首页 > 文献资料
-
运用微波原位杂交技术检测常规标本组织的基因表达
核酸原位杂交技术已广泛应用于组织和细胞的基因表达、定位及定量分析,以及病毒基因组表达的检测.但常规的原位杂交技术涉及多步骤处理,检测周期长,且石蜡包埋标本显示信号较弱.为了提高常规外检组织基因表达,缩短杂交时间,本文应用微波处理技术进行探索,取得了良好效果.
-
P16蛋白与C-erbB-2在胰腺癌组织中表达意义
目的:分析胰腺癌组织中C-erbB-2、P16蛋白表达的临床意义,探讨诊治胰腺癌的有效方法.方法:40例胰腺癌石蜡包埋标本连续5 μm切片,HE染色确定肿瘤分化程度,应用S-P法进行免疫组化染色,PBS代替一抗做阴性对照.结果:C-erbB-2在胰腺癌组织中的阳性率为47.5%(19/40).在高、中、低分化肿瘤中阳性率分别为38.89%,50.00%和60.00%.经检验无显著性差异(P>0.05),但各级阳性表达率呈逐渐增高趋势.P16蛋白在胰腺癌组织中的缺失率为55%,在高、中、低分化肿瘤中缺失率分别为27.78%、66.67%和90.00%,经检验有非常显著性差异(P<0.01).P16蛋白和C-erbB-2蛋白的表达具有负相关性(P<0.05).结论:检测胰腺癌组织中P16蛋白及C-erbB-2蛋白的表达可作为胰腺癌诊断的分子生物学手段,C-erbB-2蛋白的表达与肿瘤的恶性度有关;P16蛋白的表达可反映胰腺癌的恶性度,且同一肿瘤有多基因表达.
-
MUC5AC蛋白在大肠肿瘤中的表达及意义
目的:探讨大肠肿瘤组织中MUC5AC蛋白的表达情况及其意义.方法:采用S-P免疫组化法对10例正常大肠黏膜及60例大肠肿瘤石蜡包埋标本中MUC5AC蛋白的表达进行了检测,PBS代替一抗作为阴性对照.结果:正常大肠黏膜几乎不表达MUC5AC蛋白.肿瘤组织中MUC5AC的总阳性率为46.67%(28/60),其中,大肠腺瘤(100%,10/10)与印戒细胞癌(70%,7/10)中表达率较高,与高、中、低分化的腺癌及黏液腺癌相比,MUC5AC的表达具有显著性差异(P<0.05).结论:MUC5AC表达的异常变化可能是大肠肿瘤发生过程中的早期事件.
-
Has-miR-31-3 p表达与K-ras基因野生型转移性结直肠癌患者抗EGFR治疗的无进展生存期有关
目前抗EGFR治疗只应用于KRAS野生型转移性结直肠患者,然在这些患者的获益率只有不到40%。因而寻找更多更精确的生物标志物用于筛选出适宜的治疗患者显得尤为迫切。为此,多中心协作开展了一项研究,该研究目的是筛选出能预测KRAS野生型转移性结直肠患者抗EGFR治疗疗效的miRNAs。该研究分析了87例mCRC患者miRNA表达谱,这些患者均对化疗耐受而选用抗EGFR治疗。其中包括回顾性的33例新鲜冷冻组织标本、35例福尔马林固定石蜡包埋标本,以及19例前瞻性研究获得新鲜冻藏标本。之后对前瞻性研究中转移性结直肠癌抗EGFR治疗患者中19例新鲜冻存和26例福尔马林固定石蜡标本(共45例)进行独立验证。
-
p53和bcl-2在人前列腺癌和高分级前列腺上皮内瘤细胞中的表达及意义
研究发现前列腺上皮内瘤(PIN)可能为人前列腺癌(PCa)的前趋病变[1].我们采用免疫组织化学方法检测并比较PCa和高分级PIN细胞中p53和bcl-2蛋白的表达,探讨人PCa的发生机制,报告如下.材料与方法经病理证实的12例高分级PIN及23例PCa石蜡包埋标本.两组患者年龄分别为53~67岁和57~78岁.p53和bcl-2蛋白表达的免疫组化分析方法参照文献[2].
-
p53、C-erbB-2、AR在前列腺癌组织中的表达及意义
我们应用免疫组织化学和图像分析技术对前列腺癌组织p53、C-erbB-2表达产物及雄激素受体(AR)相对含量进行了测定,探讨其在前列腺癌(PCa)发生发展中的意义.报告如下.材料与方法选取临床资料较完整的PCa石蜡包埋标本40例.年龄54~79岁,平均73岁.随访时间7~74个月,平均38个月.病理诊断均为前列腺腺癌.按Gleason分级标准:Ⅰ级2例、Ⅱ级12例、Ⅲ级14例、Ⅳ级12例.按Jeweit分期标准:A期3例、B期11例、C期8例、D期18例.p53、C-erbB-2单克隆抗体为DaKo公司产品,AR多克隆抗体为Santa Cruz公司产品.CMIAS真彩色图像分析仪为日本产品.
-
胰岛素样生长因子1和白细胞介素1蛋白在胆管损伤瘢痕修复组织中的表达及意义
研究表明,多种生长因子在调控创面修复方面有相互影响的作用.本研究采用免疫组化方法分析胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)、白细胞介素1(interleukin,IL-1)蛋白在胆管炎性瘢痕组织中的表达情况,探讨良性胆道狭窄形成机制,为临床防治胆管炎性瘢痕狭窄提供实验依据.材料与方法1.材料:(1)收集2002-2010年荆门市第二医院经手术和病理证实的胆管狭窄瘢痕石蜡包埋标本53例,共分3组.
-
p14ARF基因改变及其蛋白表达与脑胶质瘤发生发展的相关性研究
一、材料与方法脑胶质瘤石蜡包埋标本31例,包括Ⅰ、Ⅱ级星形细胞瘤8例,Ⅲ级间变性星形细胞瘤10例,Ⅳ级胶质母细胞瘤13例.另取5例脑挫裂伤组织作为正常对照.应用一种新型直接原位PCR方法检测p14ARF基因外显子1β[引物(S)5'-TCCCAGTCTGCAGTTAAGGG-3',(AS)5'-ACCACGAAAACCCTCACTCC-3'(扩增产物174bp)],并对该方法进行优化.采用SP免疫组化法检测p14ARF蛋白.
-
巨细胞病毒在胃部疾病中的检测及意义
经口腔和咽部引起感染有:疱疹病毒、EB病毒、巨细胞病毒.本文介绍应用PCR-DNA扩增技术检测124例胃部病变组织的单纯疱疹病毒(HSV)、EB病毒和巨细胞病毒(HCMV).其中炎症56例,本院胃镜室取材,无菌取胃粘膜组织,均浆器均浆后,做DNA扩增.癌症68例,取自本院病理科石蜡包埋标本.取10 μm厚的石蜡组织3~5片经常规脱蜡,水化,消化后取上清置-20℃备用.试剂购自华美生物技术有限公司.美国PE公司480型DNA扩增仪按说明书进行操作.
-
胰腺癌中抑癌基因p16的表达及临床意义
p16基因又称多肿瘤抑制基因(MTSI),是1994年由美国报道的一种新型抑癌基因[1,2]。据统计,人类75%的癌细胞株有p16基因的缺失或突变,超过了p53基因50%的突变率。为了解p16基因与胰腺癌生物学行为的关系。作者采用mRNA原位杂交和免疫组化技术检测胰腺癌组织p16基因及蛋白的表达,结合临床资料,探讨其与胰腺癌发生,发展及预后的关系。 材料与方法 一、材料 选取我院1982~1990年间胰腺癌石蜡包埋标本56例,胰腺囊腺瘤标本9例。56例胰腺癌标本中胰腺导管腺癌50例,胰腺囊腺癌6例。其中男34例,女22例。已发生淋巴结转移11例。
-
非小细胞肺癌Bcl-2基因蛋白表达及其与细胞凋亡和增殖的关系
目的 探讨非小细胞肺癌Bcl-2蛋白表达与细胞凋亡和增殖的关系.方法 采用SAB免疫组化法检测43例非小细胞肺癌及20例癌旁正常肺组织石蜡包埋标本Bcl-2蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)表达;用TUNEL法检测细胞凋亡.结果 肺癌组织Bcl-2蛋白的表达显著高于癌旁肺组织,P<0.05;肺癌组织中凋亡指数和增殖指数均明显高于癌旁正常肺组织,P<0.01,Bcl-2表达阳性的肺癌组织细胞凋亡指数明显低于Bcl-2表达阴性组,P<0.05;高细胞凋亡、增殖指数提示肺癌预后不良,P<0.05.结论 肺癌存在Bcl-2表达上调,Bcl-2异常表达在肺癌发生过程中可能起重要作用.
-
皮肤石蜡包埋标本组织芯片制备条件优化及应用评价
组织芯片(tissue chip )又称组织微阵列(tissue microarray,TMA),是将若干石蜡包埋块上的各种典型组织或细胞转移到一个新石蜡块上重新构建微型化高通量组织阵列的方法.1
-
细胞周期调控因子在前列腺增生组织中的表达及其与生长因子、细胞增殖之间的关系
本研究旨在探讨前列腺增生(BPH)组织中细胞周期蛋白依赖性激酶 cdk2和 cdk4及细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin E的表达及其与多肽生长因子、细胞增殖之间的关系,现报道如下。 一、材料与方法 1. 一般资料:BPH 62例,年龄51~80岁;18例正常前列腺(NP)作为对照。均为石蜡包埋标本,切片厚4 μm。 2. 方法:免疫组织化学方法采用链霉卵白素过氧化物酶 (SP)方法。 cdk2(1∶50)、 cdk4(1∶50)、cyclin E(1∶40,抗原修复)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF,1∶50)和神经生长因子(NGF,1∶80)均为多克隆抗体,cyclin D1(1∶20,抗原修复)和PCNA(1∶50)为单克隆抗体,二氨基联苯胺(DAB)显色,苏木素复染。以上试剂由北京中山生物公司提供。结果判定:未见阳性细胞为阴性(-)、阳性细胞数1%~25%为(+)、26%~50%为()、>50%为()。PCNA指数的计算则在高倍镜下(400倍)随机检测5~10视野,分别测定上皮和间质的阳性细胞百分比。 3. 统计学方法:采用χ2检验、Spearman秩相关分析和t检验。
-
66例鼻咽癌石蜡包埋标本p16基因第二外显子的检测
目的研究鼻咽癌p16基因第二外显子的状态.方法采用多重PCR分析法,单链构象多态性(single strand conformation polymorphism, SSCP)法分别对66例鼻咽癌石蜡包埋标本与相应的癌旁组织中p16基因突变情况进行检测.结果 66例肿瘤标本中,发现24例p16基因缺失,点突变未检出,而相应的癌旁组织未检出缺失.结论 p16基因在鼻咽癌中存在高频率的缺失,其改变在鼻咽癌发病过程中具有一定的作用.