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Filmplate测试片法:一步完成沙门氏菌的检测
沙门氏菌感染在许多国家,尤其在发展中国家是一个重要的公共卫生问题.传统的沙门氏菌检测方法由于存在检测周期长、漏检率高、程序复杂、所需试剂繁多等缺点,已远远不能满足现代检测的需求.
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微量快速显色药敏检测法临床应用评价
随着耐多药结核病的增多,耐药性问题日趋严重,已成为结核病控制的三大难题之一,因此结核菌药敏试验显得尤为重要.结核病药物敏感试验目前常用方法有绝对浓度法或比例法.上述两种方法存在着检测周期长(全部过程需要耗时2~3个月)、阳性检出率低、不易标准化等缺点.
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运用微波原位杂交技术检测常规标本组织的基因表达
核酸原位杂交技术已广泛应用于组织和细胞的基因表达、定位及定量分析,以及病毒基因组表达的检测.但常规的原位杂交技术涉及多步骤处理,检测周期长,且石蜡包埋标本显示信号较弱.为了提高常规外检组织基因表达,缩短杂交时间,本文应用微波处理技术进行探索,取得了良好效果.
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微波快速原位杂交技术检测基因表达
核酸原位杂交技术目前已广泛应用于组织及细胞的基因表达定位和定量分析以及病毒基因组及表达的检测。常规的原位杂交技术主要强调组织细胞切片的前处理以提高其渗透性。常用的方法为蛋白酶酶解处理,但其作用的浓度和时间具有很大的范围,常难以准确把握。另外,杂交常需要16~24 h,检测周期长。近来,为了以稳定的、易控制的方法取代蛋白酶处理和缩短杂交的时间,我们应用微波处理技术,对以上两个步骤进行改良取得了很好的效果。
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染色体α卫星探针在染色体畸变诊断中的应用
目前临床确诊染色体畸变的主要方法是核型分析,但其检测周期长,诊断结果在一定程度上会受分析者经验影响.近年来,荧光原位杂交(FISH)技术利用非放射性同位素标记核酸探针对分裂间期和分裂期细胞作原位杂交,程序简单、诊断周期短且能识别染色体显带技术难以确认的一些畸变.我们采用人13、21号染色体α卫星探针直接在分裂间期和中期细胞上作FISH,分析13和21号染色体倍性,并着重探讨FISH技术在临床诊断中的应用价值.
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血清酶学测定标准化进展
血清酶学测定是临床化学检验的重要组成部分,在肝脏功能评价、心肌损伤判断、胰腺炎鉴别诊断以及在其他方面的应用中起着重要的作用,是现代临床化学中频繁测定的项目之一.在酶学定量测定中,几乎都是通过检测酶催化化学反应的转换速率来测量的.但是酶催化活性浓度的测定受到很多因素的干扰,如:催化反应的方向、起始物的种类和浓度、底物、辅因子、活化剂、变构剂的种类和浓度、指示酶和辅助酶的种类和浓度、指示剂和相应的波长、pH、缓冲液的性质和离子强度、激活或抑制因子、杂酶、样品在反应体积中的比例、检测周期长短、温度以及不同的测定程序等,都会引起结果的差异.因此实验室间的测定结果可比性很差.
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多重巢式RT-PCR检测90例恶性血液病常见染色体融合基因分析
细胞遗传学检测有助于恶性血液病的诊断、评估预后、指导佳治疗方案的选择.目前临床常采用染色体核型分析技术,但其检测周期长,常不能及时满足临床需要.同时染色体核型分析很难识别微小的染色体易位,如dulMLL、t(12;21)(p13;q22)等.因此快速、准确地获得患者染色体遗传学特征,是临床亟待解决的问题.我们采用多重巢式RT-PCR方法可同时识别29种染色体结构畸变形成的融合基因,现报告90例初诊恶性血液病检测结果如下.
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实验室分析前质量控制中临床医生应重视的问题
在实验室实施全面质量管理中,分析前质量控制是重要环节,所需时间占整个检测周期的57.3%,出现的误差占全部误差的80%.所以做好分析前质量控制,是保证检测结果准确可靠的首要举措.在该过程中,临床医生具有重要的作用.下面就医生在分析前质量控制中应重视的问题作一简述.
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肠毒素大肠埃希菌定时定量PCR法检测
肠产毒素菌大肠埃希菌(ETEC)是引起腹泻的重要病原之一,患者除腹泻也可呈轻度水泻或严重的霍乱样症状.ETEC中的肠毒素可分为不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)[1].目前检测肠毒素ETEC的方法主要有动物试验、组织培养和免疫学方法等,这些方法检测周期长,操作繁杂,灵敏度不高[2].一般PCR方法虽然操作简便、快速、特异性较强,但存在假阳性、灵敏度不高等问题.基因芯片、蛋白质芯片检测ETEC的技术刚起步,且成本较高[3,4].而荧光标记的定量PCR方法,既克服了一般PCR检测方法假阳性、灵敏度不高的问题,还可以对微生物进行定量检测[5].本文应用定时定量PCR方法,建立ETEC的LT毒素标准曲线,获得较为理想的结果.现将结果报告如下.
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沙门菌分子生物学检测技术研究进展
沙门菌感染(如伤寒和副伤寒等)是常见的肠道传染病,并始终是发展中国家严重的公共卫生问题.对于沙门菌的检测,传统的微生物方法已经显现出很大的局限性,如检测周期长、步骤繁琐、许多因素难以控制等,分子生物学技术的进步和不断成熟以及技术服务市场化,使针对沙门菌开展的快速检测方法、分子和基因水平的研究得以迅速发展.本文综述如下.
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实时荧光定量PCR技术在食源性致病菌快速检测中的应用
目前我国对食源性致病菌的标准检测方法一直沿用传统的细菌培养法,由于其检测过程繁琐复杂,所用试剂繁多,检测周期较长[1],已难以满足当前卫生应急检测快速诊断的需求[2]。因此,国内外学者都致力于建立以分子生物学为基础的快速检测方法。自美国Applied Biosystems 公司于1996年首先推出一种特异、敏感、操作简便的分子检测技术,即实时荧光定量PCR技术以来,国内外已利用此技术相继开发出一系列快速检测食源性致病微生物的试剂盒,具有快速简单的技术优势,在部分病原微生物快速检测方面已发挥出了重要的作用[3]。
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利用寡核苷酸芯片鉴定多种肠道致病菌方法的建立与初步应用
目前,临床上对腹泻样本的检测主要依靠传统的细菌学培养及生化鉴定,操作方法繁琐,检测周期较长,而利用分子生物学方法如PCR、探针杂交等及免疫学方法也存在特异性差和灵敏度低等问题[1].
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基层常用结核病诊断方法及展望
长期以来,结核病的实验室诊断对结核病的防治起到了很重要的作用.传统的结核杆菌感染的诊断方法有金标法(DICA)结核抗体、抗酸染色涂片(AFS)法及结核菌素纯蛋白衍生物皮试 (PPD)等,但这些方法均存在检测周期长,阳性率低,特异性差等缺点而不能满足临床需要[2].而基因芯片法(GCT)直接检测结核分枝杆菌(MTB)具有简单快速等优点.笔者对基层常用的结核病诊断方法进行了分析.
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以噬菌体浸染实验检测结核菌的新技术及其临床应用
肺结核是一种因结核分枝杆菌(MTB)-鲜为牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌感染而引发的传染病,在低收入地区发病率相对较高.据WHO统计,全球约1/3的人口感染MTB,每年新增患者900万,并有300万人死于该病.目前,对于结核病诊断主要依靠实验室诊断,影像诊断临床体症相结合.而实验室诊断主要包括涂片法、培养法、分子生物学方法、免疫学方法和噬菌体法.痰涂片直接镜检是检测抗酸杆菌普遍的实验室诊断方法,特异性较高,但灵敏性较低,涂片中分枝杆菌要达到103-104/ml,才可检测出阳性结果,且仅能检出1/2-3/4的活动性结核患者,漏检率相当高.罗氏培养法是目前检测MTB的"金标准",但检测周期长达8周,导致无法及时确诊、及时治疗.近发展起来并广泛使用的快培检测技术,虽大大缩短了检测周期,但仍需3周才能确诊,依然无法达到结核病的快速诊疗要求[6].这就要求我们必须寻求一种快速、敏感、特异的检测方法尽快,尽早的发现结核病患者,为治疗争取时间.目前,FASTPLAUQUE TB试剂盒采用噬菌体扩增方法能使我们达到这一目的.
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药品快速鉴别在药品技术监督中的应用
制售假劣药品的违法行为80%发生在广大农村地区,而且98%以上的药品使用单位也在农村.为此,建立一个快速、高效、实用的药品鉴别系统十分必要.一方面,由于检测周期短,可以对可疑药品及时实行暂控,防止假劣药转移和流失;另一方面,作为药品抽样检验的先行和辅助手段,可以大大减轻抽样检验工作的压力,扩大对药品生产、流通、使用单位以及地区的监管覆盖面,节约财政开支,提高监督检查效率.
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紫外分光光度法测定盐酸氨溴索口服液的含量
盐酸氨溴索是新一代的祛痰药,具有促进粘液排出、溶解分泌物的特性,能有效改善肺功能[1].现行国家标准采用高效液相色谱法测定其含量[2].我们考虑到采用高效液相色谱法所使用的设备和试剂的成本均高,检测周期也较长,大多数基层单位也不具备测定条件,故研究了紫外分光光度法对其含量进行了测定[3,4].结果显示该方法准确度和精密度均较高,操作快速,简单易行,便于掌握.现报告如下.
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临床口腔体温计检测周期探讨
目的 探讨临床上使用的口腔体温计的检测周期.方法 选择4个不同产地的合格的口腔体温计各100支,在使用2周、4周、6周、8周、10周、12周后进行体温计的准确性检测.结果 400支检测的体温计在使用2周、4周、6周、8周、10周、12周后,合格率分别是94.8%、90.7%、87.1%、80.7%、69.0%、52.7%,显示准确性逐渐下降.结论 应该加强对使用中体温计准确性的检测,建议每2周检测1次.
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临床微生物实验室信息管理平台的架构
临床微生物检验过程复杂,操作繁琐,检测周期长,产生的信息量大,信息结构与内容复杂,传统手工信息管理模式存在信息记录混乱及保存、查询和质量监控困难等缺陷,已不能适应临床微生物检验信息的规范化管理[1-4].目前,多数微生物实验室应用的信息管理软件功能尚不完善,很难满足实验室信息一体化管理需求.因此,要采用科学、先进的实验室管理理念,构建新型临床微生物实验室信息管理平台,实现以实验室信息为核心的全方位规范化管理,提升微生物实验室信息化水平.
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gtfB寡核苷酸探针对高龋及无龋者唾液变形链球菌的检测
变形链球菌是目前公认的、重要的一种致龋菌,早期鉴定人群口腔中的变形链球菌对于龋病活性检测和早期预防有着重要意义[1].变形链球菌的常规检测方法很多,但均操作复杂,检测周期长,且特异性和敏感性不高.近年来,分子生物学技术在细菌的鉴定和分类学中逐步被采用.
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新生儿先天性甲状腺功能减低症筛查召回模式的探讨
目的:总结四川省新生儿疾病筛查中心实验室先天性甲状腺功能减低症( CH)召回经验,探讨新的召回模式,提高新生儿筛查服务的有效性。方法采用时间分辨荧光免疫法对四川省新生儿疾病筛查中心片区市县2011至2012年活产婴儿血中促甲状腺激素( TSH)浓度进行检测,对阳性可疑患儿及时进行召回。召回方式根据TSH筛查结果的数值分为紧急召回和普通召回。 TSH>20.0mIU/L者采取紧急召回模式,TSH在8.0~20.0mIU/L者采取普通召回模式(传统召回模式)。对召回结果、确诊时间进行回顾性分析。结果2011至2012年共测定525941例标本,检出可疑阳性3327例,召回了2590例(77.85%),确诊387例(11.63%)。紧急召回率为93.75%(330/352),确诊率74.72%(263/352);普通召回率为75.97%(2260/2975),确诊率4.17%(124/2975)。紧急召回模式平均确诊时间为23.34天,普通模式平均确诊时间为45.55天,经比较有显著性差异( t=-5.686,P<0.05)。结论四川省新生儿疾病筛查中心采用的CH筛查分类召回模式是可行的、有依据的,能够有效地提高召回率、缩短检测周期。