首页 > 文献资料
-
围手术期应用L-精氨酸联合整蛋白复方制剂对胃癌患者术后抗肿瘤免疫及肿瘤负荷的影响
目的:分析围手术期应用L-精氨酸联合整蛋白复方制剂对胃癌患者术后抗肿瘤免疫及肿瘤负荷的影响.方法:68例胃癌患者均接受根治性手术治疗,根据围术期营养干预不同分为对照组(常规葡萄糖盐水肠内营养)34例、观察组(L-精氨酸联合整蛋白复方制剂肠内营养)34例.检测两组术后近期抗肿瘤免疫细胞水平、血清病情相关指标、营养及炎症指标水平,并随访3年观察患者残胃MRI改变.结果:(1)观察组治疗后3个月,静脉血CD4+T淋巴细胞水平,CD4+/CD8+比值均高于对照组(P＜0.05),CD8+T淋巴细胞、Treg细胞水平低于对照组(P＜0.05);血清Pentraxin-3、CYFRA21-1、TTF-1、HE4水平低于对照组(P＜0.05);白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、白介素-2(IL-2)水平高于对照组,白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)水平低于对照组(P＜0.05).(2)两组患者术后3年残胃MRI图像存在显著差异.结论:围手术期应用L-精氨酸联合整蛋白复方制剂可优化胃癌患者术后免疫及营养状态,在降低远期残胃癌发生率等方面也有肯定性作用.
-
自噬和抗肿瘤免疫关系的研究进展
自噬是真核细胞进化过程中相对固定的蛋白质降解途径.真核细胞通过自噬实现对长寿命蛋白质和细胞器的降解和重复利用.自噬在维持真核细胞合成代谢和分解代谢的平衡作用上备受关注.肿瘤细胞普遍存在着合成代谢和分解代谢的紊乱.针对自噬在肿瘤细胞发生、发展中的作用,研究发现,肿瘤细胞存在着自噬关键基因的缺陷,将自噬关键基因重新引入后,肿瘤细胞的生存能力下降[1].进一步研究揭示,自噬主要通过隔离受损细胞器,促进病变细胞分化,增强蛋白质的分解代谢,直接或间接地影响机体的免疫功能等机制发挥抗肿瘤作用.本文就自噬对机体免疫功能的影响来探讨自噬的抗肿瘤作用.
-
树突状细胞与肥大细胞瘤细胞融合后诱导T细胞介导的抗肿瘤效应
该研究利用聚乙二醇将相同来源的树突状细胞(DC)与小鼠的肥大细胞瘤系P815融合在一起,形成治疗性DC瘤苗,并对这种树突状细胞瘤苗免疫小鼠后抑制肿瘤生长的作用及其机制进行初步探讨.
-
肾癌冻融抗原致敏树突状细胞介导的CTL对肾癌786-0细胞株的体外杀伤作用研究
目的:研究肾癌冻融抗原负载树突状细胞(DCs)诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肾癌786-0细胞株的体外杀伤效应;方法:利用人外周血体外经重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、人白介素-4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导产生的DCs负载肾癌冻融裂解物后诱导产生特异性CTL,观察杀伤后肿瘤细胞的形态变化,MTT法测定细胞毒性试验,ELISA测定细胞因子的分泌.结果:(1)负载肾癌抗原的DCs能促进T细胞的增殖;(2)诱导产生的特异性CTL对肾癌细胞具有高杀伤率,显著高于非特异性T细胞(P＜0.05);(3)肾癌冻融抗原能够上调DCs人白介素-12(rhIL-12)的分泌,提高抗肿瘤的作用.(4)杀伤后的肾癌细胞发生明显凋亡.结论:由肾癌冻融抗原致敏的DCs所诱导产生的抗原特异性CTL对肾癌786-0细胞株有明显的杀伤效应,提示DCs瘤苗具有为肾癌患者进行特异性过继免疫治疗的临床应用前景.
-
慢性粒细胞白血病来源的DC细胞体外诱导高效而特异的抗肿瘤免疫
目的:选用慢粒患者的原代血细胞,经细胞因子组合联合诱导,生成携带白血病抗原信息的树突状细胞(Dendritic Cell.DC),为DC疗法在临床上的应用提供理论依据.方法:慢粒(急变期)病人的PBMC用GM-CSF+IL-4+TNF α诱导后进行形态和细胞表型的鉴定.应用同种混合淋巴细胞反应和细胞毒性实验,观察诱生之DC刺激淋巴细胞增殖的能力以及介导抗白血病特异性细胞毒性反应的能力.利用酶联免疫吸附实验检测DC产生IL-12及协助产生IFN-Y的能力.结果:诱生DC均具有DC的形态特征和超微结构.表达DC相关表面分化抗原.并可刺激T淋巴细胞产生较强的增殖效应.诱导出针对自身肿瘤靶细胞的特异性CTL反应.同时可不同程度的分泌IL-12和可协助T细胞产生IFN-Y.结论:慢粒细胞在适当的细胞因子的诱导下,可分化为具有DC形态的细胞,后者可诱导出高效而特异的抗肿瘤免疫.
-
H22源exosomes瘤苗在小鼠体内的抗肿瘤及免疫调节作用
目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响.方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/e小鼠建市动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组.15 d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,计算抑瘤率;分别称取脾重、胸腺重,检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数;用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况和细胞毒活性;酶连免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞产生IL-2、INF-γ的能力.结果:接种exosomes瘤苗能显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达42.26%;与对照组比较,实验组荷瘤鼠胸腺指数、脾指数显著提高(P<0.05);exosomes促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,同时脾淋巴细胞培养上清中IL-2、INF-γ的水平升高.结论:exosomes瘤苗可能通过增强小鼠的免疫功能抑制小鼠肝癌移植瘤生长.
-
HIFU通过下调miR-181a进而促进ICAM-1表达增强小鼠抗肿瘤免疫
目的 探讨miR-181a在高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)增强机体抗肿瘤免疫中的作用及其机制.方法 ①皮下构建供HIFU治疗的黑色素瘤移植瘤小鼠模型,采用简单随机法随机分为HIFU组与荷瘤组,每组30只,采用MTT方法检测各组脾淋巴细胞对B16细胞的杀伤活性,ELISA检测小鼠血清及共培养上清中TNF-α及IFN-γ的表达水平;②qRT-PCR检测HIFU组与荷瘤组脾淋巴细胞中的差异miRNAs;③用生物信息学方法预测差异miRNAs的潜在靶基因,通过RT-PCR及Western blot验证靶基因的表达;④构建荧光素酶报告质粒进一步验证差异miRNAs的靶基因,再将差异miRNAs的mimics转染脾淋巴细胞,RT-PCR及Western blot检测其靶基因表达的变化,以进一步确认差异miRNAs对靶基因表达的影响.结果 ①HIFU治疗能够抑制黑色素瘤生长,促进脾淋巴细胞分泌TNF-α和IFN-γ,增强脾淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性;②HIFU处理明显下调脾淋巴细胞中miR-181a的表达水平(P＜0.01);③生物信息学方法预测发现共刺激分子细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)可能是miR-181a的潜在靶基因,且HIFU处理明显促进脾淋巴细胞中ICAM-1的mRNA和蛋白质的表达(P＜0.01);④miR-181a mimics显著抑制pLUC-ICAM-1-3'UTR报告质粒荧光素酶的活性(P ＜0.01),并下调脾淋巴细胞中ICAM-1的mRNA(P＜0.05)和蛋白质的表达(P＜0.01).结论 HIFU通过抑制miR-181a对共刺激分子ICAM-1的负调控作用从而增强荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫.
-
小鼠肝癌细胞(H22)源外泌体的体内抗肝癌作用研究
目的 在荷瘤动物模型观察小鼠肝癌细胞(H22)来源的外泌体(exosomes)激发宿主抗肝癌免疫应答的效应.方法 用自行分离纯化的小鼠肝癌细胞H22源外泌体免疫小鼠,然后给小鼠皮下注射H22肿瘤细胞,观察肿瘤的生长状况.用MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况和细胞毒活性;用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD4+、CD8+ T淋巴细胞浸润情况.结果 该外泌体使肿瘤出现时间延迟,肿瘤生长缓慢,小鼠生存率提高.促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,促进CD4+ 和CD8+ T细胞活化.结论 小鼠肝癌细胞(H22)源外泌体能诱导抗肿瘤应答,有效地诱导特异性的杀伤肿瘤细胞活性,有针对亲本细胞的免疫保护作用.
-
树突状细胞抗肿瘤免疫的研究进展
树突状细胞(dendritic cell,DC)是体内有效的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC),其主要功能为捕获、加工处理抗原,并将抗原信息呈递给T、B淋巴细胞,进而引发一系列免疫应答.有别于其他APC,DC大特点是能够刺激初始型T细胞活化,在诱导机体免疫应答中起关键作用.近年来,随着对DC在肿瘤抗原的识别、加工处理及递呈过程中作用机制的进一步阐明,DC在抗肿瘤免疫中的重要作用日益受到关注,DC介导的肿瘤免疫治疗研究也取得了较大进展,显示其在抗肿瘤免疫治疗中良好的应用前景.本文就DC的生物学特性、抗肿瘤机制、DC疫苗及其在肿瘤免疫治疗中的应用等方面予以综述.
-
SEA-CD80基因过表达Hepa1-6肝癌细胞体外诱导的免疫学效应
观察经SEA和CD80重组腺病毒感染Hepa1-6肝癌细胞后体外能否诱导抗肿瘤免疫学反应.方法 Hepa1-6细胞分别经空载体腺病毒Ad(空)和重组腺病毒Ad-MMRE-mTERT-B7、Ad-MMRE-mTERT-SEA、Ad-MMRE -mTERT-BIS感染后,和小鼠脾淋巴细胞共培养,然后采用Brdu酶联免疫法(ELISA)检测淋巴细胞增殖；流式细胞术检测T淋巴细胞亚群增殖；ELISA法检测细胞因子IL-2、TNF-α和IFN-γ的产生；LDH释放法检测CTLs对Hepa1-6的杀伤作用.结果与感染空载体腺病毒Ad(空)和未感染Hepa 1-6细胞相比,经重组腺病毒感染的Hepa1-6细胞体外能够显著诱导脾淋巴细胞的增殖,其中CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞增殖显著；细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-2的产生显著升高；CTIs对肿瘤细胞的杀伤活性显著增强；双基因过表达Hepa1-6细胞体外诱导的免疫应答高于单基因过表达Hepa-6细胞.结论Hepa-6细胞经重组腺病毒感染后,表达在细胞膜上的SEA和CD80均具有免疫学活性,为今后采用所构建重组腺病毒进行肿瘤的免疫基因治疗提供了实验依据.
关键词： 金黄色葡萄球菌肠毒素A CD80 腺病毒 体外 抗肿瘤免疫 -
抗原致敏期缺损补体增强抗肿瘤免疫效应
目的 观察蛇毒因子(CVF)缺损补体对疫苗诱导的抗肿瘤免疫的影响.方法 用CVF分别在抗原的致敏期和免疫的效应期缺损补体,抗原OVA加完全弗氏佐剂(CFA)联合免疫C57BL/6小鼠,14 d后接种E.G7肿瘤细胞,评价补体缺损效果,观察肿瘤出现时间,记录小鼠肿瘤大小.结果 OVA+CFA免疫的正常小鼠,在肿瘤接种14 d内能完全抑制肿瘤生长;抗原致敏期缺损补体,肿瘤接种21 d内能完全抑制肿瘤生长;免疫效应期缺损补体,肿瘤出现的时间与OVA+CFA免疫的正常小鼠相似.结论 抗原致敏期补体缺损可能有利于抗肿瘤免疫.
-
地诺单抗对骨巨细胞瘤细胞功能的影响及其免疫效应的初步研究
目的 观察地诺单抗对骨巨细胞瘤基质细胞的治疗作用,并探讨其在骨分化及免疫方面的机制,为地诺单抗的临床治疗应用提供理论依据.方法 取临床肿瘤组织标本,体外培养获取原代骨巨细胞瘤基质细胞,加入地诺单抗,观察药物对基质细胞增殖与凋亡的影响,并进行成骨分化及相关免疫机制的探讨.结果 当地诺单抗药物质量浓度为60、600及1 200μg/ml时,可显著抑制细胞增殖(P＜0.05),并且药物质量浓度为600 μg/ml时,抑制作用达到大;与对照组相比,实验组的基质细胞的凋亡率显著升高(P＜0.05);实验组的基质细胞的cbfa-1、osterix表达均显著升高(P＜0.05);实验组的基质细胞分泌的IL-12及TNF-α明显升高(P＜0.05).结论 与对照组相比,地诺单抗可显著抑制骨巨细胞瘤基质细胞的增殖,诱导凋亡,促进向成骨细胞分化,并增强机体的抗肿瘤免疫.
-
T细胞稳态增殖与自身免疫
近年有关外周T细胞群体存活与稳态的深入研究发现: 抗原活化前T细胞的存活需要自身肽-MHC复合物的作用以提供适度的存活信号;在淋巴细胞急剧减少的状态下,T细胞一样通过与自身肽-MHC复合物的作用发生稳态增殖以恢复T细胞群体的正常规模,这种增殖后的T细胞具显著的自身反应性且兼具效应与记忆T细胞的功能.稳态增殖后的T细胞可能参与自身免疫疾病的发生;与此同时,稳态增殖的这种特性也可用来激发特异的抗肿瘤免疫,特别针对异常高表达的非突变肿瘤抗原或肿瘤相关抗原的自身免疫.
-
脾切除对诱发性肝癌大鼠免疫功能的影响
目的探讨脾切除对诱发性肝癌大鼠抗肿瘤免疫功能的影响.方法在大鼠诱发肝癌后的第2和第4个月时,检测脾切除组和对照组大鼠的NK细胞活性、TNF-α及淋巴细胞数的变化.结果脾切除组大鼠NK细胞活性与对照组比较其差异具有显著性意义(P＜0.05),但外周血淋巴细胞计数、TNF-α水平与对照组比较差异无显著性性(P＞0.05).结论脾切除后对诱发性肝癌大鼠的抗肿瘤免疫功能有一定的影响,表现为NK细胞活性持续降低,而淋巴细胞计数和细胞因子TNF-α经过一段时间后可恢复到正常水平,与对照组比较无明显差异.
-
血管正常化与肿瘤免疫治疗
免疫治疗是一种颇有前景的抗肿瘤策略。然而，肿瘤中的免疫抑制微环境阻碍了免疫治疗的发展。异常肿瘤血管造成的缺氧，使免疫细胞趋向免疫抑制。并且异常血管通过分泌生长因子及细胞因子，改变免疫细胞的增殖、分化及功能，终形成免疫抑制的微环境。因此，有效的利用血管生成及肿瘤免疫之间的相互作用，适当的抑制血管形成，促进肿瘤血管正常化，可以改变肿瘤的免疫抑制微环境，成为改善免疫治疗的新策略。现就血管正常化与肿瘤免疫的关系，及二者的联合治疗进行综述。。
-
小鼠肺癌B7疫苗细胞FLB2C诱导的抗肿瘤免疫应答
目的研究小鼠肺癌细胞与活化B淋巴细胞融合的疫苗细胞FLB2C诱导细胞免疫反应情况.方法用母本细胞LA795作对照,采用体外混合淋巴细胞培养,观察FLB2C细胞刺激T细胞增殖情况;通过CTLL细胞MTT法测定FLB2C刺激T细胞产生分泌IL-2的作用;用FLB2C免疫小鼠,观察疫苗体内诱导小鼠CTL活性的能力.结果 FLB2C细胞在体外刺激T细胞增殖的作用明显比LA795强;FLB2C能刺激T细胞分泌IL-2,而LA795则不能;FLB2C细胞在体内能诱导CTL活性,其诱导的CTL在体外对FLB2C细胞和LA795的杀伤率分别为34%和25.3%,而LA795诱导的CTL对FLB2C和LA795杀伤率分别为10.5%和12.25%,两者的杀伤率有显著性差异.结论 FLB2C细胞在体内外均能刺激T细胞免疫应答,其能力明显强于未融合的LA795小鼠肺癌细胞.将其作为疫苗细胞将有可能通过提高机体免疫应答而达到治疗肺癌的效果.本研究为进一步探讨该疫苗的应用价值奠定了免疫学基础.
-
4-1BBL-B7-H3基因对免疫重建重症联合免疫缺陷荷瘤鼠的抑瘤作用
目的：通过建立人免疫重建重症联合免疫缺陷（SCID）荷瘤鼠嵌合模型来探讨4-1BBL-B7-H3基因在非特异性抗肿瘤免疫中的作用。方法将40只SCID鼠随机分为5组，A组（对照组）行免疫重建加注射Tca8113细胞；B组（Ad4-1BBL-B7-H3组）行免疫重建加注射含有人4-1BBL-B7-H3基因腺病毒转染的Tca8113细胞；C组（空载组）行免疫重建加注射含有空载体腺病毒转染的Tca8113细胞；D组（非免疫重建组）不给予小鼠免疫重建，注射Tca8113细胞；E组（非肿瘤组）行免疫重建加注射PBS。每周定期测量肿瘤体积；酶联免疫吸附法检测人IgG蛋白含量；流式细胞仪检测外周血中人CD3+、CD56+淋巴细胞比例；免疫组织化学法观察自然杀伤细胞2族成员D（NKG2D）和Toll样受体2（TLR2）在肿瘤中的表达；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测4-1BBL-B7-H3mRNA的表达，实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测主要组织相容性复合体1类相关分子（M1C）A、B及TLR2的表达。结果1）B组小鼠肿瘤体积小（P<0.05）；2）A、B、C、E组小鼠外周血中检测到人IgG、CD3+、CD56+淋巴细胞，B组淋巴细胞比例高于A、C和E组（P<0.05）；3）B组NKG2D和TLR2的表达较其余各组明显增强；4）人4-1BBL-B7-H3基因在B组小鼠肿瘤中稳定表达；5）B组M1CA、M1CB和TLR2的表达高于A、C、D组（P<0.05）。结论4-1BBL-B7-H3基因在肿瘤组织中的高表达能成功诱导人CD3+、CD56+细胞增殖，直接或间接活化TLR2，上调NKG2D及其配体M1CA、M1CB的表达，从而产生有效的抗肿瘤免疫应答。
-
树突状细胞与肿瘤免疫治疗
随着对肿瘤逃逸机制的不断研究,发现肿瘤细胞之所以逃避机体免疫系统监视的主要原因之一,是体内的抗原提呈细胞不能有效地提呈肿瘤抗原活化初始型T淋巴细胞.而机体内树突状细胞是强大的抗原呈递细胞,因此,人们开始了对树突状细胞的探求[1].树突状细胞( dendritic cell,DC)因其胞膜向外伸出许多星状突起类似于神经细胞的树突,因而得名.
-
白细胞介素-15协同新城疫病毒HN基因抗肿瘤免疫的作用
目的探讨白细胞介素15(IL-15)质粒、新城疫病毒HN基因(PCD-HN)质粒对肿瘤免疫反应的作用.方法采用MTT法和乳酸脱氢酶释放法,检测IL-15质粒、PCD-HN质粒对小鼠抗肿瘤免疫反应作用中T淋巴细胞的增殖和NK细胞的活性.结果IL-15质粒、PCD-HN质粒同时免疫小鼠,其淋巴细胞增殖指数和NK细胞活性的百分率明显高于其它各组.结论IL-15质粒联合PCD-HN质粒免疫小鼠,对抑制肿瘤生长具有迭加效应.
-
模拟失重抑制荷黑素瘤小鼠的T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能
目的 研究模拟失重对小鼠T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能的影响.方法 小鼠右后肢皮下注射B16细胞建立移植性恶性黑素瘤模型,采用头低位-15°～20°尾吊小鼠模拟失重模型.观察模拟失重对荷瘤小鼠肿瘤体积和生存时间的影响；采用全自动血细胞分析仪和流式细胞仪分别检测模拟失重条件下荷瘤小鼠外周血白细胞、淋巴细胞的变化和T淋巴细胞亚群的变化；采用ELISA法和LDH释放法分别检测模拟失重对肿瘤细胞诱导T淋巴细胞产生IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平和肿瘤特异性CTL对肿瘤细胞杀伤活性的影响.结果 与对照组相比,模拟失重组荷瘤小鼠肿瘤生长速度加快,生存期缩短,外周血淋巴细胞总数降低,淋巴细胞比例降低,CD3+、CD4 +/CD3+、CD8+/CD3+T淋巴细胞所占比例降低,丝裂原诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力降低(P＜0.05或P＜0.01).模拟失重条件下,肿瘤细胞诱导产生的细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α水平降低,肿瘤特异性CTL对肿瘤细胞的杀伤活性降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 模拟失重抑制小鼠T淋巴细胞抗肿瘤免疫功能.
