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急性脑梗死患者血清脂联素水平测定的意义
脂联素是新近发现的一种由apM1基因编码的脂肪组织特异性血浆蛋白[1],具有抗动脉粥样硬化、抗高血糖和抗炎等作用,并在能量代谢、血脂代谢、改善胰岛素敏感性、减轻胰岛素抵抗以及动脉粥样硬化形成过程中发挥重要作用.我们通过双抗体夹心ABC-ELISA法检测急性脑梗死患者血清脂联素水平,分析急性脑梗死患者血清脂联素与脑梗死体积、NIHSS评分、血糖、血脂的关系,旨在揭示血清脂联素在急性脑梗死患者中的抗炎特性,探讨脂联素等抗炎因子在脑梗死发生中的作用,为脑梗死的防治提供一定临床理论依据,现报道如下.
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乙型肝炎表面抗原检测中假阴性问题探讨
目前国内临床检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)多采用ELISA双抗体夹心一步法,该方法检测HBsAg时,当标本中的HBsAg浓度过高,可造成假阴性。针对此现象,笔者从常规844例乙肝五项指标检测血清中,收集其中10例HBeAg、HBcAb两项阳性,而HBsAg阴性的血清标本,对其稀释后分别进行ELISA一步法和两步法检测,解决因HBsAg浓度过高而产生的假阴性问题。
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激素对哮喘和慢阻肺患者IL-8、IL-13的影响
目的 探讨糖皮质激素(GCS)对哮喘和慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)患者外周血IL-8、IL-13水平的影响.方法 选取支气管哮喘和慢阻肺患者60例作为研究观察对象,同时纳入健康人群作为对照组,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法进行血清IL-8和IL-13水平的检测分析.结果 A组哮喘患者血清IL-8和IL-13水平明显高于B组慢阻肺患者,而两组患者血清IL-8和IL-13水平明显高于健康对照组(P<0.05);A组哮喘患者治疗前后差异具有显著性(P<0.05).结论 血清IL-8和IL-13参与哮喘和慢阻肺的发病过程,糖皮质激素能够降低哮喘患者血清IL-8和IL-13水平,而对慢阻肺患者无明显效果.
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肺癌治疗前后呼出气冷凝液和血浆中CEA、ET-1水平研究
目的 研究肺癌治疗前后呼出气冷凝液和血浆中CEA、ET-1水平变化在肺癌诊治中的临床意义.方法 采用放射免疫分析法和双抗体夹心生物素-亲和素酶联免疫吸附方法,分别在治疗前、治疗后2月、治疗后4月和治疗后6月对36例肺癌患者进行血液和EBC中CEA、ET-1水平的检测.结果 ①肺癌患者治疗前血清和EBC中CEA水平为42.37±27.52 ng/L和27.31±13.21 ng/L,与治疗后2月、治疗后4月和治疗后6月比较,差异有显著意义(P<0.05).②肺癌患者治疗前血清和EBC中ET-1水平为125.78±48.28 ng/L和20.52±11.18 ng/L,与治疗后2月、治疗后4月和治疗后6月比较,差异有显著意义(P<0.05).结论 EBC中CEA、ET-1检测对肺癌的诊断有一定意义,在病情监测、评价治疗效果和预后等方面也有一定的作用.癌胚抗原(CEA)、内皮素-1(ET-1)是肺癌早期诊断和治疗效果评价较常用的肿瘤标记物,呼出气冷凝液(exhaled breath condensate,EBC)检测是一种新方法,具有无创性,重复性好等优点,通过EBC检测肺癌患者的CEA、ET-1,是进行肺癌早期诊断的新途径.本科通过检测36例肺癌患者治疗前后的血清和EBC的CEA、ET-1水平,并观察治疗前后的变化,进行对照研究,以评价EBC检测CEA及ET-1在肺癌的疗效评价中的作用.
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双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原的研究
目的建立双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原(Cag).方法采用两株抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体,应用双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫CAg,并摸索该法的佳实验条件.对感染大鼠、小鼠、疑似和确诊广州管圆线虫病病例血清进行检测,评价方法的敏感性;对日本血吸虫、肺吸虫、旋毛虫、囊虫病人血清进行交叉反应试验,评价方法的特异性.结果 10μg/ml单抗包被,酶标记单抗1∶1 600稀释为佳工作浓度.利用该法检测不同血清广州管圆线虫循环抗原的敏感性为84.2%~87.2%,特异性为100%.结论建立的双抗体夹心ELISA法检测广州管圆线虫循环抗原具有敏感性高、特异性强和经济、简便易行等优点.
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单克隆抗体JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验用于血吸虫病疗效考核的探讨
以单克隆抗体(MAb)为探针,用ELISA检测血吸虫病人血清中的肠相关趋阴极抗原(CCA),阳性率可达84.6%,有一定的疗效考核价值[1,2].傅奇等采用Sandwich-ELISA方法,检测日本血吸虫病患者血清中Sj70抗原,阳性率可达90%,吡喹酮治疗后6-12个月,94%病例转阴[3].
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双抗体夹心ELISA法检测肺炎支原体抗原方法的研究
肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae Mp)由Chanock 等(1962年)首先从人类原发性非典型肺炎(Primary atypical pneumoniae,PAP)患者痰液中分离培养出的支原体[1].目前国内、外主要依靠培养基培养分离Mp,以确诊Mp的感染,其培养时间长、影响因素较多,难以适用临床标本的鉴别诊断[2、3].
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一步法测HBsAg产生钩状效应的原因分析及对策探讨
目前,国内检测HBsAg绝大多数采用ELISA中的双抗体夹心双位点一步法.该方法具有操作简单,反应时间短等优点.但当标本中的HBsAg浓度过高时,会因钩状效应出现弱阳性甚至假阴性而造成漏检,有报道漏检率达0.95%[1].本文通过分析钩状效应产生的原因,从众多纠正措施中选出金标法(胶体金标记试纸条法)和二步法,并探讨他们的临床应用价值.
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尖锐湿疣患者HPV型别与血清白介素-2水平相关研究
为了探讨温州地区尖锐湿疣(CA)的细胞因子表达水平与HPV型别的关系.我们采用双抗体夹心ELISA法对感染HPV不同抗原的CA患者血清进行白介素-2(IL-2)水平检测.现将结果报道如下.
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血浆凝血因子ⅩⅢ活性及抗原的测定
目的:探讨中国部分汉族人群血浆FⅩⅢ抗原及活性.方法:200例健康人血浆采用双抗体夹心法检测FⅩⅢ抗原(FⅩⅢA:Ag和FⅩⅢB:Ag),生物素标记戊胺测定FⅩⅢ活性.结果:正常人血浆FⅩⅢ活性范围在74.9%~128.3%,平均为92.5%±18.3%.男性74.9%~125.7%,女性79%~128.3%.以正常标准血浆为标准,血浆总FⅩⅢ蛋白水平,其范围在68.2%~184.7%,平均为98.5%±29.6%;FⅩⅢA:Ag和FⅩⅢB:Ag分别为74.8%~125.1%和82.5%~137.9%,平均为95.7%±23.2%和103.5%±30.7%.结论:双抗体夹心法和生物素标记法均为简捷、灵敏而且特异的定量测定血浆FⅩⅢ抗原及活性的方法,值得推广使用.
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尿液中性粒细胞明胶相关脂质运载蛋白时间分辨免疫荧光分析方法的建立及临床应用评价
目的 建立尿液中性粒细胞明胶相关脂质运载蛋白(NGAL)时间分辨免疫荧光分析方法并应用于临床检测.方法 根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)制定的相关EP系列评价文件,使用本实验建立的时间分辨免疫荧光分析方法,对尿液NGAL的低检测限、精密度、准确度、稳定性、分析测量范围、Hook效应、生物参考区间进行检测评价.通过检测健康体检人员及临床急性肾损伤患者尿液样本与Abbott ARCHITECT化学发光法进行比对,使用SPSS软件进行统计学分析.结果 本实验所建立的方法低检测限为1.5 ng/ml,批内不精密度与总不精密度均<6.0%,回收率为93% ~ 107%,当NGAL浓度高达3×105 ng/ml时,无Hook效应(5 × 105 ng/ml亦不会出现假阴性),该方法与AbbottARCHITECT化学发光具有很强的相关性(r=0.989),且37℃加速7d荧光信号保留率均>80%.结论 本实验室研究方法检测尿液NGAL各项性能指标均满足临床要求,可应用于急性肾损伤患者的诊断.
关键词: 中性粒细胞明胶相关脂质运载蛋白 时间分辨 分析方法 双抗体夹心 -
脑梗死患者S100B蛋白检测的临床意义
脑梗死是临床常见的脑血管疾病,有较高的发病率和病死率,目前主要依靠影像学检查诊断,不能在急性期区别脑梗死是否可逆,临床神经功能检查也不能判断神经症状持续的时间.血液中的S100B蛋白升高可作为中枢神经系统损伤比较特异和敏感的标志物.我们采用抗S100B蛋白单克隆抗体为包被抗体,抗S100多克隆抗体为检测抗体的双抗体夹心(ELISA)法,检测45例脑梗死患者和32例对照者血清S100B蛋白水平,探讨S100B蛋白在脑梗死患者血清的动态变化和临床意义.
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联合检测腹水总蛋白、补体C3、IL-6及TNF-α对自发性细菌性腹膜炎的诊断价值
1996年以来,我们检测了22例肝炎后肝硬化腹水伴发自发性细菌性腹膜炎(Spontaneous bacterialperitonitis,SBP)患者腹水的总蛋白、补体C3、IL-6及TNF-α水平,旨在探讨其对SBP诊断预测及预后判断的临床意义。1 资料与方法1.1 一般资料 22例SBP者中男15例,女7例,年龄26~70岁,平均年龄48岁。SBP按1988年我国腹水会议制定的肝硬化腹水并发SBP的诊断标准诊断。同时期选择了22例肝炎后肝硬化腹水无SBP者为对照组,平均年龄47岁。1.2 方法 全部患者在进入研究第2天抽取腹水,检验腹水中总蛋白、补体C3浓度及IL-6、TNF-α水平。IL-6和TNF-α均采用双抗体夹心ELISA法,药盒购自美国Genzyme公司,标本由专人严格按说明书进行操作。1.3 统计学处理 采用t检验。2 结 果2.1 两组患者腹水中总蛋白、补体C3浓度测定结果肝硬化腹水并发SBP组腹水总蛋白、补体C3浓度均显著低于肝硬化腹水无SBP组(P<0.05)(见附表)。2.2 两组患者腹水IL-6和TNF-α水平测定结果肝硬化腹水并发SBP组腹水IL-6和TNF-α水平均显著高于肝硬化腹水无SBP组(P<0.05)(见附表)。
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胆管癌细胞神经转移与其基质金属蛋白酶-9的表达及其意义
我们采用双抗体夹心式酶联免疫吸附法(ELISA)检测人胆管癌细胞株(QBC939)在神经、淋巴组织中基质金属蛋白酶(MMP)的表达,探索MMP在胆管癌的特异性神经、淋巴结转移中的分子生物学机制[1].
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检测血清ATG浓度ELISA方法的建立
目的 建立检测人血清中兔抗人胸腺免疫球蛋白(ATG)的检查方法并进行初步临床应用.方法 用鼠抗兔IgG单克隆抗体做固相,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG多克隆抗体做二抗,建立双抗体夹心ELISA方法.并检测使用ATG的异基因造血干细胞移植患者血中ATG的浓度.结果 ATG浓度低检测值为31.25 ng/ml,在40~1000ng/ml范围内呈线性关系,组内和组间的变异系数分别为7.91%和5.22%.用该法测定7例干细胞移植预处理方案中使用ATG患者的浓度,ATG随时间在体内浓度逐渐下降,但预处理后90天仍能测得ATG,表明ATG在体内作用时间比较久,可能会影响移植后免疫功能重建.结论双抗体夹心法具有灵敏性高、特异性强的特点,可用于人血清中ATG水平的定量测定.干细胞移植预处理方案中使用ATG后体内浓度进行性降低,ATG将会比较长时间在体内起作用.
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婴儿免疫性血小板减少性紫癜1例
儿,女,56 d,因皮肤紫癜18 d入院.1998年6月2日患儿面部出现针尖大小出血点,3 d后腹部及四肢相继出现并逐渐增多.经当地卫生院检查血小板60×109/L,诊为"血小板减少性紫癜(ITP)”,给予强的松治疗3 d,皮肤紫癜逐渐消失.入院前2 d患儿面部又出现大量出血点.患儿为第一胎足月顺产,阴道分娩,生后体查无异常.其母24岁,妊娠前后无自发出血史.体查:T 36.5 ℃,P 130/min,R 38/min,身长60 cm,头围40 cm,面部及舌头有散在性针尖大小出血点,右足背可见1.5 cm×3 cm的瘀斑,心肺正常,肝右肋下1.5 cm,脾左肋下1 cm.血常规检查:血小板40×109/L,Hb 120 g/L,WBC 9.8×109/L,M 0.69,L 0.30,N 0.06,血小板表面相关IgA测定PAIgG 98.8 ng/107 PIt(正常值<78.20 ng/107 PIt,用双抗体夹心酶联方法测定).讨论:据报道患ITP的孕妇约50%的新生儿可有血小板减少,认为ITP是一种自身免疫性疾病,是孕母血浆中存在着抗血小板抗体IgG,并通过胎盘输送给胎儿.本例依据血小板数降低.测母(90.20 ng/107 PIt)和子PAIgG增高及患儿的临床症状,故诊断为ITP无疑.本病是输入性获得性疾病,为妊娠期间母体抗血小板抗体输入胎儿体内所致,大部分婴儿症状轻或无症状,早期血小板即可自发上升,本例未进行特殊治疗,血小板数也自行上升直致正常.但对于严重威胁婴儿生命的出血,仍需进行治疗.
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恶性肿瘤患者链式激活的免疫细胞治疗后肿瘤坏死因子α的变化及临床意义
体内回输免疫活性细胞的过继免疫疗法已成为一种重要的肿瘤综合治疗方法[1].它是将体外激活的自体或异体免疫效应细胞输注给患者,以杀伤患者体内的肿瘤细胞.链式激活的免疫细胞(cascade primed immune cells,CAPRI)是德国慕尼黑大学医学院免疫研究所RudolfWank教授的一项用于肿瘤生物治疗的专利技术.该技术是应用患者的外周血淋巴细胞,经活化刺激,获得对肿瘤的特异性杀伤功能,回输后可在体内杀伤肿瘤.实验证明,它不仅能有效提高肿瘤细胞表面抗原的表达,从而恢复已经被阻断的细胞毒细胞的杀伤过程,且具有识别微转移细胞的能力,从而防止转移的发生[2-3].本实验是采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测实体肿瘤患者经CAPRI治疗后外周血血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的变化并对肿瘤患者进行临床疗效观察.
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参麦注射液对晚期肺癌SIL-2R水平的影响
应用双抗体夹心ELISA法检测38例晚期肺癌患者参麦注射液治疗前后血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)水平.结果治疗前SIL-2R水平明显高于对照组,治疗后血清SIL-2R水平较治疗前显著降低,且治疗后血清SIL-2R水平与对照组比较无明显差异.提示参麦注射液对晚期肺癌患者免疫功能有调节作用.
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慢性肝病患者血清和腹水IL-8含量测定及临床意义
IL-8是重要的促炎性因子,在抗感染免疫中起重要作用。为了探讨慢性肝病患者血清和腹水IL-8的水平,采用对抗体夹心ELISA法对28例慢性肝病患者血清和腹水中IL-8水平进行了检测,现将结果报告如下:1 材料和方法1.1 研究对象:临床确诊的慢性肝病合并腹水患者28例,其中合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)11例。正常对照组30例系我院健康体检者。1.2 方法1.2.1 标本采集:抽取患者血液3ml待凝固后分离血清,留取1ml血清置-20℃冰箱保存待查;同时抽取患者腹水3ml离心后,留1ml上清液置-20℃冰箱保存待查。1.2.2 IL-8测定:采用双抗体夹心ELISA法检测血清及腹水中IL-8。试剂盒由第四军医大学免疫室提供,血清和腹水IL-8单位为mg/L,操作方法按说明书进行。1.3 统计学处理:数据以均数±标准差(x±s)表示,样本均数间比较用t检验。2 结果2.1 慢性肝病SBP组及无SBP组的血清和腹水IL-8水平比较,结果见表1。
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386例HBsAg阴性血清乙肝血清学标志检测结果分析
经血传播乙型肝炎是国内外输血专家非常关注的问题。我国为乙型肝炎病毒(HBV)感染高发区,人群HBsAg阳性比较多,危险性高,但近年研究发现部分HBsAg阴性者血清也有传染性。目前国内各血液中心、血站等采血机构对供血者健康检查中,HBV感染的筛查都仅要求HBsAg阴性,其检测方法基本都采用双抗体夹心二位点一步法ELISA,此可因钩镰效应出现假阴性。本试验对386例HBsAg阴性血清进一步做了乙型肝炎血清学标志的全面检测,现将结果报告如下。……