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清肠合剂治疗小儿湿热痢的临床与实验研究
痢疾广泛分布于全世界,也是我国一种常见的疾病.一年四季均可发生,但以夏秋常见.若不及时治疗,可使病情危笃,甚可危及生命.为探索有效方便的治疗方法,我课题组于1997年1月-1999年10月,共治疗300例湿热痢患儿,其中治疗组200例,对照组100例.治疗组采用清肠合剂灌肠,对照组采用清肠合剂口服,两组疗效比较,治疗组明显优于对照组.动物实验作了清肠合剂对内毒素所致家兔发热的解热实验;清肠合剂对腹腔注射HAC所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响;清肠合剂的镇痛实验(热体法)等药效学实验并设庆大霉素为对照组.同时作了清肠合剂直肠用药的毒性及刺激性实验.药学研究作了制备工艺及质量标准的研究.
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复合真菌多糖的抗肿瘤及免疫增强作用初探
本研究选择猴头菇、香菇、茯苓3种真菌的多糖,配以葡萄籽多酚和甘草酸,制成复合多糖,研究复合真菌多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用和对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响.
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弓形虫保种的实验观察
弓形虫保种常用小鼠腹腔转种传代，该法费时费力，若转种不及时容易断种，为解决此问题，我们对弓形虫在4℃存放不同时间后的感染力，及应用保护剂在不同温度下存放不同时间后弓形虫的死亡率进行了观察。
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在慢性声刺激期间心率变异性的24小时节律变化
[英]/Takeuchi H…//Med Biol Eng Comp.-2001,39(1).-113～117.心率变异性(HRV)分析是预测心肌疾患的一种重要方法,并已应用于临床.HRV功率谱的对数-对数曲线具有1/fβ型特性,其谱指数会在应激情况下改变,表示其与心搏调节系统有联系.HRV谱的β指数也存在明显的24小时节律,这被认为是与自主神经系统功能的一昼夜变化相关,但目前对慢性应激条件下的24小时节律却知之甚少.本文目的在于研究慢性声刺激期间HRV谱指数β的24小时节律变化.并确定β是否可以用作鉴别慢性紧张状态的一个工具.实验中,选取了6只9周龄的雄性Wistar小鼠.其体重为280～300g,用手术方法将无线电发射器植入小鼠腹腔并缝合在腹肌上,心电图电极装在发射器上并缝合在右肋骨架和较低的左?
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达克宁在细胞克隆技术中的应用
能否有效地控制分泌特异性单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞的污染,是该项研究中常遇到的问题,由于细菌耐药性的产生,传统应用双抗处理的方法多难于奏效.在杂交瘤细胞融合培养过程中,有时会发生真菌污染的现象.为防止和清除真菌污染,除了严格控制操作,还可采用小鼠腹腔和使用抗真菌药物的方法.目前,国内抗真菌药物如制霉菌素对杂交瘤细胞的毒性较大,抑制真菌效果不理想.我们在实验研究过程中使用达克宁注射液(有效成份为咪康唑)挽救意外污染了真菌的杂交瘤细胞,取得了良好的效果.
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马齿苋多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能作用
马齿苋为马齿苋科植物马齿苋(portulaca oleraceal)的全草,具有抗氧化、增强免疫功能等药理活性作用[1,2].马齿苋多糖体内外具有抑制肿瘤生长的作用[3],本室前期研究发现,马齿苋水提液体内具有抗肿瘤生长和增强免疫功能的作用.为了进一步研究马齿苋的免疫调节作用,本实验观察马齿苋多糖体外对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响.
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磁场对荷瘤小鼠免疫功能的影响
我们用SP2/0骨髓瘤细胞致瘤的小鼠作为实验模型，研究了磁场对荷瘤小鼠NK细胞及巨噬细胞表达IL-1的影响。材料和方法 取BALB/C小鼠24只，体重18～22 g，雌雄各半，随机分成3组，每组8只。背部脱毛，取SP2/0细胞3×106个接种于背部皮下(脾区)，接种24 h后分组处理。对照组不进行磁疗；旋磁组采用RMT3磁疗机，磁头磁片4片，直径为1.3 cm的永久磁铁，异名极排列，磁头紧贴小鼠脾区(距鼠颈1.5 cm，脊椎左侧0.1 cm)，磁感强度在转速2 000 r/min为0.2 T，每天1次，20 min，连续10次；静磁组的磁感强度为0.09 T，磁作用部位、时间及次数同旋磁组。 细胞活性检测：分别取靶细胞(浓度为1×105个/ml K562细胞)及效应细胞(浓度为1×106个/ml 脾细胞)各100 μl 加入96孔板，加MTT 10 μl(5 mg/ml)后置37℃ 5% CO2培养箱4 h，离心，弃上清，各孔加入二甲基亚砜150 μl，震荡10 min，测570 nm A值。 小鼠腹腔巨噬细胞制备：将小鼠处死，无菌操作取腹腔液，离心弃上清，制成细胞悬液浓度为2×106个/ml，加LPS至浓度为10 mg/ml，取1 ml加于96孔板，诱导36 h(置于5% CO2培养箱)，上清含IL-1。
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TF口服液诱导T细胞IL-2、IL-6及CD分子的表达
转移因子(transfer factor,TF)是介导细胞免疫的重要因子之一,其TF口服液具有协同诱导人T淋巴细胞IFN-γ和HLA-DR/DQ分子的表达[1],促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能,促进人T淋巴细胞增殖发挥良好的免疫调节作用[2].为进一步了解TF口服液协同诱导细胞因子的分泌和CD分子的表达,我们以TF口服液加入外周血淋巴细胞培养,观察其协同PHA诱导T细胞、IL-2、IL-6的分泌及CD3、CD4、CD8T细胞的变化.
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雷公藤多甙联合环孢素A对小鼠腹腔心脏移植急性排斥反应的影响
器官移植仍是目前治疗终末期器官衰竭有效的办法［1，2］。患者需通过长期服用免疫抑制药物来维持移植器官的存活及其正常功能。环孢素 A（cy-closporine A，CsA）是目前临床常见的免疫抑制剂之一，但由于患者需长期服用，毒副作用强，并且费用高昂。因此，寻找新型免疫抑制剂，降低毒性损伤，减轻患者经济负担，是目前移植领域研究的热点之一。雷公藤作为传统中药材，具有抗炎、免疫抑制作用，可以治疗类风湿性关节炎［3］等自身免疫性疾病［4］。雷公藤多甙（tripterium wilfordii hook f ， TWHF）作为雷公藤提取物，其免疫抑制功效优于雷公藤本身［5，6］。本实验使用雷公藤多甙联合环孢素 A，观察对小鼠腹腔心脏移植物存活时间的影响、移植急性排斥反应的组织学变化、受体外周血 CD4＋和 CD8＋T 细胞比例变化等情况，寻找新型免疫抑制方案。
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玉屏风散发酵液对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响
1 实验材料 试剂:RPMI-1640(Hyclone Cat.No.SH 30197.01),标准胎牛血清(中国医学科学院工程研究所Cat.No.TBO0032HYP),青链霉素(Hyclone Cat.No.SV 30010),一氧化氮测试盒(深圳晶美生物工程有限公司),IL-1测试盒(Cat.No.MY1001),玉屏风散煎剂及玉屏风散发酵液由本室自制.仪器:酶标仪(Laysystems Multiskan Ascent),UV-2550紫外分光光度计(日本岛津).动物:昆明种小鼠体重20～25g,雌雄不限.由本院实验动物中心提供.
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小青龙汤整体给药和含药血清作用的比较研究
许多研究者设想用含药血清进行离体实验比以往直接将中药粗制剂加入离体反应系统更能反映中药在体内的作用情况,为了验证这一设想,本文对实验中发现的小青龙汤增强昆明小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能进行了整体给药与含药血清实验的比较,报告如下.
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五味消毒饮对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
五味消毒饮方剂载于<医宗金鉴>,具有清热解毒,凉血消肿、化痰散结、止痛之功效,主治各种疔毒、痈疮疖肿.现代多用于感染性疾病的治疗.该方剂组成为:金银花、野菊花、蒲公英、紫花地丁、紫背天葵.本文研究了五味消毒饮对小白鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)吞噬功能的影响.
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金银花对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.、红腺忍冬L. hypoglauca Miq.、山银花L. confusa DC或毛花柱忍冬L. dasystyla Rehd.的干燥花蕾.味甘,性寒.归肺、心、胃经.清热解毒、疏散风热.具有抗病原微生物作用、抗毒作用、抗炎、解热作用等.该文研究了金银花对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能影响.
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抗日本血吸虫重组蛋白20.8 kDa抗原单克隆抗体的建株
以日本血吸虫重组蛋白20.8 kDa抗原免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体.每鼠注入蛋白100 μg,共免疫3次,第1次加福氏完全佐剂,第2、3次加福氏不完全佐剂,间隔3wk.融合前,于免疫的BALB/c小鼠尾静脉注射50 μg血吸虫重组蛋白20.8 kDa抗原,4 d后取脾脏与骨髓瘤细胞SP2/O融合,11d后检测,融合率为13.54%(26/192).ELISA检测培养上清,筛选阳性孔,经3次克隆,获得6株阳性杂交瘤细胞株.将这6株细胞上清浓缩10倍,用琼脂双扩散法测得免疫球蛋白亚类为IgG14株,IgM 2株.将6株细胞扩增后注入BALB/c小鼠腹腔,诱生腹水.
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小鼠腹腔巨噬细胞内的游离钙离子浓度及PMA、fMLP反应性的不均一性
目的:巨噬细胞(Mφ)的反应性是炎症过程中的重要问题.迄今为止绝大多数的工作是以细胞群作为研究对象.我们推测在细胞群中各个细胞的反应可能是不一样的,因此有必要在单细胞水平上对白细胞的反应性进行研究.
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SRS淋巴瘤的SAC-ⅡB2克隆细胞株的生物学和诱导分化研究
目的和方法:SRS腹水瘤来源于本室建立的L6565病毒性白血病的胸腺悬液,移植成功率100%.继而应用SRS腹水瘤细胞在体外建成SRS-82细胞系.许菡等对SRS-82细胞采用有限稀释法,经过培养建立了SAC-ⅡB2克隆细胞株.经用抗淋巴细胞血清和多种单克隆抗体检测证明SRC-ⅡB2为无T,B细胞表面标记的淋巴干细胞.X-C生物学检测阳性,超薄切片在电镜下观察到A型和C型病毒颗粒.2×106个克隆细胞注射昆明种或SW-1系小鼠腹腔或皮下,可发生腹水瘤或实体瘤.结果:应用细胞诱导分化剂维甲酸(RA)的研究表明,在2×10-6～2×10-5 mol/L浓度作用下,分裂指数降低,并对SRS腹水瘤生长有明显抑制作用(P＜0.01),延迟荷瘤小鼠的生存期.免疫学和细胞化学方法研究显示,经RA处理的SAC-ⅡB2克隆细胞的ANAE阳性率和细胞内嘌呤核苷磷酸(PNP)活性均明显升高,而腺苷脱氨酶(ADA)活性显著下降,末端脱氧核苷酰转移酶(ADA)的表达有所减弱.结果提示RA对SAC-ⅡB2克隆细胞有一定程度的诱导分化作用.应用ABC免疫组织化学方法(郑颂国等1997),通过癌基因产物的单抗和多抗检测筛选,发现SAC-ⅡB2细胞有c-myc,c-fos的强阳性表达(+++)和c-jun, c-erbB, ras P21的弱阳性表达(+),严开平等(1997)针对c-fos cDNA第2～7编码序列设计合成18聚反义(AS)和正义(S)和无义(NS)的寡脱氧核苷酸,研究结果发现反义c-fos寡脱氧核苷酸可促使SAC-ⅡB2细胞形态向成熟阶段分化,抑制细胞增殖速度;免疫组化方法显示,克隆细胞中FOS蛋白表达下降.结论:反义c-fos寡脱氧核苷酸能特异地抑制小鼠淋巴瘤SAC-ⅡB2克隆细胞的恶性表型,并有诱导分化作用.
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在核转录因子NF-KB、AP-1的水平探讨严重烫伤后小鼠腹腔巨噬细胞分泌功能异常的机制及其调控
临床与实验研究均表明，严重烧伤后机体免疫功能紊乱，既有免疫抑制的一面，也有免疫亢进的一面，其原因十分复杂。严重烧伤后Mφ生成过多的TNF-α不仅介导机体炎症过程，可能发生全身炎症反应综合症(SIRS)，而且还是导致脓毒性休克(SS)，多器官功能衰竭(MOF)的重要原因之一。
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小青龙加减方药理作用研究摘要
目的:研究小青龙加减方平喘作用及作用机理;方法:通过豚鼠药物引喘、豚鼠体外气管容积法、大鼠被动皮肤过敏反应PCA、DNCB所致小鼠DTH反应、对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响、角叉菜胶致足跖肿胀的影响、对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响、对小鼠棉球肉芽肿的影响、对致敏小鼠中脑单胺类神经递质含量的影响、对肥大细胞的影响、对小鼠炎症组织炎症介质、丙二醛及肝组织LPO含量的影响实验,研究小青龙加减方平喘、抗过敏、抗炎及平喘作用机理的重要参数;
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紫苏叶挥发油抗炎作用的实验研究
目的:紫苏叶是常用解表药,具有发散风寒,行气和胃的功效.抗炎作用是中药发挥解表功效的重要途径之一,而目前国内对该药抗炎作用的研究报道甚少,该药主要组分挥发油的抗炎作用研究更未涉及.为了寻找和阐释紫苏叶解表功效的主要物质基础,探求解表药之辛味与挥发油的内在联系,丰富解表药挥发油研究的现代药理学内容,指导临床合理用药与开发新药,我们开展了本课题研究.方法:采用多种急性炎症动物模型:小鼠二甲苯耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进、大鼠蛋清足肿胀、大鼠角叉菜胶胸膜炎;并采用慢性炎症模型小鼠棉球肉芽肿实验 ,对紫苏叶挥发油(VOPF)的抗炎作用进行了研究.结果:VOPF 2μl/kg、1μl/kg(分别相当于6g原生药/kg、3g原生药/kg)能极显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.01)和蛋清致大鼠足肿胀(P<0.01);能明显对抗醋酸导致的小鼠腹腔毛细血管通透性亢进(P<0.05),VOPF 2μl/kg能显著降低角叉菜胶胸膜炎大鼠胸腔渗出液中中性粒细胞的增高(P<0.05),对灌洗液中蛋白质渗出量的增加也有明显抑制作用(P<0.05) .对慢性炎症模型,VOPF可减轻小鼠棉球肉芽肿重量,并显著降低肉芽指数(P<0.05).结论:VOPF具有良好的抗炎作用,是其解表抗炎的主要物质基础之一,其抗炎机理研究正在深入进行.
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藏药榜姿多沃抗炎镇痛药理实验研究
榜姿多沃为常用藏药,具有清热解毒、祛风湿、止痛功效,主要用于治疗瘟病时疫、风湿性关节炎等证.目的:为了筛选确定藏药榜姿多沃抗炎镇痛的有效部位,为开展其品种整理和品质评价提供科学的方法和依据.方法:抗炎实验用醋酸诱发小鼠腹腔毛细血管通透性增高和用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,阳性对照分别为斯匹林和氢化可的松;镇痛实验采用醋酸诱发小鼠腹痛和用热板诱发小鼠足痛,阳性对照为盐酸吗啡,对藏药榜姿多沃不同提取部位进行了抗炎镇痛药效学研究.结果:藏药榜姿多沃5种不同提取部位样品的毒性均很小,4种榜姿多沃提取部位样品对两种疼痛模型均有镇痛作用,其中总皂苷类(5g/kg剂量组)作用强.藏药榜姿多沃的不同提取部位样品均能对抗醋酸诱发的小鼠腹腔毛细血管通透性增加和二甲苯致小鼠耳廓肿胀,并以环烯醚萜甙类样品作用为优(P<0.001).结论:藏药榜姿多沃不同提取部位有明显的抗炎镇痛药效作用,其中总皂苷类成分镇痛作用较强,环烯醚萜甙类成分抗炎作用较好,由此可以看出藏药榜姿多沃的抗炎镇痛作用可能主要与其总皂苷类成分有关.
