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肾脏特异性microRNA的鉴定及功能预测
目的:应用Solexa技术分析和筛选出肾脏特异性表达microRNA (miRNA),同时利用生物信息学技术预测特异表达miRNA的靶基因并对其功能进行初步分析,探讨特异表达miRNA在肾脏中的功能. 方法:选取8周龄C57/B6雄性小鼠,取其全身11个组织器官,提取总RNA并从中分离小分子量RNA进行Solexa测序,筛选出相较其他组织器官,在肾脏中表达为特异的miRNA;然后,利用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术对筛选出的肾脏特异性表达miRNA进一步验证;后,通过生物信息学技术对其进行靶基因预测,并对交集的基因集合分别进行GO分析和KEGG通路分析. 结果:Solexa测序结果显示在正常小鼠中miR-196a和miR-196b在肾脏特异性高表达.qRT-PCR验证了miR-196a和miR-196b在小鼠11个组织器官中的表达分布情况,定量结果与测序结果相一致.TargetScan6.2和PicTar两个软件预测到交集靶基因74个.GO分析显示miR-196a/b的预测靶基因集合显著富集在血小板源生长因子结合活性、转录调控活性、细胞外基质的结构组成等分子功能上并参与调控代谢、发育等生物学过程(P<0.01).信号转导通路显著富集于促性腺激素释放激素信号通路、细胞外基质受体相互作用等多个信号通路和脑胶质瘤、前列腺癌等疾病通路中(P<0.05). 结论:miR-196a/b在肾脏中特异性高表达,靶基因功能广泛,与细胞代谢、生长发育等密切相关.
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局灶节段性肾小球硬化患者肾组织microRNAs表达分析
目的:比较局灶节段性肾小球硬化(FSGS)患者与正常对照肾组织中差异表达的microRNAs(miRNAs),探讨miRNAs在FSGS发病中的作用. 方法:选取年龄、性别匹配的FSGS患者6例及正常对照3例,留取肾组织标本,提取总RNA.将6个FSGS及3个正常对照样品分别混合后,采用TaqMan低密度芯片(TaqMan Low Density Array)进行miRNAs表达谱分析,筛选出在FSGS患者肾组织中表达丰富并上调的miRNAs分子;选取14例FSGS患者和15例正常对照,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法对筛选出的miRNAs分子进行验证;采用Pearson相关分析FSGS患者肾组织中miRNAs表达水平与临床病理指标之间的相关性. 结果:芯片结果显示正常对照组检测到358个miRNAs,FSGS组检测到427个miRNAs,其中109个miRNAs在FSGS肾组织中表达上调.qRT-PCR结果显示与正常对照相比,FSGS患者肾组织中miRNA-155、miRNA-194和miRNA-215表达显著上调(P<0.05).相关性分析显示,FSGS患者肾组织miRNA-215表达与肾小球硬化比例、总胆固醇水平正相关. 结论:FSGS患者肾组织miRNA-155,miRNA-194和miRNA-215表达上调,它们与FSGS发生和发展之间的联系值得进一步研究阐明.
关键词: 局灶节段性肾小球硬化 肾组织 microRNAs -
MGMT在肾细胞癌中的研究
目的 探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT) 在肾透明细胞癌中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学法检测80例肾细胞癌组织及30例癌旁组织和20例正常肾脏组织中的MGMT表达,分析其与临床病理的相关性及意义.结果 MGMT在肾细胞癌组织中的阳性表达率为32.5%(26/80)明显低于癌旁组织76.7%(23/30)和肾脏正常组织65.0%(13/20),P=0.000;肾细胞癌组织高分化的阳性表达率47.1%(16/34)明显高于中分化28.6%(10/35)和低分化9.1%(1/11),P=0.034;肾细胞癌临床分期中T1+T2的表达(48.6%,18/37)明显高于T3+T4(18.6%,8/43),P=0.004.但与患者性别、年龄均无明显相关性.结论 MGMT可能成为肾细胞癌诊断及判断预后的标志物.
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狼疮性肾炎患者肾组织中CCR4+T淋巴细胞的选择性聚集
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核素肾功能显像发现异位发育不良肾三例
例1 患者男,67岁.因右腰部疼痛伴低热20d入院.实验室检查:血清肌酐186μmol/L、尿素氮21.3 mmol/L、血肌酐清除率30.1 ml/min.腹部、盆腔B超检查示:右肾体积增大、积水,左肾区未探及肾脏.膀胱前、后及上方,骶前直肠窝等处均未见肾组织回声.腹部CT检查示:右肾积水,右侧肾盏、肾盂扩张,肾内多发小结石;左肾区未见肾脏影.静脉肾盂造影(IVP)检查示:右肾功能不良,左肾7、15、30及45min未显影.
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大黄素对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达的影响
目的 探讨大黄素对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响.方法 将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病大黄素治疗组,经大黄素治疗糖尿病大鼠2,4和8周后,分别观察大鼠血肌酐及24 h尿蛋白定量,以及肾脏MCP-1表达的变化.结果 与正常对照组相比,糖尿病大鼠的24 h尿蛋白以及肾组织MCP-1表达显著增加,经大黄素治疗后上述指标在一定程度上有所减轻.结论 糖尿病时MCP-1表达增加,大黄素可能通过抑制糖尿病大鼠肾脏MCP-1表达而达到延缓糖尿病肾病的进展.
关键词: 大黄素 糖尿病 单核细胞趋化蛋白-1 肾组织 -
氟伐他汀对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响
目的 探讨氟伐他汀对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响.方法 将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病氟伐他汀治疗组,经氟伐他汀治疗糖尿病大鼠2,4,8周后,分别观察其对大鼠血胆固醇、血肌酐及24 h尿蛋白定量和肾组织TGF-β1表达的变化.结果 与正常对照组相比糖尿病大鼠的24 h尿蛋白以及肾组织TGF-β1表达显著增加.经氟伐他汀治疗后8周,糖尿病大鼠的24 h尿蛋白明显下降,肾组织TGF-β1在蛋白和基因水平表达明显减少.结论 糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达增加,氟伐他汀可能通过抑制糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达而达到延缓糖尿病肾病的进展.
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整合素在胚胎肾组织和肾小球疾病患儿肾活检组织中的表达
目的:明确整合素在正常和病理肾组织中的表达,以探明其在肾组织损伤发病机理中的作用.方法:以整合素α1、α2、α3、α5、α6、αv 链的单抗,用间接免疫酶的方法,观察它们在11例胎儿肾和38例肾小球疾病患儿肾活检组织中的表达.结果:整合素α链在胚胎和正常成熟肾组织中的表达存在着分布的时空顺序性,而在肾小球疾病的肾组织中其表达发生明显改变.结论:推测整合素在肾脏发育的不同时期对肾脏不同结构的发育所起作用不同;在肾小球疾病时整合素异常表达提示,其可能在某些肾小球疾病的发病和慢性进展中发挥作用.
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血糖波动对1型糖尿病大鼠肾组织Bcl-2和Bax表达的影响
目的:观察血糖波动对1型糖尿病大鼠肾组织的影响并探讨其可能的作用机制,为临床血糖控制标准及防治糖尿病肾病提供理论依据。方法 SD雄性大鼠40只,随机取10只为正常对照组( NS组),其余一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg诱导糖尿病模型。成模的糖尿病大鼠随机分为2组:糖尿病血糖控制组(CDM组)、糖尿病血糖波动组( FDM组)。 FDM组每天定时皮下注射中性胰岛素,并错时给予葡萄糖,造成1天中血糖浓度大幅度波动模型。 CDM组每天与血糖波动组同时皮下注射精蛋白锌胰岛素,使血糖严格控制在16.7 mmol/L以下。 NS组每天定时皮下注射生理盐水。每周测血糖值(葡萄糖氧化酶法)2天,每天4次,制模12周后,亲和层析法测定糖化血红蛋白(HbA1c),化学比色法测定24 h尿蛋白、血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),免疫组织化学法测定Bcl-2、Bax在肾组织中的表达。结果 FDM组血糖波动较大,血糖变异系数( CV)与NS组、CDM组比较,差异有统计学意义(P<0.01);FDM组HbA1c水平与CDM组的差异无统计学意义(P>0.05);FDM组较其他两组出现了明显的多饮、多尿和消瘦症状;FDM组24 h尿蛋白、BUN、Cr和肾脏指数较其他两组明显升高,出现糖尿病肾病;FDM组肾皮质中Bax的表达较其他两组明显升高,而Bcl -2的水平明显下降( P<0.05)。结论在HbA1c控制水平相同的情况下,血糖波动可至糖尿病肾病的发生,其机制可能是通过促进肾脏细胞凋亡的进程来实现的。治疗中防止血糖波动、平稳降糖对于防治糖尿病肾病有着至关重要的意义。
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内皮素及其受体与肾损害的研究进展
内皮素(ET)是一种合成于内皮细胞粗面内质网的多肽,与特定受体(ETR)结合后通过一系列的信息传递而发挥强烈的生物效应.肾组织能合成和分泌成熟的ET,同时也有规律地分布ETR.肾功能与ET的关系密切,血液、尿液中ET的变化不同程度反映了肾脏损害和修复的过程.目前,相关研究的热点集中于不同类型肾损害中ET改变的内在机制及临床意义.
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B超引导下小儿经皮肾穿刺活检术的护理
经皮肾穿刺活检是指在B超定位后用肾穿针经皮肤刺入肾脏摘取肾组织的方法,是目前国内外普遍采用的肾活检方法.我院自1999~2003年进行此手术287例,现将护理体会介绍如下.
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儿童直立性蛋白尿临床病理与随访
直立性蛋白尿(Orthostatic proteinuria,OP)一般认为属于功能性蛋白尿,大多呈良性过程,预后较好,但也有人持不同观点.本文探讨我院1997~2000年间收治的7例OP患儿,结合肾组织病理检查及随访结果报道如下.
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IgA肾病中医辨证与肾组织病理的关系探讨
IgA肾病(Ig Anephropathy,IgAN)是常见的原发性肾小球肾炎,也是导致终末期肾衰常见的原因之一[1].为了探讨IgAN病理活动性病变与中医辨证之间的关系,笔者将杭州市中医院2005年7月~2009年7月经肾活检证实,慢性肾脏病(CKD)1~2期的180例IgAN患者的临床及病理资料进行回顾性分析,报道如下.
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肾活检病人的护理
肾穿刺活检是确诊肾脏疾病的重要手段之一,临床可根据肾组织的病理检查进行分型诊断并确定治疗措施[1].2000年1月至2005年12月,本科肾穿刺活检303例,经过精心的观察与护理,有效地防治了各种并发症的发生.现将护理经验报告如下.
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861例肾脏活检术并发症的观察和护理
肾脏活体组织检查(简称肾活检)是肾脏疾病重要的诊断技术,一般比较安全,但由于肾组织质地脆嫩,易在肾穿后并发出血,因此护理工作十分重要.我科1989~1999年间共做肾穿活检术861例,无1例因严重并发症而需外科处理.现报告如下.
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闭合性病理肾损伤的诊断与治疗(附10例报告)
在肾脏病理情况如肾积水、肿瘤、结石等因素的存在下,因肾组织脆性的增加,即使在较小外力作用也可引起闭合性肾损伤[1].
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儿童紫癜性肾炎肾组织VCAM-1的表达及其意义
目的:探讨紫癜性肾炎(HSPN)患儿肾活检组织血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达情况及其意义.方法:应用免疫组化技术检测8例HSPN和7例薄基底膜病(对照组) 通过肾穿刺活检术获得的肾组织VCAM-1表达情况(用IOD值表示),分析其与肾脏病理、主要临床指标(包括24 h尿蛋白、尿红细胞)的关系.结果:对照组的肾组织仅少量表达VCAM -1;HSPN患儿的肾小管、肾间质及肾小球中VCAM-1表达均增加,以小管间质部位为著,并随ISKDC肾病理级别的增加而增强;平均肾组织VCAM -1表达的IOD值在Ⅲ-Ⅳ级组为(6.54±2.02)×105 ,在Ⅰ-Ⅱ级组为(2.45±0.07)×105,对照组为(0.76±0.12)×10 5,Ⅲ-Ⅳ级组与Ⅰ-Ⅱ级组均明显高于对照组(均 P<0.01),且Ⅲ-Ⅳ级组高于Ⅰ-Ⅱ级组(P<0.05).HSPN患儿的肾组织VCAM -1表达的IOD值与其ISKDC肾病理分级呈显著正相关(r =0.866,P<0.01),与IgA和C3沉积量均无显著性相关(r分别为0.339、-0.436,均P>0.05),与24 h尿蛋白量呈显著正相关(r=0.755,P<0.05),而与尿沉渣红细胞量无显著性相关(r=-0.626,P>0.05).结论:VCAM-1参与了HSPN的发生、发展过程,其肾组织的VCAM -1表达可反映其病情的严重程度.
关键词: 紫癜性肾炎 血管细胞黏附分子-1 肾组织 儿童 -
柱前衍生HPLC法测定大鼠肾组织中羟脯氨酸的含量
目的:建立一种测定大鼠肾组织中羟脯氨酸(Hyp)含量的柱前衍生HPLC法.方法:将大鼠肾组织以6 mol · L-1盐酸于110℃水解24 h,加入9-芴甲氧基羰酰氯(FMOC)衍生后,进行HPLC分析.HPLC分析条件为:Phenomenex C18色谱柱(4.60 mm× 150 mm,5(m);流动相:醋酸钠缓冲液( pH3.78)-甲醇-乙腈(梯度洗脱);流速:1.0 ml·min-l;柱温:40C;检测波长:265 nm.结果:羟脯氨酸在浓度范围为15.30~612.00 mg·L-1内线性良好(r =0.9999);回收率为97.4%~103.9%.结论:该方法简单、准确、灵敏,可用于测定大鼠肾组织中羟脯氨酸的含量.
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上尿路梗阻并发尿脓毒血症的护理
尿路感染在临床上较常见,当上尿路梗阻并发感染往往比较严重,可形成肾盂积脓,持续时间久后会破坏肾组织,致使肾功能受损,严重时肾实质破坏,患肾功能丧失,需行脓肾切除[1]。同时由于肾盂内压力增高,常引起细菌反流入血,导致脓毒血症而危及生命。当尿路感染出现临床感染症状并且伴有全身炎症反应征象(发热或体温降低,血白细胞升高或降低,心动过速,呼吸急促)即可诊断为尿脓毒血症[2]。上尿路梗阻并发尿脓毒血症一旦确诊,在有效抗感染的基础上应及时去除梗阻原因,引流肾积脓。2008-01-2012-04我科收治了186例上尿路梗阻继发尿路感染患者,其中36例出现尿脓毒血症,采取微创技术进行早期外科干预,取得较好的疗效,现将护理经验报道如下。
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IgA肾病肾组织CD68表达与病理类型的关系
IgA肾病(IgAN)是我国常见的原发性肾小球疾病,指IgA或以IgA为主的免疫球蛋白弥漫沉积在肾小球系膜区及毛细血管袢引起的一系列临床症状及病理改变[1].CD68又称巨嗜细胞唾液酸糖蛋白是原位研究巨嗜细胞的有用标记,是氧化低密度脂蛋白的一种清道夫受体,并参与细胞间的多种相互作用[2].