NO-3含量、MDA含量以及肺组织W/D均显著降低( P＜0.05),肺组织形态学病理变化明显减轻.Sham组与sham+AG组之间各项指标均无显著差异 .讨论本实验结果显示大鼠双侧后肢肢体缺血再灌注可以导致肺损伤的发生,同时伴有肺组织中iNOS表达和NO生成增多,应用iNOS阻断剂-AG减少NO生成,可显著减轻肢体缺血再灌注所导致的肺损伤,表明肺组织中iNOS的诱生以及NO的过量生成具有损伤作用,参与介导了此种肺损伤的发生.结论: 肢体缺血再灌注致肺损伤时肺组织中iNOS表达的上调以及NO的过量生成参与介导了此种肺损伤的发生.

甲基泼尼松龙减轻脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨大剂量甲基泼尼松龙(MP)对大鼠缺血再灌注脑损伤的影响.方法用改良的大白鼠局灶性脑缺血再灌注线栓模型对缺血1小时再灌注大白鼠使用生理盐水、30mg/kg MP后脑梗塞体积、微血管内聚集与粘附的多形核白细胞及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)免疫组化染色阳性的细胞进行观察.结果 MP能够缩小脑梗塞的体积,减少多形核白细胞在微血管内的聚集与粘附,使bFGF免疫阳性的细胞数增多.结论大剂量的MP治疗能够减轻脑缺血再灌注损伤.

自发性细菌性腹膜炎实验室诊断研究进展

自发性细菌性腹膜炎（spontaneous bacterial peritonitis， SBP ）又称原发性细菌性腹膜炎，是肝硬化等终末期肝病的严重并发症之一。排除腹腔继发性感染后，当腹水多形核白细胞（polymorphonuclear，PMN）计数≥0．25×109／L 时即可初诊为SBP 并启动经验性抗感染治疗［1］，这一早期诊疗策略可改善 SBP 患者的预后。然而，新的调查［2］显示， SBP患者的30 d内死亡率仍高达24．1％。因此，如何更好地对SBP做出早期诊断仍是目前研究的重点。本文将对SBP的实验室诊断研究进展做一综述。

延缓肾脏疾病进行性发展的策略与方法

1 引言 慢性肾脏疾病呈持续进行性发展,终发展至尿毒症.其进行性发展机制目前尚未完全明了.近十年来,由于细胞、分子生物学技术的发展,人们对在肾小球疾病发病机制中发挥重要作用的各种炎症介质 (如补体、凝血因子、细胞因子,以及单核巨噬细胞、血小板、多形核白细胞等炎性细胞 ), 以及非免疫因素在肾脏疾病进行性发展的作用有了更深入的了解.2 肾脏疾病进行性发展的影响因素 2.1 免疫因素 免疫因素对肾脏疾病进行性发展的影响可能表现为下面两方面: ①免疫损害出现后由于临床表现不明显而未加治疗,免疫因素持续存在使肾小球进行性硬化 ; ②免疫损害出现后虽予治疗,但治疗不彻底或效果欠佳,不能抑制免疫反应,肾小球进行性硬化.

结节性多动脉炎

1 引言结节性多动脉炎(polyarteritis nodosa,PAN)主要侵犯中小肌性动脉,损害呈节段性分布,易发生于动脉分叉处,向远端延伸.有的病变向血管周围浸润,可沿浅表动脉血管分布扪及结节.病因不明,可能与感染(病毒、细菌)、药物及注射血清等有关.组织学上见血管中层改变明显,急性期为多形核白细胞渗出到血管壁各层和血管周围区域,组织水肿,病变向外膜和内膜蔓延而致管壁全层坏死,其后有单核细胞及淋巴细胞渗出.

肝素结合蛋白研究进展?

感染性疾病是一类严重威胁人类健康的疾病。脓毒症是病死率较高的感染性疾病之一，尽早诊断及治疗对提高脓毒症疗效及预后有重要的作用，所以现在临床面临的大挑战是如何尽早对脓毒症患者明确诊断。近年来肝素结合蛋白(HBP)被证实可以作为脓毒症早期诊断标志物之一[1]，本文现对HBP 作一简要的综述。

醒脑静注射液的体外抗多形核白细胞与血管内皮细胞粘附的效果

目的:研究醒脑静注射液的抗粘附效果及机理.方法:利用兔多形核白细胞 (PMN)悬液与兔脑微血管内皮细胞 (BMVEC)共育,观察醒脑静注射液对内毒素所导致的 PMN- BMVEC粘附及血小板活化因子( PAF)和一氧化氮( NO)水平变化的影响.结果:醒脑静可以明显降低 PMN- BMVEC粘附率以及培养基中 PAF、 NO的水平.结论:醒脑静可以抑制 PMN- BMVEC的粘附及部分介质的分泌,而部分介质释放减少与其粘附率降低有关.

痛泻要方的抗炎作用研究

目的:研究痛泻要方的抗炎作用.方法:采用角叉菜胶复制大鼠足肿胀和大鼠背部气囊模型,巴豆油混合致炎剂复制小鼠耳肿胀模型,鲁米诺化学发光法测定多形核白细胞(PMN)的发光强度.大鼠气囊炎性渗出液中前列腺素E_2(PGE_2)、白细胞介素-6(IL-6)和大鼠血清皮质醇用放射免疫法测定,一氧化氮(NO)用硝酸还原酶法测定.结果:痛泻要方对大鼠足肿胀有显著抑制作用,能显著减少气囊炎性渗液中IL-6、NO含量,对气囊模型大鼠血清皮质醇含量无显著影响,且能显著抑制激活的PMN化学发光.结论:痛泻要方有显著的抗炎作用,其机制为抑制NO、IL-6的产生,抑制PMN产生氧自由基,但可能与影响下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴无关.

急性脑缺血后甘草甜素抗细胞间黏附作用实验研究

目的 探讨甘草甜素在急性脑缺血后的抗细胞间黏附作用.方法 将成年雄Wistar大鼠40只随机分为正常对照组、伪手术对照组、脑缺血-再灌注损伤组(脑缺血组)、脑缺血-再灌注损伤加甘草甜素组(脑缺血加甘草甜素组)4组,每组10只.分离培养大鼠脑毛细血管内皮细胞(CCEC)和多形核白细胞(PMN),利用微管吸吮技术观察各组CCEC和PMN间黏附力特性的变化.结果与结论 脑缺血-再灌注后各时间点CCEC和PMN的黏附力和黏附应力均明显高于正常对照组和伪手术组(P<0.01);加用甘草甜素后,CCEC和PMN的黏附力和黏附应力均明显下降(P<0.05或P<0.01).结论脑缺血-再灌注损伤后,甘草甜素可抑制CCEC和PMN的黏附,减轻脑损伤.

急性肺损伤大鼠肺组织PMN扣押的变化及山莨菪碱的影响

多形核白细胞（Polymorphonuclear leukocyte,PMN）于肺内大量扣押是急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）和急性呼吸窘迫综合征（Acute respiratory distress syndrome,ARDS）发病过程中的早发事件，是PMN介导肺血管内皮细胞、肺泡上皮细胞广泛损伤致通透性增加、肺水肿及微血栓形成的关键所在［1］。髓过氧化物酶（Myeloperoxidase,MPO）主要存在于PMN中，每个PMN所含的酶量都是一定的，因此组织MPO活力可能反映组织PMN的积聚量，我们通过分光光度法测定内毒素性ALI大鼠肺组织MPO活力观察ALI过程中大鼠肺组织PMN扣押量的变化及山莨菪碱对这种变化的影响。

大鼠脊髓压迫伤后PMN浸润的变化及MPS的治疗作用

脊髓损伤在战时和平时的创伤发生率中均占有一定的比例,其原发损伤后继发性损伤是致瘫的重要原因,但确切机制目前尚不清楚.近年来多形核白细胞(PMN)在继发性脊髓损伤中的作用受到重视[1],研究PMN在脊髓继发性损伤中的作用及其机制具有重要意义.

高压氧对缺血再灌注损伤后多形核白细胞的影响

缺血再灌注损伤在很多外伤和疾病的组织损伤病理生理过程中起重要作用[1],如心肌梗死、中风、挤压损伤等.高压氧已经在多种缺血再灌注损伤模型上进行了治疗性实验研究.如心肌、骨骼肌、小肠、肝脏并获得有益的治疗结果.值得注意的是,高压氧用于缺血再灌注损伤治疗中,直觉中会假设在再灌注过程中由氧产生的氧自由基会对细胞的脂质成分、蛋白质、核酸产生损伤作用.而在体实验则观察到再灌注前使用高压氧可在缺血部位产生积极的治疗效果.目前高压氧对缺血再灌注损伤的基本治疗机制逐渐为人们所了解[2].高压氧从多个方面对缺血再灌注损伤产生治疗作用,包括:中性粒细胞、内皮细胞、炎性介质、脂质过氧化、细胞能量代谢、微循环等.

痛泻要方的抗炎作用研究

目的:探讨痛泻要方的抗炎作用及其机制.方法:以过滤空气皮下注射和1%角叉莱胶囊内注射制备大鼠背部气囊炎症模型预防性灌胃用药,用放免法检测炎性渗出液中IL-6和PGE2,用硝酸还原酶法测定渗出液中NO,用化学发光法分析药物血清对多形核白细胞(PMN)活性的影响.用MTT染色法分析肠上皮内淋巴细胞(IELs)的增殖情况.结果:痛泻要方和氢化可的松均能显著降低大鼠气囊炎症渗出液中IL-6水平,降低大鼠气囊炎症渗出液中NO含量.痛泻要方药物血清、10-4～10-6mol/L芍药苷能显著降低PMN的活性,且10-4moL/L芍药苷的作用与氢化可的松相当,痛泻要方药物血清对PMN活性的影响明显强于正常大鼠血清.痛泻要方药物血清和正常大鼠血清皆能明显促进IELs增殖.结论:痛泻要方具有抗炎作用,其作用机制包括降低炎症渗出液中IL-6、NO水平,抑制PMN活性,促进肠道IEIJs的增殖.

013慢性充血性心力衰竭患者周围血多形核白细胞的一氧化氮合成酶的活性

不同间歇低氧暴露内皮细胞与多形核白细胞共培养下核转录因子κB p65表达水平的研究

目的 探讨不同间歇低氧暴露的内皮细胞和多形核白细胞(PMN)共培养后内皮细胞中核转录因子κB p65(NF-κB p65)的水平变化.方法 18只雄性Wistar大鼠随机分为常氧组和间歇低氧组(IH组).IH组暴露于间歇低氧环境中,氧浓度波动于5.4％ ～20.7％,低氧频率为30次/h,8 h/d,6周后处死大鼠,腹主动脉取血,分离纯化PMN.PMN分别与常氧暴露内皮细胞、IH暴露内皮细胞(低氧频率12次/h,共4h)共培养4h.细胞按暴露情况分为常氧内皮+常氧PMN组,IH内皮+常氧PMN组,常氧内皮+IHPMN组,IH内皮+IHPMN组.Western blotting测定内皮细胞中NF-κB p65浓度,GAPDH为内参,以NF-κB p65/GAPDH标准化NF-κB p65的表达量.结果 IH内皮+常氧PMN组与常氧内皮+IHPMN组NF-κB p65表达量分别为2.49±0.39和2.14±0.33,两组间差异无统计学意义(P＞0.05),但两组均较常氧内皮+常氧PMN组显著升高(0.68±0.20,P＜0.05).IH内皮+IHPMN组NF-κB p65表达水平为4.17±1.48,较其余三组显著升高(P＜0.05).结论 间歇低氧可分别致内皮细胞和PMN发生炎症反应,而当两种细胞同时暴露于间歇低氧条件时炎症反应为严重.上述两种细胞间的相互作用和引发的炎症反应可能是低氧内皮细胞损伤和睡眠呼吸暂停综合征并发心血管合并症的重要原因.

急性胆管炎多形核白细胞聚集及其肝损害作用的研究

为探讨多形核白细胞(PMN)浸润在急性胆管炎肝损害中的作用,作者观察了急性胆管炎时肝脏PMN聚集与肝损害的关系.结果显示: 急性胆管炎时大鼠肝组织PMN数量进行性增多,开始主要聚集在肝窦,12小时后穿越肝窦内皮细胞在肝细胞周围聚集并逐渐增多,肝细胞变性坏死,动物24小时存活率仅为40%.消耗循环PMN使肝脏功能损害得到明显改善,肝坏死面积减少,动物存活率提高.表明肝脏PMN浸润在胆道感染肝损害发生中具有重要作用.

P-选凝素与心肌缺血-再灌注损伤

研究心肌缺血-再灌注损伤中P-选凝素(P-selectin)的重要作用.P-selectin是一种糖蛋白黏附因子, 存在于内皮细胞和血小板,并介导血小板、内皮细胞和多形核白细胞(PMNs)等之间的相互作用,且与一氧化氮有着密切的关系,形成了许多复杂的炎症病理过程,在心肌缺血-再灌注损伤中起到了关键的作用.特别是P-selectin与晚期再灌注损伤、血小板及心肌损伤中治疗作用、新的P-selectin基因缺陷小鼠和糖尿病小鼠等的心肌缺血-再灌注损伤中表现的深入研究,使其在缺血-再灌注损伤中的重要性和复杂性显得更加突出.

β-葡萄糖醛酸苷酶与牙周炎的相关性研究进展

内源性β-葡萄糖醛酸苷酶是溶酶体内的酸性水解酶,主要来源于多形核白细胞,是细胞外基质主要成分大分子蛋白聚糖降解的酶原之一,直接参与细胞外基质的降解过程.由于该酶与肿瘤的转移能力和炎症活动状态密切相关,故近年来其检测技术和研究意义备受关注.笔者下面主要就内源性β-葡萄糖醛酸苷酶的活性水平与牙周炎症之间的相关性及其相关性研究的实际意义作一综述.

伴放线放线杆菌对2型糖尿病患者多形核白细胞分泌白细胞介素-6和凋亡的影响

目的 研究2型糖尿病患者多形核白细胞(PMN)分泌功能和凋亡情况以及伴放线放线杆菌(A.actinomycetem)对其的影响.方法 Percoll不连续梯度离心法分离非糖尿病者和2型糖尿病患者外周血中的PMN,实验组的PMN加入A.actinomycetem的超声滤液刺激,对照组为PMN的PBS悬浮液.培养20、40、60min后定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其白细胞介素-6(IL-6)的分泌水平;另外在培养6、12h后使用流式细胞分析仪检测各组PMN的凋亡率.结果 糖尿病患者的PMN无论是否受到 A.actinomycetem超声滤液刺激,在实验各个时段的IL-6分泌水平均高于非糖尿病者,且细胞凋亡率明显降低(P<0.001).结论 2型糖尿病患者的PMN具有过度炎症反应特征,在受到牙周致病菌刺激后,凋亡推迟,分泌炎症介质,从而造成严重的牙周组织破坏.

粪肠球菌对多形核白细胞释放基质金属蛋白酶-8及凋亡影响的实验研究

目的 体外研究粪肠球菌对多形核白细胞(PMNs)释放基质金属蛋白酶-8(MMP-8)及凋亡的影响.方法 提取PMNs,以加入粪肠球菌悬浮液的PMNs作为实验组;加入乙酸肉豆蔻佛波醇的PMNs为阳性对照组;PMNs的PBS悬浮液为阴性对照组.培养0、20、60、120 min后,ELISA法检测各时间点MMP-8的释放量.以加入粪肠球菌裂解液的PMNs为实验组,PMNs的PBS悬浮液为对照组,培养2、5、10、15 h后,流式细胞分析仪检测PMNs的捌亡率.结果 在0 min时,实验组和阳性对照组MMP-8释放量间差异无统计学意义(P＞0.01);在60、120 min时,实验组MMP-8的释放量明显低于阳性对照组,二者间差异有统计学意义(P＜0.01).在2、5、10、15 h,实验组凋亡率均高于对照组(P＜0.01).结论 粪肠球菌作用于PMNs后,PMNs无大量释放MMP-8现象,PMNs无凋亡延迟现象.