促黄体素β基因表达中的转导通路及转录因子

促性腺激素释放激素(GnRH)为下丘脑促垂体激素,其脉冲式地释放调节垂体促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的合成与释放,进而调节动物的生殖活动.LH是由α亚基和β亚基组成的异二聚体糖蛋白激素,其中β亚基决定激素的特异性.LHβ基因的表达是由GnRH诱发的,此过程主要依靠PKC和Ca2+两类信号通路,并调节LHβ基因的表达.目前已经发现,多种转录因子,如早期生长反应基因(Egr-1)、核受体SF-1基因、Ptx1基因和Sp1基因等,通过与LHβ亚基基因的启动子区直接结合,而对该基因的表达进行调控.

固醇调节元件结合蛋白与脂质代谢

固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element-binding proteins,SREBPs)是脊椎动物细胞脂质稳态的转录调节物,可直接激活多个参与胆固醇、脂肪酸、甘油三酯、磷脂合成和摄取,以及辅助因子NADPH等基因的表达,从而调控胆固醇及脂肪酸等脂类的代谢过程.本文综述了SREBPs转运和活化的过程,以及调节细胞脂质稳态功能的分子机制,并探讨了其在脂代谢紊乱相关疾病发生中的重要作用.

呼吸中枢发育的基因调控研究进展

脑干呼吸中枢组成一个复杂的网络系统,产生和调控节律性呼吸.近年来,人们利用分子生物学技术研究发现,小鼠某些基因突变可影响呼吸中枢特定神经元的发育,并由此导致特殊的呼吸表型.近,在人类某些中枢性呼吸疾病中,也发现了相应的基因突变.因此,基因水平的研究为深入认识节律性呼吸活动的产生和调控机制提供了新的研究途径.本文就目前研究较多、相对较深入的一些呼吸中枢发育调节基因的研究进展作一综述.

治疗性克隆与体细胞重编程:殊途同归

治疗性克隆和体细胞重编程是制备患者特异性自体干细胞的两种不同策略,近期已取得了重大的研究进展.治疗性克隆是通过体细胞核移植后形成克隆囊胚进而获得胚胎干细胞,体细胞重编程则是将特异性转录因子导入到体细胞核中而建立诱导性多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS细胞).两者在方法学路径、技术难题、伦理争议等方面各不相同,但在应用研究层面上都涉及到干细胞的定向诱导分化、细胞移植治疗等相同的问题.本文总结了这两种生物技术的研究进展及其异同点.

GATA结合蛋白4在心脏发育及心肌重塑中的作用

转录因子GATA结合蛋白4(GATA-binding protein 4, GATA-4)在心脏发育和心肌重塑过程中发挥重要的调控作用.GATA-4基因缺失可致胚胎死亡,而不同位点的错义突变将引起不同类型的先天性心脏发育畸形.GATA-4蛋白表达水平降低可导致心脏功能进行性下降.压力超负荷、缺氧、交感神经激活等各种心肌肥厚刺激因素均可显著影响GATA-4的DNA结合活性,进而通过调控心房利钠肽(ANP)、脑利钠肽(BNP)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、心肌锚定重复序列蛋白(CARP)等多种心肌重塑相关转录因子的表达参与心肌重塑过程.深入探讨GATA-4的转录调控机制,有望为心血管疾病的防治提供新的线索.本文扼要综述GATA-4在心脏发育及心肌重塑中的研究现状.

钙离子调节的转录因子NF-κB激活参与小鼠记忆功能与行为调控

FosB和Glu受体Ⅱ亚型与慢性可卡因成瘾

过去的一段时间里,CREB一直被认为是与药物成瘾有密切关系的明星分子.但随着研究的不断深入发现,急性给予可卡因可引起ΔFosB家族的多种转录因子在伏核暂时性高表达,但慢性给予可卡因却可诱导Fos家族的异型体ΔFosB在伏核长期高表达,类似现象也见于反复给予其他成瘾性药物,因此ΔFosB遂脱颖而出成为又一个新星分子.1999年9月在英国Nature杂志发表的一篇文章报道,ΔFosB的表达增加及其引发的Glu受体Ⅱ亚型的增加可加强慢性给予可卡因引起的成瘾性,这可能与人类成瘾的形成相似.

IRE1α调控CD8α＋树突状细胞功能

未折叠蛋白反应（UPR，unfolded protein response）和内质网应激在维持免疫系统稳态中的作用并未完全知晓。本文作者发现树突状细胞，在未发生ER stress的情况下，持续激活未折叠蛋白反应感受分子IRE-1α及其下游靶分子，转录因子XBP-1。而XBP-1的缺失导致CD11 c ＋细胞表型缺陷，内质网稳态失衡以及CD8α＋树突状细胞抗原呈递功能障碍。然而CD11 b＋树突状细胞并未受到影响。XBP-1转录功能丧失导致XBP-1敲除鼠树突状细胞内质网功能失调。IRE1-α依赖的，包括对CD18整合素和MHCⅠ分子复合物mRNA降解，导致敲除鼠表型和功能的缺陷。IRE1α和XBP-1参与的反馈调节机制调控CD8α＋树突状细胞。

葡萄糖介导 SCAP 的 N-糖基化为 SREBP-1激活和肿瘤生长所必需

细胞代谢的改变是许多肿瘤的一个重要特征。在肿瘤细胞中，有氧糖酵解和脂质生成的增加能提供肿瘤细胞生长所需的能量和脂质。然而葡萄糖代谢和脂质生成通路之间的相互联系依然不清楚。本文的研究人员立足于此，探讨了葡萄糖代谢和脂质生成通路之间的联系，发现葡萄糖能通过胰岛素非依赖的通路来控制 SCAP 并促进脂质生成。
　　研究表明，EGFR 信号能增加肿瘤细胞对葡萄糖的摄取。细胞内的葡萄糖主要进入了糖酵解通路的分支己糖胺生物合成通路，并终启动蛋白的 N-糖基化通路，促进了 SCAP 的 N-糖基化。已知 SREBP-1是一个能与内质网结合的转录因子，在脂质代谢中起着关键的作用。进一步研究发现，SCAP 经过 N-糖基化修饰后能激活 SREBP-1。SCAP 发生 N-糖基化修饰后，能增加自身蛋白的稳定性，并促进其与锚定在内质网上的 Insig-1解离，使得 SCAP／SREBP 复合物能迁移到高尔基体。在高尔基体中，蛋白水解酶对 SREBP 进行剪切激活，激活后的 SREBP 随后入核，终调控脂质相关基因的转录，促进细胞的脂质生成。在体的异种移植瘤实验也同样表明，阻断 SCAP 的 N-糖基化能在体有效地减轻 EGFRvIII 诱导的胶质母细胞瘤的生长。

诱导性 RNAi 在体试验证实转录因子 BATF 参与CD8＋ T 细胞分化起始过程

效应性 CD8＋ T 细胞分化成熟是机体抵抗病原体侵袭及疫苗发挥作用的重要环节。激活后数小时内，初始 CD8＋ T 细胞起始一系列基因转录促进向效应性及记忆型 T 细胞分化，然而这一过程的调节机制尚不清楚。利用病毒转导 shRNA 是一项经典的通过特异性敲低某基因实现研究该基因功能的技术，但该项技术在初始 T 细胞中效率非常低。后续改进的方法多集中在通过给予各种体外刺激如 TCR、感染、细胞因子等激活初始 T 细胞而达到提高转导率的目的，可是这种额外的干扰对细胞的正常分化过程造成较大影响。

VVC患者临床分离白念珠菌Cap1、Mrr1和MDR1在唑类药物交叉耐药中的作用

目的 探讨白念珠菌锌簇转录因子Cap1、Mrr1基因突变/高表达及外排泵基因MDR1的mRNA表达水平在唑类抗真菌药物氟康唑(FCA)、伊曲康唑(ITR)、伏立康唑(VRC)交叉耐药中的作用.方法 收集山西医科大学第二医院皮肤性病科门诊疑似外阴阴道念珠菌病(VVC)患者阴道分泌物标本,进行真菌直接镜检、培养、分离鉴定和体外药物敏感性试验,获得试验用白念珠菌耐药和敏感菌株共68株.采用PCR方法扩增68株白念珠菌临床分离菌株Cap1、Mrr1基因,并进行双向测序,应用Blast软件,将测序结果与GenBank中已发表的序列进行比对,分析基因突变情况,实时荧光定量PCR检测锌簇转录因子Cap1、Mrr1和外排泵基因MDR1的mRNA表达水平.结果 Cap1测序中1株ITR、VRC交叉耐药菌株出现P311S错义突变.Mrr1测序中1株FCA、ITR、VRC交叉耐药菌株出现5个错义突变(T917M,T923I,E1020Q,F1032L,S1037L);FCA、ITR、VRC交叉耐药菌株组中Cap1/Mrr1/MDR1的mRNA表达量分别高于敏感菌株组;CA、ITR、VRC交叉耐药菌株组Cap1和MDR1(r=0.173,P=0.571), Mrr1和MDR1(r=-0.091,P=0.766),Cap1和Mrr1基因(r=0.025,P=0.936)的mRNA表达量不相关(均P>0.05).结论 Cap1和Mrr1的突变可能和唑类药物交叉耐药有关.

GATA-1和GATA-2基因在再障和正常骨髓基质细胞中的表达

目的探讨转录因子GATA-1和GATA-2基因在再障和正常骨髓基质细胞中表达的情况.方法体外扩增培养骨髓基质细胞,运用RT-PCR-ELISA方法检测GATA-1和GATA-2基因的表达情况,并对其相对表达水平进行半定量比较.结果 GATA-1和GATA-2基因在正常和再障的骨髓基质细胞中均有一定的表达.再障的骨髓基质细胞中GATA-1的表达水平较正常低;而GATA-2的表达水平与正常相比无显著性差异.正常和再障的骨髓基质细胞中均以GATA-2的表达占优势.结论转录因子GATA-1和GATA-2基因可在正常和再障骨髓基质细胞中表达,并可能影响骨髓微环境的造血调控作用,对再障等血液疾病的发生发展起一定的作用.

转录因子GATA-2的研究进展

转录因子GATA-2是具有锌指结构的GATA家族中的一员,它在造血系统中广泛表达,且与造血细胞的分化、发育关系密切.GATA-2主要调控造血干/祖细胞的增殖和分化,亦可调控其他造血相关因子的表达,并与白血病等血液病的发生有一定的相关.

淋巴细胞增殖、分化和生存的重要因子--BCL11A和BCL11B

BCL11A和BCL11B基因是BCL家族的新成员,分别是与淋巴细胞的增殖、分化和生存密切相关的原癌基因和肿瘤抑制基因,对其基因结构和功能特点已有初步的认识,其异常的表达与淋巴细胞恶性转化有一定的关系.

结直肠锯齿状腺瘤中RUNX3基因多态性及免疫组化表达

目的 探讨RUNX3基因及蛋白表达在锯齿状病变发生与癌变途径中的作用.方法 应用序列特异引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)法研究50例锯齿状腺瘤(SA)中RUNX3(rs2236851,C/T)的多态性,其中包括传统锯齿状腺瘤(TSA)40例,广基锯齿状腺瘤/息肉(SSA/P)10例以及20例正常大肠组织；并从SA中抽取30例进行免疫组化染色,用IPP(Image pro plus)图像分析系统进行免疫组化阳性表达的半定量分析,分析基因型与RUNX3表达之间的关系.结果 SA试验组T等位基因的频率(18.8％)明显高于正常对照组(5.0％),差异有统计学意义(P＜0.05)；TC基因型SA患者的RUNX3平均吸光度(0.27 ±0.16)较CC基因型患者的平均吸光度(0.28±0.18)明显降低(P＜0.05).结论 RUNX3基因(rs2236851)位点可能与SA密切相关.

膀胱癌中转录因子E2F的表达及其临床意义

目的探讨细胞周期转录因子 E2F 与膀胱癌发病及生物学特征之间的关系.方法应用免疫组化方法检测膀胱癌和正常膀胱组织中E2F和PCNA的表达;应用原位凋亡 TUNEL 方法测定膀胱癌中细胞凋亡指数.结果膀胱癌中E2F阳性率为42.3%,显著高于正常膀胱组织的22.2%(P<0.05).膀胱癌中E2F表达与肿瘤分级、分期和PCNA指数之间呈正相关(P<0.05),而与肿瘤复发和细胞凋亡指数之间无显著相关性(P>0.05).结论E2F异常参与膀胱癌的发病过程,可在一定程度上反映肿瘤的恶性程度和浸润深度.

兔单克隆Idl抗体在人类乳腺癌中的表达

Id1蛋白是具有"螺旋-环-螺旋"结构的转录因子起负调节作用的一组家庭蛋白,目前已知它可以调控不同组织中不同细胞的分化.

布鲁氏菌部分毒力相关调控因子免疫原性检测与保护性评价

目的 检测部分布鲁氏菌毒力相关调控因子刺激机体产生细胞免疫反应的能力,并对具有细胞免疫原性蛋白的免疫保护性进行初步评价. 方法 利用Gateway的方法将9个布鲁氏菌毒力相关转录调控因子克隆至表达载体pHXGWA上并利用Ni-NAT层析的方法纯化重组蛋白.构建布鲁氏菌疫苗株S19株免疫的BALB/c小鼠模型,免疫35 d后分离小鼠脾细胞并用体外重组蛋白再刺激,ELISA方法检测蛋白体再刺激后小鼠脾细胞分泌的细胞因子IFN-γ水平,了解毒力相关调控因子刺激机体产生细胞免疫反应情况.以CpG-ODN为免疫佐剂,用具有细胞免疫活性蛋白免疫小鼠,观察对布鲁氏菌强毒株544攻击感染的免疫保护作用. 结果 7个布鲁氏菌毒力相关调控因子在大肠埃希菌中得以表达.其中BMEⅠ 1573及BMEⅡ0475再刺激下S19免疫小鼠脾细胞产生的IFN-γ水平高于PBS对照小鼠.而在以CpG-ODN为免疫佐剂时,两者均不具有免疫保护性. 结论 布鲁氏菌LysR家族及GntR家族的转录因子BMEⅠ 1573及BMEⅡ0475具有细胞免疫原性,初步检测无免疫保护作用.

肝脏泡型包虫病患者外周血单个核细胞IL-9、PU.1及IRF-4 mRNA表达水平的研究

目的 探讨辅助性T细胞9(Th9)相关细胞因子IL-9及转录因子PU.1和IRF-4 mRNA在肝脏泡型包虫病患者外周血单个核细胞中的表达及其作用. 方法 2012年10月-2014年3月新疆医科大学第一附属医院收治的肝脏泡型包虫病患者(AE组)14例,健康志愿者(HC组)14例,应用实时荧光定量PCR法检测两组受试者外周血单个核细胞中IL-9、PU.1和IRF-4 mRNA的相对表达量,数据分析采用非参数秩和检验两独立样本比较法(MW法),用Spearman线性相关性检验分析细胞因子和转录因子之间的相关关系. 结果 肝泡型包虫病组和健康对照组受试者外周血单个核细胞IL-9 mRNA相对表达量分别为2.44911(IQR:0.69268-5.70628)和0.00316(IQR:0.0198-0.00815),差异有统计学意义(P=0.000);PU.1 mRNA相对表达量分别为313.105(IQR:94.80556-548.13140)和0.77147(IQR:0.28829-1.59077),差异有统计学意义(P=0.009);IRF-4 mRNA相对表达量分别为0.04126(IQR:0.01957-0.08204)和21.58347(IQR:8.95431-52.31027),差异有统计学意义(P=0.000),单个核细胞中IL-9 mRNA水平与PU.1 mRNA呈正相关(r=0.8228,P-0.000),与IRF-4 mRNA也呈正相关(r=0.9332,P=0.000). 结论 Th9细胞功能性细胞因子IL-9以及转录因子PU.1和IRF-4参与泡型包虫病发生发展过程,其表达水平上调有利于虫体继续寄生于宿主体内,同时可能与形成泡型包虫慢性肉芽肿有关.

基于网络成分分析的阿尔茨海默症靶基因动态表达研究

解析转录因子与靶基因之间相互调节的关系并构建转录调控网络,对研究阿尔茨海默症(AD)的致病机理、早期诊断及制药等具有重要意义.网络成分分析(NCA)是一种能够动态预测转录因子活性并表现其影响关系的方法.本研究利用转录因子对靶基因的调控作用,及基因在AD不同病程中表达的先验知识和生物数据,通过预处理AD基因表达数据,选择出10个转录因子和85个靶基因进行网络成分分析,并利用162条调控关系构建AD基因调控网络,形成和展示了转录因子对靶基因的动态调控关系和作用.通过动态预测转录因子活性及构建网络图,发现转录因子在AD疾病的不同程度的活性有明显变化趋势,其调控的靶基因变化符合AD的病理特征.如靶基因NONO在转录因子ANAPC5的调控下,表达值由3 126上升至4 508,而靶基因YWHAZ表达值由6 000下降到接近于0.该研究为AD致病机理探寻、早期诊断和相应的分子生物学实验,提供了新的思路和依据.