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高通量血液透析与常规血液透析治疗慢性尿毒症患者的疗效差异研究
目的 探究高通量血液透析与常规血液透析治疗慢性尿毒症患者的疗效差异.方法 选取2015年8月~2017年7月我院收治的慢性尿毒症患者60例,以计算机随机分组的方式分为对照组和观察组.对照组(n=30)予以常规血液透析,观察组(n=30)予以高通量血液透析.比较2组治疗效果及不良反应情况.结果 观察组的iPTH下降率、P下降率、β2-M下降率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组的BUN下降率、Cr下降率之间的差异无统计学意义(P>0.05);观察组的不良反应发生率(6.66%)显著低于对照组(23.33%)差异无统计学意义(P>0.05).结论 对慢性尿毒症患者采取高通量血液透析治疗,既可获得较为理想的治疗效果,又能降低不良发生发生率,应用价值较高,值得推广.
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两种自动化全基因血液样本DNA提取效果的比较
血液中DNA的提取是遗传性疾病、胎儿产前无创伤诊断、肿瘤和传染性疾病等临床早期确诊的基础技术和重要手段.外周血因取材方便,是临床上常见的DNA基因组提取样本[1,2].目前,对大量临床血液样本DNA的提取方法多局限于酚-氯仿有机抽提法、盐析法、滤膜离心柱法等,但此类方法只能用于人工提取,不适合高通量样本的DNA提取,且大多存在耗时长、费用高而且操作繁琐等问题.为建立适合临床高通量血液DNA提取的方法,本研究采用Tecan 150-8型、Qiacube两种不同类型的全自动化DNA提取工作站,运用磁珠吸附法和硅珠膜吸附法,建立两种高通量自动化临床血液DNA提取法,并对其进行比较,旨在建立一种快速、高效、批量、适合不同临床需求的全血基因组提取方法.
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高通量血液透析有效清除透析患者瘦素与改善营养状态和贫血
目的 观察高通量透析(high-flux hemodialysis,HFHD)对维持性血液透析(maintainhemodialysis,MHD)患者瘦素的清除与改善营养状态和贫血的影响.方法 本研究为前瞻性、自身对照研究.120例常规低通量血液透析患者转换为HHD 6个月.分别观察0个月(治疗前)、3个月、6个月瘦素(leptin)、血红蛋白(Hb)、红细胞比容(Hct)、血清白蛋白(ALB)、血清前白蛋白(PA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及相关指标水平,同时进行PG-SGA营养评分.结果 与治疗前比较,HFHD治疗3、6个月后瘦素显著下降[(8.21 ±4.18) vs (6.53±3.72) vs (5.54± 3.39)μg/L,P<0.05],差异有统计学意义.Hb、Hct呈逐渐升高[(96.40± 16.09)vs(103.85±13.90) vs(113.11±11.85) g/L,P<0.05],差异有统计学意义.ALB、PA在治疗3个月时变化不明显,6个月后明显上升[(35.38±4.93) vs(39.82±3.33) g/L,P<0.05;(30.20±5.57)vs(39.92±10.27)g/L,P<0.01],差异有统计学意义.除HDL-C以外,TNF-α、肾素、CHO、TG、LDL-C等结果显示,治疗后6个月后较治疗前变化差异有统计学意义(P<0.05).PG-SGA营养评估,治疗后6个月营养不良比例显著下降(P<0.05),差异有统计学意义.结论 高通量血液透析能有效清除透析患者血清瘦素对改善维持性血液透析患者的贫血和营养状态有积极的作用.
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基于人类全基因表达谱技术对"肾精亏虚证"原发性骨质疏松患者差异基因表达分析
目的 基于人类全基因表达谱芯片高通量测序技术,检测肾精亏虚证骨质疏松患者和同龄健康状态老年人血液中的差异基因表达,探讨肾精亏虚证骨质疏松症的发病机制,为中医药防治该病证提供可能的作用靶点.方法 从辽宁中医药大学附属医院和上海中医药大学附属龙华医院门诊肾精亏虚证原发性骨质疏松症患者群中随机选择16例患者,男女各半,年龄60岁以上,作为OP组(OP group);同龄健康状态老年人24例,男女各半,年龄60岁以上,作为对照组.采用人类全基因表达谱芯片检测两组人群的差异基因表达,并对差异显著的基因表达进行荧光定量PCR验证.结果 在肾精亏虚证OP患者中共有602个基因呈现差异性表达,其中上调基因579个,下调基因23个(FC≥1.5或FC≤0.667,q-value≤5%).表达上调超过3倍的基因有7个,分别为S100P、SNX3、DEFA1、MMP9、ANXA3、IL1R2、PLSCR1;表达下调超过2倍的基因有3个,分别为CX3CR1、SPON2、GNLY.对以上10个差异显著的基因进行RT-PCR验证,结果与基因芯片检测结果一致.结论 肾精亏虚证OP患者与同龄健康老年人比较,差异基因表达上调或下调显著,这些基因通过调控免疫应答、防御应答、趋化因子信号转导通路等方面在肾精亏虚证OP的发病过程中可能发挥着重要的作用.
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基因芯片和组织芯片在前列腺癌基因诊断中的应用
前列腺癌是老年人疾病,占美国男性主要死亡原因第二位,近年来国人前列腺癌发病率有明显上升趋势[1].临床上亟待一种敏感的技术对前列腺癌早期诊断、治疗、演进趋势及预后进行评价,增加对前列腺癌本质的认识.新近发展的高通量基因表达分析平台--基因芯片及组织芯片技术,具有多样品并行处理能力,分析速度快,所需样品量少,污染少,现已用于前列腺癌的基因诊断、基因表达及寻找新基因等研究领域.我们对基因芯片和组织芯片技术在前列腺癌基因诊断研究方面的初步应用简要综述如下.
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DNA微阵列在乳腺癌研究中的进展
乳腺癌是危害女性生命健康的一大杀手,全世界每年约有120万女性患乳腺癌,50万人死于乳腺癌.我国属于乳腺癌低发地区,但近年来的发病率有明显增长趋势,在一些城市如北京、天津、上海已居女性恶性肿瘤发病的首位,随着基因研究的深入,许多同乳腺癌发生发展相关的基因被发现并逐渐应用于临床工作,但仍不能解释个体之间在乳腺癌进展过程及对治疗反应等方面存在的差异,无法从根本上解释肿瘤细胞以及正常细胞内复杂的细胞信号转导通路.微阵列技术因其具有大规模、高通量、平行处理等优点,目前被广泛应用于医学研究,特别是肿瘤研究领域,在乳腺癌方面的研究也初显成果,现综述如下.
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临床多药耐药铜绿假单胞菌基因芯片快速检测技术的研究
目的:建立一种应用基因芯片技术检测临床病原微生物铜绿假单胞菌菌种及其耐药基因的方法,并进行鉴定。方法根据生物信息学设计引物及探针,采用基因芯片技术对分离51株临床病原微生物及其耐药基因进行检测,并以PCR结果做对照来评价芯片技术的特异性及灵敏度。结果采用基因芯片技术共检出41株铜绿假单胞菌,病原菌阳性检出率100.0%;耐药基因检测结果显示,有11株T EM基因阳性,15株V IM-2基因阳性,8株Int Ⅰ基因阳性,1株 IM P-1阳性,4株阴性,其中39份基因芯片检测结果与 PCR结果一致,准确率为95.1%。结论基因芯片系统具有高通量、高特异性等优点,对鉴定临床多药耐药铜绿假单胞菌有很大的应用价值,尤其能够为临床快速选择合适的抗菌药物提供很好的指导依据。
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使用微阵列分析胎儿先天性心脏缺陷的产前基因诊断
本文发表在2011年10月的《Prenatal Diagnosis》杂志上.微阵列技术具有高分辨率、高通量和高准确性等优点,已成为一种重要的工具,用于产前、产后和植入前诊断染色体亚微结构异常.
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高通量基因测序产前筛查与诊断技术规范解读
近几年,无创产前检测(noninvasive prenatal test,NIPT)已被大家所熟知,一些试点单位也在逐步开展此项技术.从世界范围来看,已经有多个国家都出台了相应的NIPT指南,我国也于2015年出台了NIPT相关的政策法规.
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多重连接探针扩增技术在产前诊断中的应用
多重连接探针扩增技术(multiplex ligationdependent probe amplification, MLPA),是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进行定性和定量分析的新技术.
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人乳头瘤病毒基因亚型与宫颈病变的关系
宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,位居女性恶性肿瘤第二位.我国宫颈癌发病率和死亡率占全世界的1/3.宫颈癌病因学研究结果已证实,人乳头瘤病毒(HPV)感染是其发生的主要致病因素,迄今已发现120多种HPV亚型,依据其致病力大小,将HPV亚型分为低危型和高危型两类.基因芯片是近年发展起来的对病原体核酸进行高通量快速的检测方法,主要可用于HPV分型检测[1],本文旨在进一步了解HPV亚型与宫颈病变的关系.
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急性白血病分子-细胞遗传学研究及临床应用进展
近年来,染色体双色或多色荧光原位杂交(FISH)、光谱核型分析、高通量基因芯片、染色体涂抹及基因扩增、定位和克隆等新技术的应用,大大提高了白血病常规法易漏检的隐匿性或复杂性异常染色体的检出率.
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肿瘤标志蛋白质组学研究及展望
蛋白质组学的概念早由澳大利亚学者Wilkins和Williams于1994年提出,其从整体水平对特定时间和环境下组织或细胞的蛋白构成进行高通量研究.特异性的蛋白标志对于早期肿瘤的诊断具有重要的临床应用价值,蛋白质组学技术可以在总体上比较肿瘤样本(组织、体液和细胞株)和非肿瘤样品的蛋白表达谱差异,为新的肿瘤标志的发现提供有力的工具.
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高通量筛选法鉴定选择性肿瘤干细胞抑制因子
研究表明肿瘤干细胞 (CSCs)促使肿瘤的生长和复发.CSCs对目前多种化、放疗治疗耐受.这表明虽然许多抗肿瘤的治疗能够杀死大量肿瘤细胞,但终仍会失败,原因在于这些治疗不能根除引起肿瘤再生的CSCs.
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全基因组外显子测序技术在神经系统疾病中的应用及科学基金资助情况分析
近年来,基因组技术取得了迅猛发展,尤其是自2005年以来,以Roche公司454技术、Illumina公司Solexa技术和ABI公司SOLiD技术为标志的新一代测序技术相继问世,标志着基因组研究步入了一个全新的高通量时代.全基因组外显子测序是一种针对核基因组上1%的蛋白质编码序列进行快速、深度的靶向测序[1],与全基因组测序相比,其针对性强、覆盖深度大、数据分析效率高,且大大降低了成本[2].
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高通量组织微阵列技术在临床研究中的应用
高通量组织微阵列(组织芯片)技术是新发展起来的一种组织学新技术,它需要取材少,可将数十到上千个微小组织整齐的排放在一张载玻片上制成组织芯片,它可含多达1000个直径0.6~2mm的组织,一次试验可采用一种试剂同时对组织芯片上多达1000种组织进行一种生物标记物的检测,信息量大,大限度的减少了系统误差,加速了基础研究转化为临床应用的步伐,是现代临床研究中不可多得的分子病理手段.
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基因芯片在内耳基因功能与突变检测中的应用
基因芯片又称DNA芯片,寡核苷酸微阵列等,是在人类基因组计划实施过程中出现并发展起来的.它融合了多领域的各项技术,具有高通量、高集成、微型化和自动化的特点,能够高效平行地处理和应用日益庞大的基因组信息,被称为继单克隆抗体技术和PCR技术之后生命科学中的又一重大技术创新[1],在序列分析、新基因的发现、基因表达谱分析、基因诊断及构建单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)图谱等方面发挥着日益重要的作用.
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生物芯片技术在眼科的应用
生物芯片技术是近几年来生命科学领域中发展起来的一项新技术,以其检测的快速、高效、高通量、高度并行性、微型化和自动化等特点一经出现即成为生命科学领域研究的热点.目前已成为研究生命本质及疾病发生发展规律的重要手段,生物芯片技术在眼科疾病研究中也颇受关注.本文对生物芯片技术的基本概念、分类、特点、基本原理及其在眼科疾病研究中的应用前景作一综述.
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代谢组学技术在精准医疗中的运用
个体差异的存在对复杂的代谢综合征(如糖尿病、肥胖、心血管疾病)和癌症治疗及预防带来了巨大的挑战.精准医疗策略利用高通量的分子监测技术筛选与疾病相关的生物标志物,为疾病发生的病理学机理研究及动态监测提供了新的思路.在精准医疗的分子监测技术中,代谢组学技术分析的结果与疾病发生的相关性高.本文对代谢组学技术在精准医疗中的运用进行阐述,主要包括代谢组学技术的优点,代谢表型的影响因素和代谢组学在疾病监测中的运用,旨在促进精准医疗策略在人体健康管理中的运用.
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RNR2调控的重组绿色荧光蛋白酵母细胞的构建及其对化学诱变原的高通量筛选
目的 建立RNR2调控的酵母增强绿色荧光蛋白(yEGFP)发光酵母细胞,高通量筛选化学诱变原.方法 用PCR方法从酵母(W303-1 A)基因组扩增RNR2启动子,经酶切后,用T4连接酶与线性化的含酵母嗜好遗传密码子的yEGFP报告载体相连,连接产物转化子质粒经酶切和测序鉴定,构建RNR2调控的yEGFP酵母报告载体.用醋酸锂方法将其转化于W303-1 A酵母细胞,从而构建成RNR2调控的yEGFP发光酵母细胞(W303-1 A/RNR2-yEGFP).用甲磺酸甲酯0~400 mg· L-1分别作用于该发光酵母细胞0,4,8,12,16和20 h后,于倒置荧光显微镜下观察荧光,用多功能酶标仪检测其荧光发光强度,选择佳诱导时间;用不同浓度的DNA烷化剂、DNA断裂剂和DNA合成酶抑制剂作用于该重组细胞16h,检测其荧光发光强度,考察W303-1 A/RNR2-yEGFP细胞对各种化学诱变原的敏感性.结果 经测序确定W303-1 A/RNR2-yEGFP构建成功.选择16 h为佳诱导时间;各种化学诱变原与W303-1 A/RNR2-yEGFP细胞作用16h后,与DNA发生结合的化合物中放线菌素D和溴乙锭诱导的发光度与对照组无明显差别,发光倍数<1.5;与DNA发生烷基化的化合物中,甲磺酸甲脂200 mg· L-1诱导的细胞发光度强,发光倍数为5.21,瘤可宁200 μg· L-1诱导的发光倍数为1.9,而丝裂霉素C的发光度与对照组无明显差别.在使DNA发生断裂的诱变原中,顺铂250 mg· L-1诱导的细胞高发光倍数为3.7,其次4-硝基-N-氧化喹啉3.1 mg·L-1、博来霉素12.5 mg·L-1和福来霉素200 mg· L-1,高诱导倍数分别为2.35,2.26和2.53;在抑制DNA合成酶或拓扑异构酶的诱变原中,5-氟尿嘧啶500 μg· L-1、羟基脲570.45 mg· L-1和喜树碱30 mg,L-1所诱导的细胞大发光倍数分别为2.36,2.65和2.53;而非基因毒性化合物秋水仙碱、刀豆氨酸和四环素诱导的发光度与对照无明显差别.结论 该重组发光酵母细胞可用于对多数造成DNA断裂或合成阻断的化学诱变原筛选,具有快速、方便和高通量等特点.