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shrew-1与MMP-9蛋白的表达及其联合检测对早期子宫颈鳞癌复发的预测价值
宫颈癌是全世界妇女的第二大常见恶性肿瘤.我国的新统计显示,宫颈癌的发病率正呈逐年上升趋势,每年新发患者约137000例.目前,临床针对宫颈癌复发的系统化治疗已在广泛开展,但是复发率仍高达40％[1-2].寻找有效的生物学标志物用于预测宫颈癌复发已成为临床亟待解决的重要问题.shrew-1是2004年新发现的由上皮细胞合成的膜蛋白,由411个氨基酸组成,C端位于细胞内[3 ].目前的体外研究证实,该分子能够提高肿瘤细胞表面CD147及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平,从而影响细胞的迁移能力,提示其可能参与了体内肿瘤的转移[4 ].本研究初步探讨shrew-1与MMP-9蛋白的表达及其联合检测对早期宫颈癌复发的预测价值.
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解整合素-金属蛋白酶12与子(癎)前期
蛋白水解处理和膜蛋白的释放,作为翻译后开关起到调节粘着底物活性的作用,这一被称为蛋白质外在区域剪切(protein ectodomain shedding)的过程能够活化、灭活底物蛋白,或者改变其功能特性.
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8-异前列腺素F2α及其在新生儿缺氧缺血性脑损伤中的作用
1 概述新生儿缺氧缺血性脑损伤(HIBD)多由围生期窒息所致,是新生儿死亡及儿童伤残的重要原因之一[1].如何对HIBD患儿病情早期做出正确判断并实施有效的干预,防止或减少HIBD的发生,降低致残率,是围生医学领域的重大课题.迄今为止,HIBD的发病机制尚未完全明确,也缺乏有效评定患儿脑损伤程度的指标,但一般认为缺血再灌注后的氧化应激在HIBD的发生发展中具有重要作用.氧化应激是体内自由基产物超过抗氧化防御代谢时的一种不平衡状态,可发生脂质过氧化作用、膜蛋白损伤及DNA损害[1,2].
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缺血再灌注损伤对新生鼠肾小管上皮细胞calpain的影响
calpain是一种钙依赖性半胱氨酸蛋白酶,钙离子浓度升高使其激活.细胞骨架蛋白和膜蛋白都是calpain的水解底物.过去calpain被认为介导了缺氧对心脏、肝脏和大脑所致的损伤.
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大鼠马桑内酯点燃癫癎模型P-糖蛋白和多药耐药相关蛋白1的表达
耐药性癫癎约占癫癎患者的30%,耐药癫癎动物模型是研究其耐药机制和探讨治疗方法的重要工具.马桑内酯(coriaria lactone,CL)是从植物马桑中提取的一种致癎物质,对动物反复肌注阈下剂量的CL可以建立化学点燃模型,并具有一定的耐药性[1].P-糖蛋白(P-glycorprotein,P-gp)和多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)是近年在耐药性癫癎患者脑组织中发现的两种与耐药性产生相关的膜蛋白[2,3].我们通过建立大鼠CL点燃模型,观察其对卡马西平(carbamazopine,CBZ)、丙戊酸钠(valproate,VPA)及托吡酯(topiramate,TMP)等抗癫癎药物(AED)的治疗反应和大鼠脑部P-gp和MRP1的表达,探讨该模型的耐药性及其可能机制.
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癫癎发病机制的相关研究进展
对于癫(*间)综合征,迄今已发现了一系列候选基因,其中大部分编码离子通道蛋白及相关调节因子、膜蛋白或参与信号传导的酶和细胞因子.虽然它们不是全部的病因所在,国际癫(*间)学界仍倾向于部分癫(*间)综合征是一类"离子通道病"(channelopathy)[1].
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Bcl-2融合蛋白对颅脑损伤细胞凋亡的影响
颅脑损伤引起局部神经细胞受损死亡,包括坏死和凋亡两种形式.研究表明,在创伤性脑损伤后存在细胞凋亡相关基因的表达谱改变,其中Bcl-2的表达起着神经保护、减少受损细胞凋亡的作用[1].Bcl-2是在哺乳动物中早发现的与凋亡有关的基因,属于Bcl-2基因家族,编码一个25-26KD的膜蛋白.
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抗逆转录病毒治疗方法的新进展
1 2000年后美国食品和药品管理局(FDA)批准的抗逆转录病毒治疗(ARV)新药(表1)2 FDA批准的ARV新药和正在开发中的ARV药品[2]简介2.1艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)进入细胞的抑制剂侵入抑制剂是一类新的试验性ARV药物,试图用以干扰HIV与宿主细胞的粘附融合,阻断HIV-1进入细胞有两个要点:一是以细胞膜受体为靶点,如CD4阳性T细胞或辅助受体;一是以病毒膜蛋白为靶点,多数抑制剂干预gp120与辅助受体的结合过程,随着gp120与CD4受体的附着,gp120发生构象变化,使得gp120与其它宿主细胞受体发生作用,此类受体称为趋化因子协同受体(CCR5或CXCR4),是HIV-1进入CD4阳性T细胞和其他细胞的必要受体.人们正在致力于发展趋化协同受体抑制剂,可以抑制和干扰这一过程,阻断病毒与受体的结合,这已成为发展抗HIV-1药物的重要途径[3].
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内质网应激与耳聋
内质网(endoplasmic reticulum,ER)是真核细胞所特有的亚细胞器结构,参与内分泌性蛋白及膜蛋白翻译后加工修饰、正确折叠和新生蛋白的转运过程.然而,多种生理、生化以及一系列的细胞毒因素,如基因突变或机体状态的改变包括缺血、缺氧、营养不足、病毒感染、钙平衡失调等各种内质网刺激因子均可干扰蛋白质的合成,导致错误折叠蛋白或未折叠蛋白在ER内大量积聚,从而形成内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS).
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EB病毒潜伏膜蛋白2A诱导细胞毒性T细胞抗鼻咽癌的体内外实验
目的观察EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)-潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)转染人树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导特异性细胞毒性T细胞(cytotoxicity T lymphocyte,CTL)的体外生物学特性;建立表达EBV-LMP2A的裸鼠鼻咽癌动物模型,探讨LMP2A特异性CTL在荷瘤鼠体内的抗肿瘤效应.方法分离人外周血单核细胞(pripheral blood mononuclear cell,PBMC),以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-monocyte colony stimulating factor,GM-CSF)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导培养获得DC,荧光激活细胞分选仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)检测成熟DC的表面分子表达.用LMP2A重组腺病毒转染成熟DC,将转染DC与自体PBMC混合培养,在白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)作用下诱导针对LMP2A的特异性CTL,FACS检测CTL群体中阳性细胞的组成.将鼻咽癌CNE细胞接种BALB/c裸鼠,建立鼻咽癌动物模型;在裸鼠肿瘤局部注射LMP2A特异性CTL,观察治疗后移植瘤生长情况及病理变化.结果人外周血PBMC体外在GM-CSF、IL-4、TNF-α诱导下获得典型形态及表型特征的成熟DC.FACS检测表明,以LMP2A重组腺病毒转染DC诱导的CTL细胞群体以CD4、CD8阳性细胞组成为主.在接种CNE细胞3周后建立表达EBV-LMP2A的裸鼠鼻咽癌动物模型;动物体内实验表明注射CTL的裸鼠肿瘤生长缓慢,体积明显小于对照组(P<0.01);病理检查显示肿瘤局部发生液化性坏死并有淋巴细胞浸润.结论人外周血单核细胞体外经细胞因子诱导,可生成具典型特征的成熟DC.利用LMP2A重组腺病毒将LMP2A基因转入DC,可在同一个体体外诱导出针对LMP2A的特异性CTL.CNE细胞接种裸鼠,可成功构建鼻咽癌动物模型;LMP2A特异性CTL在动物体内可明显抑制鼻咽癌肿瘤的生长,发挥有效的抗肿瘤作用.
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Prestin--一种新型的分子马达蛋白
近三年来,Prestin,一种新型的耳蜗外毛细胞的转膜蛋白的发现,引起了分子细胞学家及听觉生理学家的极大关注,这个蛋白的发现在解释哺乳动物耳蜗的高度敏感性及频率选择特性以及外毛细胞的电动特性机制上具有重要意义.
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晶状体中钙蛋白酶的研究
钙蛋白酶(calpains)是一种广泛存在于包括晶状体在内的人全身各脏器组织中的钙离子浓度依赖性中性蛋白酶.在人的晶状体中m-钙蛋白酶的表达占主导地位,同时存在内源性抑制剂--钙蛋白酶抑制剂(calpastatin).各种原因引起的钙离子浓度的升高可激活钙蛋白酶,使晶状体内的晶状体蛋白、细胞骨架蛋白和膜蛋白等多种蛋白质发生水解,从而导致白内障形成.钙蛋白酶的抑制剂可不同程度地抑制蛋白的水解作用,从而降低高钙引起的晶状体透明度的丧失,可为白内障的药物预防和治疗提供新的方法.
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大鼠实验性根尖周病变中RANKL的免疫组化研究
RANKL(receptor activator of NF-κB ligand)是一种表达于骨髓间质细胞、成骨细胞和T淋巴细胞等细胞表面的膜蛋白,对破骨细胞等细胞的发育及行使功能具有重要作用.我们首次观察了RANKL在根尖周病损中的表达,为探讨根尖周病变的发病机制提供资料.
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两种不同溶液体系提取大鼠脊髓蛋白双向电泳图谱比较
目的:比较尿素/CHAPS和尿素/硫脲/CHAPS/SB3-10两种不同溶液体系提取大鼠脊髓蛋白双向电泳（two-dimensional electrophoresis, 2-DE）图谱的差异。方法：大鼠脊髓经三氯醋酸/丙酮沉淀蛋白后，分别用尿素/CHAPS和尿素/硫脲/CHAPS/SB3-10两种不同的溶液体系提取蛋白。以固相pH梯度（IPG）等电聚焦为第一向，SDS-PAGE水平电泳为第二向进行蛋白质2-DE。图像分析软件ImageMaster 2D Elite 3.01分析蛋白质2-DE图谱。结果：两种蛋白提取溶液分别获得1 059和1 023个蛋白（亚基）斑点，其中790个蛋白在两张图谱中重叠，其余269和233个蛋白点为两种体系各自所特有。两种提取方法共获得1 292个蛋白斑点。结论：综合使用不同蛋白提取方法有助于提高组织蛋白2-DE图谱的完整性。
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多巴胺转运蛋白研究进展
多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT),位于中枢多巴胺能神经元末梢,是一种膜蛋白,属于Na+/Cl-依赖性转运体基因家族.其生理作用为将突触间隙内已发挥生理效应的多巴胺(DA)重新摄入突触前膜,以备再次利用,同时终止神经细胞间的信息传递.
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旋毛虫膜蛋白新基因Tmp10的免疫筛选及鉴定
目的：免疫筛选旋毛虫成虫cDNA文库,寻找抗旋毛虫病的疫苗候选抗原或诊断抗原。方法应用旋毛虫感染的猪血清免疫筛选旋毛虫成虫cDNA文库,获得阳性克隆。将一阳性克隆与原核表达载体pET-28a(+)构建重组质粒,异丙醇硫代-β-D-半乳糖苷( isopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导后,利用亲和层析柱纯化目的蛋白,并通过酶联免疫吸附实验( enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和Western blotting鉴定其抗原特异性和免疫原性。结果免疫筛选旋毛虫成虫cDNA文库获得42个阳性克隆,选取一个新基因Tmp10,成功构建了重组质粒pET-28a(+)/ Tmp10,诱导表达后获得的重组蛋白(rTmp10)的相对分子质量约为40000。 Western blotting检测结果显示,该重组蛋白可被旋毛虫感染小鼠和猪血清所识别,具有抗原特异性。rTmp10免疫小鼠可诱导产生高滴度的抗体,显示其具有较好的免疫原性。结论免疫筛选旋毛虫成虫cDNA文库获得一个新基因Tmp10,生物信息学分析预测其为膜蛋白,其重组蛋白(rTmp10)具有较好的抗原特异性和免疫原性。
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甲肝疫苗Epaxal Berna的特性
脂质被认为是提高一些抗原和可溶、无膜蛋白或合成肽免疫原性的一种好的物质.到目前为止,仅有铝盐是人类使用的辅助剂.这些疫苗可在接种部位引起轻度至中度的反应.
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微囊蛋白-1对内皮祖细胞的调控机制研究进展
微囊蛋白(Caveolin),又称小窝蛋白,为小窝(Caveolae)主要的组成蛋白,属整合膜蛋白,对许多关键信号分子的活性状态起直接调节作用.既往对Caveolin的研究多集中于其与肿瘤细胞转化、肿瘤发生与远处转移之间的关系,而近年的研究显示Caveolin与机体参与血管生成重要的内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)的增殖及功能密切相关,认为Caveolin-1是EPC参与创伤后组织修复过程中的重要调控因素.因此我们回顾以往的研究结果,综述Caveolin-1的功能及其对EPC调控作用的研究进展.
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胞膜(Ecto)-6A8α-甘露糖苷酶
68Aα-甘露糖苷酶是本实验室克隆的cDNA(GenBank的登记号为AF044414)编码的一个新的人α-甘露糖苷酶[1].该cDNA长3300bp,其开放阅读框架编码1062个氨基酸的蛋白质.蛋白质的1028～1048aa为穿膜区.6A8α-甘露糖苷酶属工型穿膜蛋白.6A8基因定位于第15号染色体q11～13区.
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表皮生长因子受体对肝细胞增殖的调控作用
表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)属于受体酪氨酸激酶超家族成员,广泛表达于哺乳动物的各种组织细胞,是一多功能的膜蛋白.它能与多种配体结合而发生二聚化,从而调节细胞的生长、增殖和分化.在包括肺癌、膀胱癌和乳腺癌等多种组织中,存在EGFR信号通路的高度激活.近年来的研究表明,EGFR信号转导网络在肿瘤的发生和发展过程中发挥了重要的作用.新的研究表明,EGFR与肝细胞的增殖密切相关.
