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大肠杆菌O157∶H7实验感染动物排菌动态检测
目的 检验大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染动物排菌中的应用效果.方法 将牛和小鼠采用灌胃攻毒方式实验感染大肠杆菌O157∶H7,用大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基分别培养检测感染动物粪便中的O157∶H7的排菌量和持续时间.结果 牛在感染大肠杆菌O157∶H7后的第2天开始从粪便排菌,第4～6天达到峰值,排菌时间可持续28 d；小鼠在感染O157∶H7后的第4小时开始从粪便排菌,第6小时达到峰值,排菌时间可持续15 d.结论 大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基培养计数的检测结果一致,试纸条更简便、快捷、直观,在1 ～5 min内可得出检测结果.
关键词： 胶体金免疫层析检测试纸条 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 牛 鼠 粪便 检测 -
腰椎后柱"骨-腱-骨"结构的完整性对邻近节段生物力学的影响
目的 探讨腰椎后柱"骨-腱-骨"结构的完整性对邻近节段生物力学的影响.方法 取1月龄小牛腰椎标本5具,于万能生物力学试验机上模拟人体不同工况,对L3～4节段进行力学测定;随后进行各种模拟手术,于L4～5安装内固定并逐级切除后柱"骨-腱-骨"结构,依次测定经单侧椎板开窗髓核摘除(UTD组)、单侧椎板切除+双侧椎弓根钉和单枚融合器(BFC组)、双侧椎板及部分"骨-腱-骨"结构切除+双侧椎弓根钉和单枚融合器(BFC+PBTB组)、双侧椎板及全部"骨-腱-骨"结构切除+双侧椎弓根钉和单枚融合器(BFC+TBTB组)处理后L3～4节段力学变化情况.结果 行UTD后,邻近节段小关节应变、应力及椎间盘应力在前屈和侧屈时均有所增加,但差异无统计学意义(P＞0.05).行BFC后,在不同工况下椎间盘上的应力明显异常(P＜0.05),前屈时小关节的应变和应力增加明显(P＜0.05).行BFC+PBTB/TBTB后,在不同工况下小关节应变、应力及椎间盘上应力的增加差异均具有统计学意义(P＜0.05).腰椎轴向刚度在BFC组增加达到218.33 N/mm(P＜0.05),但在BFC+PBTB/TBTB组均下降,其中后两者分别下降17%、25%,与正常标本相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 腰椎融合内固定术中,后柱"骨-腱-骨"结构完整性的破坏有增加术后上位节段退变的趋势.
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异种骨替代材料--鸵鸟及牛松质骨形态比较、成分测定及抗折强度分析
目的:制备鸵鸟松质骨(OCB)及牛松质骨(BCB),并比较其结构、成分和抗折强度. 方法:新鲜鸵鸟及牛骨经过化学处理后制备出松质骨(CB)材料.观察材料表面结构,分析其水分、有机质及无机物含量,测定其抗折强度. 结果:OCB表面及孔隙结构与BCB相比有不同特点,OCB孔径大小更不均匀.OCB及BCB水分、有机质及无机物含量分别为( 6.85±0.10)%、(28.75±0.83)%、(64.40±0.78)%和(6.36±0.16)%、(29.79±0.28)%、(63.85±0.35)%.二者的抗折强度分别为(14.18±2.50)MPa和(22.93±3.93)MPa. 结论:OCB及BCB在水分、有机质及无机物含量方面接近.OCB材料具有与BCB不同的孔隙特点,有望成为另一类有价值的异种骨替代材料.
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乙酰唑胺对培养的牛角膜内皮细胞液体转运功能的影响
目的 研究乙酰唑胺对培养的牛角膜内皮细胞液体转运功能的影响.方法 观察并记录给予不同浓度乙酰唑胺(0.1 μmol/L,1 μmol/L,10μmol/L,100 μmol/L)后角膜内皮细胞在低渗溶液中的体积改变,并计算其渗透水通透性(osmotic water permeability,PF)的变化.结果 培养的正常牛角膜内皮细胞的Pf值为(0.0446±0.0089)cm/s,在0.1～100μmol/L乙酰唑胺孵育72 h后,培养的牛角膜内皮细胞的渗透性水通透性逐渐减少,其Pf值分别为(0.0406±0.0014)cm/s,(0.0364±0.0015)cm/s,(0.0300±0.0022)cm/s,(0.0226±0.0019)cm/s.结论 乙酰唑胺呈剂量依赖性地减低角膜内皮渗透性水通透性,抑制角膜内皮细胞液体转运功能.
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增强型绿色荧光蛋白在体外培养的牛眼小梁细胞中的表达
目的 观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein ,EGFP)在体外培养的牛眼小梁细胞(bovine trabecular meshwork cells,BTMCs)中的表达.方法 将含有pEGFP-C1的菌株复苏,抽提pEGFP-C1并进行鉴定.选用阳离子脂质体Lipofectamine包埋pEGFP-C1转染BTMCs,以荧光显微镜观察转染后细胞EGFP的表达情况.结果 pEGFP-C1能有效地转染BTMCs,BTMCs可以很好地表达EGFP.结论 外源性的EGFP能够在体外培养的BTMCs中有效地复制、转录和翻译.这种标记方法有利于从基因水平研究牛眼小梁细胞.
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牛心包补片应用于后巩膜加固术的早期安全性与生物相容性
目的 评估牛心包补片用于人眼后巩膜加固术的安全性和生物相容性.方法 回顾性系列病例研究.分析2006年1月至2014年10月在上海和平眼科医院行后巩膜加固术的进展性轴性近视连续病例377例(670眼),其中应用牛心包生物补片组182例(330眼),年龄3～64岁,等效球镜度-6.00～-30.00 D,应用同种异体硬脑膜组195例(340眼),年龄3～61岁,等效球镜度-6.00～-33.00 D,随访时长为至少6个月.所有患者均行常规眼部检查,部分患者还行眼部高频B超检查.采用卡方检验对计数资料进行分析.结果 牛心包补片组和硬脑膜组术后6个月佳矫正视力提高的分别有105眼(31.8％)和119眼(35.0％),不变的有209眼(63.3％)和205眼(60.3％),下降的有16眼(4.8％)和16眼(4.7％),组间差异均无统计学意义(x2=0.765,P＞0.05).术后第1天2组发生球结膜水肿的分别有225眼(68.2％)和258眼(75.9％),组间差异有统计学意义(x2=4.935,P＜0.05).2组病例在术后6个月内均未出现感染、视网膜脱离、眼内出血、斜视/斜视加重及复视等并发症.牛心包补片组有1例出现双眼排异反应,而硬脑膜组有1例1眼出现排异反应,差异无统计学意义(发生率分别为0.61％和0.29％,P＞0.05).行眼部高频B超检查的硬脑膜组有术后至少6年患者10例19眼,均检测到加固条带,而且未见条带钙化;牛心包补片组有术后6～12个月患者15例28眼,均检测到加固条带,而且厚度正常,出现部分钙化的有3眼(P＞0.05).结论 牛心包补片应用于人眼后巩膜加固术具有良好的安全性、生物相容性和耐降解性.
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己烯雌酚人工抗原的合成及多克隆抗体的制备
目的:合成己烯雌酚人工抗原,制备效价高、特异性好的己烯雌酚多克隆抗体.方法:以己烯雌酚(DES)、溴乙酸乙酯、牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)等作为合成的主要原料,采用亲核取代反应,合成己烯雌酚衍生物(DES-HS),用电喷雾电离质谱(ESI-MS)鉴定合成是否成功；然后,将DES-HS与BSA (OVA)偶联合成人工抗原,并用紫外扫描法以及高效液相色谱鉴定人工抗原是否制备成功.后,用DES人工抗原动物免疫以获得DES多克隆抗体.结果:成功合成了偶联率为22∶1的己烯雌酚人工抗原.利用已合成的人工抗原制备出了效价为1∶25 600、IC50为10.81 ng/ml的己烯雌酚多克隆抗体.结论:建立了己烯雌酚人工抗原合成和鉴定以及制备己烯雌酚多克隆抗体的方法.
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细胞裂解液对蛋白质定量方法的影响
目的:观察不同细胞裂解液对Bradford法和bicinchoninic acid(BCA)法的影响,以确定适合蛋白质组学研究中细胞全蛋白含量的定量方法.方法:采用Bradford法和BCA法测定牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)样品溶液,样品BSA溶液分别由双蒸水和不同裂解液(荧光差异双向凝胶电泳裂解液、三种传统双向凝胶电泳裂解液)配制;然后,采用这两种方法测定上述裂解液所提取的细胞全蛋白样品;采用Bradford法定量反复冻融、不同比色杯和不同时期标准曲线下的样品.结果:各细胞裂解液对Bradford法均有显著性影响,使所定量的BSA浓度普遍偏高1.2至2倍,但定量值可随着加样浓度的增加而增加(r=0.989～0.996,P<0.05);各裂解液对BCA法也均有显著性的干扰,多数定量结果超出仪器读数范围;对于同批全蛋白溶液样品,BCA法的定量结果与Bradford法相比可有千倍差异;反复冻融后蛋白浓度变化统计学上无显著性差异,但有下降趋势,不同比色杯和不同时期标准曲线对Bradford法无显著影响.结论:Bradford法是蛋白质组学中细胞全蛋白定量的较适方法,但需根据具体实验进行优化.
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国产牛分枝杆菌菌苗联合化疗治疗初治肺结核的疗效
目的观察和评价国产牛分枝杆菌菌苗用于初治涂阳肺结核治疗的疗效和安全性.方法采用随机配对方法,将190例初治涂阳肺结核患者分为治疗组(95例)和对照组(95例).化疗方案为2HREZ/4H3R3.治疗组加用牛分枝杆菌菌苗深部肌肉注射,每2周一次.两组疗程均为6个月.结果治疗组第2个月涂片阴转率89.0%,对照组为75.8%,差异有显著性(P＜0.05);两组第5、6个月末涂片阴转率差异无显著意义(P＞0.05).治疗组治疗2个月的病灶改善情况好于对照组.菌苗应用中不良反应少而轻微.结论短程化疗中加用牛分枝杆菌菌苗能加快初治涂阳患者痰菌阴转和病灶吸收,改善临床症状,不良反应少而轻微.牛分枝杆菌菌苗可作为初治涂阳肺结核短程化疗的辅助治疗.
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卡介菌多糖核酸治疗玫瑰糠疹92例疗效观察
我院2000年1月～2003年12月使用卡介菌多糖核酸治疗玫瑰糠疹92例,取得满意效果.现报道如下.
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母牛分枝杆菌菌苗免疫辅助治疗老年初治空洞型肺结核的疗效分析
目的 探讨母牛分枝杆菌菌苗联合化疗对老年免疫功能低下的空洞型肺结核的疗效.方法 64例老年免疫功能低下初治空洞型肺结核患者随机分为治疗组33例和对照组31例,治疗组在对照组常规抗结核方案基础上,联合母牛分枝杆菌菌苗治疗.结果 治疗2月末的痰菌阴转率、病灶及空洞治疗有效率,血清白蛋白,CD+4 T淋巴细胞数,CD+4/CD+8 T细胞;治疗6月末的痰菌阴转率、病灶及空洞治疗有效率,治疗组均较对照组明显升高(P<0.05).结论 母牛分枝杆菌菌苗能明显改变老年CD+4T淋巴细胞低下的初治空洞型肺结核患者的细胞免疫功能,加快病变的吸收和痰菌的阴转速度,对结核病的治疗有辅助作用.
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水通道蛋白-1在培养的牛角膜内皮细胞中的表达研究
目的 研究水通道蛋白-1在培养的牛角膜内皮细胞中的表达情况及意义.方法 用免疫组织化学方法,检测水通道蛋白-1在培养的牛角膜内皮细胞中的表达.结果 培养的牛角膜内皮细胞中有水通道蛋白-1的表达,且主要位于细胞膜上.结论 牛角膜内皮细胞中的水通道蛋白-1在角膜内皮液体转运中起着重要作用,其表达改变可能导致角膜水肿和功能改变.
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功能化自组装单层作为遗传分析多用途平台的研究
目的以并行检测单核苷酸多态性(SNP)为基础,研制对牛个体进行可靠鉴定的遗传学条形码生物芯片.方法将生物素化等位基因特异性寡核苷酸固定于生物芯片上长链烷烃硫醇自组装单层已连接链霉亲和素(SA)的部位.多重PCR法扩增待杂交并于芯片上微型测序的靶DNA.结果经过微型测序的酶促延伸反应,能可靠地从待测基因检出所有C/T碱基替换.结论我们的SNP芯片系统能用于检测任何基因的C/T点突变.
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脑蛋白水解物溶液的灭活/去除病毒工艺研究
目的 研究脑蛋白水解物灭活/去除病毒工艺.方法 选择细小病毒科细小病毒属的猪细小病毒(PPV)、弹状病毒科水疱性口炎病毒属的水泡性口炎病毒(VSV)做为指示病毒,其中PPV代表无囊膜脱氧核糖核酸(DNA)病毒,VSV代表有囊膜核糖核酸(RNA)病毒.模拟生产工艺中的病毒灭活步骤100℃×30 min,超滤作为灭活/去除病毒条件.将病毒分别按照1∶9加入到脑蛋白水解物溶液中,进行高温和超滤灭活/去除病毒.以猪肾细胞(PK-15)细胞培养PPV,以非洲绿猴肾细胞(Veto细胞)培养VSV,测定病毒滴度.结果 PPV、VSV通过灭菌,病毒半数组织培养感染剂量(TCID50)分别为6.15 log/0.1 mL (logs)、5.37 log/0.1 mL(logs);去除工艺平均病毒降低系数分别为6.15 log/0.1 mL (logs)、5.37 log/0.1 mL(logs).结论 生产脑蛋白水解物溶液工艺中的高温和超滤均是有效的病毒灭活/去除工艺.
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母牛分枝杆菌菌苗联合化疗治疗老年人细胞免疫功能低下肺结核临床分析
目的：探讨母牛分枝杆菌菌苗与化疗联合治疗老年人细胞免疫功能低下肺结核的临床应用价值。方法研究对象48例被确诊为免疫功能低下肺结核老年患者，采用数字表法将其分为治疗组及对照组，每组24例。对照组给予异烟肼、利福平、乙胺丁醇、吡嗪酰胺治疗，治疗组在此基础上给予母牛分枝杆菌菌苗，比较分析两组疗效及不良反应。结果治疗组总有效率为91．7％，显著高于对照组的37．5％（χ2＝26.502，P＜0．05），第一个月及第二个月痰菌转阴率分别为75．0％、95．8％，均显著高于对照组的62．5％、70.8％（χ2＝6．229、11．982，P＜0．05）；两组不良反应发生率差异无统计学意义。结论母牛分枝杆菌菌苗与化疗联合治疗老年人细胞免疫功能低下肺结核疗效显著、不良反应少等特点，可作为老年细胞免疫功能低下肺结核患者治疗的首选。
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牛源金黄色葡萄球菌spa基因多态性分型研究
目的 为了研究引起奶牛乳房炎的主要病原菌金黄色葡萄球菌的35个分离株进行spa基因多态性分型研究.方法 在河北、内蒙古、山东、黑龙江、湖北、河南等省份采集奶牛乳房炎奶样,经实验室分离鉴定,从中择35株金黄色葡萄球菌, 采用PCR方法 扩增spa基因的X区域,测序后根据数据库(http://www.ridom.de/spaserver/)进行分型.结果 35株菌可分成11个型,分别为t521型有8株,t518型和t2788型各5株,t246型和t519型各4株,t359型和t2756型各3株,t189型、t224型、t267型、t2759型各有1株;同时发现3个新型,分别为t2788、 t2756、t2759.结论 研究显示spa基因分型方法 具有快速、分辨力强、易于标准化等特点,可用于牛源金黄色葡萄球菌的基因分型及生态学等研究.
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牛丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白6同源基因的克隆化研究
目的利用不同种属动物之间重要基因序列高度同源的理论,应用生物信息学技术和方法,克隆牛丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白结合蛋白6(HCBP6)的同源基因.方法首先应用酵母双杂交技术,以表达HCV核心蛋白的表达载体为诱饵,对于百万级的肝细胞cDNA文库酵母进行配合、筛选,首先获得人HCBP6的全长编码基因,然后应用美国国立生物信息学中心(NCBI)建立的核苷酸序列数据库(GenBank)的同源基因的检索,搜索与之同源的来源于牛的表达序列标签(EST).然后根据基因同源性的原则,确定牛HCBP6的同源基因.结果获得了与HCV核心蛋白结合蛋白的36个基因片段,其中之一命名为HCBP6.根据基因同源性搜索,获得了来源于牛的EST基因序列片段,终确立了牛HCBP6的同源基因.结论利用不同物种之间基因同源性的原理,NCBI数据库GenBank同源基因的搜索,获得了牛HCBP6同源基因.生物信息学技术在后基因组时代具有重要地位和作用.
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牛肉住肉孢子虫的种类及其危害研究进展
黄牛是住肉孢子虫的中间宿主,住肉孢子虫危害牛肉品质和安全,人类食用患病牛肉会危害健康,引起腹痛、腹泻等症状.我国黄牛住肉孢子虫病的阳性率为3.64％～98.1％,其他国家黄牛住肉孢子虫病的阳性率为42.44％～98.72％.目前,已确定的黄牛住肉孢子虫虫型有5种,分别为S.cruzi、S.hirsuta、S.hominis、S.rommeli、S.heydorni,我国已报道的黄牛住肉孢子虫型有3种S.cruzi、S.hominis和S.heydorni,前两种虫型对牛和人均有致病性.本文综述了黄牛牛肉中住肉孢子虫的生活史、流行情况、种类、致病性以及诊断方法,为监控牛肉中的住肉孢子虫提供参考依据.
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新疆14地州2014年家畜棘球蚴病感染调查报告
目的 为掌握新疆家畜包虫病的流行病学情况,对其14地州2014年进行了牛、羊、犬包虫感染情况调查.方法 通过在屠宰场直接检查牛、羊肝脏和肺脏的棘球蚴数量,采用酶联免疫吸附试验方法检测犬的粪便.结果 羊感染率为9.8％(1801/18374);牛感染率为10.71％(362/3380);虫体阳性率为9.84％(378/3842).结果 包虫病在新疆的家畜中流行广泛、感染率高,应引起高度重视.
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新疆地区6县棘球蚴病流行病学调查
目的 为掌握新疆地区家畜棘球蚴病的流行病学情况,2010年4月至2010年11月对其6个县进行了牛、羊、犬包虫感染情况调查.方法 通过在屠宰场直接检查牛、羊肝脏和肺脏的棘球蚴数量,采用酶联免疫吸附试验方法检测犬的粪便.结果 共检查羊604只,感染率为45.58%;共检查牛582头,感染率为20.83%;共检测1 080只犬的粪样,虫体阳性率为17%.结论 棘球蚴病在新疆的家畜中流行广泛、感染率高,应引起高度重视.
