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1例非血缘外周血干细胞移植合并植入综合征病人的护理
1 病例介绍 病人,男,33岁,确诊为慢性粒细胞性白血病3个月,为行异基因造血干细胞移植入院.入院后移植预处理采用经典的BUCY方案,耐受性良好,于移植后第3天出现发热,体温波动在37.0 ℃~38.3 ℃,并伴有打喷嚏、流清涕等卡他症状及咳嗽.经采用头孢哌酮钠舒巴坦钠抗感染、地塞米松对症处理后,效果不佳,出现持续高热,无心悸、气短,无中毒症状,于移植后第7天,病人出现颜面部、躯干、四肢散在密集斑丘疹,边界清楚,呈暗红色同时伴有恶心、呕吐、稀水样便,每天4次或5次.肝功能检查提示丙氨酸氨基转移酶升高(ALT 223 U/L)伴低蛋白血症.胸部CT提示肺叶支气管扩张.考虑为植入综合征,给予甲泼尼龙240 mg静脉输注,替考拉宁、卡泊芬净抗感染,于第15天病人体温正常,水肿、咳嗽减轻,肝功能、CT检查正常,一般情况明显改善.
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1例外周血干细胞移植并全身极重度皮肤及黏膜脱落病人的护理
外周血干细胞移植(PBSCT)是将正常造血干细胞在病人接受超大剂量化疗/放疗后,通过静脉输注移植受者体内,以代替原有的病理性造血干细胞,从而使正常的造血干细胞免疫功能得以重建.是在无菌空气层流室(LAFR)内对造血功能衰竭性疾病、恶性血液病进行的一种特殊治疗.
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2例DC-CIK细胞治疗自体外周血干细胞移植后急性白血病的护理
经化疗达到完全缓解后的急性白血病病人,常规必须选择造血干细胞移植或定期化疗以期减少复发或根治疾病.异基因造血干细胞移植受高费用、高风险和供者的限制而难以普及,而自体造血干细胞移植具有低风险低费用和不受供者限制的优点,但主要问题是移植后的复发率较高[1].为减少自体造血干细胞移植后的复发率,我科对2例自体外周血造血干细胞移植后的急性白血病病人给予了树突状细胞预激的细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)治疗.现将DC-CIK治疗过程中的护理介绍如下.
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虎尿对类风湿性关节炎患者的免疫学影响
Objective To study immunologic mechanism of tiger's urine on patients of rheumatoid arthritis. Method We used ELISA method to detect TNF values of serum; we also used MTT colorimetric method to detect the inhibition of tiger's urine on T- cell. Result TNF values of RA patient's serums at both active stage and stationary phase before the therapy were higher than those of healthy group; TNF values of patient's serums after the therapy were lower than those before the therapy; tiger's urine had obvious inhibitive action on proliferation of peripheral blood's T- cell. Conclusion Tiger's urine could inhibit T- cell's proliferation and TNF's secretion, which may be the important mechanism of curing RA.
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外周血干细胞冠脉内移植治疗缺血性心脏病初步临床研究
随着冠心病发病率的日益升高,如何更有效地降低由此带来的病死率、病残率日益成为研究和关注的焦点.药物、介入、手术治疗能改善心肌缺血和心衰症状,却无法促使梗死的心肌细胞再生,心脏移植也有极大的局限性.近年来分子生物学和细胞生物工程技术的发展以及对造血干细胞研究认识的深入,使人们试图将造血干细胞移植到受损心肌组织中增殖替代坏死心肌,改善心脏功能,为缺血性心脏病提供一种全新的治疗策略.国内外研究已取得令人鼓舞的结果.
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从单核细胞中分离流行性出血热病毒
自1978年以来,国内外先后以A549细胞和Vero传代细胞从疫区鼠肺和患者血中分离得到病原[1-4].本研究系用Vero细胞从陕西省冬季散发型流行高峰期的流行性出血热(EHF)患者血清和单核白细胞(包括单核细胞和淋巴细胞)中分离得到EHF病毒.
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The Beige and Chediak-Higashi (BEACH) domain is highly conserved in a large family of eukaryotic proteins, and is crucial for their functions in vesicle trafficking, membrane dynamics and receptor signaling. From a fetal brain cDNA library, we isolated a cDNA of 3858 bp encoding a novel human BEACH protein, which was named as human neurobeachin-like 1 (NBEAL1) gene. The cDNA had an open reading frame (ORF) of 3006 bp encoding a putative 1001 amino acid protein. The NBEAL1 gene was located on human chromosome 2q33-2q34 and consisted of 25 exons spanning about 73 kb of the human genome. PSORT analysis indicated that the NBEAL1 protein contained a vacuolar-targeting motif ILPK, which suggested the protein might be located in the cell lysosome. The expression pattern was examined by reverse transcription/polymerase chain reaction (RT-PCR), which showed that the transcripts were highly expressed in the human brain, kidney, prostate, and testis while lowly in the ovary, small intestine, colon and peripheral blood leukocyte. In addition, the RT-PCR result of and Northern blot showed that the novel gene was highly expressed in the biopsies of different grade glioma, especially in that of lower grade ones, which suggested it might be correlative with the glioma.
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A novel coronavirus, severe acute respiratory syndrome (SARS)-associated coronavirus (SARS-CoV), has been identified as the causal agent of SARS. Spike (S) protein is a major structural glycoprotein of the SARS virus and a potential target for SARS-specific cell-mediated immune responses. A panel of S protein-derived peptides was tested for their binding affinity to HLA-A * 0201 molecules. Peptides with high affinity for HLA-A * 0201 were then assessed for their capacity to elicit specific immune responses mediated by cytotoxic T lymphocytes (CTLs) both in vivo, in HLA-A2. 1/Kb transgenic mice, and in vitro, from peripheral blood lymphocytes (PBLs) harvested from healthy HLA-A2.1 + donors. SARS-CoV protein-derived peptide-1 (SSp-1 RLNEVAKNL), induced peptide-specific CTLs both in vivo (transgenic mice) and in vitro (human PBLs), which specifically released interferon-gamma (IFN-gamma) upon stimulation with SSp-1-pulsed autologous dendritic cells (DCs) or T2 cells. SSp-1-specific CTLs also lysed major histocompatibility complex (MHC)-matched tumor cell lines engineered to express S proteins. HLA-A * 0201-SSp-1 tetramer staining revealed the presence of significant populations of SSp-1-specific CTLs in SSp-1-induced CD8+ T cells. We propose that the newly identified epitope SSp-1 will help in the characterization of virus control mechanisms and immunopathology in SARS-CoV infection, and may be relevant to the development of immunotherapeutic approaches for SARS.
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乳腺癌患者循环肿瘤细胞的检测及其临床应用
肿瘤转移是乳腺癌治疗失败的主要原因之一.肿瘤细胞进入外周血是发生远处转移的前提,早在1896年,Ashworth在1例因癌症死亡的患者外周血中发现了类似肿瘤的细胞,并首次提出了循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的概念.进入循环未被清除的肿瘤细胞可相互聚集形成微小癌栓,并在一定条件下发展为转移灶.越来越多的学者开始关注循环肿瘤细胞方面的研究,近年来,有关乳腺癌患者CTC检测及其临床应用的研究已取得了长足的进展.
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角膜炎、鱼鳞病、耳聋综合征一例及GJB2基因突变研究
目的 探讨角膜炎、鱼鳞病及耳聋综合征患者临床特征和GJB2基因突变情况,为该病临床与基因诊断提供依据.方法 收集1例角膜炎、鱼鳞病及耳聋综合征患者的临床资料,提取患者及家族成员的外周血DNA,用PCR扩增GJB2基因外显子2及其附近的剪切点,DNA直接测序法进行基因突变检测.结果 该患者存在血管化角膜炎、鱼鳞病及先天性耳聋三联征的典型临床特征,检测到GJB2基因中核苷酸序列外显子2第148位碱基由G突变为A,导致编码的连接蛋白Cx26第50位的天冬氨酸转换成天冬酰胺(D50N).其未患病的母亲及哥哥未检测到突变位点.结论 GJB2基因突变(D50N)可能是引起鱼鳞病、角膜炎及耳聋综合征患者临床表型的原因.
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系统性硬化病患者外周血CD4+T细胞CD40L DNA甲基化研究
[目的]探讨系统性硬化病(SSc)患者外周血CD4+T细胞中CD40L基因调控序列的甲基化状态.[方法]密度梯度离心法分离SSc患者(女16例,男10例)和健康对照组(女15例,男10例)外周血单一核细胞,磁珠分选CD4+T细胞,提取DNA,亚硫酸氢钠处理DNA,巢式PCR扩增CD40L基因调控序列片段(包括启动子和增强子),转化进入大肠杆菌,每个样本挑取8个克隆进行测序.[结果]亚硫酸盐基因组测序结果显示,健康女性CD40L基因调控序列一半为甲基化,一半为去甲基化,女性SSc患者CD40L基因启动子和增强子区域平均甲基化水平均显著低于女性健康对照(P值均< 0.01);男性SSc患者和男性健康对照CD40L基因启动子和增强子区域几乎全部为去甲基化,两组平均甲基化水平差异无统计学意义(P值均>0.05).[结论]女性SSc患者CD4+T细胞中失活的X染色体上CD40L调控序列低甲基化,可能是导致CD40L在女性SSc患者CD4+T细胞中过度表达的原因之一.
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自体外周血造血干细胞移植治疗重症天疱疮三例
目的 探讨自体外周血造血干细胞移植治疗天疱疮的疗效及安全性.方法 选择经糖皮质激素、免疫抑制剂等治疗6个月以上病情仍难以控制或病情进展、且出现治疗相关并发症的3例寻常型天疱疮患者进行自体外周血造血干细胞移植治疗,并随访5年以上.3例中男1例,女2例,平均年龄27.3(21~39)岁.造血干细胞的动员方案为环磷酰胺4g/m2、重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、利妥昔单抗375 mg/m2;预处理方案为环磷酰胺50 mg·kg-1·d-1连用4d(移植前第6天到移植前第3天)、抗胸腺细胞球蛋白2.5 mg·kg-1·d-1连用4d(移植前第3天至移植当天)、利妥昔单抗600 mg/d于移植当天和移植后第7天静脉滴注.结果 3例天疱疮患者均获得成功植入,平均植活时间白细胞13.3 d(11 ~ 16d),血小板16.3 d(16~ 17d).监测各项免疫指标及相关抗体未见异常,免疫重建良好.随访期间,所有患者无严重并发症,生活质量较前明显提高.结论 自体外周血造血干细胞移植可能是治疗天疱疮有效且安全的新方法之一.
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梅毒血清固定患者外周血调节性T细胞/Th17细胞平衡的研究
目的 探讨梅毒血清固定患者外周血调节性T细胞(Treg细胞)和Th17细胞平衡的变化.方法 梅毒血清固定患者26例,正常人对照23例,利用流式细胞仪分别检测外周血Treg细胞和Th17细胞的比例及相关特异性转录因子Foxp3和ROR-γt的定量表达情况,并进行相关性分析.结果 梅毒血清固定患者外周血CD4+T细胞中,Treg细胞比例为33.28%±11.84%,明显高于正常人对照组(22.13%±7.79%,P<0.01);Th17细胞比例(3.17%±2.32%)显著低于正常人对照组(8.87%±2.00%,P< 0.01);CD4+T细胞内转录因子Foxp3的表达量(2994.86±1099.18)高于正常人对照组(2539.72±1086.96,P<0.05),而ROR-γt的表达量(1473.12±752.20)低于正常人对照组(1778.34±388.13,P< 0.05).在所有受试者外周血CD4+T细胞中Foxp3和ROR-γt的表达呈负相关(r=-0.48,P<0.01).结论 梅毒血清固定患者外周血存在Treg/Th 17细胞平衡的异常.
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系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞Th17相关转录因子RORγt mRNA的表达
目的 探讨Th17细胞在系统性红斑狼疮(SLE)免疫炎症反应中的作用机制.方法 逆转录PCR(RT-PCR)检测12例活动期SLE患者、9例非活动期SLE患者和12例正常人对照PBMC中维A酸相关孤儿核受体γt (RORγt) mRNA表达水平.活动期SLE患者组、非活动期SLE患者组与正常人对照组PBMC中RORγt mRNA表达水平采用近似F检验(Welch方法)和校正的多重比较方法(Dunnett's T3)进行分析.结果 活动期SLE患者、非活动期SLE患者及正常人对照RORγt mRNA表达水平分别为1.06±0.44,0.65±0.25,0.22±0.08,3组之间差异有统计学意义(F=23.286,P< 0.01).其中活动期SLE患者组显著高于非活动期患者组(F=2.453,P<0.05)及正常人对照组(F=6.504,P<0.05),非活动期SLE患者组显著高于正常人对照组(F=3.343,P<0.05).SLE患者RORγt mRNA表达水平和SLEDAI之间存在显著正相关(rp=0.623,P< 0.01).结论 证实SLE患者存在Th17细胞极化现象,拮抗调控Th17细胞分化的关键转录因子RORγt能减轻SLE的免疫炎症反应而达到治疗SLE的目的.
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寻常型白癜风患者外周血单一核细胞、血清及皮肤组织液中巨噬细胞游走抑制因子检测
目的 检测巨噬细胞游走抑制因子(MIF)在寻常型白癜风患者外周血单一核细胞(PBMC)、血清及皮肤组织液中的表达,探讨其临床意义.方法 应用实时逆转录PCR及酶联免疫吸附试验检测39例寻常型白癜风患者与31例性别、年龄相匹配的正常人对照者PBMC中MIF mRNA的表达水平及血清、皮肤组织液中MIF的含量.结果 寻常型白癜风患者PBMC中MIF mRNA的表达水平及血清、皮肤组织液中MIF的含量分别为6.70(2.64 ~ 8.65)、32.76(10.67~40.98) μg/L、167.80(107.40 ~ 219.60) μg/L,显著高于正常人对照组(Z值分别为5.895、5.936、4.715,P值均<0.05);进展期白癜风患者分别为7.89(3.89 ~ 9.12)、37.80(29.50 ~ 45.70) μg/L、211.50( 131.70 ~ 248.75) μg/L,显著高于稳定期患者(Z值分别为2.213、2.141、2.100,P值均<0.05).白癜风患者PBMC中MIF mRNA的表达水平及血清中MIF的含量与疾病严重程度评分呈正相关(r值分别为0.486、0.453,P值均<0.05).结论 MIF可能在寻常型白癜风的发病过程中发挥一定作用.
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过敏性紫癜患者外周血CD146的表达及意义
目的 检测CD146在过敏性紫癜(HSP)患者血清及外周血单一核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在HSP发病机制中的意义.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HSP患者急性期、恢复期及正常人对照组血清中可溶性CD146(sCD146)水平;采用实时荧光定量RT-PCR法检测PBMC中CD146 mRNA的相对表达水平,并分析CD146与疾病活动的相关性.结果 HSP患者急性期、恢复期及正常人对照组sCD146水平分别为(0.84±0.49)、(0.52±0.15)和(0.23±0.08) ng/L,急性期高于恢复期(t=3.44,P< 0.05),恢复期高于正常人对照组(t=8.90,P< 0.05).HSP患者急性期、恢复期及正常人对照组PBMC中CD146 mRNA的相对表达水平分别为26.34±2.55、14.18±2.49和10.08±2.08,急性期明显高于恢复期(t=18.69,P< 0.05),恢复期高于正常人对照组(t=6.92,P<0.05).结论 CD146可能在HSP的发病中起一定作用.
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玫瑰糠疹患者外周血淋巴细胞Toll样受体3、7、9的表达
目的 探讨Toll样受体在玫瑰糠疹发病中的作用.方法 选择玫瑰糠疹患者40例以及正常对照者40例,RT-PCR方法检测外周血淋巴细胞中TLR3、7、9 mRNA的表达情况.结果 玫瑰糠疹患者TLR3、7、9的mRNA与正常人对照组相比表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05).玫瑰糠疹组TLR3与TLR7,TLR3与TLR9呈正相关性(P<0.05).玫瑰糠疹组TLR7与TLR9,以及对照组TLR3、7、9之间无相关性.结论 玫瑰糠疹发病可能与病毒通过Toll样受体途径作用于机体免疫系统有关.
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淋球菌性菌血症的快速筛查及鉴定
目的探讨16S rDNA检测技术在快速筛查鉴定淋球菌性菌血症中的应用价值.方法选择1例反复规律性发热、畏寒1个月入院的41岁男性菌血症患者,入院前几天开始出现尿急、尿频和尿痛症状,大便正常,贫血消瘦外容,皮肤黏膜稍苍白,无出血点及皮疹,全身浅表淋巴结未及肿大,血尿常规异常,肝肾功能尚可.采用PCR检测菌血症患者外周血病原菌16S rDNA,对其扩增产物进行DNA测序,再将DNA序列结果与GenBank中的已知序列进行同源性比较;同时对外周血病原菌进行分离培养鉴定及药敏实验.结果16S rDNA扩增产物序列与GenBank中的已知序列进行同源性比较后确定为淋病奈瑟菌,同外周血分离培养鉴定结果一致.结论检测淋球菌性菌血症患者外周血16S rDNA具有高效率、高特异性、高灵敏度、快速准确等特点.
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地塞米松对系统性红斑狼疮阴虚内热证患者外周血单一核细胞基因表达谱的影响
目的 探讨地塞米松对系统性红斑狼疮(SLE)阴虚内热证患者外周血单一核细胞(PBMC)基因表达谱的影响.方法 用地塞米松孵化SLE阴虚内热证患者PBMC,收集孵化后细胞进行PBMC的基因表达谱检测.结果 地塞米松上调85个PBMC基因,下调126个PBMC基因.结论 地塞米松调控SLE阴虚内热证患者PBMC的基因所属功能簇众多,基因编码的功能蛋白分布细胞多个部位,不是所有基因调控结果均有利于SLE缓解,一些基因调控作用对研究地塞米松治疗SLE的机制有帮助.
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白癜风患者外周血白介素17和孤独核受体的表达
目的 探讨Thl7细胞在白癜风免疫发病机制中的作用.方法 采用双抗体夹心ELISA法检测白癜风患者进展期、稳定期和正常人外周血血清中白介素17(IL-17)水平;采用实时荧光定量RT-PCR方法检测外周血单一核细胞中孤独核受体(RORγt)mRNA表达水平,并分析其与疾病活动的相关性.结果 进展期与稳定期白癜风外周血中IL-17、RORγt表达水平与正常人对照组相比显著升高(P<0.01).结论 Th17细胞可能与白癜风的发病机制密切相关.